Гирудотерапия при эко: Постановка пиявок вагинально | Многопрофильный медицинский центр в Тюмени — «Авиценна»

Содержание

Лечение бесплодия пиявками — Записаться на прием

От метро Нахимовский проспект (5 минут пешком)

Из метро Нахимовский проспект выход на Азовскую улицу, далее через 250-300 метров поверните налево на Сивашскую улицу, далее через 40-50 метров поверните направо во двор.

От детской поликлиники и родильного дома в Зюзино (10 минут пешком)

От детской поликлиники и родильного дома в Зюзино необходимо выйти на Азовскую улицу, далее повернуть на болотниковскую улицу и не доходя наркологической клинической больницы N17 повернуть налево во двор.

От метро Нагорная (15 минут)

От метро Нагорная до нашего медицинского центра можно добраться за 15 минут, проехав 1 остановку на метро.

От метро Варшавская (19 минут пешком)

От метро Варшавская удобно добраться на троллейбусе 52 и 8 от остановки «Болотниковская улица, 1» до остановки Москворецкий рынок, далее 550 метров пешком

От метро Каховская (19 минут пешком)

От метро Каховская необходимо выйти на Чонгарский бульвар, проследовать по Азовской улице, повернуть направо на Болотниковскую улицу, далее через 40-50 метров (за домом номер 20 повернут наалево во двор)

От метро Чертановская район Чертаново ( 20 минут)

Из района Чертаново до нашего медицинского центра можно добраться от Метро Чертановская за 20 минут или пешком за 35-40 минут.

От метро Профсоюзная (25 минут)

Выход из метро Профсоюзная на Профсоюзную улицу. Далее от Нахимовского проспекта с остановки «Метро Профсоюзная» проехать 7 остановок до остановки «Метро Нахимовский проспект». Далее по Азовской улице 7 минут пешком.

От метро Калужская (30 минут)

От метро Калужская можно добраться на 72 троллейбусе за 30 минут. Выход из метро на Профсоюзную улицу, от остановки «Метро Калужская» проследовать до остановки «Чонгарский бульвар», далее 7 минут пешком по Симферопольскому бульвару

От префектуры ЮГО-ЗАПАДНОГО (ЮЗАО) округа (30 минут пешком)

С Севастопольского проспекта повергуть на Болотниковскую улицу, не доходя наркологической клинической больницы N17 100 метров, повернуть во двор налево.

От метро Новые Черемушки (40 минут)

Выход из метро Новые Черемушки на ул. Грибальди, далее на остановке на Профсоюзной улице «Метро Новые черемушки» на троллейбусе N60 проследовать до остановки Чонгарский бульвар, далее 7 минут пешковм по Симферопольскому бульвару

Гирудотерапия при бесплодии от клиники МЦИ в Волгограде

Гирудотерапия при бесплодии

Кроме общего положительного действия на организм, пиявки оказывают влияние и на нарушения в репродуктивной системе.

У женщин:

• улучшается кровообращение в органах малого таза

• уменьшается спаечный процесс

• нормализуется уровень половых гормонов

• уменьшаются боли при менструации и выраженность предменструального синдрома

• уменьшаются очаги эндометриоза, доброкачественные опухоли матки и яичников

• улучшается качество эндометрия

• повышается процент успеха при ЭКО

У мужчин:

• улучшается кровообращение в органах малого таза

• уменьшаются застойные и воспалительные процессы в предстательной железе

• уменьшаются боли при простатите

• улучшается эрекция и сперматогенез

Гирудотерапия является важным вспомогательным методом в подготовке к программе ЭКО. Гирудотерапия напрямую воздействует на состояние гемостаза в организме человека. Незаменимую роль медицинская пиявка оказывает при, так называемых, генных мутаций в системе гемостаза. Наличие той или иной мутации, гомо- или гетерозиготной, зачастую приводит к внутрисосудистомутромбообразованию, что влечет за собой неэффективную имплантации эмбриона или полное ее отсутствие. Биологическое действие пиявки обеспечивается благодаря наличию в ее слюне гаммы биологически активных веществ, среди которых можно особо выделить гирудин — мощный ингибитор тромбина, который блокирует свертывание фибриногена, замедляет активацию тромбином факторов свертывания V, VIII, XIII, препятствуют агрегации тромбоцитов. Гирудин представляет собой самый изученный компонент пиявочного секрета и является палочкой-выручалочкой в лечении и профилактике синдрома внутрисосудистого свертывания крови. Препараты для стимуляции суперовуляции, способствуют повышению уровня D-димера в крови. D-димер — является фрагментом волокон фибрина, которые образуются в процессе фибринолиза при расщеплении фибринового сгустка плазмином. Повышение содержания D-димера в плазме крови является одним из главных маркеров активации системы гемостаза, отражая процессы, как образования фибрина, так и его лизиса. Поэтому гирудотерапия, в плане подготовки к программе ЭКО, является альтернативным лечением для женщин с генными мутациями системы гемостаза и профилактическим для любой женщины, вступающей в протокол ЭКО.

Рефлекторное воздействие пиявок. Иглорефлексотерапия так же успешно зарекомендовала себя в качестве обоснованного метода в подготовке к экстракорпоральному оплодотворению. К точкам рефлексотерапии следует отнести: так называемые дермальные точки, стимуляция которых приводит к возникновению определенных реакций внутренних органов. Точки рефлексотерапии отличаются от других рядом лежащих участков кожи своими функциональными и некоторыми морфологическими характеристиками: меньшим электрокожным сопротивлением, разной электропроводимостью в зависимости от функционального состояния точки, наличием повышенного потенциала и температуры в зоне точки и др. При воздействии на рефлексогенную точку возникает местная реакция, поток импульсов передается по соматическим и вегетативным афферентам в сегменты спинного мозга — сегментарная реакция — и вышележащие отделы ЦНС (ствол, лимбико-ретикулярные структуры, гипоталамус, кора большого мозга) — общая реакция. Ответные реакции имеют в своей основе сложные нервные, нейрогормональные и нейрогуморальные механизмы, при помощи которых можно добиваться желаемого результата.
Благодаря принципу сомато- и висцеротопии в иннервации внутренних органов и поверхности тела стимуляция точек акупунктуры, расположенных в пределах данного метамера или спинномозгового сегмента, вызывает в первую очередь рефлекторные эффекты в иннервируемых органах, участках тела и системные реакции, запускаемые с данного сегмента. Отдельные участки поверхности тела имеют особенно тесные афферентные связи с функциональными системами внутренних органов, что позволяет путем рефлекторного воздействия на соматические рецепторы общей чувствительности корректировать функцию органов и систем организма. Совокупность методов фитотерапии, гирудотерапии, иглорефлексотерапии позволяет провести качественную подготовку организма к результативной программе ЭКО.

Материал подготовлен врачом акушером гинекологом, гирудотерапевтом, к.м.н. Лемякиной Е.В. 

Гирудотерапевт в Москве, прием врача в клинике, цены на консультацию

Врачи многих специальностей оценили эффективность процедуры и рекомендуют ее своим пациентам. Гирудотерапия помогает неврологам, гинекологам, гепатологам, флебологам, отоларингологам, кардиологам и даже травматологам. Это – мощнейшее натуральное средство, настоящий природный лекарь. Гирудотерапия используется как самостоятельных метод лечения, так и в комплексной терапии неврологических, гинекологических, урологических и многих других заболеваний.

Наши гирудотерапевты являются авторами специальных методик, позволяющих эффективно бороться с лишним весом, гинекологическими заболеваниями, артериальной гипертензией и патологиями позвоночника.

Пиявки, необходимые для проведения гирудотерапии, выращиваются в специальных лабораториях, а сама методика проводится в стерильной обстановке процедурного кабинета. Каждая пиявка используется только один раз, благодаря чему полностью исключена возможность попадания инфекции, после проведения сеанса гирудотерапии пиявки умерщвляются.

Специалистами нашего центра гирудотерапия применяется в специальных программах по лечению гинекологических заболеваний и перед процедурой ЭКО:

  • хронические воспалительные процессы в матке и придатках
  • эндометриоз, аденомиоз
  • спаечные процессы в малом тазу
  • климактерические и менопаузные расстройства
  • нарушения менструального цикла
  • альгодисменорея
  • бесплодие

Также с помощью гирудотерапии проводится подготовка эндометрия перед программами ВРТ.

Врачами используются как системные, так и внутривлагалищные постановки

  • Все пиявки сертифицированы и выращиваются на лицензированной биофабрике.
  • Стоимость одного сеанса фиксированная и не зависит от того, сколько пиявок необходимо для его проведения.
  • Вы можете лечить основное заболевание, а гирудотерапию использовать в качестве укрепляющего и омолаживающего средства, положительно влияющего на организм.
  • Огромный спектр заболеваний, которые можно лечить и корректировать с помощью гирудотерапии.
  • Возможность проведения профилактической процедуры при сильной зашлакованности организма.
  • Гирудотерапия входит в комплексные методики лечения проблем репродуктивной системы и бесплодия.

Полезная информация по коррекции и восстановлению мужского и женского репродуктивного здоровья

Гирудотерапия в гинекологии. Лечение медицинскими пиявками

Гирудотерапию не случайно называют уникальным методом лечения.

Интерес к нему растет с каждым годом, так как применение пиявок эффективно при многих заболеваниях и практически не имеет противопоказаний, позволяет справиться с тяжелыми состояниями и снизить количество применяемых лекарств. Медицинская пиявка — настоящая биофабрика сильнейших биологически активных веществ, благодаря которым проявляются разнообразные положительные эффекты при многих заболеваниях.

В гинекологии пиявка используется в лечении воспалительных и инфекционных болезней, бесплодия, а также в процессе подготовки к ЭКО. При гинекологических проблемах использование пиявок помогает не только быстро уменьшить симптомы, но и ускорить выздоровление, закрепить результаты лечения.

Постановка пиявок входит в номенклатуру медицинских услуг, утвержденную Минздравом РФ (приказ №804н) и является официальной методикой.

Важно, чтобы процедуру проводил  сертифицированный врач-гинеколог в условиях гинекологического кабинета.  

Пиявки, используемые во время процедуры, — это медицинские пиявки, которые выращиваются на специальных фабриках.

Показания для применения медицинской пиявки

  • Острые и хронические воспалительные заболевания матки и придатков, сопровождающиеся болями, нарушениями менструального цикла,
  • спаечные процессы после перенесенного воспаления придатков, аборта, хирургической операции,
  • доброкачественные опухоли матки и придатков (кисты, миомы),
  • эндометриоз,
  • болезненные менструации,
  • маточные кровотечения, вызванные гормональным дисбалансом, воспалительными заболеваниями, миомами,
  • возрастные изменения половых органов, климактерические измерения тканей влагалища (для улучшения кровенаполнения и увлажненности),
  • бесплодие, обусловленное различными причинами (включая эндометриоз),
  • планирование беременности и подготовка к ЭКО.

Как проходит сеанс гирудотерапии?

При лечении гинекологических заболеваний используются методики постановки пиявок внутрь влагалища и на шейку матки, а также в другие зоны: по передней линии живота, над лобком и в паховой области, в области поясницы и крестца, вокруг анального отверстия.
— Кожа и слизистые оболочки перед постановкой пиявок обрабатываются для предупреждения инфицирования ранки.
— Пиявка ставится на время от 15 до 60 минут, кровопотеря от одной пиявки — до 10 мл.
— После снятия пиявки с участка кожи на ранку накладывается стерильная повязка, после отпадения пиявки со слизистой (влагалище, шейка матки) во влагалище помещается стерильный тампон, так как кровотечение продолжается еще некоторое время (до нескольких часов).
— За один сеанс используется разное количество пиявок — от 2-3 до 4-8 штук на разные зоны.
— Длительность, частоту и количество сеансов определяет врач в зависимости от диагноза, ответной реакции организма на лечение пиявками и других факторов.

Как действует пиявка при гинекологических заболеваниях?

При заболеваниях женской половой системы пиявки ставятся в основном во влагалище и на шейку матки. Влагалище очень хорошо снабжено кровеносными сосудами, поэтому все активные вещества пиявки (их несколько десятков, это ферменты, гормоны и др.) быстро попадают в кровь и оказывают соответствующие эффекты:

  • противовоспалительный эффект обусловлен повышением скорости биологических реакций в области воздействия пиявки,
  • иммуностимулирующий (местный) эффект проявляется за счет комплекса активных веществ пиявки,
  • обезболивающий эффект при постановке пиявок объясняется повышением «текучести» крови и улучшением кровообращение во влагалище, матке, придатках
  • психологический эффект постановки пиявок также очень важен: во время сеанса гирудотерапии женщина испытывает сильнейшие эмоциональные переживания (все-таки метод лечения необычный!), поэтому «на эмоциях» формируется выраженный положительный эффект (психосоматический эффект гирудотерапии).

Противопоказания к проведению гирудотерапии

Все противопоказания обусловлены влиянием активных веществ пиявочного секрета на организм.

  • Заболевания со склонностью к кровотечениям.
  • Железодефицитная анемия с уровнем гемоглобина ниже 100 г/л.
  • Аллергические реакции, развивающиеся после сеанса гирудотерапии или применения препаратов из пиявки.

Применение лекарственных средств, уменьшающих свертываемость крови, беременность, низкое АД являются относительными противопоказаниями. Лечение таких пациентов рассматривается индивидуально.

Гирудотерапия при гинекологических проблемах в ТН-Клинике

Гирудотерапия как универсальная вспомогательная методика применяется врачами-гинекологами ТН-Клиники. Постановка пиявок проводится в специально оборудованном гинекологическом кабинете, с использованием качественных медицинских пиявок (применяются однократно, после сеанса утилизируются).

Гинекологи, осуществляющие лечение пиявками, являются сертифицированными гирудотерапевтами, имеют большой опыт работы в этом направлении и применяют на практике классические и авторские схемы. В ТН-Клинике гирудотерапия проводится при инфекционно-воспалительных заболеваниях женской половой системы, на этапе планирования беременности и подготовки к ЭКО, а также в других случаях.

Обращаем внимание, что гирудотерапия используется в комплексе с другими методиками и совместно с лекарственными препаратами.

Применение пиявок в гинекологии, вопреки распространенному среди пациенток мнению, — не новый метод, он имеет интересную историю. В советские годы во многих женских отделениях были кабинеты гирудотерапии. Сегодня метод вновь очень востребован. Огромный практический опыт применения пиявок у пациенток ТН-Клиники и положительные результаты, полученные при лечении различных заболеваний и бесплодия, говорят о большом потенциале гирудотерапии.

Остались вопросы

Записаться на прием и получить подробную информацию вы всегда можете у специалистов нашего консультативного отдела по телефонам:

+7(495) 210-02-48+7(495) 799-02-06

Записаться на прием

Гирудотерапия (лечение пиявками)

Гирудотерапия – лечение пиявками. Не любую пиявку, взятую из пруда, можно применять в медицине, но только особый вид – аптечную.

Она выращивается на специальных пиявочных биофабриках (фермах). В России аптечная пиявка даже зарегистрирована в качестве лекарственного средства и широко применяется врачами гирудотерапевтами.

Пиявка применялась в медицине с очень давних времен, но все-таки современный подход к этому методу значительно отличается, даже от XIX века. Тогда считалось, что пиявки «вытягивают плохую кровь», теперь лечебный эффект связывают с особыми веществами, которые маленький червь выделяет во время сосания в ранку.

Полезных веществ, выделяемых пиявкой, найдены десятки, но изучено очень мало. Пиявка использует их для того, чтобы во время сосания кровь в ранке не свернулась, а текла свободно. Но при этом они попадают в общий кровоток организма и производят эффект на всю кровеносную систему.

Комплексное действие пиявки гораздо шире, чем каждого ее вещества, взятого по отдельности. Основные эффекты:

— противосвертывающий – снижает вязкость и свертываемость крови;

— противовоспалительный – уменьшает воспаление;

— восстанавливает микроциркуляцию – питание тканей по капиллярам;

— противоотечный – уменьшает отеки благодаря оттоку крови;

— обезболивающий – снижает болевые ощущения в месте укуса и отдаленно;

— иммуностимулирующее – улучает работу иммунной системы.

Также неминуемо сказывается и последствия кровотечения из ранки: перераспределение крови, отток ее из застоявшихся участков, рассасывание тромбов.

Какие болезни можно лечить пиявкой

Лечению пиявками хорошо поддаются болезни, связанные с повышенной свертываемостью и вязкостью крови, застоем крови, ухудшением микроциркуляции.

Во-первых это тромбозы и тромбофлебиты (кроме острой стадии), варикозное расширение вен, геморрой. Затем – хронические воспалительные болезни малого таза – простатит у мужчин, миомы матки и эндометриты у женщин. Также поддаются лечению ишемическая болезнь сердца, гипертония, артрозы и даже некоторые виды женского бесплодия.

Противопоказаниями к гирудотерапии являются все виды малокровия (низкий гемоглобин), гемофилия и любые виды плохой свертываемости крови, онкологические болезни в стадии метастазирования, сильно пониженное артериальное давление, острые инфекции и аллергия на пиявок.

Гирудотерапия при беременности

Во время беременности лечиться пиявками можно только в первом триместре, во втором и третьем это может быть опасным. Дело в том, что в норме у будущих мам к середине срока происходит значительное разжижение крови, а если к этому добавить эффект пиявки, то свертываемость упадет совсем, и с большой вероятностью вызовет проблемы у малыша вплоть до выкидыша или преждевременных родов.

Совсем другая ситуация в начале беременности, когда гирудотерапия наоборот способна предотвратить выкидыш. Одной из довольно частых причин прерывания беременности на ранних сроках бывает наследственная склонность к тромбозам, и вот тут пиявка поможет. Несколько сеансов после зачатия предотвратят излишнее сгущение крови, мешающее эмбриону прижиться и расти.

Подготовка к беременности с помощью пиявок

Поскольку пиявки обладают общерегулирующим действием на организм человека, улучшают иммунитет, их очень полезно использовать при планировании беременности, причем и мужчинам, и женщинам.

Несколько сеансов гирудотерапии помогут справиться с застоем крови в малом тазу, у мужчин – улучшить функцию предстательной железы и выработку ею секрета, у женщин – нормализовать работу яичников и снять воспаление органов малого таза. После такого профилактического курса улучшается здоровье будущих родителей и значительно облегчается зачатие.

Пиявки и бесплодие

Многие формы бесплодия поддаются лечению пиявками. Прежде всего это бесплодие, связанное с воспалительными процессами в малом тазу: аднекситом, эндометритом, воспалением после абортов и операций, спаечная болезнь и др. Выявлена даже возможность лечения пиявками синдрома поликистозных яичников.

Если бесплодие тяжелое, и женщина выбрала ЭКО, в этом случае пиявки могут помочь легче пройти протокол, получить качественные яйцеклетки, повысить шансы на приживление эмбрионов. В любом случае лечение у гирудотерапевта надо согласовать со своим лечащим врачом-гинекологом.

На сеансе

Если вы идете на сеанс первый раз, неплохо взять с собой анализ крови на гемоглобин и свертываемость – так вы облегчите жизнь врачу. Кроме того, есть несколько правил, которые рекомендуется соблюдать до и после лечения пиявками:

— Перед сеансом нельзя использовать духи, пахнущие крема, одеколон и туалетную воду. Любой посторонний запах отпугнет пиявку и она не будет присасываться;

— после сеанса нельзя заниматься физическим трудом, лучше всего сразу идти спать. Поэтому планируйте лечение на вторую половину дня;

— из ранки может вытечь значительное количество крови, поэтому ваше одеяние должно соответствовать этому обстоятельству. Не одевайте светлые и открытые вещи. Кроме того, учтите, что в местах приставки пиявок вы будете перебинтованы, возьмите что-то, чтобы прикрыть это от любопытных глаз.

Сеанс длится от 20 минут до часа, в зависимости от метода приставки и густоты вашей крови. Чем гуще кровь, тем труднее пиявке ее сосать. Частота сеансов обычно не превышает 1 – 2 раз в неделю, а количество их может быть от 5 – 10 и более.

Места приставки пиявок выбирает врач в зависимости от вашего заболевания и состояния. Будьте готовы к самому неожиданному повороту: например для лечения бесплодия одно из мест приставки пиявок – на промежность и верхний свод влагалища. Также ставят их на живот, поясницу, крестец, плечи, за уши и в другие места.

Насосавшись, пиявки отпадают сами примерно через 30 – 60 минут, если врач не решит снять их раньше. За это время они успевают выпить от 5 до 15 мл крови, но основное кровотечение будет после – из ранки. Места укусов вам закроют впитывающими салфетками или обычными прокладками, а затем непромокаемым слоем и лейкопластырем.

Среднее время кровотечения из ранки – от 6 до 12 часов, иногда до суток. За это время может вытечь до 50 мл крови, но обычно меньше. Чтобы уменьшить кровопотерю, нельзя менять повязку раньше, чем через 12 часов. Если на промокла, надо приложить сверху дополнительный слой ваты и снова забинтовать.

В некоторых случаях врачу хочет получить более обильное кровотечение, например при большой вязкости крови. Тогда он рекомендует вечером снять старую повязку и приклеить новую.

Боль от укусов вполне сравнима с комариными, только немного дольше. В первые дни после сеанса ранки не ощущаются и выглядят как бурые точки на коже. Но на 4 – 5 сутки они вспухают и начинают сильно зудеть. Это называется «приставочная реакция», она совершенно нормальна и не говорит о каких-либо отклонениях или аллергии. Чесать ранки нежелательно, лучше помазать их любым средством от укусов насекомых или просто спиртом и перетерпеть.

Запись по телефону: 204-2-700 доброжелательные сотрудники cаll-центра всегда помогут решить любой вопрос, подскажут нужного специалиста, подберут удобное для Вас время посещения.

Гирудотерапия в Калининграде – цена лечения пиявками в центре гирудотерапии

Гирудотерапия (лечение пиявками) – один из самых древних и очень эффективных методов лечения. В настоящее время лечение пиявками стало очень популярным как в России, так и за рубежом. Открываются специализированные медицинские центры, частные кабинеты, отделения на базе больниц, санаториев, медицинский центров. Наш медицинский центр «Надежда» предлагает лечение пиявками жителям Калининградской области и гостям региона. Лечение проводит опытный врач общей практики, терапевт, гирудотерапевт, член Ассоциации Гирудологов Санкт-Петербурга – Рашоян Елена Фрунзиковна.

 

На нашем сайте Вы найдете информацию о применении пиявок в различных направлениях медицины – лечебной практике, профилактике заболеваний, оздоровлении, очищении организма, омоложении, эстетической медицине и косметологии.

В природе существует много разновидностей пиявок, но для лечения применяется медицинская пиявка, выращенная на специальных биофабриках. Такая пиявка является стерильной и используется однократно. Гирудотерапия применяется для лечения большого количества заболеваний, а в некоторых случаях становится единственной надеждой на выздоровление. Современные методики постановки пиявок не имеют негативных последствий и применение их возможно даже маленьким детям, а в некоторых случаях, беременным женщинам. В нашем центре применяется – системная и локальная гирудотерапия, комплексная гирудотерапия (сочетание гирудотерапии, вакуум-градиентной терапии, методик очищения организма, диетотерапии, озонотерапии, массажа), гирудорефлексотерапия (постановка пиявок по точкам акупунктуры и рефлексогенным зонам, как альтернатива иглоукалыванию), косметическая гирудотерапия. Каждый метод подбирается индивидуально, в зависимости от состояния пациента, его заболевания, и пожеланий. В случае необходимости пациенту может быть назначено обследование для подтверждения диагноза или уточнения, или с целью динамического наблюдения.

Лечебные эффекты гирудотерапии

  • Биохимический. Пиявка во время укуса выделяет большое количество биологически активных веществ, улучшающие свойства крови человека, оказывающие иммуностимулирующее, противовоспалительное и бактериостатическое действие. Также, в слюне пиявки содержатся ферменты, обладающие антиатеросклеротическим, противоишемическим, антитромботическим, гипотензивным и лимфогенным действием. Компоненты слюны пиявки оказывают мощный косметический эффект, способствуют обновлению кожи, делают ее эластичной, упругой и мягкой.
  • Рефлексогенный. Раздражение акупунктурных (биологически активных) точек при прокусывании кожи, стимулирует работу различных органов и систем организма.
  • Лечебное кровопускание. Разгрузка кровотока, улучшение микроциркуляции крови и ее реологических свойств положительно влияет на весь организм.

Показания к гирудотерапии

Гирудотерапия высокоэффективна при лечении почти всех существующих заболеваний, независимо от причины их возникновения. Наиболее востребованы следующие направления:

В гинекологии и маммологии:

  • Лечение бесплодия.

Необходимый эффект при женском бесплодии достигается за счет улучшения кровообращения в органах малого таза. Это способствует рассасыванию спаек, восстановлению проходимости маточных труб, нормализации уровня половых гормонов. При мужском бесплодии происходит восстановление обмена веществ в тканях предстательной железы.

Зачастую, гирудотерапия становится единственным методом лечения бесплодия, способствует наступлению беременности, даже при неудачных попытках ЭКО.

  • При беременности:

Лечение токсикоза, гестоза, антифосфолипидного синдрома и других патологий, которые могут привести к срыву беременности.

Показанием для лечения пиявками является:

  • хронические воспалительные процессы
  • эндометриоз, аденомиоз
  • миома матки
  • климактерические расстройства
  • кисты яичников
  • нарушения менструального цикла
  • аменорея
  • бесплодие
  • невынашивание беременности
  • антифосфолипидный синдром
  • адреногенитальный синдром
  • вульвиты, вагиниты
  • варикозное расширение вен малого таза
  • профилактика и лечение спаечных процессов после оперативных вмешательств
  • мастопатии
  • фиброзы и кисты молочных желез
  • маститы
  • сексуальные расстройства

В неврологии:

  • различные виды головной боли
  • мигрени
  • транзиторные ишемические атаки
  • черепномозговые травмы
  • невропатии лицевого и других нервов
  • невралгия тройничного нерва
  • болезнь Бехтерева
  • детский церебральный паралич (ДЦП)
  • рассеянный склероз
  • радикулопатии
  • остеохондроз позвоночника
  • межпозвонковые грыжи
  • нарушение мозгового кровообращения и его последствия
  • церебро-васкулярная болезнь
  • атеросклероз сосудов головного мозга

В стоматологии:

  • в комплексном лечении пародонтита
  • гингивита
  • пародонтоза
  • кандидоза и т. д.

В офтальмологии:

  • субретинальные и субхориоидальные кровоизлияния, частичный и полный гемофтальм.
  • отслойка сетчатки
  • острая непроходимость сосудов сетчатки и зрительного нерва, на почве тромбоза и спазма сосудов
  • глаукома
  • заболевание зрительного нерва
  • воспалительные заболевания глаз
  • (кератиты, иридоциклиты, увеиты, хориоретиниты и невриты зрительных нервов)
  • травма органа зрения
  • макулярный отек
  • сосудистая патология органа зрения

В пульмонологии:

  • бронхиты
  • пневмонии
  • бронхиальная астма и т.д.

В кардиологии:

  • гипертоническая болезнь
  • ишемическая болезнь сердца
  • стенокардия
  • постинфарктный кардиосклероз
  • атеросклероз сосудов
  • нарушения ритма сердца и др.

Заболевания пищеварительной системы:

  • гастриты
  • панкреатиты
  • холециститы, в т. ч. калькулезный (растворение мелких холестериновых камней)
  • гепатиты
  • гепатозы
  • алиментарное ожирение (пищевое)
  • запоры
  • заболевания кишечника (колиты, проктиты, сигмоидиты, анальная трещина, геморрой и др. )
  • дисбиоз кишечника

Кожные заболевания:

  • экзема
  • псориаз
  • дерматит
  • алопеция (облысение) и др.

Болезни эндокринной системы:

  • сахарный диабет
  • заболевания щитовидной железы
  • заболевания яичников

Урологические заболевания:

  • простатиты
  • аденома предстательной железы
  • бесплодие
  • циститы
  • уретриты
  • недержание мочи
  • эректильная дисфункция
  • импотенция

Заболевания опорно-двигательного аппарата:

  • артрозы
  • артриты
  • бурситы
  • остеохондроз позвоночника
  • радикулиты и т.д.

Хирургические заболевания:

  • заболевания сосудов нижних конечностей
  • геморрой
  • фурункулы
  • состояние после растяжения связок
  • различные травмы, переломы
  • лечение и профилактика образования келоидных рубцов, грыж
  • лечение и профилактика спаечного процесса
  • лечение трофических язв и т. д.

Лор заболевания:

  • нейросенсоргная тугоухость
  • риниты
  • синуситы
  • тонзиллит

Гирудотерапия в гинекологии (лечение пиявками)

Лечение гинекологических заболеваний с помощью гирудотерапии.


Медицинская пиявка является источником большого количества различных биологически активных веществ, все эти вещества имеют естественное происхождение. Получить искусственно подобное сочетание полезных факторов не удается.

Какое воздействие оказывает лечение пиявками?

Пиявки оказывают мягкое тромболистическое, антибактериальное, противовоспалительное, рассасывающее, антиопротективное действие на организм.

При каких гинекологических заболеваниях используется гирудотерапия? 

  • воспалительные заболевания
  • спаечный процесс малого таза
  • хронический эндометрит
  • неудачные попытки выносить желанную беременность 
  • расширение вен малого таза, возникающее вследствие малоподвижного образа жизни, при сидячей работе, или на фоне приема гормональной контрацепции или менопаузальной терапии
  • подготовка к вступлению в протокол ЭКО, особенно после неудачных попыток, если неудача ассоциируется с плохим кровотоком в эндометрии
  • нарушение менструального цикла
  • миома тела матки
  • эндометриоз матки 

Можно ли делать гирудотерапию без назначения доктора?

Перед проведением гирудотерапии обязательно проводится консультация врача гинеколога-гирудотерапевта или предоставляется назначение от своего лечащего доктора. Также перед процедурой необходимо пройти развернутый общий анализ крови и гинекологический мазок на флору из 3 точек. В случае, если такого направления нет — гинеколог-гирудотерапевт возьмет мазок на флору на приеме с составит план оздоровления при помощи медицинской пиявки. 

Как готовиться к процедуре гирудотерапии в гинекологии?

Подготовка пациента к проведению гирудотерапии несложна. Достаточно принять душ с неароматизированным, нейтральным моющим средством незадолго до проведения процедуры и    воздержаться от половых контактов, а также использования влагалищных свечей, капсул, кремов накануне проведения гирудотерапии .

Как проводится процедура?

Процедура гирудотерапии проводится на обычном гинекологическом кресле, при внутривлагалищных приставках медицинской пиявки используется влагалищное зеркало. Укус пиявки не сопровождается болевыми ощущениями. Процедура в норме может длиться от 5 до 30 минут и не доставляет пациентке дискомфорта. 

Насытившись, пиявка отсоединяется от места присасывания самостоятельно. После того, как пиявка отсоединилась, из приставочной ранки появляются кровянистые выделения, в связи с тем, что секрет слюны пиявки содержит фермент, разжижающий кровь и улучшающий регионарный кровоток. 

Обычно кровотечение бывает несколько обильнее привычных менструаций,  которые прекращаются через 8-12  самостоятельно. Рекомендуется после процедуры использовать средства гигиены. Самым удобным, из которых, является памперс или урологическая гигиеническая прокладка. Учитывая, что опытные гирудотерапевты учитывают отсутствие крупных сосудов в месте приставки пиявки, опасности такое кровотечение обычно не представляет. 

Безопасно ли проводить процедуру?

Медицинская пиявка используется однократно, и сразу после использования утилизируется при помощи специального дезинфицирующего раствора. Поэтому применение безопасно в бактериологическом отношении.

Какие противопоказания к гирудотерапии в гинекологии существуют?

Противопоказаний для применения гирудотерапии в гинекологии немного. Это снижение гемоглобина и (или) тромбоцитов, нарушения свертывания крови, и острые воспалительные процессы во влагалище.

Применение пиявок в терапевтических целях

Abstract

Известно, что животные-гематофаги, включая пиявок, содержат биологически активные соединения в своих выделениях, особенно в слюне. Кровососущие кольчатые черви, пиявки использовались в лечебных целях с начала цивилизации. Древнеегипетские, индийские, греческие и арабские врачи использовали пиявки для лечения широкого спектра заболеваний, начиная от обычного использования при кровотечениях и заканчивая системными заболеваниями, такими как кожные заболевания, аномалии нервной системы, проблемы мочевыводящей и репродуктивной систем, воспаления и проблемы с зубами.В последнее время обширные исследования слюны пиявок выявили наличие множества биоактивных пептидов и белков, включая антитромбин (гирудин, буфрудин), антитромбоцитарные (калин, саратин), ингибиторы фактора Ха (лефаксин), антибактериальные (теромацин, теромизин) и другие. Следовательно, пиявки вернулись в качестве нового средства от многих хронических и опасных для жизни отклонений, таких как сердечно-сосудистые заболевания, рак, метастазы и инфекционные заболевания. В 20 годах гирудотерапия зарекомендовала себя в пластической и микрохирургии как средство защиты от венозного застоя и служила для спасения реплантированных пальцев и лоскутов.Многие клиники пластической хирургии по всему миру стали использовать пиявки в косметических целях. Несмотря на эффективность лечения пиявками, безопасность и осложнения пиявок до сих пор остаются спорными.

Ключевые слова: Кровопускание, рак, сердечно-сосудистые заболевания, сахарный диабет, гирудин, пиявка, микрохирургия

Известно, что животные-гематофаги, питающиеся кровью добычи, преодолевают свертываемость крови, выделяя в секрет слюнных желез множество биологически активных соединений. , особенно антикоагулянты [1].Среди кровососущих организмов пиявка является ярким примером беспозвоночного, обладающего высокоразвитым механизмом предотвращения свертывания крови[2]. На протяжении веков пиявки привлекали внимание терапевтов, которые использовали лечение пиявками для лечения широкого спектра заболеваний. Для различных терапевтических целей европейский вид медицинской пиявки Hirudo medicalis , также известный как целебная пиявка, был предпочтительнее для большинства врачей по сравнению с американским видом Hirudo decora , который может сосать меньше крови из-за меньшего размера и поверхностный разрез на коже жертвы[3,4,5].Кроме того, в качестве медицинских средств рассматривались и многие другие виды, такие как Hirudinaria manillensis [6], Hirudo nipponia [7,8], Hirudo verbena , Hirudo orientalis [9] и Haementeria depressa. [2,10].

В настоящем обзоре обобщено значение пиявок как дополнительного источника медикаментозной терапии большого числа заболеваний, включая сердечно-сосудистые заболевания (ССЗ), пластическую хирургию, рак и метастазы, сахарный диабет (СД), его осложнения и инфекционные заболевания .

Местонахождение пиявок и экология:

Пиявки могут жить в различных средах, включая водные и влажные наземные регионы. Некоторые виды живут в пресной воде, эстуариях, реках, прудах, озерах и море. Другие приспособлены с большим количеством слизистых желез и более крупными нефридиальными пузырьками (пузырем), которые удерживают и хранят дополнительную воду, что позволяет пиявкам переносить недостаток воды на влажной земле. Кроме того, пиявки обладают высокой физиологической гибкостью, что позволяет им противостоять многочисленным вызовам окружающей среды, таким как нехватка кислорода и колебания температуры.Поскольку влага является весьма существенным фактором, влияющим на распространение и поведение наземных пиявок, их можно встретить в большом количестве в лесах и высокогорьях Северной Америки, Европы и Юго-Восточной Азии. В постоянно влажных регионах, таких как Малайзия, пиявки будут оставаться активными в течение всего года, тогда как на территориях с влажным и засушливым сезонами они проходят активную и спящую фазы[11].

Таксономия и морфология пиявок:

Пиявки ( Euhirudinea ) были впервые названы Линнеем в 1758 году нашей эры[3].Они связаны с типом Annelida , классом Clitellata . В целом ранние исследования классифицировали пиявок на 4 подкласса, 3 отряда, 10 семейств, 16 подсемейств, 131 род и более 696 видов[12]. В последнее время систематики выявили более 1000 видов пиявок[13]. Размер пиявки варьируется в зависимости от семейства и может достигать 20 см в длину, в дополнение к некоторым гигантским видам, таким как амазонская пиявка, Haementaria ghilianii , длина которой составляет около 50 см[14].Классическое тело пиявки состоит из множества сегментов, разделенных на два преоральных неметамерных сегмента и 32 посторальных метамера (сомита). Сомиты подразделяются на 2-16 наружных колец, и рисунок колец можно рассматривать как диагностический признак для рода и вида пиявки. Сенсорные структуры, такие как глаза, глазовидные пятна, сосочки и сенсиллы, также используются систематиками для идентификации рода и вида. Обычно пиявка имеет переднюю и заднюю присоски. Некоторые пиявки, относящиеся к отряду Rhynchobdellida , имеют большую переднюю присоску с маленьким бесчелюстным ртом и выступающим мускулистым хоботком.Другие из отряда Arhynchobdellida обладают простой передней присоской с широким ртом, который может иметь или не иметь челюсти, как, например, у гирудинид и erpobdellids соответственно. Присоски очень важны во время движения (передвижение, подобное дюймовым червям) и для прикрепления к поверхности хозяина [11]. Пиявки дышат через кожу и считаются гермафродитами, но для оплодотворения всегда требуется другая пиявка[14].

Биология питания пиявок:

В зависимости от особенностей питания пиявки делятся на две основные группы.К первой группе относятся хищные пиявки, являющиеся хищниками многих беспозвоночных. Вторая группа, названная кровоядными пиявками, представляет собой эктопаразитов, питающихся кровью позвоночных, в том числе человека[11]. С помощью присосок и кусающих челюстей пиявки способны поглощать кровь жертвы[15]. Интересно отметить, что пиявки обычно высасывают 2-20 мл крови в течение 10-30 минут, а затем спонтанно прекращают пить после того, как полностью насытятся без немедленного желания большего количества пищи [16,17].

Пиявки, кровожадные и хищные, переваривают пищу в кишечнике. Кровоядные виды хранят кровь в своем теле только в течение нескольких месяцев. На самом деле, процесс переваривания крови у пиявок-гематофагов проходит много медленных стадий, что позволяет пиявкам хранить проглоченную кровь до 18 месяцев. Симбиотические бактерии под названием Aeromonas spp., находящиеся в кишечнике пиявки, выделяют ферменты, помогающие не только расщеплять компоненты проглоченной крови, но и вырабатывать антибиотики для предотвращения гниения крови после длительного хранения в зобе пиявки.Кроме того, еще одна предполагаемая роль этих ферментов заключается в предотвращении дефицита комплекса B, который часто возникает у животных, зависящих от питания кровью [11,12].

ИСТОРИЧЕСКИЙ ОБЗОР ПИВЕНКИ

Важность пиявки в клинической терапии может быть просто представлена ​​англо-саксонским словом врача «laece», указывающим на то, что и врачи, и эти кольчатые черви были этимологически связаны друг с другом с самого начала цивилизации[3]. ,18]. Использование пиявок для различных медицинских целей можно проследить тысячи лет назад.До христианской эры (до н.э.) лечебные пиявки упоминались в картинах фараонов 18 й династии (1500 г. до н.э.). Талмуд, Библия и другие еврейские рукописи описывали медицинские показания к пиявкам[18]. Греческие поэты Никадр Колофанский (200-130 гг. до н.э.) упоминали о пиявках в своих медицинских поэмах[3].

В христианскую эпоху использование кровососущих пиявок стало очень популярным и использовалось почти во всех регионах мира. Греческие врачи использовали пиявки для кровопускания и для лечения ревматических болей, подагры, всех видов лихорадки и потери слуха.Использование пиявок в то время зависело от юмористической концепции Галена (130–201 гг. Н.э.), которая была вдохновлена ​​гипотезой Гиппократа (460–370 гг. до н.э.) о болезнях, связанных с дисбалансом жидкостей в организме. Гален считал, что облегчение болезней может быть достигнуто за счет восстановления баланса между жидкостями организма, когда пиявка забирает кровь у больных [3,19]. Гален прописывал кровопускание пиявками почти при всех заболеваниях, таких как простые воспалительные состояния, психические расстройства и геморрой[20].Более того, сирийский врач Фемисия Лаодика подчеркивала, что удаление крови у пациента выведет злых духов, которые могут вызывать болезни[3].

Кроме того, практика использования пиявок также была описана в исламской литературе. Например, Авиценна (980-1037 гг. н.э.) в своей книге «Канон медицины» описал, что пиявка может сосать кровь из глубоких вен, до которых нельзя добраться обычными влажными банками[3,19], и рекомендовал пиявки при кожных заболеваниях[21]. ]. В 12 -м веке Абд-эль-Латиф аль-Багдади упоминал в своих текстах о благотворном использовании применения пиявок после хирургических операций[21]. После этого Ибн Масихи (1233-1286 гг. н.э.) в своей книге «Умда фи джарахат» различал медицинские пиявки от немедицинских (ядовитых) по их форме и цвету[19].

Позднее, в средние века, медики больше зависели от гирудотерапии, которую назначали при широком спектре заболеваний, в том числе при заболеваниях нервной системы (эпилепсия, застой головного мозга), заболеваниях мочевыводящих и репродуктивных органов (нефрит, подострый овариит, половой передающиеся заболевания), воспалительные заболевания (острый гастрит, ларингит) и болезни глаз[3,19].Некоторые французские врачи прописывали больному пиявки еще до того, как увидели его. На самом деле, широко распространенные признаки пиявки можно отнести к концепции, которая предполагала, что кровопускание пиявкой менее болезненно, чем с помощью ланцета или скарификатора. Кроме того, применение пиявок более подходит и управляемо при геморрое и вагините, когда пациенты не переносят лезвие или баночный стакан [3].

Достигнув пика популярности в начале девятнадцатого века, торговля пиявками стала прибыльным бизнесом, который побуждал людей собирать большое количество пиявок, что в конечном итоге привело к тому, что они стали вымирающим видом. Следовательно, европейские и американские власти предложили вознаграждение за изобретение нового метода разведения пиявок[3]. Между тем пиявками лечили психические расстройства, кожные заболевания, подагру, головную боль и коклюш[14].

К концу 19 -го -го века пиявки постепенно приобрели дурную славу и почти прекратились к началу ХХ, потому что гирудотерапия не соответствовала новым требованиям современных медицинских правил и большому прогрессу во всех областях медицины[3] .В то время кровопускание пиявками все еще было обычным явлением при лечении эпилепсии наряду с другими традиционными средствами, такими как прижигание и ванны. Раньше терапевты прикладывали пиявки к коже головы, чтобы уменьшить застой крови в мозгу и кровоснабжение мозга, которые, как считалось, связаны с этиологией эпилепсии [22]. Несмотря на это, научный интерес к пиявкам сохранился в результате исследований Хейкрафта, которые вернули пиявки в медицинскую практику, когда он впервые обрисовал присутствие в слюне пиявки антикоагулянта, который он назвал гирудином[23]. позже выделен и идентифицирован Марквардтом, который продемонстрировал его антитромбиновую активность [24].Другой врач писал о превосходном благотворном использовании пиявок при лечении коронарного тромбоза, и он преувеличенно выражал свое желание быть полностью покрытым пиявками, чтобы извлечь пользу из их слюны, содержащей гирудин [20].

В 1981 году американский биолог Рой Т. Сойер[3] основал фонд для развития разведения пиявок и исследований медицинских пиявок. Некоторые хирурги недавно разработали искусственный прототип пиявки, названный «механической пиявкой», который может выполнять кровососание для лечения венозного застоя.Они утверждали, что это устройство более приемлемо для пациентов и более точно, чем сами существа[25,26].

После периода рецессии гирудотерапии она возродилась после середины 20-го века с новыми применениями во многих областях медицины, включая хирургические процедуры и восстановительные процедуры, сосудистые заболевания, артрит, мигрень[19,21]. Это новое терапевтическое использование пиявок привело к большему интересу к выделению и характеристике активных компонентов слюны пиявок [27].В 2004 году Организация по санитарному надзору за качеством пищевых продуктов и медикаментов (FDA) одобрила использование пиявок в медицинских целях[19]. Предполагалось, что гирудотерапия зависит в основном от двух концепций. Сначала, когда пиявка прокусывает кожу жертвы, она впрыскивает в рану секрет слюнной железы. Во-вторых, другая часть этих выделений будет смешиваться с проглоченной кровью, чтобы поддерживать ее в жидком состоянии [28, 29].

СОВРЕМЕННЫЕ ПРИМЕНЕНИЯ ПИВАТЬЯ

Сердечно-сосудистые заболевания:

ССЗ представляют собой группу хронических аномалий, поражающих сердечно-сосудистую систему, включая сердце, вены и артерии[30].Среди неизлечимых болезней ССЗ считались главной причиной смертности, вызывая до 30% смертей в мире к 2008 году[31]. Текущий уровень заболеваемости и смертности, вызванный сердечно-сосудистыми заболеваниями, был основной причиной интенсивных исследований в поисках сильнодействующих лекарств с меньшим количеством побочных эффектов [32].

Лечение пиявками зарекомендовало себя как альтернативное средство для лечения сосудистых заболеваний, поскольку слюна пиявки может временно улучшить кровоток и уменьшить гипералгезию соединительной ткани[17].К 1997 году на российский рынок был выпущен новый антитромботический и антикоагулянтный фармацевтический препарат под торговым названием «Пиявит», который состоял из экстракта слюны медицинской пиявки. Препарат назначали как тромболитическое и антиагрегантное средство. Клинические исследования показали, что он может снижать гиперкоагуляцию крови с противовоспалительным эффектом у пациентов с тромбофлебитом [33]. Аналогичным образом, пациенты с флебитами, получавшие местную пиявку, демонстрировали лучшую способность ходить, меньшую боль и незначительный отек ног, а также почти нормальный цвет кожи ног [34].В таких случаях медики обычно прикладывают 4-6 пиявок непосредственно к пораженному участку. Многие терапевты использовали пиявки для лечения гипертонии, варикозного расширения вен, геморроя, гонартрита и вторичного дерматоза, связанного с ишемией [17,21].

Эффективность слюны пиявки при сердечно-сосудистых заболеваниях является результатом применения специфических ингибиторов тромбина, гирудина, который впервые был выделен из H. medicalis [23,24,25]. -связанный тромбин [35,36].Кроме того, у разных видов пиявок были идентифицированы другие ингибиторы тромбина. Например, буфрудин был выделен из H. manillensis с химической структурой, близкой к гирудину [6]. Тесно связывающийся ингибитор тромбина, названный гемадин, был идентифицирован из экстракта всего тела пиявки вида Haemadipsa sylvestris [37]. Другой антитромбин, названный гранулиноподобным, был выделен из пиявки вида H. nipponia [38]. Наконец, ингибитор белка гранулоцитов и моноцитов человека, известный как теромин, был охарактеризован из экстракта головы видов пиявок Theromyzon tessulatum с антитромбиновой активностью [39].

Следует отметить, что гирудин является единственным антикоагулянтом гематофагов животного происхождения, одобренным FDA для клинических целей [32]. Многие исследования показали, что гирудин более эффективен, чем гепарин, в предотвращении тромбоза глубоких вен (ТГВ) и ишемических событий у пациентов с нестабильной стенокардией [32]. В отличие от непрямых ингибиторов тромбина, гепарина и низкомолекулярных гепаринов, гирудин обладает тем преимуществом, что оказывает прямое ингибирующее действие на тромбин без необходимости использования эндогенных кофакторов (антитромбин III).Таким образом, гирудин стал препаратом выбора у больных с синдромом диссеминированного внутрисосудистого свертывания крови (дефицит антитромбина III). Гирудин можно безопасно использовать у пациентов с аномалиями тромбоцитов или гепарин-индуцированной тромбоцитопенией, поскольку он не оказывает иммунного действия на эритроциты [36]. Кроме того, в отличие от гепаринов, гирудин обладает многообещающей профилактической активностью у пациентов с высоким риском развития сердечно-сосудистых заболеваний, поскольку он может препятствовать росту тромба благодаря своей способности блокировать связывание тромбина с фибрином. Следовательно, сообщалось, что гирудин может уменьшить ТГВ, легочную эмболию и распространение венозного тромбоза [32,36].

Открытие Гирудина послужило поводом для разработки многих новых многообещающих антикоагулянтов с использованием методов рекомбинантной технологии. Например, два аналога, лепирудин и десирудин, были одобрены FDA и в настоящее время используются под торговыми названиями Рефлудан ® и Иприваск ® соответственно [32]. Именно десирудин в настоящее время используется для профилактики ТГВ после операции по замене тазобедренного или коленного сустава [40].

С другой стороны, пиявки выработали другие активные соединения, нацеленные на различные факторы свертывания крови, такие как антиагреганты, ингибиторы фактора Ха (FXa) и фибринолитические ферменты[41]. Во-первых, из Macrobdella decora был идентифицирован мощный антитромбоцитарный декорсин, обладающий высоким сродством к гликопротеиновым рецепторам IIb-IIIa [42]. Во-вторых, ингибитор адгезии и активации тромбоцитов, названный калин, был выделен из секрета слюны европейской пиявки H. medicalis , и предполагалось, что он действует путем ингибирования коллагена и фактора фон Виллебранда [43].Кроме того, саратин из пиявки Haementeria ghilianii был описан как ингибитор агрегации тромбоцитов за счет блокирования связывания коллагена с интегрином α 2 β 1 и фактором фон Виллебранда [44]. С фармакологической точки зрения активированный тромбоцитарный гликопротеин IIb-IIIa функционирует как рецептор фибриногена, витронектина, фактора фон Виллебранда и фибронектина. Следовательно, ингибиторы этих поверхностных рецепторов могут быть использованы в качестве препаратов для лечения острого коронарного синдрома [45].

Кроме того, в экстракте слюны пиявки было идентифицировано несколько ингибиторов фактора Ха, таких как гилантен [46], лефаксин [2] и теростатин [47] из H. ghilianii , H. depressa и T. tessulatum , соответственно. Доказано, что FXa играет ключевую роль в гемостазе организма человека. Как внешний, так и внутренний пути процесса свертывания крови приводят к активации FXa, который опосредует превращение протромбина (FII) в тромбин (FIIa) [48]. Кроме того, гементин и гементерин были охарактеризованы из H. ghilianii [49] и H. depressa [10] и описаны как фибриногенолитические ферменты. Интересно, что расщепление фибриногена приводит к ранней блокаде коагуляционного каскада, что также делает фибриногенолитические соединения очень перспективными терапевтическими средствами [10].

Реконструктивная и микрохирургия:

Микрохирургия – вид хирургических операций, проводимых с использованием микроинструментов под микроскопом с целью анастомозирования мелких кровеносных сосудов, вен и артерий при реплантации тканей или ампутированных пальцах[18].Артериальный тромбоз встречается нечасто, в то время как венозная окклюзия представляет серьезную угрозу для вновь трансплантированных тканей и может привести к образованию тромбов, стазу и, в конечном итоге, к некрозу тканей. Таким образом, врачи утверждали, что устранение венозного застоя является жизненно важным шагом для снижения этого риска и спасения этих трансплантированных тканей [18, 50]. Следовательно, не только активный отток крови, возникающий в результате сосания пиявки, но и пассивное просачивание после отслоения пиявки из-за наличия в слюне пиявки антикоагулянтов длительного действия побудили медиков использовать пиявку для уменьшения венозного застоя [18, 51].Облегчающий эффект является кумулятивным результатом кровоточивости, вызванной укусом пиявки, что является следствием многих факторов, в том числе кровоточащей раны, секретируемого биоактивного фермента, антикоагулянтов и сосудорасширяющих средств [50]. С другой стороны, хирурги, практикующие пластические операции, считали пиявки перспективным средством, так как наблюдали, что Y-образные раны, вызванные укусами пиявок, обычно заживают без рубцов и осложнений[17]. Тем не менее, не было установлено никаких международных протоколов по инструкциям по лечению пиявками, некоторые сообщали, что применения пиявок в течение недели достаточно для получения хороших результатов [18,52].Все данные о применении медицинской пиявки в микрохирургии основаны на отчетах о клинических случаях и сериях случаев, при этом до настоящего времени не было опубликовано ни одного контролируемого исследования[18].

Сообщалось, что пиявка является успешным средством для улучшения кровотока после микрохирургии сильно оторванного скальпа (оторванного в результате травмы). Кожа головы была частично спасена с нормальным ростом волос на всех поврежденных участках [53]. К 1984 году некоторые врачи использовали гирудотерапию для лечения семи пациентов с набухшими кожными лоскутами.Ставили пиявки 2-4 раза в день в течение 2-4 дней. Они сообщили, что пиявки предотвратили спадение лоскута с заметным улучшением цвета и незначительными осложнениями[54]. Пиявки также использовались для устранения заложенности полностью ампутированных ушей[55]. Другие использовали 4-дневный курс пиявок для лечения восьми человек, перенесших операции по реплантации и реваскуляризации после ампутационных травм. Было отмечено, что четыре пациента реагировали положительно и у них нормализовалось кровообращение [56]. Реплантация ампутированных тканей лица (кончики носа, нижняя губа, волосистая часть головы и уши) с микрососудистым анастомозом достигла больших успехов и лучших косметических результатов, когда венозный отток был увеличен за счет применения пиявок наряду с артериовенозными фистулами и булавочными уколами. Сообщалось, что более половины пролеченных случаев были полностью спасены[57]. Другие отметили, что кровопускание пиявками в сочетании с фактором роста эндотелия сосудов может улучшить выживаемость лоскута [58]. Кроме того, применение пиявок назначали в качестве послеоперационного ухода пациентам, перенесшим хирургическую операцию по реплантации кончика пальца [59]. Совсем недавно некоторые медики рассказали об успешном применении пиявки для спасения ишемизированного пальца. На 7-й день лечения пациент отметил улучшение чувствительности и чувствительности к уколу булавкой в ​​верхней части пальца [60].

Реплантация полового члена обычно связана с венозной недостаточностью. К 1996 году некоторые исследователи впервые сообщили об эффективном использовании пиявок для уменьшения послеоперационного венозного застоя у 37-летнего мужчины, у которого был полностью ампутирован половой член[61]. Больших успехов достигла реплантация полового члена немикрохирургическими операциями в сочетании с гирудотерапией. У пациентов, получавших пиявки, не было выявлено отека и нормальных функций, таких как опорожнение, чувствительность и эрекция [62].

Задокументировано множество успешных применений пиявок после процедур резекции и реплантации. Например, у женщины, которая страдала базально-клеточной карциномой над носом и перенесла хирургические процедуры, после девяти месяцев лечения пиявками было обнаружено нормальное кровообращение и здоровый лоскут [17]. Лечение пиявками было успешно применено для предотвращения венозной недостаточности у пациентов, которым были пересажены свободные перфорационные лоскуты для медиальной икроножной артерии, кровоснабжающей медиальную икроножную мышцу и прилегающую кожу [63].Недавно сообщалось, что пиявки использовались для лечения шести пациентов с венозным застоем микрососудистых свободных лоскутов, у которых венозный отток и хирургическая операция не могли быть выполнены. Они подчеркнули, что режим лечения в течение 4-14 дней привел к безопасному сохранению всех лоскутов [52].

Рак и метастазы:

В 2008 году рак стал причиной около 13% всех смертей в мире. Ожидается, что эти тревожные показатели возрастут в течение следующих двух десятилетий и достигнут 13.2 миллиона смертей к 2030 году[64]. Этот обзор был проведен с учетом того, что гирудотерапия в качестве цитотоксического средства для лечения рака в научных отчетах не установлена. Обзор выполнен на основе некоторых исследований, которые были ориентированы на использование слюны пиявки и экстракта пиявки в качестве антиметастатических средств, а не на их использование для лечения самой опухоли.

Применение пиявки в качестве антиметастатического средства было вдохновлено ранее сообщавшейся ингибирующей метастатической активностью некоторых антикоагулянтов, таких как варфарин и гепарин[65].Предполагалось, что необычная комбинация многих антикоагулянтов, ингибиторов протеазы и других компонентов в слюне пиявки может быть более мощным антиметастатическим средством [66]. Было отмечено, что экстракт слюнных желез из H. ghilianii и Haementeria officinalis ингибировал метастатическую колонизацию опухолевых клеток легких, которые вводили внутривенно экспериментальным животным [66]. Позже антиметастатический и антикоагулянтный белок, названный ghilanten, был выделен из секрета слюнных желез хоботковой пиявки, H.ghilianii [67]. Сообщалось, что гилантен может подавлять метастазирование меланомы, рака молочной железы, рака легких и рака предстательной железы [68]. В другом исследовании синтетический препарат гирудина описан как эффективный ингибитор метастазирования широкого спектра злокачественных опухолевых клеток, таких как карцинома легких, карцинома молочной железы, карцинома мочевого пузыря, колоректальная карцинома, саркома мягких тканей, лейкемия и лимфома [65].

Мексиканская пиявка Haementeria officinalis была подвергнута многим исследованиям, которые в конечном итоге привели к раскрытию антиметастатической активности секрета ее слюнных желез.Было замечено, что его слюна содержит белок массой 17 кДа, называемый антистазином, обладающий способностью предотвращать колонизацию рака легких. Они утверждали, что антиметастатическая активность слюны мексиканской пиявки была обусловлена ​​наличием ингибиторов агрегации тромбоцитов, антикоагулянтов и антипротеолитических ферментов [69,70].

К 2010 году другие ученые впервые установили, что 2-месячное лечение местным применением H. medicalis может полностью вылечить локальную поясничную боль у пациентов с поздними стадиями рака почки и лейомиосаркомы[71].Недавно было доказано, что экстракт слюны тропической пиявки H. manillensis (Lesson, 1842) проявлял антипролиферативную активность in vitro в отношении мелкоклеточного рака легкого (SW1271). Кроме того, полученная из них слюна пиявки проявляла сверхаддитивную синергетическую активность с карбоплатином [72].

Сахарный диабет и его осложнения:

Сахарный диабет (СД) представляет собой группу метаболических нарушений, приводящих к повышению уровня глюкозы в крови, что в конечном итоге приводит к клиническим симптомам и осложнениям[73]. В последнее время СД считается глобальной пандемией из-за постепенного увеличения числа людей, страдающих диабетом, и ожидается, что к 2030 году он станет бременем во всем мире с 366 миллионами пациентов с диабетом [74]. Всесторонний поиск в литературе показал, что нет документированных научных отчетов о лечении пиявками как сахароснижающем средстве. С другой стороны, применение пиявок традиционно использовалось для лечения осложнений сахарного диабета [75].

Одними из наиболее тяжелых осложнений СД являются сердечно-сосудистые, обусловленные коронарным атеросклерозом, гипергликемией, повышением уровня липидов в крови, нарушением адгезии тромбоцитов, факторами свертывания крови, повышенным артериальным давлением, окислительным стрессом и воспалением.Больные сахарным диабетом имеют высокий риск развития инфаркта миокарда, который является основной причиной смерти при СД 2 типа [73]. С другой стороны, наличие в слюне пиявок пептидов и белков, влияющих на кровь, может иметь важное значение для облегчения этих состояний. Прежде всего, гирудин играет существенную роль в предотвращении процесса свертывания благодаря его способности связывать тромбин и, следовательно, подавлять опосредованное тромбином превращение фибриногена в фибрин, что делает его эффективным для купирования ишемических явлений [32].Было доказано, что калин, выделенный из H. medicalis , препятствует образованию тромбов, как описано выше [43]. Кроме того, другие пептиды и белки, влияющие на факторы свертывания крови, были выделены из других видов пиявок, как описано выше, и могут иметь первостепенное значение для пациентов с диабетом [2,6].

Осложнения периферических сосудов у больных сахарным диабетом могут привести к уменьшению притока крови к дистальным частям тела, что приводит к ишемическим заболеваниям конечностей, таким как гангрена.Контроль гангрены очень важен для пациентов с диабетом за счет снижения как артериального давления, так и липидемии, наряду с усилением кровообращения в периферических кровеносных сосудах [73]. Дикая пиявка вида Whitmania pigra (семейство: Hirudinidae ) использовалась традиционными китайскими терапевтами для увеличения притока крови к дистальным частям тела и облегчения нарушений свертывания крови. Сообщалось, что водные и спиртовые экстракты всего тела этого вида пиявок обладали мощной антикоагулянтной активностью[76].Из пиявки W.pigra был выделен миоактивный пептид, называемый возбуждающим пептидом пиявки, который, как сообщается, усиливает мышечное сокращение полового члена и кишечника [77].

К 2002 году был открыт официальный центр лечения пиявками, который за короткое время стал международным центром лечения СД пиявками. Основатель этого центра сказал, что будет использовать четыре пиявки за один сеанс, и во многих тяжелых случаях большее количество пиявок может предотвратить ампутацию[75].Недавно сообщалось, что слюна тропической пиявки H. manillensis обладала антигипергликемической активностью в отношении аллоксан-индуцированного СД у крыс при эффективных дозах от 250 до 500 мкг/кг массы тела (неопубликованные данные).

Инфекционные заболевания:

Постоянно растущие показатели инфекционных заболеваний привели к более широкому использованию имеющихся в продаже антибиотиков, что привело к возникновению нового сложного явления, известного как устойчивость к противомикробным препаратам.Поэтому ученые разработали новые стратегии для разработки противомикробных препаратов с новыми механизмами действия и более низкой частотой бактериальной резистентности [78].

Многие обозреватели, которые исследовали терапевтическое значение медицинской пиявки, указывали, что пиявка может быть эффективной для лечения инфекции, не упоминая более подробной информации или информации о протоколах применения пиявки и природе активного компонента. Например, некоторые сообщали, что терапия пиявками использовалась традиционными стоматологами в качестве средства от стоматологических инфекций, таких как периодонтит и альвеолярные абсцессы [21].

Из экстракта медицинской пиявки выделен белок дестабилаза с лизоцимоподобной активностью. Сообщалось, что этот белок обладал антибактериальной активностью в отношении некоторых бактериальных штаммов, поскольку он может разрушать их клеточные компоненты [79,80]. Некоторые исследователи установили, что инъекция липополисахаридов или хирургический разрез пиявке T. tessulatum приводили к быстрому высвобождению нейросигнальных и антимикробных пептидов (AMP), которые работают синергетически, подавляя проникновение бактерий и активируя иммунный ответ атакованных клеток. [81].Два АМП, теромацин и теромизин, были выделены из жидкости организма пиявки T. tessulatum . Было обнаружено, что оба обладают антибактериальной активностью в отношении штаммов грамположительных бактерий Micrococcus luteus [82]. Более того, сообщалось, что нервная система европейской пиявки H. medicalis может инициировать антимикробный ответ после повреждения, сигнализируя о синтезе AMPs[83]. У этого вида пиявок были идентифицированы три различных пептида с антибактериальной активностью. Hm-люмбицин и невромацин были выделены из нейронов и клеток микроглии, а пептид B был обнаружен в жидкостях тела пиявки [84].

Недавно некоторые исследователи запатентовали использование экстракта пиявок многих видов пиявок семейства Hirudinidae в качестве антимикробного средства для различных применений. Они утверждали, что очищенный экстракт, полученный из любой части тела пиявки, особенно слюнных желез, проявлял антимикробную активность в отношении многих грамотрицательных/положительных патогенов.Они сообщили, что экстракт пиявки обладал высокой антибактериальной активностью в отношении Shewanella и Aerococcus viridans , в то время как более низкая активность наблюдалась в отношении Escherichia coli , Salmonella typhi и Staphylococcus aureus . Они отметили, что экстракт пиявки можно использовать для лечения заболеваний, вызванных бактериями, включая артрит, расстройства пищевого происхождения и внутрибольничные инфекции. Они также подчеркнули полезное использование экстракта пиявки в чистящих средствах для дезинфекции больниц и ежедневной домашней уборки[78].Наконец, было обнаружено, что секрет слюнных желез, полученный из тропической пиявки H. manillensis , обладает широким спектром антибактериальной активности как против грамположительных ( S. aureus ), так и грамотрицательных ( Sal. typhi и E. .coli ) бактериальные штаммы[85].

Артрит и анальгетик:

Обезболивающее действие пиявок было подтверждено во многих исследованиях на пациентах с остеоартритом, которые утверждали, что пиявки приносят больше облегчения, чем местный диклофенак, и не вызывают побочных эффектов[86].Аналогичным образом, некоторые исследования доказали, что гирудин может уменьшать воспаление синовиальной оболочки у пациентов с артритом путем ингибирования белка DING, производного синовиального стимулирующего белка, действующего как аутоантиген у пациентов с ревматоидным артритом [87]. В другом исследовании группа женщин с остеоартрозом первого запястно-пястного сустава получила курс лечения 2-3 пиявками местно. Все пролеченные лица показали уменьшение боли и улучшение инвалидности. Эффективность пиявок наблюдалась через 1 неделю терапии и сохранялась не менее 2 месяцев[88].

Другое клиническое исследование на пациентах с прогрессирующим остеоартритом коленного сустава показало, что терапия пиявками может эффективно снизить потребность в приеме анальгетиков. Было отмечено, что двойной режим лечения с 4-недельным интервалом продемонстрировал более длительное облегчение и лучшую физическую активность, чем один курс лечения [89]. Кроме того, оценивалась эффективность лечения пиявками в сочетании с традиционной травяной формулой Унани. Было замечено, что у пациентов, получавших комбинированное лечение, наблюдались меньшие боли и скованность при лучшей работоспособности [90].В других сообщениях указывалось, что терапия пиявками используется в качестве анальгетика при боли в подвздошно-крестцовых суставах и синдроме цервикобрахиалгии [17].

Осложнения лечения пиявками

Авиценна Ж. Фитомед. 2020 май-июнь; 10(3): 222–234.

Матине Пуррахими

1 Студенческий исследовательский комитет, факультет смежной медицины, Иранский университет медицинских наук, Тегеран, Иран

Моджтаба Абди

2 Студенческий исследовательский комитет, Школа сестринского и акушерского дела, Иранский университет медицинских наук, Тегеран, Иран

Рошанак Годс

3 Научно-исследовательский институт исламской и комплементарной медицины Иранского университета медицинских наук, Тегеран, Иран

4 Школа персидской медицины Иранского университета медицинских наук, Тегеран, Иран

1 Студенческий исследовательский комитет, факультет смежной медицины, Иранский университет медицинских наук, Тегеран, Иран

2 Студенческий исследовательский комитет, Школа сестринского и акушерского дела, Иранский университет медицинских наук, Тегеран, Иран

3 Научно-исследовательский институт исламской и комплементарной медицины Иранского университета медицинских наук, Тегеран, Иран

4 Школа персидской медицины Иранского университета медицинских наук, Тегеран, Иран

* Автор, ответственный за переписку: Тел. : +98-

35302, Факс: +98-21-55613191, годс[email protected]

Поступила в редакцию 6 февраля 2019 г.; Пересмотрено 4 августа 2019 г .; Принято 24 августа 2019 г. Medium, при условии, что оригинальная работа правильно процитирована.

Abstract

Objective:

Принцип использования пиявок связан с народной медициной многих стран и его применение имеет разные философии для использования на разных участках тела.Пиявки, при всех преимуществах, могут таить в себе опасности.

Материалы и методы:

Обзор осложнений лечения пиявками был сделан на основе статей на английском языке, проиндексированных в базах данных до 1 июля 2018 года. Стратегический поиск был проведен независимо членами исследовательской группы, а затем все статьи были +классифицированы по темам.

Результаты:

Связанные статьи были в основном отчетами о случаях болезни. Осложнения были разделены на пять категорий, включая инфекцию, аллергию, длительное кровотечение, миграцию и другие. Инфекция является наиболее частым осложнением, связанным с лечением пиявками, и Aeromonas spp. имеет наибольшее участие в инфекциях.

Заключение:

Лечение пиявками может быть дополнительным терапевтическим методом при правильном лечении возможных осложнений.

Ключевые слова: Пиявка, Лечение пиявками, Осложнение, Дополнительная медицина

Введение

Пиявка — разновидность кровожадного гермафродита. Род Hirudo известен как медицинские пиявки.В слюне этого маленького существа содержится более сотни биоактивных соединений, которые вводятся в ткани хозяина во время кормления (Баскова и др., 2008 ▶; Mehlhorn, 2008 ▶; Поршинский и др., 2011 ▶; Mann, 2013). ▶; Wollina et al., 2016 ▶). Принцип медицинской пиявочной терапии (МЛТ) или гирудотерапии связан с традиционной медициной многих стран и имеет разные подходы к использованию на разных участках тела (Whitaker et al., 2004 ▶; Hyson, 2005 ▶; Papavramidou and Christopoulou). ‐Алетра, 2009 ▶).

Иранские ученые традиционной медицины, такие как Авиценна и Абдул Латиф Багдади, также упоминали в своих книгах об эффектах лечения пиявками (Ибн-Сина, 1593 ▶; AI-Багдади, 1942-1944 ▶). Обзор источников иранской традиционной медицины показал, что лечение пиявками используется при 125 различных состояниях, самых разных заболеваниях и расстройствах (Barzegar et al., 2015 ▶).

С появлением современной медицины эти маленькие вампиры стали реже использоваться, но в конце девятнадцатого века для них было создано новое применение в современной медицине (Lui and Barkley Jr, 2015 ▶; Ghods et al., 2019 ▶). Использование медицинских пиявок для внутривенного застоя после реконструктивных операций одобрено FDA (Deganc and Zdravic, 1960 ▶; Rados, 2004 ▶).

Сосущее кровь внешнее паразитическое поведение, такое как пиявки, может иметь различные последствия из-за прокалывания поверхности тела хозяина для проникновения. Укус пиявки вызывает прямую связь между ее телом и телом хозяина. Укус пиявки также может привести к смерти, хотя это происходит очень редко. Следовательно, лечение пиявками при всех преимуществах может таить в себе опасности (Kose et al., 2008 ▶; Хильдебрандт и Лемке, 2011 ▶; О’Демпси, 2012 ▶).

Настоящее исследование было проведено для обзора результатов лечения пиявками в статьях, чтобы помочь клиницистам узнать о его осложнениях и предотвратить их.

Материалы и методы

Стратегия поиска

Настоящее исследование представляет собой обзор осложнений лечения пиявками. Доказательства, представленные в этой статье, извлечены из статей на английском языке, проиндексированных в таких базах данных, как Ebsco Host (все академические версии), Ovid, ProQuest, PubMed, ScienceDirect, Scopus, Web of Knowledge (полный доступ) и Wiley и Google Scholar (в качестве поискового запроса). двигатель).Были собраны и проанализированы статьи, относящиеся к нашей теме. Срок поиска статей был до 1 июля 2018 года.

Сначала из MESH было извлечено стандартное ключевое слово и его эквиваленты. Затем, используя PubMed, был выполнен пилотный поиск, чтобы найти больше ключевых слов для написания стратегии поиска с использованием «Пиявок», «Пиявок», «Терапии пиявками», «Пиявок», «Гирудинеи», «Гирудинеаса», «Гирудотерапии» и их эквивалентов. , вместе с их ожидаемыми комбинированными формами, с помощью соответствующих операторов.После определения всех эквивалентных терминов и всех комбинаций слов была написана стратегия поиска и проведен стратегический поиск по всем упомянутым базам данных. Статьи были независимо проверены членами исследовательской группы для повышения точности и достоверности поиска. Наконец, все статьи были объединены в одну базу данных. В приложении упоминается стратегия поиска.

Следует отметить, что для предотвращения утери статей, поиск был очень обширным, и затем были извлечены статьи, связанные с осложнениями при использовании пиявок, также этот поиск использовался в других исследованиях на предмет показаний к применению пиявок.

Выбор бумаги

На первом этапе были удалены повторяющиеся статьи. Затем валидные статьи были отделены от новостей, страниц общедоступных журналов, газет и других неавторитетных источников, а также статей в виде постеров или лекций по причине внутренней валидности исследования. На следующем этапе были рассмотрены тезисы статей. Затем полный текст статей с нужными нам характеристиками был извлечен через доступ к Центральной библиотеке Иранского университета медицинских наук.Чтобы получить полный текст недоступных статей через эту библиотеку, авторам статей были отправлены электронные письма. Затем были изучены полные тексты статей и отобраны окончательные статьи для использования в данном исследовании. Далее их распределили по темам. Для управления статьями использовалось программное обеспечение EndNote Ver.X7. Поток бумаги показан на .

Бумажный поток; процесс извлечения статей об осложнениях гирудотерапии из базы данных всех статей о гирудотерапии

Извлечение данных

Выводы статей и связанных с ними предметов вместе с их ссылками были разделены на категории. После прочтения всех выбранных статей и поиска в библиографии каждой статьи выводы были обобщены и использованы в статье.

Таблица 1

Таблица 1

(57,1%) (Устойчивость к ципрофлоксацину и пиперациллин-тазобактаму), Enterococcus spp. (42,9%) (резистентность не указана), Proteus Vulgaris (42,9%) (резистентность к триметоприму-сульфаметоксазолу и ципрофлоксацину), Morganella morganii (28,6%) (резистентность к триметоприм-сульфаметоксазолу и ципрофлоксацину), Corynebacterium spp. . (14,3%) (резистентность не указана) и Candida parapsilosis (14,3%) (резистентность не указана)
У 5 больных была полимикробная инфекция. 9039 7 1 пациент мужского пола с застоем кожного лоскута в связи с удалением большой опухоли правой височной яремной гломуса после ангиографической эмболизации
Учебный номер года Детали
Счастливый отчет 2010 Причина пията терапия Венозный застой
Пациенты 5 пациентов мужского пола с венозным застоем
Осложнения 9097 А. hydrophila и А. veronii биовар sobria
Результаты фторхинолонов антибиотики
Ван отчет Case 2011 Причина пиявки терапии малоберцовой osteomyocutaneous лоскут для реконструкция нижней челюсти
Пациенты 1 пациент мужского пола с амелобластомой, перенесший костно-кожный лоскут малоберцовой кости
hydrophila
Исходы Пациент лечился цефепимом, но лоскут некротизировался, и через 8 месяцев пациенту в очередной раз была проведена реконструктивная операция.
Bibbo Случай Дело 2013 Причина леческую терапию Венозные заторы
пациенты 1 инсулиновый, зависящий от бегового мужского пола, хронический боковая рана лодыжки и деформация лодыжки Шарко
Осложнения Инфекция A.Hydrophila , A. Veronii , Proteus , Proteus Vulgaris , и Morganella Morganii
Результаты Отзывы с парентеральным антибиотикам (не упомянуты), Оперативное сосредоточение, Отрицательные привязки, и Гипербарическая кислородная терапия
Giltner Дело в корпусе 2013 2013 Причиной лечебной терапии Венозные заторы на дистанционном порции лоскута
пациенты 1 женские проходимые хирургии пациента с отказом
Осложнения Инфекция A.hydrophila и Morganella morganii (резистентные к ампициллину-сульбактаму и цефазолину и чувствительные к цефепиму и гентамицину)
Исходы (230 мг внутривенно каждые 8 ​​часов) продолжали в течение 3 недель.
Gönen отчета Case 2013 Причины пиявка терапия остеоартрита коленного сустава
больных 1 Больных с остеоартритом коленного сустава
Осложнения Инфекция Acinetobacter spp.
Результаты Обработанные с тигециклина (50 мг) после 21 дней
Wilmer История болезни 2013 Причина пиявки терапии Венозный застой
Пациенты 1 пациент с ампутацией указательного, среднего и безымянного пальцев правой руки на уровне проксимальной фаланги дисковой пилой
Осложнения Ципрофлоксацинрезистентная инфекция A.Hydrophila
Наиболее Пациент был инициирован на ко-трикоксазоле (SXT) в течение 7 дней
Kruer Multicenter Retrosспективное чтение и все данные было описательным. 2015 2015 Причина лечейной терапии венозные заторы
Исходы Исходы пациентов не упоминаются, но у пациентов, получавших цефазолин, цефтриаксон, цефотетан и ванкомицин, инфекции не было.
Ретроспективное обучение когорты, но все данные были описательными 2016 Причина леческую терапию венозные заторы пластической хирургии и 1 из 16 в ортопедической хирургии)
Осложнения Инфекция дикого типа Aeromonas spp.
1 пациент с устойчивостью к фторхинолонам и 2 пациента с резистентностью к амоксициллину/клавулановой кислоте и цефалоспоринам второго поколения
, И кооператовазол для пациента, зараженные фторохинолонами устойчивые штаммы)
кейс отчет 2010 2010 Причины лечеистых терапии
пациентов 1 женщина Пациент с мигренью
Осложнения Pruuritus, эритема, отмеченные отек лица, носовые перегрузки и реакция назовывания и гиперчувствительности
тема l стероидный крем
CARADAG CARADAG CARADAG 2011 Причина лечейной терапии Head and Head Pain
пациентов 1 мужской пациент с болью головой и шеи
Осложнения Целлюлит (эритематозные, резко граничные, нерегулярные налетные и геморрагические корки)
Отзывы Обработаны левоцетиризином 5 мг предложения (два раза в день), IBUPROFEN 600 мг.Тиоколхикозид (для мышечных болей), актуальные фуздийные кислоты и влажную заправку с физиологическим раствором, TID (три раза в день) в течение 30 минут на области поражения, кларитромицин
Pietrzak Case Report 2012 Пиякотерапия Самосвязка для острого фарингита (было успешным) и повторно использовано, что пияток для боли в спине
пациента 1 мужской пациент с боли в спине
Осложнения Кожа эритема, отек и увеличение подмышечных лимфатических узлов (во время повторного использования)
Исходы Регресс поражения (кроме эрозий) при пероральном применении антибиотиков (ципрофлоксацин), антигистаминных препаратов (клемастин и фексофенадин), васкулопротекторных препаратов (рутозид, эсцин , диосмин и сулодексид), топические стероидные мази и 5-дневный курс криотерапии.Через четыре недели снова сделали криотерапию.
Chelifa Chereifa Chereifa 2013 Причина лечейных терапии хроническая боль в спине
пациентов 1 женского пациента с хронической нижней боли в спине
Осложнения Фирма и эритематозные узелки, геометрически распределяется на нижней части спины и псевдолимфомы
Outcomes Обработанные с актуальными, а затем внутри пораженной ГКС
Алтамура отчет Case 2014 Причина лечейной терапии хроническая фибромиалгия
пациента 1 пациент с хронической фибромиалгией
Множество фирм, красноватые, цепи Тед на спине и псевдолимфому
результаты Обработанные Mometasone актуальны, ставка (в течение 3-4 недель)
RASI Case Report 2014 Причина лечу-терапии Инфекция
пациента 1 мужской пациент с предполагаемой инфекцией
Осложнения Многочисленные асимптомные многотрубные кистозные поражения с центральным черным эсчарным причем с желтой жирной экссудатом (для A.Hydrophila )на груди
Исходы Лечение пероральным ципрофлоксацином в дозе 2 г ежедневно (в течение 10 дней), 2% раствором эритромицина для местного применения ежедневно (в течение 10 дней)
Через две недели после исчезновения Воспаление цистические поражения эвакуированы с острым экстрактором Curette и Comedone
Brzezinski Brezinski 2015 2015 Причина лечейной терапии хроническая венозная болезнь
пациентов 1 пациент С хронической венозной недостаточностью класса II
Осложнения Многочисленные эритематозные налетные налета с центральным черным эсчарным, зудом и распределены на обоих нижних конечностях
результаты , обработанные пероральным цефуроксимом 1G в день (в течение 7 дней ), пероральные антигистаминные препараты ежедневно (в течение 7 дней), крем со стероидами для местного применения Класс II Daily (в течение 2 недель)
Guyesil Чекстуальный отчет 2017 Причины леческую терапию Glaucoma
30389 1 женские пациенты с глаукомой
Осложнения Покраснение с повышением температуры окологлазной кожи и мягких тканей, отек век и орбитальный целлюлит
MG Daily (в течение 2 недель)
Ikizceli Ikizceli Отчет о случаях 2005 Причина лечейной терапии хроническая боль в ноге
пациент 1 мужской пациент с хроникой боль
Осложнения Продлить кровотечение (более 3 ч, несмотря на компрессию и перевязку тугими бинтами)
Исходы Через 6 ч после лечения пиявками и через 18 ч при перемежающемся кровотечении кровотечение остановилось.
Зенгин отчет Case 2012 Причина пиявки терапии Face угревой
Пациенты 1 пациента мужского пола с прыщами
Осложнения Продолжительные кровотечение (в течение 10 часов справа и слева на шее, несмотря на наложение стерильной марлевой повязки)
Корпус отчет 2016 2016 Причина лечейной терапии хроническая боль в спине и коленях
пациентов 3 пациента с хронической болью
Осложнения Длительное кровотечение (для более более 2 часов, несмотря на наложение давящей повязки)
Результаты Leech укусы были закрыты с первичными швами
Guven отчет Case 2016 Причина пиявки терапии Face угревой
Пациенты 1 мужской пациент с Acne
Осложнения Длительное кровотечение (в щеке и лбу, несмотря на применение давления со стерильной марлей)
После 2 дозы транексамовой кислоты (500 мг) Медленная внутривенная инъекция, кровотечение остановлено
Change Case Причина лечеистой терапии EAR GRAFT
Paties 1 пациент с ушной трансплантацией
Осложнения Мигр ation
Прикрепленные один конец хирургического шов на пиячу и связывание свободный конец к фирму объект или завязка
Conroy Conrony 2006 Пиякотерапии 30388 палец трансплантат
1 пациент с палец прививки
результаты Использование пластикового чашки, часть базы чашечку снимают и делают продольный разрез на всю ее длину.Затем пиявки были помещены на необходимый палец, а вокруг него была помещена чашка с марлевой прокладкой, чтобы предотвратить потерю пиявки congertion
пациентов 1 пациентки 1 пациент с заторов трансплантата после операции на большом поражении с участием правого ноздрического пола и Columella
0
Размещение Шов пирсинг через середину пията и крепление его к базовой ткани с использованием соединительной петли
отчет о случаях 2003 Причина леческую терапию венозные пробки
Пациенты
Осложнения Менингит вследствие A.veronii biovar sobria инфекция
Исходы Первоначально назначено лечение антибиотиками с внутривенным введением гатифлоксацина и азтреонама и установкой спинального дренажа спинномозговой жидкости. После посева ЦСЖ пациенту назначали цефтриаксон, а затем цефепим-тобрамицин в течение 21 дня и грудной лоскут, используемый для восстановления места операции.
Дело Дело отсчет 2011 Причина леческую терапию Венозные заторы
пациентов 1 пациентки 1 пациентки с венозным заложением в свободном заслоне Осложнения Туннелирование пиягов в другом укусе пиял
результаты AtraUmatic Things были использованы для извлечения пията из укуса
Total Numbers 25
Пациенты 39

Результаты

Двадцать пять связанных статей, в основном отчеты о клинических случаях, были до 2018 года ().На основании результатов исследований статьи были разделены на пять категорий: инфекция, длительное кровотечение, аллергия, миграция и другие осложнения ().

Частота побочных реакций

Инфекция

Шесть клинических случаев (Schnabl et al., 2010 ▶; Wang et al., 2011 ▶; Bibbo et al., 2013 ▶; Giltner et al., 2013 ▶; Gonen et al., 2013 ▶; Wilmer et al. , 2013 ▶) и 2 ретроспективных когортных исследования (Kruer et al., 2015 ▶; Verriere et al., 2016 ▶) в этой области.Их результаты показали, что Aeromonas spp. чаще всего наблюдается в поле инфекций (). Чаще всего пиявки применялись при венозном застое, и пациенты принимали антибиотикопрофилактику.

Таблица 2

Участие бактерий в инфекциях

Микроорганизмы А. гидрофила A. veronii, биовар собрия Протей обыкновенный Морганелла моргании Другое
I 1 (+) (+) (-) (-) (-) (+) (+)
I 2 (+) +) (-) (-) (-) (-)
I 3 (+) (-) (-) (+)
I 4 (+) (+) (+) (+) (-) (-) (-)
I 5 (-) (-) (-) (-) (-) (-) (+) (+)
i 6 (+) (+) (-) (-) (-) (-)
I 7 +) (-) (+) (+) (+) (+) (+) (+) (-) (+) (-)
ВСЕГО 7 3 2 3 5

В Европейском госпитале Жоржа Помпиду было проведено клиническое исследование, в которое вошли пациенты, перенесшие медикаментозную терапию пиявками после пластической хирургии и лечения пиявками. месячный период анализа.В этом исследовании у 11% из них были послеоперационные инфекции из-за неадекватной или отсутствия антибиотикопрофилактики. Исследователи также провели микробиологический анализ образцов воды из аквариума и раздавленных пиявок и сообщили, что Aeromonas spp. были наиболее часто выделяемыми микроорганизмами, и тестирование на чувствительность к противомикробным препаратам показало, что все они были устойчивы к амоксициллину/клавулановой кислоте (коамоксиклаву) и в основном к цефалоспоринам второго поколения. Они были чувствительны к цефалоспоринам третьего поколения, аминозидам, сульфаметоксазолу/триметоприму (SXT) и фторхинолонам (Verriere et al., 2016 ▶).

Еще одно ретроспективное когортное исследование, проведенное Kruer в больнице Джона Хопкинса, включало всех взрослых пациентов, получавших терапию медицинскими пиявками в течение 38-месячного периода анализа. Согласно их отчету, 91,5% из них получали противомикробную профилактику, такую ​​как ципрофлоксацин, триметоприм-сульфаметоксазол, пиперациллин-тазобактам и цефтриаксон. Кроме того, у 11,9% всех пациентов была инфекция в области хирургического вмешательства, и микробиологический анализ показал, что выделенные организмы представляли собой Aeromonas spp., Enterococcus spp. , Proteus Vulgaris , Morganella morganii , Corynebacterium spp. и Candida parapsilosis . Исследователи предположили, что сульфаметоксазол/триметоприм (SXT) и ципрофлоксацин могут быть эффективными антибиотиками для предотвращения инфекций, связанных с пиявками (Kruer et al., 2015 ▶).

Аллергия

Восемь сообщений о клинических случаях (Кукова и др., 2010 ▶; Карадаг и др., 2011 ▶; Пьетшак и др., 2012 ▶; Хелифа и др.., 2013 ▶; Альтамура и др., 2014 ▶; Раси и др., 2014 ▶; Бжезинский и др., 2015 ▶; Gülyesil et al., 2017 ▶) были опубликованы в этой области, и только в одном случае пиявки использовались повторно. Наиболее распространенной реакцией была эритема, отек и припухлость с черным струпом в центре в месте укуса, а у пациентов возникали некоторые реакции, такие как кожная псевдолимфома и реакция гиперчувствительности IV типа. В большинстве случаев лечили пероральными антигистаминными препаратами и местными кортикостероидами. Гипотеза, обсуждаемая авторами, заключалась в том, что реакция и аллергия связаны с веществом в слюне пиявки, но не было найдено ни доказательств, ни методов предотвращения.

Длительное кровотечение

Четыре клинических случая (Ikizceli et al., 2005 ▶; Zengin et al., 2012 ▶; Dogan et al., 2016 ▶; Güven, 2016 ▶) были опубликованы в области кровотечения пиявок и антикоагулянтных эффектов. Длительное кровотечение определяется в этих статьях как кровотечение, продолжающееся более 2 часов, несмотря на сдавливание места укуса, которое может вызвать тяжелую анемию и геморрагический шок. Чтобы остановить это, некоторые решили наложить первичный шов на места укусов пиявок (Ikizceli et al., 2005 ▶; Dogan et al., 2016 ▶), а некоторые использовали транексамовую кислоту (ТХА) вместо свежезамороженной плазмы (СЗП) (Güven, 2016 ▶).

Миграция

Одним из осложнений лечения пиявками является нежелательная миграция пиявок на места; в связи с этим были опубликованы три статьи о клинических случаях (Granzow et al., 2004 ▶; Conroy et al., 2006 ▶; Bank et al., 2008 ▶). Исследователи использовали свой творческий потенциал для решения проблемы. Двое из них порекомендовали фиксировать пиявки швом к тому месту или на повязке, где нам нужно провести лечение пиявками.Другой также использовал пластиковый стаканчик с обрезанным концом и фиксировал его на месте, препятствующем миграции пиявок. В некоторых других статьях упоминалось о прекращении миграции пиявок, но они не использовали это для пациента, например наложение ксеропены, гипертонического раствора и парафина вокруг выбранного места или пластикового покрытия на другие места (Chua S., 2015 ▶; Tan et al. ., 2004 ▶; Гейсхаузер и др., 2009 ▶; Чуа и др., 2015 ▶).

Другие осложнения

Некоторые осложнения встречались редко, но ими нельзя пренебрегать.В этой области были опубликованы два клинических случая. Случай заключался в том, что пиявка вонзалась в укус другой пиявки, вызванный предшествующей терапией пиявками, что учит нас не использовать пиявку на необработанной ране (Flurry et al., 2011 ▶). Другим был менингит, вызванный A. veronii biovar sobria , что подчеркивало важность использования антибиотиков или обработанных пиявок для предотвращения инфекции (Ouderkirk et al., 2004 ▶). Оба этих случая были раскрыты. Но в одном случае возникла тромботическая микроангиопатия, приведшая к острой почечной недостаточности.Мы отправили авторам электронное письмо, но ответа не получили (Etemadi et al., 2008 ▶).

Обсуждение

Лечение пиявками известно и уже используется во всем мире, и есть многочисленные исследования, подчеркивающие благотворное влияние этого маленького существа в различных условиях (Abdualkader et al., 2013 ▶; Barzegar et al., 2015 ▶; Wollina et al. ., 2016 ▶; Ahirrao et al., 2017 ▶; Ghods et al., 2019 ▶). Судя по нашему поиску, статья, в которой указаны все возможные осложнения лечения пиявками, встречается редко.Это исследование было направлено на изучение и сбор зарегистрированных осложнений лечения пиявками.

Наше исследование показало, что наиболее частым осложнением лечения пиявками является бактериальная инфекция и (51%). Aeromonas spp. , особенно A. hydrophila , является наиболее распространенным микроорганизмом, выделенным из места укуса пиявки, который представляет собой симбиотическую грамотрицательную бактерию в их кишечнике. Инфекция неизбежна без профилактического применения антибиотиков, но представители рода Aeromonas известны своей устойчивостью к β-лактамным антибиотикам, связанной с продукцией различных β-лактамаз.Они активны в отношении цефалоспоринов, пенициллинов и карбапенемов первого поколения (Rossolini et al., 1996 ▶; Parker and Shaw, 2011 ▶). Мы обнаружили, что ципрофлоксацин, сульфаметоксазол/триметоприм (SXT) и цефалоспорины второго и третьего поколения играют эффективную роль в качестве противомикробной профилактики, которая подтвердила предыдущие исследования (Whitaker et al., 2009 ▶; Sivachandran et al., 2013 ▶; Herlin et al. ., 2017 ▶). В некоторых сообщениях также наблюдались устойчивые инфекции Aeromonas после лечения пиявками (Giltner et al., 2013 ▶; Патель и др., 2013 ▶; Ван Альфен и др., 2014 ▶; Марден и др., 2016 ▶).

Наше исследование подтверждает важность выбора подходящей антибиотикопрофилактики, предотвращения дальнейшего развития лекарственной устойчивости и охвата всех устойчивых штаммов Aeromonas spp. Перед использованием рекомендуется культивировать содержимое кишечника местных пиявок и их обычную воду из аквариума и проверять на чувствительность к антибиотикам (Bibbo et al., 2013 ▶; Van Alphen et al., 2014 ▶; Verriere et al., 2016 ▶). Использование двойной терапии вместо монотерапии антибиотиками с профилактической целью помогает остановить развитие инфекции после пиявки (Giltner et al., 2013 ▶; Patel et al., 2013 ▶). Обработанные антибиотиками пиявки также помогают избавиться от кишечных бактерий пиявки. В статье предлагалось использовать пиявки, обработанные ципрофлоксацином, вместо того, чтобы давать пациентам антибиотики. 20 мкг/мл ципрофлоксацина или 50 мкг/мл цефотаксима добавляют к 1,5 мл дефибринированной овечьей крови для кормления пиявок, а 20 мкг/л раствора ципрофлоксацина или 50 мкг/л цефотаксима добавляют в емкость с водой для хранения пиявок.Они показали, что через две недели все культуры от пиявок были свободны от колоний, а еще через две недели в некоторых культурах была обнаружена только 1 колония (среднее количество колоний на каждой пиявке 11,44±33,6), а также резервуар для воды для хранения пиявки, очищенные от кишечных бактерий пиявок (Litwinowicz and Blaszkowska, 2014 ▶).

Мы предположили, что аллергия является редким осложнением, но мы обнаружили, что это наиболее регистрируемое осложнение (21%) после инфекции. Y-образный укус пиявок в норме вызывает легкий зуд, но он не должен продолжаться часами или днями.В большинстве случаев аллергические реакции были зарегистрированы после более чем однократной пиявки, самолечения пиявками или повторного использования пиявок. Возможные аллергены точно не идентифицированы. Есть обязательные пункты. Пиявку следует использовать один раз, а использованную пиявку следует вернуть в полностью отделенный бассейн или убить путем замораживания или погружения в спирт. С мертвой пиявкой следует обращаться как с опасными отходами (Abdualkader et al., 2013 ▶; Mumcuoglu, 2014 ▶; Jha et al., 2015 ▶; Wollina et al., 2016 ▶). По этим пунктам мы не нашли ни одного сообщения о том, где пиявки передавали болезни. Есть несколько видов пиявок, используемых в качестве «лечебных пиявок». Лекарственные пиявки относятся к роду Hirudo . Неквалифицированная терапия нелекарственными и неправильными пиявками может вызвать более тяжелые аллергические состояния. Важно учитывать предыдущий контакт пациента с пиявками и возможные аллергические реакции на пиявки и активные вещества их слюны, такие как гирудин, гиалуронидаза, дестабилаза и т. д.Виды пиявок следует тщательно выбирать и покупать из правильных и надежных коммерческих источников.

Слюна пиявки содержит многочисленные биоактивные вещества и вводит их в ткани хозяина во время кормления (Conley and Juergens, 2018 ▶). Эти секретируемые белки реагируют против коагуляции. Они усиливают кровоток и подавляют адгезию тромбоцитов. Очень хорошо известная молекула под названием гирудин является наиболее мощным природным ингибитором тромбина. Одиночный укус пиявки может кровоточить в течение нескольких часов или дней после нарушения каскада коагуляции (Hildebrandt and Lemke, 2011 ▶; Sig et al., 2017 ▶). В результате избыточное кровотечение может вызывать беспокойство после лечения пиявками, и может потребоваться переливание крови (Mumcuoglu, 2014 ▶; Jha et al., 2015 ▶). Мы обнаружили, что продолжительное кровотечение (15%) является еще одним описанным осложнением, и в некоторых статьях также предлагались решения. Мы нашли отчет о первом использовании кровоостанавливающей повязки у 30-летнего мужчины, который столкнулся с двумя укусами пиявки после похода через джунгли в Непале. Он страдал от непрекращающегося кровотечения из правой лодыжки, несмотря на стандартный уход за раной.Рану обработали марлевой повязкой QuikClot, которая способствует быстрому свертыванию крови без повторного кровотечения (Федор, 2012 ▶). Похоже, что гемостатическая повязка является лучшей альтернативой агрессивному лечению, такому как наложение швов, системные препараты, такие как транексамовая кислота, или продукты крови, такие как СЗП. Необходимы дальнейшие исследования для сравнения доступных методов лечения для этой цели.

Пиявка может представлять больший риск для людей со склонностью к кровотечениям или анемии. Противопоказаниями к применению медицинских пиявок являются гемофилия, лейкемия, артериальная недостаточность, артериальная гипотензия, септические расстройства, кахексия, заболевания гепатобилиарной системы, ВИЧ-инфекция, больные, принимающие антикоагулянты и иммунодепрессанты, детский возраст, беременность и период лактации.Ежедневный клинический мониторинг и лабораторные анализы необходимы для пациента, проходящего лечение пиявками (Mumcuoglu, 2014 ▶; Jha et al., 2015 ▶; Wollina et al., 2016 ▶).

В иранских традиционных справочниках по медицине также упоминается, что использование немедицинских пиявок вызывает побочные эффекты, такие как отек, кровотечение, слабость тела, лихорадка, обмороки и инфицированные раны. Симптомы отека, лихорадки и инфицированных ран могут быть похожи на инфекцию. Слабость тела может относиться к тем же признакам аллергии и шока, что и лечение пиявками.Осложнение чрезмерного и длительного кровотечения упоминается и в старой медицинской литературе (Ибн-Сина, 1593 ▶).

С точки зрения традиционной иранской медицины, мохнатые пиявки с лазурными линиями, живущие в теплой или серной воде, или пиявки со сферическим телом темно-красного цвета, похожие на маленький кузнечик или крысиный хвост, являются токсичными и не должны использоваться для лечебных целях (Агхили Хорасани, 2006 ▶). Таким образом, вполне вероятно, что случаи, описанные выше в виде истории болезни, связаны с использованием нелекарственных или зараженных пиявок.Иранская традиционная медицина считает, что лучшая пиявка зеленого цвета, как цвет мунга, с двумя оранжевыми линиями на спине. Эта пиявка живет в водах, где растут мох и водоросли и где много лягушек (Ибн-Сина, 1593 ▶).

Иранская традиционная медицина заявила, что зуд является частым осложнением лечения пиявками, и рекомендовала два метода его уменьшения после высасывания крови пиявкой и когда она покидает кожу и падает в порядке. Наложение банок на место укуса может помочь отсосать больше крови или позволить крови течь некоторое время, а затем перевязать его.Также для предотвращения отека и инфицирования места укуса пиявки необходимо избегать непосредственного контакта обработанного пиявками органа с холодной водой и воздухом (Ибн-Сина, 1593 ▶). Согласно этому описанию, необходимы дальнейшие исследования, чтобы выяснить, вызывает ли несоблюдение этих мер предосторожности эти осложнения или нет.

Представляется важным знать об осложнениях неправильного или неаккуратного использования пиявок для врачей всех специальностей, особенно для всех специалистов в области дополнительной терапии, которые заинтересованы в использовании пиявок для лечения заболеваний.В этом исследовании мы столкнулись с некоторыми ограничениями, включая ограниченный доступ к данным, низкое качество и неоднородность доступной литературы, а также неопубликованные отчеты. Все рецензируемые статьи представляли собой отчеты о клинических случаях, кроме двух. Поэтому настоящее исследование не является систематическим обзором и метаанализом. Более широкие исследования с более точными доказательствами и методами в будущем могут сделать врачей более осведомленными о преимуществах и опасностях этого маленького хирурга. Это помогает пациентам пройти успешное лечение под наблюдением знающего врача с меньшим количеством осложнений или даже без них.

Лечение пиявками может быть дополнительным терапевтическим методом при правильном лечении возможных осложнений. Наиболее частым осложнением, связанным с лечением пиявками, является инфекция, которую можно легко контролировать с помощью профилактических антибиотиков.

Благодарность

Это исследование является результатом исследовательского проекта, одобренного Исследовательским институтом исламской и комплементарной медицины Иранского университета медицинских наук под кодовым номером 95-02-116-28482. Большое спасибо всем уважаемым, кто помог нам с этим исследованием.

Конфликт интересов

Авторы заявили об отсутствии конфликта интересов.

Ссылки

  • Абдуалкадер А., Гави А., Алама М., Аванг М., Мерзук А. Терапевтические применения пиявки. Индийская Дж. Фарм. 2013;75:127–137. [Бесплатная статья PMC] [PubMed] [Google Scholar]
  • Агхили Хорасани М. Краткое изложение мудрости (Холаса Аль-Хекма), 1-е изд. Тегеран: Институт истории медицины, дополнительной и исламской медицины; 2006. стр. 521–527.[Google Scholar]
  • Ахиррао Р., Джадхав Дж., Павар С. Обзор лечения пиявками. Фарма Научный Монит. 2017; 8: 228–237. [Google Scholar]
  • AI-Багдади . Китаб аль-Мухтарат фи ат-Тибб. 1-е изд. Хайдарабад, Osmania Oriental Publications, Университет Османии; 1942-1944 гг. [Google Scholar]
  • Altamura D, Calonje E, Li Liau J, Rogers M, Verdolini R. Диффузная кожная псевдолимфома вследствие лечения медицинскими пиявками. JAMA дерматол. 2014; 150:783–784. [PubMed] [Google Scholar]
  • Bank J, Zilinsky Y, Haik J, Winkler E, Goldan O.Фиксация медицинской пиявки в ненадежных местах. J реконструировать микросург. 2008; 24:067–068. [PubMed] [Google Scholar]
  • Барзегар А., Азизи А., Фариди П., Мохагегзаде А. Лечение пиявками в традиционной иранской медицине. Дополнение Med Res. 2015;22:50–53. [PubMed] [Google Scholar]
  • Баскова И., Кострюкова Е., Власова М., Харитонова О., Левицкий С., Завалова Л., Мошковский С., Лазарев В. Белки и пептиды секрета слюнных желез медицинских пиявок Hirudo verbana H medicalis и H восточный.Биохимия (Москва) 2008;73:315–320. [PubMed] [Google Scholar]
  • Bibbo C, Fritsche T, Stemper M, Hall M. Инфекция лоскута, связанная с использованием медицинских пиявок в реконструктивной хирургии: два новых устойчивых к лекарствам организма. J реконструировать микросург. 2013; 29: 457–460. [PubMed] [Google Scholar]
  • Brzezinski P, Solovan C, Chiriac A, Foia L. Отчет о клиническом случае: положительный результат применения медицинских пиявок (гирудотерапия) при венозном застое. Malawi Med J. 2015; 27:38–39. [Бесплатная статья PMC] [PubMed] [Google Scholar]
  • Chua S, Pitts M, Lemark P.Простой, гибкий и легко применимый метод построения границ для предотвращения миграции пиявок. Singapore Med J. 2015; 56:644. [Бесплатная статья PMC] [PubMed] [Google Scholar]Retracted
  • Chua S SJ, Huang D. Рандомизированное контролируемое исследование использования Xerofoam для контроля миграции пиявок в гирудотерапии у пациентов, перенесших реконструктивную операцию, требующую свободных лоскутов (YIA- NR-008) 21-я ежегодная научная конференция Сингапурской больницы общего профиля, 2015 г .; 2015. [Google Scholar]
  • Конли К., Юргенс А.Л.StatPearls [Интернет] StatPearls Publishing; 2018. Укуси, Лич. [Google Scholar]
  • Конрой Ф.Дж., Уитакер И.С., Дживан С., Маджумдер С. Предотвращение миграции во время лечения пиявками. Plast Reconstr Surg. 2006;117:2539. [PubMed] [Google Scholar]
  • Deganc M, Zdravic F. Венозный застой лоскутов лечится применением пиявок. Бр Дж Пласт Хирург. 1960; 13: 187–192. [PubMed] [Google Scholar]
  • Доган С., Озгюн М.Ю., Акман С., Калафат У.М., Оджак Т. Использование первичных швов для остановки постоянного кровотечения из-за гирудотерапии.J Emerg Med Case Rep. 2016; 7:58–60. [Google Scholar]
  • Этемади Дж., Ардалан М.Р., Мотавали Р., Таббс Р.С., Шоджа М.М. Тромботическая микроангиопатия как осложнение лечения медицинскими пиявками. South Med J. 2008; 101: 845–847. [PubMed] [Google Scholar]
  • Федор П.Я. Новое использование гемостатической повязки при укусе кровоточащей пиявки: отчет о клиническом случае и обзор литературы. Дикая природа Мед. 2012; 23:44–48. [PubMed] [Google Scholar]
  • Flurry M, Natoli NB, Mesa JM, Moyer KE.Туннелирование пиявки в реконструкцию молочной железы со свободным лоскутом. J Plast Reconstr Aestet Surg. 2011;64:1687–1688. [PubMed] [Google Scholar]
  • Гейсхаузер М., Шмидль С., Кноблох К., Фогт П.М., Гориц А. Научите пиявку кусать: еще один технический совет, как приручить Hirudo medicalis. Plast Reconstr Surg. 2009; 124:671. [PubMed] [Google Scholar]
  • Годс Р., Абди М., Пуррахими М., Дабагян Ф.Х. Показания к лечению пиявками: обзорный обзор. Традиционная мед. 2019;4:118–130. [Google Scholar]
  • Giltner CL, Bobenchik AM, Uslan DZ, Deville JG, Humphries R.Ципрофлоксацин-резистентный целлюлит Aeromonas hydrophila после лечения пиявками. Дж. Клин Микробиол. 2013;51:1324–1326. [Бесплатная статья PMC] [PubMed] [Google Scholar]
  • Гонен И., Озсахин М., Туран Х., Мустафа У., Целбек Г., Йилдирим М., Атаоглу С. Инфекция Acinetobacter развилась после лечения пиявками у пациента с гонартрозом: история болезни . Турок Гериатри Дерг. 2013; 16: 237–240. [Google Scholar]
  • Granzow JW, Armstrong MB, Panthaki ZJ. Простой метод борьбы с медицинскими пиявками.J реконструкция Microsurg. 2004; 20: 461–462. [PubMed] [Google Scholar]
  • Gülyesil F, Sabaner M, Duman R, Çetinkaya E, Duman R. Периорбитальный целлюлит, развившийся после применения альтернативных препаратов Hirudo Medicinelis. J Clin Exp Офтальмол. 2017;8(2):643. [Google Scholar]
  • Гювен Р. Лечение больного с геморрагическим шоком вследствие укуса пиявки транексамовой кислотой. Am J Emerg Med. 2016;34:2253.e3–2253. [PubMed] [Google Scholar]
  • Herlin C, Bertheuil N, Bekara F, Boissiere F, Sinna R, Chaput B.Лечение пиявками при сохранении лоскута: систематический обзор и практические рекомендации. Энн Чир Пласт Эстет. 2017;62:e1–e13. [PubMed] [Google Scholar]
  • Hildebrandt J-P, Lemke S. Маленький укус, большой удар — слюна и молекулы слюны в медицинской пиявке, Hirudo medicalis. Натурвиссеншафтен. 2011; 98: 995–1008. [PubMed] [Google Scholar]
  • Терапия Хайсона Дж. Пиявки: история. Дж. Хист Дент. 2005; 53: 25–27. [PubMed] [Google Scholar]
  • Ибн-Сина. Китаб аль-Канун фи ат-Тиб, аль-Китаб ас-сани.Romae, Typographia Medicea: 1593. [Google Scholar]
  • Икизчели И., Авшарогуллары Л., Сёзюэр Э., Юрумез Ю., Акдур О. Кровотечение из-за укуса медицинской пиявкой. Emerg Med J. 2005; 22:458–460. [Бесплатная статья PMC] [PubMed] [Google Scholar]
  • Джа К., Гарг А., Наранг Р., Дас С. Гирудотерапия в медицине и стоматологии. J Clin Diagn Res. 2015;9:ZE05–ZE07. [Бесплатная статья PMC] [PubMed] [Google Scholar]
  • Карадаг А.С., Калка О., Акдениз Н., Чечен И. Случай раздражающего контактного дерматита пиявкой.Кутан Окул Токсикол. 2011;30:234–235. [PubMed] [Google Scholar]
  • Хелифа Э., Кая Г., Лаффит Э. Кожные псевдолимфомы после лечения пиявками. J Дерматол. 2013;40:674–675. [PubMed] [Google Scholar]
  • Косе А., Зенгин С., Косе Б., Гюнай Н., Йилдирим С., Кылинч Х., Тогун И. Укусы пиявок: массивное кровотечение, нарушения профиля свертывания крови и тяжелая анемия. Am J Emerg Med. 2008;26:1067.e3–1067. [PubMed] [Google Scholar]
  • Kruer RM, Barton CA, Roberti G, Gilbert B, McMillian WD.Антимикробная профилактика во время терапии Hirudo medicalis: многоцентровое исследование. J реконструкция Microsurg. 2015;31:205–209. [PubMed] [Google Scholar]
  • Кукова Г., Гербер П.А., Антал А.С., Хоми Б. Аллергия «отстой»: пиявки тоже могут быть вредными. Контактный дерматит. 2010;62:124–125. [PubMed] [Google Scholar]
  • Litwinowicz A, Blaszkowska J. Предотвращение инфекционных осложнений после лечения пиявками: элиминация симбиотических видов Aeromonas из кишечника Hirudo verbana с помощью кормления антибиотиками.Сур Инфекция. 2014; 15:757–762. [Бесплатная статья PMC] [PubMed] [Google Scholar]
  • Lui C, Barkley Jr TW. Медицинская пиявка: новая жизнь древнему методу лечения. Уход. 2015;45:25–30. [PubMed] [Google Scholar]
  • Mann KH. Пиявки (Hirudinea): их строение, физиология, экология и эмбриология. Эльзевир; 2013. [Google Scholar]
  • Marden JN, McClure EA, Beka L, Graf J. Хозяева: симбионты пищеварительного тракта медицинской пиявки и их патогенный потенциал. Фронт микробиол.2016;7:1569. [Бесплатная статья PMC] [PubMed] [Google Scholar]
  • Мельхорн Х. Энциклопедия паразитологии: Том 1. AM. Гейдельберг: Springer-Verlag GmbH; 2008. [Google Scholar]
  • Mumcuoglu KY. Рекомендации по применению пиявок в реконструктивно-пластической хирургии. Комплемент на основе Evid Alternat Med. 2014:2014. [Бесплатная статья PMC] [PubMed] [Google Scholar]
  • О’Демпси Т. Пиявки — хорошие, плохие и шаткие. Педиатр Int Child Health. 2012; 32:16–20. [PubMed] [Google Scholar]
  • Ouderkirk JP, Bekhor D, Turett GS, Murali R.Аэромонадный менингит, осложняющий лечебную пиявку. Клин Инфекция Дис. 2004; 38: e36–e37. [PubMed] [Google Scholar]
  • Папаврамиду Н., Христопулу-Алетра Х. Лечебное использование пиявок в текстах древнегреческих, римских и ранневизантийских писателей. Intern Med J. 2009; 39: 624–627. [PubMed] [Google Scholar]
  • Паркер Дж.Л., Шоу Дж.Г. Клиническая микробиология и болезни Aeromonas spp. J заразить. 2011;62:109–118. [PubMed] [Google Scholar]
  • Patel KM, Svestka M, Sinkin J, Ruff Pt.Ципрофлоксацин-резистентная инфекция Aeromonas hydrophila после лечения пиявками: отчет о клиническом случае и обзор литературы. J Plast Reconstr Aestet Surg. 2013;66:e20–e22. [PubMed] [Google Scholar]
  • Pietrzak A, Kanitakis J, Tomasiewicz K, Wawrzycki B, Kozlowska-Loj J, Dybiec E, Chodorowska G. Кожные осложнения неправильного применения пиявок. Энн Агрик Энвайрон Мед. 2012;19:790–792. [PubMed] [Google Scholar]
  • Поршинский Б.С., Саха С., Гроссман М.Д., Бири II П.Р., Ставицки С.П.Клиническое применение медицинской пиявки: практический обзор. J Постград Мед. 2011;57:65–71. [PubMed] [Google Scholar]
  • Радос С. Помимо кровопускания: FDA придает пиявкам медицинский вид. Потребление FDA. 2004;38:9. [PubMed] [Google Scholar]
  • Раси А., Фагихи А., Джалали М.А., Заманян А., Гаффарпур Г. Лечение пиявками эпидермоидных кист и обзор литературы. Adv Biomed Res. 2014;3:112. [Бесплатная статья PMC] [PubMed] [Google Scholar]
  • Rossolini GM, Walsh T, Amicosante G.Металло-β-лактамазы Aeromonas: генетика, энзимология и вклад в лекарственную устойчивость. Устойчивость к микробам. 1996; 2: 245–252. [PubMed] [Google Scholar]
  • Schnabl SM, Kunz C, Unglaub F, Polykandriotis E, Horch RE, Dragu A. Острая послеоперационная инфекция Aeromonas hydrophila после использования медицинских пиявок для лечения венозного застоя. Arch Orthop Trauma Surg. 2010; 130:1323–1328. [PubMed] [Google Scholar]
  • Сиг А.К., Гуней М., Ускюдар Гуклу А., Озмен Э. Лечебная пиявочная терапия – общая перспектива.Интегр Мед Рез. 2017;6:337–343. [Бесплатная статья PMC] [PubMed] [Google Scholar]
  • Сивачандран П., Маримуту К., Равичандран М., Арокиарадж Дж. Чувствительность к антибиотикам поверхности тела и кишечной микрофлоры двух видов водных пиявок (Hirudinaria manillensis и Hirudinaria javanica) в Малайзии. Дж. Кост Лайф Мед. 2013; 1:52–56. [Google Scholar]
  • Тан О., Атик Б., Косеоглу Б. Простой и безопасный метод установки пиявок на лоскуты: клетка для пиявок. Plast Reconstr Surg. 2004; 113:466–467.[PubMed] [Google Scholar]
  • Ван Альфен Н.А., Гонсалес А., МакКенна М.С., МакКенна Т.К., Карлсен Б.Т., Моран С.Л. Ципрофлоксацин-резистентная инфекция Aeromonas после лечения пиявками для реплантации пальцев: отчет о 2 случаях. J Hand Surg Am. 2014; 39: 499–502. [PubMed] [Google Scholar]
  • Verriere B, Sabatier B, Carbonnelle E, Prognon P, Whitaker I, Lantieri L, Hivelin M. Медицинская пиявка и инфекция Aeromonas spp. Eur J Clin Microbiol Infect Dis. 2016; 35:1001–1006. [PubMed] [Google Scholar]
  • Ван Э.В., Уоррен Д.К., Феррис В.М., Касабар Э., Нуссенбаум Б.Передающийся пиявками устойчивый к ципрофлоксацину Aeromonas hydrophila. Arch Otolaryngol Head Neck Surg. 2011; 137:190–193. [PubMed] [Google Scholar]
  • Уитакер И.С., Камья С., Аззопарди Э.А., Граф Дж., Кон М., Линививер В.К. Профилактика инфекционных осложнений после лечения пиявками: идет ли практика в ногу с текущими исследованиями? Микрохирургия. 2009; 29: 619–625. [PubMed] [Google Scholar]
  • Уитакер И.С., Рао Дж., Изади Д., Батлер П.Дж.Б. Историческая статья: Хирудо лекарственный: древнее происхождение и тенденции использования медицинских пиявок на протяжении всей истории.Br J Oral Maxillofac Surg. 2004; 42: 133–137. [PubMed] [Google Scholar]
  • Уилмер А., Слейтер К., Йип Дж., Карр Н., Грант Дж. Роль отбора проб воды у пиявок при выборе профилактических антибиотиков при медицинской пиявочной терапии. Микрохирургия. 2013; 33:301–304. [PubMed] [Google Scholar]
  • Wollina U, Heinig B, Nowak A. Лечение медицинскими пиявками (гирудотерапия) Наш дерматол онлайн. 2016;7:91–96. [Google Scholar]
  • Зенгин С., Ярбиль П., Килич Х., Ал Б. Длительное кровотечение из-за укуса медицинской пиявки: еще один метод лечения, первичный шов.BMJ Case Rep. 2012; 2012:bcr0220125759. [Бесплатная статья PMC] [PubMed] [Google Scholar]

Applications and Indications in Surgery

Biochem J 1992;287 (Pt 3):943-949.

33. Ригби М., Джексон К.М., Латалло З.С.

Специфический ингибитор фактора Ха в слюне медицинской пиявки

Hirudo medicalis. 14-й международный конгресс

биохимии; Тезисы ФР 037, с. 53, 10 июля —

15, 1998; Прага.

34.Ригби М., Леви Х., Элдор А., Ираки Ф., Тейтельбаум М.,

Ореви М. и др.  слюна медицинской пиявки

Hirudo medicalis—II. Ингибирование

агрегации тромбоцитов и активности лейкоцитов и изучение предполагаемых анестезирующих эффектов. Comp Biochem

Physiol C 1987; 88:95-98.

35. Кумар С.А., Пракаш С.О.

Обезболивающее и противовоспалительное действие пиявок при лечении артрита.(Международный исследовательский журнал

Фармации) IRJP 2011; 2:172-174.

36. Reverter D, Vendrell J, Canals F, Horstmann J,

Avilés FX, Fritz H, et al. Ингибитор карбоксипептидазы

из медицинской пиявки Hirudo medicalis. Изоляция, анализ последовательности, клонирование кДНК, рекомбинантная экспрессия

и характеристика. J Biol Chem

1998; 273:32927-32933.

37. Reverter D, Fernández-Catalán C, Baumgartner

R, Pfänder R, Huber R, Bode W, et al.Структура

нового ингибитора карбоксипептидазы пиявки определяется в свободном виде в растворе и в комплексе с карбоксипептидазой А2 человека

. Nat Struct Biol 2000;7:322-

328.

38. Михальсен А., Рот М., Добос Г. Медицинская пиявка

Терапия. ieme, Stugart, Germany, 2007.

39. Zaidi SM, Jameel SS, Zaman F, Jilani S, Sultana A,

Khan SA. Систематический обзор лечебного

значения кровоядных пиявок.Altern Med

Rev 2011; 16:59-65.

40. Mumcuoglu KY, Pidhorz C, Cohen R, Ofek A, Lip-

тонн HA: использование медицинской пиявки Hirudo

medicalis в реконструктивно-пластической хирургии.

Интернет-журнал пластической хирургии 2007;4(2).

41. Чепеха Д.Б., Нуссенбаум Б., Брэдфорд Ч.Р.,

Текнос Т.Н. Лечение пиявками у пациентов с сур-

гически не поддающейся спасению венозной обструкцией после ре-

переноса васкуляризированной свободной ткани.Arch Otolaryngol

Head Neck Surg 2002;128:960-965.

42. Абдельгабар А.М., Бхоумик Б.К. возврат пиявки

. Int J Clin Pract 2003; 57:103-105.

43. де Шален ТМ. Изучение использования медицинской пиявки

: клинический анализ пользы и риска. J Reconstr Mi-

crosurg 1996;12:165-172.

44. Конфорти М.Л., Коннор Н.П., Хейси Д.М., Хартиг Г.К.

Оценка рабочих характеристик медицинской пиявки

(Hirudo medicalis) для лечения венозного застоя

.Plast Reconstr Surg

2002;109:228-235.

45. Дерганц М., Здравич Ф. Венозный застой в клапанах

лечится применением пиявок. BrJ Plast Surg

1960;13:187-192.

46. Кноблох К., Гориц А., Буш К., Шпис М., Фогт

PM. [Применение пиявок Hirudo medicalis в

пластической и реконструктивной микрохирургии — обзор литературы

]. [Статья на немецком языке]. Хандчир Мик-

рочир Пласт Чир 2007;39:103-107.

47. Мутимер К.Л., Банис Дж.К., Аптон Дж. Микрохирургическое восстановление суставов полностью ампутированных ушей. Plast Recon-

str Surg 1987;79:535-541.

48. Кремер Б.А., Корбер К.Е., Акино Т.И., Энглман А.

Применение пиявок в пластической и реконструктивной хирургии:

обзор. J Reconstr Microsurg 1988;4:381-386.

49. Riede F, Koenen W, Goerdt S, Ehmke H, Faulhaber

J. Медицинские пиявки для лечения

венозных застойных явлений и гематом после пластической реконструктивной хирургии.J Dtsch Dermatol Ges 2010;8:881-

888.

50. Cherniack EP. Жуки как лекарства, часть вторая: глисты,

пиявки, скорпионы, улитки, клещи, многоножки и пауки

. Altern Med Rev 2011; 16:50-58.

51. Ascenzi P, Amiconi G, Bode W, Bolognesi M, Co-

lea M, Menegai E. Ингибиторы протеиназы из

европейской медицинской пиявки Hirudo medicalis:

структурные, функциональные и биомедицинские аспекты . Mol

Aspects Med 1995;16:215-313.

52. Шах С. Почему пиявки влияют на мой

медицинский осмотр. Ланцет 1998;352:2014-2015.

53. Orevi M, Rigbi M, Hy-Am E, Matzner Y, Eldor A.

Мощный ингибитор фактора активации тромбоцитов из

слюны пиявки Hirudo medicalis. Prosta-

гландины 1992;43:483-495.

54. Ахмад Т., Анвар М. Клиническое значение терапии Пиявкой

. Индийский журнал традиционных знаний

2009; 8:443-445.

55. Гилева О.С. Современная гирудотерапия: экспериментальная

179

Гирудотерапия

, № 10

обнаружен в выделениях пиявок, но, к сожалению, данные

ограничены по этому вопросу. Кроме того, теромацин, теромизин

и пептид B были выделены в виде антимикробных пептидов

.Были опубликованы исследования in vitro, свидетельствующие о противораковых эффектах экстрактов слюны пиявок. Поскольку коагуляция

связана с метастазированием и прогрессированием опухоли, блокирование каскада

может быть противоопухолевым действием. Гирудин изучался

по этой теме, и сообщалось об очень многообещающих результатах о

метастазах, особенно при мезотелиоме.

Кроме того, было заявлено, что другие производные антикоагулянта

имеют аналогичный эффект, но также снижают рост клеток и

ангиогенез опухоли.Было обнаружено, что экстракты

провоцируют апоптоз и дифференцировку клеток и вызывают

остановку клеточного цикла. Основными механизмами действия, по-видимому, являются

, зависящие от подавления экспрессии онгенных генов, и

, повышающие регуляцию апоптотических цепей. С другой стороны, также сообщалось об эффектах

против дегенерации клеток. Было обнаружено, что Eglin C,

бделластазин, дестабилаза, бделлины и гирудин

оказывают сильное защитное и/или положительное стимулирующее действие,

особенно на нейроны, но эти исследования находятся только на

предварительной фазе.

Заключение

Пиявки имеют стройное листовидное тело, что

отличает их от других видов вернуться к типу

Annelida, у них в области клитора есть мужские и

женские половые отверстия выделяют кокон яиц, они

выделяют Nephridia , они дышат через стенку тела

, их кровь красная, потому что гемоглобин

растворен в крови. Это животные-гермафродиты, тип оплодотворения

, называемый Х-оплодотворением.Имеют челюсти

и три лопасти, расположенные под углом друг к другу,

рот, расположенный вентрально в переднем конце тела

затем глотку, пищевод, зоб, желудок, наконец

кишечник, а у кровососущих видов пиявок при хранении урожая

почта крови производила антикоагулянт, который

предотвращает свертывание крови. У хищных пиявок вместо челюстей

есть хоботок и некоторые из пиявок питаются мелкими

беспозвоночными, они синтезируют необходимые питательные вещества

переваривая пищу, они в обязательном симбиозе

с бактериями вырабатывают много витаминов.

Одобрение по этике: Комитет по этике исследований в

научное исследование с этического одобрения как

министерств охраны окружающей среды, здоровья и высшего образования, так и

министерств научных исследований в Ираке

Конфликт интересов: Авторы заявляют, что они

не имеют конфликт интересов.

Источник финансирования: Самофинансирование

REFRENCSES

Bush AO, Fernández JC, Esch GW, Seed JR. Паразитизм:

Разнообразие и экология паразитов животных.

Издательство Кембриджского университета; 22 марта 2001 г.

Дэвис А., Аппель Т. Инструменты для кровопускания в Национальном музее истории и технологий

.

Смитсоновский институт истории и технологии.

1979.

Мори Р.Н., Минделл Д., Блум Д.А. Пиявка и

врач: биология, этимология и медицинская

практика с Hirudinea medicalis. Мир

журнал хирургии. 2000 г., 1 июля; 24 (7): 878–83.

Япичи А.К., Дурмус М., Танюксель М., Тюрккан С.,

Тузун Х.Ю., Арсенишвили А. Хирудо лекарственный—

исторические и биологические предпосылки и их роль

в микрохирургии. Обзорная статья. Ручной микросург.

2017; 6:34-8.

Заиди С.М., Джамиль С.С., Заман Ф., Джилани С., Султана А.,

Хан С.А. Систематический обзор

лечебного значения кровоядных пиявок.

Альтерн мед. ред.2011 1 марта; 16 (1): 59-65.

Ахмед Т., Анвар М. Клиническое значение терапии пиявками

.[1]. Индийский журнал. 2009.

Картер К.С. Пиявки в британской

медицине девятнадцатого века. Журнал Королевского общества медицины

. 2001 Январь; 94 (1): 38-42.

Уитлок М.Р., О’Хара П.М., Сандерс Р., Морроу Северная Каролина.

Медицинская пиявка и ее использование в пластической хирургии:

возможная причина инфекции. Британский журнал пластической хирургии

.1983 1 апреля; 36 (2): 240-4.

Нури М., Карими-Яранди К., Этезади Ф.,

Амирджамшиди А. Лечение пиявками для облегчения боли:

Рациональность за понятием. Хирургическая неврология

международный. 2012;3.

О Т.С., Халлок Г., Хонг Дж.П. Пропеллер Freestyle

Лоскуты для реконструкции дефектов задней части туловища:

Простой подход к сложной проблеме. Анналы

пластической хирургии. 2012 1 января; 68 (1): 79-82.

Меджитов Р., Джейнвей С.Дж. Абстрактный.

Иммунологические обзоры. 2000 г., февраль; 173(1):89-97.

Биомедицинские препараты | Бесплатный полнотекстовый | Европейские медицинские пиявки — новые роли в современной медицине

1. Биология медицинских пиявок

Европейские медицинские пиявки рода Hirudo — кровососущие кольчатые черви. Наиболее важными видами являются H. orientalis (азиатская пиявка), H. medicalis (европейская пиявка) и H. verbana (венгерская пиявка). Все три вида являются эктопаразитами, которые живут в пресноводных прудах и медленно текущих ручьях, где они находят своих позвоночных хозяев, ощущая тепло, химические вещества или движение [1,2].Пиявки прикрепляются к поверхности тела хозяина и разрезают кожу сотнями обызвествленных зубов [3]. Затем они могут брать кровь на срок до одного часа, выделяя слюну в рану. Секретируемые белки и пептиды слюны достигают сосудистой системы хозяина через тысячи крошечных протоков клеток слюнных желез [4]. После проглатывания пиявкой кровь хозяина сжимается в зобе за счет выделения воды и солей [5,6]. Оставшаяся высоковязкая кровь содержит белки плазмы и клетки крови и может храниться в посевах до одного года [7].Считается, что морфология концентрированных эритроцитов остается стабильной при хранении [8], что означает ингибирование протеолиза, индуцированного высвобождаемыми из лейкоцитов протеазами хозяина [5]. Кроме того, пиявки неизбежно вступают в контакт (и, таким образом, проглатывают) некоторые бактерии на поверхности кожи хозяина во время кормления, но хранящаяся кровь не переполняется патогенами. Действительно, основные симбиотические основные бактерии, такие как Aeromonas veronii, A. hydrophila и рикинеллоподобные виды, выживают в пищеварительном тракте пиявки [9,10,11].Предполагается, что такие симбионты, как A. veronii, поддерживают переваривание крови хозяина, облегчая гемолиз [10,12,13], а также могут способствовать подавлению роста других бактерий в зобе пиявки [9]. У большинства паразитических пиявок кровь хозяина запасается в зобе, а переваривание пищи и всасывание питательных веществ происходит преимущественно в кишечнике. Можно предположить, что ферменты медицинской пиявки (например, эндопептидазы, аминопептидазы, фосфатазы) способствуют процессам пищеварения [14].

2.Фармакологический потенциал медицинских пиявок

Медицинские пиявки использовались египетскими, индийскими, греческими и арабскими врачами тысячи лет назад. Основным применением было кровопускание, но пиявки также рекомендовали для лечения системных заболеваний, таких как воспаление, кожные заболевания, ревматические боли или проблемы с репродуктивной системой [15]. Как сторонник терапии пиявками, греческий врач Гален Пергамский (130–201 гг. Н.э.) описал пиявки как эффективное средство для лечения многих заболеваний.Позже, в Средние века, лечение пиявками было популярно, потому что оно было менее болезненным, чем обычные методы лечения, и его рекомендовали даже при заболеваниях нервной системы и глаз. Использование пиявок сократилось в эпоху современной медицины, но интерес к медицине возродился, когда Джон Берри Хейкрафт в 1884 году обнаружил в слюне пиявки один из сильнейших природных антикоагулянтов — гирудин, который в 1950-х годах описал Фриц Марквардт [15]. В 1960-х годах врачи заново открыли фармакологический потенциал слюны пиявки.Например, медицинские пиявки использовались для профилактики сосудистых нарушений после реконструктивных операций [16], для восстановления нарушенных сетей кровеносных сосудов и в качестве альтернативы противовоспалительным препаратам. Большинство сообщений о лечении медицинскими пиявками сосредоточено на косметической и реконструктивной хирургии. Тем не менее, лечение пиявками было протестировано при многих состояниях за последние два десятилетия, включая мигрень [17,18], остеоартрит коленного сустава [19,20,21,22,23,24,25], сердечно-сосудистые заболевания [26,27,28]. ), кожные заболевания [29], диабетические язвы стопы [30,31,32], приапизм [33], макроглоссия [34,35], рак [36,37] и кожные раны [38,39].Для большинства этих состояний были опубликованы только отдельные тематические исследования [39], но мигрень и остеоартрит коленного сустава являются исключениями. Мигрень является первичным неврологическим расстройством и у большинства пациентов пожизненным заболеванием, сопровождающимся головными болями, рвотой, тошнотой, светобоязнью и фонофобией. В серии случаев семи пациентов, которые не реагировали на обычные лекарства, было показано, что постаурикулярная терапия пиявками значительно снижает частоту мигренозных головных болей, что авторы связывают с наличием в пиявке сильнодействующих анестезирующих, противовоспалительных и сосудорасширяющих веществ. слюна [17].Остеоартрит — это заболевание суставов, которое распространено у пожилых людей (старше 65 лет) и вызывает боль после активности и скованность после отдыха [40]. Метаанализ семи статей, опубликованных в период с 2000 по 2017 год, показал, что лечение пиявками может улучшить симптомы остеоартрита коленного сустава и уменьшить боль [39]. Важно отметить, что пиявки, помещенные на колено, часто обеспечивали сравнимое или даже лучшее облегчение боли, чем обычные лекарства, и пациенты сообщали, что подвижность восстанавливалась, а преимущества лечения пиявками иногда все еще были очевидны через шесть месяцев [41].Хотя преимущества терапии пиявками были очевидны из этих исследований, соединения слюны, ответственные за эти эффекты, и лежащие в их основе молекулярные механизмы не были подробно охарактеризованы.

3. Белки слюны: натуральные препараты медицинских пиявок

Антагонистические взаимодействия между паразитами и их хозяевами привели к эволюционной «гонке вооружений», в ходе которой эктопаразиты приспособились питаться жидкостями тела хозяина [42,43]. Чтобы проглотить и переварить кровь хозяина, медицинские пиявки синтезируют более 100 слюнных белков и пептидов [44,45,46,47].Молекулы секретируются во время кормления и нацелены на физиологические пути, участвующие в защите хозяина, работая как анальгетики (кининазы), антикоагулянты (гирудин, калин, саратин и апираза), противовоспалительные средства (эглины, бделлины и ингибиторы триптазы), белки, разрушающие клеточный матрикс. (гиалуронидаза) или противомикробные препараты [7,45,47,48,49,50,51,52,53,54,55,56,57,58]. Данные транскриптома слюны Macrobdella decora [59] и Hirudo nipponia [60], а также библиотеки маркеров экспрессированных последовательностей, сконструированные из слюнных желез H.verbana, M. decora и Aliolimnatis fenestrata [61], предоставили информацию о спектральных белках, обнаруженных в слюне пиявки. Для европейских медицинских пиявок комбинированный транскриптомный анализ клеток слюнных желез и протеомный анализ слюны H. medicalis, H. orientalis и H. verbana выявил гораздо более широкий репертуар компонентов, чем было известно ранее [44], что указывает на то, что только ~15% белков слюны у этих видов были идентифицированы и охарактеризованы (таблица 1). Анализ слюнных транскриптомов H.medicalis, H. orientalis и H. verbana выявили наличие транскриптов, представляющих 189, 86 и 344 белка слюны соответственно [44]. Было обнаружено, что три близкородственных вида имеют 39 общих ортологических кластеров, тогда как 50 ортологических кластеров были общими для любых двух из трех видов [44]. Многие из этих недавно открытых белков слюны пиявок либо связаны с питанием кровью, либо связаны с белками, обнаруженными в ядах животных [44]. Белки слюны, предсказанные на основании транскриптомных и протеомных данных, могут быть отнесены к различным функциональным группам на основании их структурного сходства, включая металлопротеазы, представляющие семейства М12, М13 и М28, гиалуронидазы, апиразы, аденозиндезаминазы, антистазины, секреторные белки, богатые цистеином (CRISP). , эглины, цистатины, доменные белки PAN/яблока, α2-макроглобулин, рецепторы липопротеинов низкой плотности, лектины R-типа и белки слюны, содержащие домен фактора фон Виллебранда типа А (vWA).Эти белки, вероятно, участвуют в регуляции свертывания крови, временной корректировке артериального давления, регуляции воспаления, подавлении микробного роста или переваривании крови в зобе [44]. Интересно, что дифференциальный анализ экспрессии генов показал, что гены, кодирующие белки слюны, такие как гирудин, эглины, саратины и дестабилазы, также экспрессировались в других тканях пиявки, показывая, что по крайней мере некоторые «белки слюны» пиявки не ограничены слюной и могут иметь дополнительные физиологические функции [44].Некоторые специфичные для пиявок антикоагулянты также были обнаружены у пиявок, не питающихся кровью, таких как Whitmania pigra [62]. Интересно, что эти антикоагулянты активировались после кормления [62] так же, как и у пиявок, питающихся кровью [63]. Идентифицированные семейства металлопротеаз в слюне пиявки включают астацины (М12), неприлизины (М13) и аминопептидазу S (М28). Члены этих семейств металлопротеаз были также определены в секрете слюны лекарственных личинок Lucilia sericata [64].Астациноподобные металлопротеазы представляют собой эндопептидазы, первоначально обнаруженные у раков Astacus astacus, которые способствуют пищеварению. В яде бурых пауков Loxosceles были обнаружены гомологи, причем рекомбинантная форма способна вызывать морфологические изменения, такие как потеря адгезии клеток мышечной аорты in vitro и гидролизованные очищенные фибриноген и фибронектин [65]. Неприлизин млекопитающих участвует в репродукции и модуляции активности нейронов и артериального давления [66].Интересно, что транскриптомный анализ слюнных желез лекарственных личинок L. sericata выявил диверсификацию протеолитических ферментов [64], тогда как самые разнообразные группы молекул в слюне пиявок представляют собой ингибиторы протеаз.

Таблица 1. Белки слюны пиявки H. medicalis, H. verbana или H. orientalis. Изоформы отдельных белков не показаны.

Таблица 1. Белки слюны пиявок H. medicinalis, H.вербана или H. восточная. Изоформы отдельных белков не показаны.

слюнных Protein Механизм действия Биологическое значение справочном
Hirustasin
(Mass: 5,866 кДа) ингибитор калликреина
ткани и ингибитор трипсина, химотрипсина и нейтрофилы катепсина G Анти -INLAMPAMMATY [55]
APYRASE
(масса: 45 кДа)
расщепление аденозин 5′-дифосфат ингибитор агрегации тромбоцитов [67]
BDellin B-3
: 6.141 KDA)
Ингибитор плазмина, трипсина и сперматозоидов Аккозин АТМОТРЭНТАЦИЯ [68] [68] [68]
CALIN
(масса: 65 кДа)
Предотвращает связывание фактора Фон Виллебранда к коллагену ингибитора Агрегация тромбоцитов [50,69]
Коллагеназа
(масса: 50 кДа)
Расщепление коллагена Коллагеновое пищеварение [70] [70]
destabilase
(масса: 12.6-12.9 KDA) 9-12.9 KDA)
Расщепление сгустка фибрина, расщепление пептидогликанов в бактериальных стенах антикоагулянт / антимикробная [71,72,73]
EGLIN C
(масса: 8,1 кДа)
Neuturephil Elastase ингибитор , Cathepsin G ингибитор противовоспалительный [74,75]
Hirudin
(масса: 7,1 кДа)
Тромбин ингибитор антикоагулянт [48,76]
Гирудинскоподобные факторы
(Масса: 4.27–6,67; ISOFORMS HLF1-HLF3)
Неизвестный для трех европейских видов [77,78]
гиалуронидаза
(масса: 27,5 кДа)
Расщепление гиалуроновой кислоты Внеклеточный матричный пищеварение [79]
Pechneeh-производный триптазный ингибитор
(масса: 4,7 кДа)
мачты клетки.2 кДа) карбоксипептидазы В ингибитор мутноватый [80]
Саратин
(Масс-спектр: 12 кДа)
ингибирует связывание фактора фон Виллебранда с коллагеном Ингибитор агрегации тромбоцитов [51, 81]
Ягин
(Масса: 15,4 кДа)
Фактор XA Ингибитор XA Антикоагулянт [82] [82]
Многие пияльные белки, в том числе антистасинские ингибиторы, хирудин, хирудиновые факторы и куниц ингибиторы протеиназы -типа демонстрируют значительное разнообразие [44,78], возможно, отражая эволюцию, ориентированную на мишень [83], которой способствуют события дупликации генов [84].События дупликации генов, вероятно, способствовали приобретению двух основных семейств белков слюны — ингибиторов свертывания крови слюны и ингибиторов агрегации тромбоцитов — у кровососущих клещей [85]. Рекрутирование генов также поддерживает диверсификацию изоформ белков слюны, основываясь на гипотезе, что регуляторная эволюция является фундаментальной для адаптивной эволюции [86]. Соответственно, по крайней мере некоторые белки яда и слюны были рекрутированы из других тканей, где они выполняли определенные биологические функции.Набор альтернативных вариантов сплайсинга и эволюция 5′-экзона могут объяснить адаптацию летучих мышей-вампиров к гематофагии и могут быть более распространенным источником геномной сложности у кровоядных животных, чем эволюция новых генов [86]. Это привело к идентификации новых и конвергентно рекрутируемых белков яда у кровососущих пиявок и летучих мышей-вампиров [86]. Эволюционные модели, объясняющие адаптацию белков слюны пиявок к конкретным хозяевам, до сих пор являются предметом споров. Текущие проблемы включают отсутствие хорошо охарактеризованных белков с точки зрения способа действия и мишени.Изопротеины в слюне пиявки могут иметь более одной мишени в хозяине, или их активность может зависеть от pH, температуры, времени года или фазы развития. Следует учитывать как избыточность белков слюны (множество белков, направленных против одной и той же мишени), так и потенциальные кооперативные взаимодействия между несколькими белками слюны. Взаимодействие нескольких слюнных белков можно наблюдать у кровососущих членистоногих Rhodnius prolixus, которые продуцируют четыре изоформы нитрофорина слюны.Все они являются вазодилататорами (работающими совместно) и супрессорами гистамина, но один является сильным ингибитором фактора IXa, другой — более слабым антикоагулянтом, а оставшиеся две изоформы, по-видимому, утратили свою антикоагулянтную активность [87].

4. Антистазины как репрезентативное семейство белков слюны пиявки

Несколько антистазинов были идентифицированы у видов пиявок, в том числе (1) антистазин-прототип, выделенный из слюнных желез мексиканской пиявки, Haementeria Officers; (2) гирустазин и бделластазин, идентифицированные у H.лекарственные; (3) ghilanten, выявленный у Haementeria ghilianii; (4) пигуамерин, идентифицированный у H. nipponia; и (5) гуамерин I (H. nipponia) и гуамерин II, выделенные из Whitmania edentula [88,89,90,91,92,93]. Все эти богатые цистеином белки содержат несколько повторяющихся мотивов, каждый из которых состоит из шести консервативных остатков цистеина и двух консервативных остатков глицина [94], но сильно различаются по структуре и функциям [89]. Прототипом антистазина является полипептид из 119 аминокислот. который включает 10 дисульфидных мостиков и двойной внутренний повтор, предполагая, что он возник после события дупликации гена [54,95].Этот белок является мощным конкурентным ингибитором фактора свертывания Ха, сериновой протеазы, которая расщепляет антистазин в положении Arg 34 с образованием фрагмента массой 10 кДа [91]. Таким образом, присутствие антистазина поддерживает кровь хозяина в жидком состоянии [54]. Медицинское применение антистазина не ограничивается его ролью в качестве антикоагулянта, поскольку было также показано, что его способность ингибировать сериновые протеазы предотвращает распространение опухолей, вероятно, за счет снижения вероятности метастазирования [96].Дополнительные белки антистазинового типа, которые, как известно, ингибируют фактор Ха, включают гилантен [93] и ягин [82]. Напротив, гуамерин I [97] и гуамерин II [88] являются специфическими ингибиторами эластаз нейтрофилов и поджелудочной железы, тогда как гирустазин является мощным ингибитором трипсина, химотрипсина, катепсина G и тканевого калликреина [55]. В отличие от гирустазина, пигуамерин не ингибирует тканевой калликреин, но ингибирует плазменный калликреин и трипсин [89]. Остаток P1 реактивного сайта определяет специфичность ингибиторов сериновых протеаз [98].Если это лизин или аргинин, ингибитор нацелен на трипсин и трипсиноподобные ферменты. Однако если это тирозин, фенилаланин, лейцин или метионин, то более вероятными мишенями являются химотрипсин или химотрипсиноподобные ферменты [99]. Если это аланин или серин, ингибитор будет иметь тенденцию воздействовать на эластазоподобные ферменты [98,99]. Это было подтверждено для ингибитора сериновой протеазы, содержащего домены антистазина и сывороточного кислого белка (WAP) (StmAW-SPI), выделенного из тропического морского огурца Stichopus monotuberculatus [98].

5. Белки слюны пиявки как лекарственные препараты

Натуральные продукты из растений и животных представляют собой удивительно разнообразный источник активных соединений для разработки лекарств и клинических испытаний [100] и могут использоваться в качестве инструментов для фармакологических или биотехнологических приложений [101]. Медицинские пиявки перспективны для лечения заболеваний, связанных с болью, воспалением или заболеваниями крови. Однако использование живых животных сопряжено с риском заражения. Пиявки переносят бактерии в пищеварительном тракте [10,11] и на коже, и эти бактерии могут заразить пациентов, проходящих лечение.Использование антибиотикопрофилактики для минимизации послеоперационных инфекций, переносимых пиявками, лишь частично решает эту проблему и способствует появлению полирезистентных возбудителей в клинических условиях [102]. Одной из стратегий полного избегания контакта с пиявками является извлечение и очистка отдельных компонентов слюны и их производство в виде рекомбинантных белков для введения с использованием стерильного оборудования. Связанные наборы протеомных и транскриптомных данных необходимы для изучения биоактивных белков и пептидов, полученных из природных источников животного происхождения, таких как слюна пиявки [101].Такой комбинированный анализ (например, RNA-Seq + MALDI-TOF-MS или NanoLC-ESI-MS) позволяет исследователям сравнивать транскрипты слюнных желез, содержащие сигнальные пептиды, с белками слюны, секретируемыми в рану хозяина. Поскольку европейские медицинские пиявки имеют тысячи отдельных клеток слюнных желез и механизмы секреции их слюны до сих пор неизвестны, необходимо подготовить ткани клеток слюнных желез для протеомики. Сравнительный протеомный анализ некормленных и сытых пиявок позволил исследователям разделить белки и провести различие между секреторными и несекреторными белками [63].Комбинация протеомики и транскриптомики с последующим поиском консервативных доменов позволила предсказать функциональные домены белков слюны, которые могут быть ответственны за наблюдаемые терапевтические эффекты пиявок, что привело к идентификации новых противовоспалительных, обезболивающих или прокоагулянтных ведет (рис. 1). Фармакологический потенциал белка может быть установлен только в том случае, если известна его мишень, и это лучше всего достигается путем экспрессии ведущего лекарственного средства в виде рекомбинантного белка, так что достаточные количества доступны для тестирования in vitro, в клетках, в тканевых анализах и в моделях животных.Доступны многочисленные анализы для обнаружения мишеней, связанных со свертыванием крови, болевыми путями, антимикробной активностью, цитотоксичностью и воспалением. Рекомбинантные белки пиявки могут быть экспрессированы в бактериях [77, 103], дрожжах [104, 105, 106], клетках насекомых [107] или бесклеточной системе экспрессии, или пептиды пиявки могут быть получены путем химического синтеза. Правильная укладка важна, но ее трудно контролировать, потому что белки слюны пиявки часто содержат многочисленные остатки цистеина, образующие дисульфидные связи, и эти структуры необходимо реплицировать, чтобы синтетические и рекомбинантные белки оставались стабильными и функциональными.Эглины представляют собой идентифицированное семейство белков слюны пиявок без остатков цистеина [74,75], в то время как другие описанные белки слюны содержат шесть остатков цистеина (гирудин, гирудин-подобные факторы, ингибитор триптазы, полученный из пиявки, бделлин-B3; саратин; [48,51]. ,56,57,68,76,77,81]), восемь цистеиновых остатков (ингибитор карбоксипептидазы пиявки; [80]), 10 цистеиновых остатков (гирустазин; [55]) или 14 цистеиновых остатков (дестабилаза; [71,72, 73]). Образование дисульфидных связей является одной из важнейших посттрансляционных модификаций, обеспечивающих биоактивность белка и лежащих в основе отнесения белка к данному классу или семейству [101].Правильная укладка может быть подтверждена рентгеновской кристаллографией или спектроскопией ядерного магнитного резонанса (ЯМР), но требуется большое количество белка. Напротив, предварительный структурный анализ с ограниченным количеством образцов возможен с использованием таких подходов, как диссоциация с захватом электронов (ECD) или диссоциация с переносом электронов (ETD) в сочетании с масс-спектрометрией с жидкостной хроматографией (LC-MS) с использованием масс-спектрометра с тройной квадрупольной ионной ловушкой [108]. ].

Подробная информация об ошибке IIS 10.0 — 404.11

Ошибка HTTP 404.11 — не найдено

Модуль фильтрации запросов настроен на отклонение запроса, содержащего двойную управляющую последовательность.

Наиболее вероятные причины:
  • Запрос содержал двойную escape-последовательность, а фильтрация запросов настроена на веб-сервере на отклонение двойных escape-последовательностей.
Что вы можете попробовать:
  • Проверьте параметр configuration/system.webServer/security/[email protected] в файле applicationhost.config или файл web.confg.
Подробная информация об ошибке:
Модуль RequestfilteringModule
Уведомление Beadrequest
Handler StaticFile
код ошибки 0x00000000
Запрошенный URL http://search.ebscohost.com:80/login.aspx?direct=true&profile=ehost&scope=site&authtype=crawler&jrnl=09760245&an=140756654&h=f3qv0fvn8axgwklkmfec8wbb5bkswwr%2fp9m9a54xlwsnrbzdmwbpuaulldhlqpdo0zbw9wpziipsuo91nqqzea%3d%3d&crl=f
Физический путь    c:\WebApps\af-webauth\login.ASPX? прямой = истина & профиль = ehost & Объем = сайта & AuthType = гусеничного & Jrnl = 09760245 & ап = 140756654 & ч = f3qv0fvn8axgwklkmfec8wbb5bkswwr% 2fp9m9a54xlwsnrbzdmwbpuaulldhlqpdo0zbw9wpziipsuo91nqqzea% 3d% 3d & CRL = F
входа Метод еще не определено
входа пользователя пока не определено
Дополнительная информация:
Это функция безопасности. Не изменяйте эту функцию, пока полностью не поняты масштабы изменений.Перед изменением этого значения следует выполнить трассировку сети, чтобы убедиться, что запрос не является вредоносным. Если сервер разрешает двойные управляющие последовательности, измените параметр configuration/system.webServer/security/[email protected] Это может быть вызвано искаженным URL-адресом, отправленным на сервер злоумышленником.

Посмотреть дополнительную информацию »

Могут ли секреторные белки слюнных желез пиявок-гематофагов (Hirudo verbana) достичь фармакологически релевантных концентраций в позвоночном хозяине?

Реферат

Слюна пиявок-гематофагов ( Hirudo sp.) содержит биологически активные белки, которые позволяют пиявке правильно питаться и хранить проглоченную кровь, но также могут оказывать воздействие на хозяина. Терапия пиявками используется для лечения многих различных заболеваний у людей, хотя пока охарактеризована лишь небольшая часть белков слюны. Более того, мы не знаем, может ли полная передача слюнных белков, хранящихся в одноклеточных слюнных железах пиявки, хозяину во время кормления, создавать концентрации, достаточно высокие, чтобы влиять на физиологические процессы в хозяине.Наша 3D-реконструкция части внутренней ткани пиявки из гистологических срезов показала, что одна пиявка содержит ок. 37 000 клеток слюнных желез. Используя для справки срезы ткани печени свиньи и скелетных мышц мыши, мы получили данные о плотности белка в клетках слюнных желез пиявки. Поскольку отдельные клетки слюны объемные (67 000 мкм 3 ), а хранящиеся белки плотно упакованы (примерно 500 мкг/мм 3 ), мы экстраполировали, что одна пиявка может содержать до 1.2 мг белков слюны. Анализируя белковые экстракты некормленных или сытых пиявок методом 2D-электрофореза, мы рассчитали относительное молярное количество отдельных белков слюны в диапазоне масс 17–60 кДа, которые могут выделяться из одной пиявки во время кормления. Распределение этих белков слюны в организме хозяина (предполагаемый объем плазмы 5 л) может привести к концентрации отдельных соединений от 3 до 236 пмоль/л. Такие концентрации кажутся достаточно высокими для осуществления биохимических взаимодействий с молекулами-мишенями в организме хозяина.

Образец цитирования: Lemke S, Müller C, Lipke E, Uhl G, Hildebrandt J-P (2013) Могут ли секреторные белки слюнных желез пиявок-гематофагов ( Hirudo verbana ) достигать фармакологически релевантных концентраций в позвоночном хозяине? ПЛОС ОДИН 8(9): е73809. https://doi.org/10.1371/journal.pone.0073809

Редактор: Ben J. Mans, Ветеринарный институт Ондерстепорта, Южная Африка

Получено: 30 апреля 2013 г.; Принято: 23 июля 2013 г.; Опубликовано: 18 сентября 2013 г.

Copyright: © 2013 Lemke et al.Это статья с открытым доступом, распространяемая в соответствии с лицензией Creative Commons Attribution License, которая разрешает неограниченное использование, распространение и воспроизведение на любом носителе при условии указания оригинального автора и источника.

Финансирование: Авторы не имеют поддержки или финансирования для отчета.

Конкурирующие интересы: Авторы заявили об отсутствии конкурирующих интересов.

Введение

В результате адаптации пиявок к гематофагии клетки слюнных желез пиявок содержат разнообразные биологически активные белки и пептиды [1], [2], которые, по крайней мере частично, передаются хозяину во время кормления [3] .Среди других эффектов ингредиенты слюны пиявки могут подавлять воспаление, уменьшать интенсивность боли и ингибировать свертывание крови у хозяина [4]–[7]. Пиявки широко используются хирургами для лечения венозного застоя или гематом после пластических операций [7]. Из многих белковых соединений в слюне пиявки [8], [9] лишь некоторые идентифицированы на молекулярном и функциональном уровне [1], [10]–[13]. Единственным, хорошо охарактеризованным в фармакологическом отношении, является гирудин [6], [14], который действует как высокоэффективный ингибитор тромбина и препятствует свертыванию крови позвоночных.Гирудин был получен в рекомбинантной форме, которая успешно применялась в течение многих лет у людей для профилактики тромбоза [15], [16].

Только для некоторых из многих соединений в слюне пиявки в литературе приводится качественная информация об их потенциальных функциях [2], но редко встречаются данные о количествах, присутствующих в пиявке, или об эффективных дозах, или о ингибирующих константах физиологических эффектов у хозяина. [17]. При терапии пиявками пациентов-людей обычно лечат от 2 до 6 пиявок одновременно [5], [7].Несмотря на то, что терапия пиявками имеет впечатляющие показатели успеха при самых разных заболеваниях, до сих пор совершенно неясно, могут ли концентрации компонентов слюны, потенциально переносимые хозяину во время кормления, достигать эффективных уровней концентрации только локально в ране или также системно в системе кровообращения хозяина.

По этой причине мы решили определить общее количество запасенных слюнных белков и пептидов, которые высвобождаются средней голодной пиявкой ( Hirudo verbana ) из клеток слюнной железы во время кормления с использованием гистологической 3D-реконструкции небольшого блока ткани тела. сегментов, содержащих клетки слюнных желез, и определение концентрации белка в отдельных клетках слюнных желез.Предполагая, что большая часть, если не весь секретируемый материал передается хозяину во время кормления, мы рассчитали концентрации отдельных белковых соединений слюны пиявки в кровообращении хозяина, используя интенсивность окрашивания отдельных белковых пятен в качестве меры их вклада в общий белковая масса.

Материалы и методы

Животные и образцы тканей

Медицинские пиявки ( Hirudo verbana Carena 1820) были получены от Futura Blutegelzucht, Потсдам, Германия, и содержались в стеклянных контейнерах в воде искусственного пруда (0,5 г морской соли, растворенной в 1 л деионизированной воды) при 20°C.Свежую ткань печени свиньи получали от коммерческого мясника (Greifenfleisch, Грайфсвальд, Германия) и хранили на льду до использования. Одна взрослая самка мыши ( Mus musculus, C57Bl/6) была получена из Департамента лабораторных наук о животных Университета Грайфсвальда, Германия, и умерщвлена ​​смещением шейных позвонков. В этом исследовании использовали мышечную ткань задних конечностей. Беспозвоночные (Annelida) не подпадают под действие правил защиты животных в Германии. Тем не менее пиявок приносили в жертву как можно быстрее (фиксативом или жидким азотом), чтобы избежать страданий.Подготовку образцов тканей мышей проводили в соответствии с рекомендациями «Европейской конвенции по защите позвоночных животных, используемых для экспериментальных и других научных целей» и Закона Германии о защите животных. Разрешение на содержание животных и подготовку органов для исследовательских целей было получено от Государственного управления сельского хозяйства, безопасности пищевых продуктов и рыболовства земли Мекленбург-Передняя Померания, Росток, Германия.

Разделение образцов тканей, залитых в парафин, и 3D-моделирование

пиявки (n = 5) растягивали на перфорированном деревянном стержне и фиксировали в фиксаторе Dubosq-Brasil (1 г пикриновой кислоты, растворенной в 150 мл 80% (об./об.) этанола, 60 мл раствора формальдегида (35%, масс./об.). ж), 15 мл ледяной уксусной кислоты) в течение 10 мин.Переднюю часть тела, содержащую клетки слюнных желез, отрезали от остальной части тела и дополнительно фиксировали в фиксаторе Dubosq-Brasil при 4°C в течение одной недели. Затем зубы на гребне челюстей удаляли путем инкубации образцов в разбавленной азотной кислоте в течение 10 ч при комнатной температуре. Для предотвращения отека ткань помещали в раствор сульфата натрия с концентрацией 250 ммоль/л на 24 ч и затем промывали проточной водой в течение 24 ч. Перед заливкой в ​​парафин ткань обезвоживали.С этой целью образцы помещали в 80% (об./об.) этанол в дистиллированной воде на 2 часа и затем на 2×30 мин в 96% (об./об.) этаноле. Затем образцы переносили в раствор тетрагидрофуран (ТГФ)-этанол (смесь равных объемов ТГФ и 96% этанола) на 2 ч, в чистый ТГФ на ночь, в ТГФ с парафином (24 ч, 60°С) и, наконец, в чистый парафин (24 ч, 60°С).

Для заливки парафин нагревали до 60°С. Ткань помещали в химический стакан, наполненный жидким парафином (60°С).Стеклянные панели формы были покрыты глицерином. Жидкий парафин заливают в форму. Используя горячий пинцет, ткань соответствующим образом помещали в форму и оставляли под колпаком на ночь для медленного охлаждения. Гистологические срезы (продольные или поперечные срезы) встроенной ткани пиявки (толщиной 6 мкм) готовили на микротоме (Microm HM 360 Rotary Microtome, Thermo Scientific, Dreieich, Германия). Срезы тканей окрашивали с использованием процедуры окраски азаном по Гейдису [18].

Для трехмерной реконструкции 50 серийных срезов, окрашенных азаном, выравнивали с помощью AMIRA 4.1 (Visualization Sciences Group, Дюссельдорф, Германия). Контуры отдельных клеток слюнных желез (всего 154) были прорисованы в цифровом виде, и была создана 3D-модель каждой клетки в контексте ее естественной ткани. Наконец, объемы клеточных тел были индивидуально рассчитаны с использованием функции площади поверхности программы AMIRA. Затем общий объем использовали для расчета естественного объема с использованием отношения воксел/мкм 3 .

Криосрезы образцов тканей

пиявки (n = 5) растягивали на перфорированном деревянном стержне и фиксировали в 5% формальдегиде в фосфатно-солевом буфере (PBS, 0,1 моль/л, pH 7,4) в течение ночи при 4°C. После отрезания задних сегментов переднюю часть тела пиявки, содержащую клетки слюнных желез, переносили в раствор 20% (вес/вес) сахарозы в PBS и инкубировали в течение 1 недели при 4°С. Ткань была быстро заморожена при -20°C и помещена в Tissue Tek (Sakura Finetek, Zoeterwoude, Нидерланды).Поперечные срезы (толщиной 6 мкм) готовили с использованием криостата Leica CM1900 (Leica Microsystems, Wetzlar, Germany) и переносили на предметные стекла для микроскопии. Образцы тканей скелетной мышцы мыши и печени свиньи, для которых измеряли массу, объем и содержание белка [19], использовали в качестве эталонных тканей для определения плотности белка в тканях пиявки. Срезы всех образцов тканей (пиявки, мышц, печени) монтировали на предметные стекла и одновременно окрашивали реактивом Брэдфорда [19] в течение 9 мин при комнатной температуре.Покровные стекла монтировали с использованием Mowiol (Roth, Карлсруэ, Германия). Микроскопическое исследование и создание цифровых изображений проводили с использованием микроскопа Nikon Eclipse TE300 и цифровой камеры Nikon DXM1200 (Nikon, Дюссельдорф, Германия). Денситометрический анализ проводили с использованием функции плотности коммерческой графической программы (Corel Photo Paint).

2D полуколичественный анализ отдельных белков слюны на основе геля

Пиявки были подготовлены к извлечению белка после содержания не менее 3 месяцев без кормления (некормленные пиявки, n = 10) или после добровольного кормления в течение 30 мин свиной кровью, заключенной в кусок кишечника свиньи (кормленные пиявки, n = 4 ).Каждую пиявку умеренно растягивали на перфорированном деревянном стержне и замораживали в жидком азоте. Через 30 с животное снимали со стержня и вырезали из передней части тела центральный тканевый цилиндр (содержащий клетки слюнной железы). Образец измельчали ​​в фарфоровой ступке при замораживании в жидком азоте и затем гомогенизировали в лизирующем буфере (мочевина 7 моль/л, тиомочевина 2 моль/л, дитиотреитол 60 ммоль/л, CHAPS 30 ммоль/л, Biolyte pH 3–10 0,8). %, Пефаблок 5 ммоль/л в А.расч.). После центрифугирования в течение 3 мин (4°С, 13 000 g) образец делили на аликвоты и супернатант использовали для определения белка [19]. Две IEF-полоски (Ready Strips™ IPG Strips (Biorad, Мюнхен, Германия), 17 см, pH 5–8) на образец инкубировали с 200 мкг белка в регидратационном растворе (мочевина 9 моль/л, CHAPS 30 ммоль/л, Дитиотреитол 50 ммоль/л, Биолит pH 3–10 0,2% в А. дез.) при 20°С. После регидратации в течение 12 часов белки разделяли в соответствии с их pI с помощью изоэлектрического фокусирования (ячейка Protean IEF, Biorad, Мюнхен, Германия).ИЭФ-стрипы инкубировали в восстанавливающем уравновешивающем буфере (мочевина 6 моль/л, глицерин 30%, додецилсульфат натрия 20%, дитиотреитол 60 ммоль/л в Трисе 1,5 моль/л, рН 8,8) в течение 10 мин, переносили в йодоацетамидсодержащую среду. уравновешивающим раствором (мочевина 6 моль/л, глицерин 30%, додецилсульфат натрия 20%, йодоацетамид 324,3 ммоль/л, трис 1,5 моль/л, рН 8,8) и инкубируют 10 мин. Затем полоски переносили в 2 х SDS буфер для образцов (трис 50 ммоль/л, глицерин 40%, β-меркаптоэтанол 8%, раствор додецилсульфата натрия 0.2%, бромфеноловый синий 0,2%) в течение 5 мин. Затем каждую полоску переносили на верхнюю часть 15% полиакриламидного геля (20×20 см) в вертикальной камере для электрофореза (Biorad, Мюнхен, Германия). Белки разделяли по молекулярным массам при 250 В и 20°С в течение примерно 6 часов. После завершения 2D-гели окрашивали серебром [20]. Обнаружение пятен и денситометрический анализ выполняли с использованием Phoretix 2 D (NonLinear Dynamics, Ньюкасл-апон-Тайн, Великобритания).

Результаты

Состояние наполнения клеток слюнных желез до и после кормления

Окрашенные азаном продольные срезы (толщиной 6 мкм) залитой парафином передней части тела пиявки, содержащей клетки слюнных желез, использовали для сравнения состояния наполнения клеток слюнных желез у некормленных (не менее 3 месяцев) или накормленных пиявок, которые готовили сразу после кормления человека-хозяина в течение не менее 30 мин.У некормленных пиявок клетки слюнных желез имели круглые или слегка удлиненные клеточные тела диаметром 50–100 мкм, которые были полностью заполнены материалом, окрашивающимся либо в синий, либо в красный цвет при окрашивании азаном (рис. 1А). В срезах тканей сытых животных большинство клеток слюнных желез выглядели намного меньше, выглядели истощенными и были едва различимы (рис. 1Б). Эти данные показывают, что 30-минутного периода кормления может быть достаточно, чтобы пиявка мобилизовала наибольшую часть запасенных белков слюнных желез и вытолкнула этот материал в рану на коже хозяина.

Рисунок 1. Пример изображения окрашенных азаном продольных срезов (6 мкм) ткани пиявки.

Ткань получали из центральной части передней части тела, содержащей тела клеток слюнных желез. А — некормленная пиявка, Б — пиявка, питавшаяся человеком-хозяином в течение 30 мин непосредственно перед фиксацией для гистологического анализа. Стрелки указывают на тела отдельных клеток слюнных желез. бв — кровеносный сосуд, м — тяжи мышечных клеток.

https://doi.org/10.1371/journal.pone.0073809.g001

Содержание белка в клетках слюнных желез

Для расчета общего содержания белка во всех клетках слюнных желез у пиявки определяли среднюю концентрацию белка в отдельных клетках слюнных желез, а также общее количество клеток и общий объем хранимого материала у одной пиявки. Поскольку слюнные железы медицинских пиявок представляют собой одноклеточные структуры, было невозможно приготовить чистый материал клеток слюнных желез для измерения общей концентрации белка.Таким образом, мы использовали непрямой метод определения концентрации белка в депонирующем отделе клеток слюнных желез с использованием двух типов эталонных тканей, для которых вес, объем и содержание белка (мышечная ткань мыши: 109,4±12,3 мкг/мкл; печень свиньи: 200,3±9,7 мкг/мкл, средние значения ± стандартное отклонение, n = 3). Криосрезы (6 мкм) всех трех тканей помещали на предметные стекла и одновременно окрашивали реактивом Бредфорда. Сразу после окрашивания срезы ткани просматривали под микроскопом и получали цифровые изображения репрезентативных участков ткани (рис.2). Среднюю оптическую плотность выбранных полей на изображениях измеряли с помощью функции «гистограммы» в Corel Photoshop. Была построена двухточечная калибровочная кривая с использованием данных о содержании белка в эталонных тканях в качестве независимых параметров по оси x и оптических плотностей криосрезов, окрашенных по Бредфорду, в качестве зависимых параметров по оси y. Используя данные об оптической плотности 25 отдельных клеточных тел слюнных желез, мы рассчитали среднюю концентрацию белка в хранилище клеток слюнных желез как 476 ± 224 мкг/мкл (среднее значение ± S.д., n = 25).

Рисунок 2. Количественная оценка плотности белка в телах отдельных клеток слюнных желез.

Скелетные мышцы мыши (A) или печень свиньи (B) использовали в качестве эталонных тканей (для которых предварительно определяли массу образца, объем образца и содержание белка) для определения плотности белка в клетках слюнных желез пиявки (C). Криосрезы (6 мкм) всех трех типов тканей наносили на предметные стекла и одновременно окрашивали реактивом Бредфорда. Изображения были получены с использованием одних и тех же настроек микроскопа и камеры.Денситометрические анализы проводили на цифровых изображениях эталонных тканей в полях a-d. Скорректированные по фону (bg) средние значения были использованы для построения калибровочной кривой, которая использовалась для считывания содержания белка в отдельных клеточных телах клеток слюнной железы пиявки с использованием значений плотности с поправкой на фон, измеренных в полях, отмеченных белыми квадратами (C).

https://doi.org/10.1371/journal.pone.0073809.g002

Объем отдельной клетки слюнной железы

Для определения содержания общего белка в резервуаре отдельной клетки слюнной железы необходимо было рассчитать объем одной клетки.Мы использовали цифровые микроскопические изображения 50 окрашенных азаном серийных поперечных срезов (толщиной 6 мкм) ткани пиявки, которые были залиты парафином, для 3D-моделирования (Amira 4.1) блока ткани размером примерно 600×500×300 мкм. Всего в пределах этого тканевого блока было реконструировано 154 клетки слюнных желез (рис. 3). Средний объем составлял 67 048 ± 38 935 мкм 3 на клеточный резервуар (среднее значение ± стандартное отклонение, n = 154). Используя данные о концентрации белка в клетках слюнной железы, рассчитанные выше, мы оценили, что содержание белка в отдельном резервуаре клеток слюнной железы составляет 32 ± 19 нг (среднее значение ± S.д., n = 154).

Рис. 3. Окрашенный азаном поперечный срез передней части тела пиявки (А) и трехмерная реконструкция блока ткани (В) из тканевого цилиндра в этой области.

Клетки слюнных желез расположены в области между слизистой оболочкой желудочно-кишечного тракта (обведена внутренней белой окружностью на А) и мышечным слоем стенки тела (за пределами внешней белой окружности на А). Блок реконструированной ткани составляет примерно 1/12 всей ткани по окружности соответствующего слоя ткани.bv — кровеносный сосуд, m — тяжи мышечных волокон, n — нефридий, sgc — клетка слюнной железы.

https://doi.org/10.1371/journal.pone.0073809.g003

Общее количество клеток слюнной железы

Чтобы получить разумную оценку общего количества клеток слюнных желез на одну пиявку, мы подогнали блок ткани, который был реконструирован в 3D, к окружности и длине сегментов тела, содержащих клетки слюнных желез. Как показывает окрашенный азаном поперечный срез пиявки, показанный на рис.3А, наличие тел клеток слюнных желез было ограничено тканевым цилиндром между толстым внешним слоем мышц стенки тела и тканью, окружающей желудочно-кишечную систему. Помимо тел клеток слюнных желез, промежуточный слой содержал нефридии, кровеносные сосуды и пакеты мышечной ткани в разной ориентации (рис. 3). Блок ткани, использованный для трехмерной реконструкции, содержал 154 клетки слюнных желез и примерно 12 раз подходил по окружности тела пиявки.Это составляло 1848 клеток слюнных желез в поперечном срезе тела толщиной 300 мкм. Клетки слюнных желез присутствуют в передних сегментах тела пиявки в пределах 5–9 сегментов [21]. Среднее расстояние между передней передней частью 5-го сегмента и задним краем 9-го сегмента у средних пиявок составляет примерно 6 мм. Это означало, что количество клеток, присутствующих в одном поперечном срезе тела толщиной 300 мкм, нужно было умножить на 20, чтобы получить оценку общего количества клеток слюнных желез на одну пиявку.Окрашенные азаном серийные поперечные срезы передней части тела другой пиявки выявили неглубокий градиент количества клеток слюнных желез от сегмента 5 к сегменту 9. Поскольку реконструированный блок ткани был приготовлен из сегмента 7, мы предполагаем, что плотность железистых клеток находится в среднем диапазоне. Опираясь на эти соображения, общее количество клеток в пиявке, чей блок ткани использовался для 3D-реконструкции, было рассчитано до 36 960.

Максимальные концентрации белков слюны пиявки в кровотоке человека-хозяина

Путем умножения общего количества клеток слюнных желез на пиявку на данные о содержании белка в отдельных клетках слюнных желез мы рассчитали общее количество слюнного белка на одну пиявку, которое может быть выделено за один цикл кормления, до 1.2 ± 0,7 мг белка (среднее значение ± стандартное отклонение, n = 154).

Для определения представленности отдельных белков слюны в общей массе секреторных белков мы разделили белки, выделенные из передней части тела 10 некормленных и 4 накормленных животных ( Hirudo verbana ) на 2D-гелях (200 мкг общего белка/гель). Используя окрашивание серебром, мы смогли идентифицировать 40 белковых пятен, которые воспроизводимо встречались в 75% всех образцов, полученных от голодных животных (рис. 4А). Некоторые из этих пятен можно было наблюдать и в 2D-гелях, приготовленных из белковых экстрактов свежеоткормленных животных (рис.4 Б). Денситометрический анализ с использованием программного обеспечения Phoretix 2D показал, что многие из пятен были менее многочисленны у сытых животных, чем у некормленных животных, что указывает на определенную степень истощения этих белков во время кормления. Приблизительно 50% воспроизводимых пятен в образцах тканей некормленных животных, однако, полностью отсутствовали в образцах сытых животных (рис. 4, пятна отмечены красным), что указывает на то, что эти пятна, вероятно, представляют собой секреторные белки из клеток слюнных желез, которые освобождается во время кормления.Поэтому дальнейшие расчеты проводились только с белками, представленными этими пятнами в гелях (табл. 1). К сожалению, до сих пор нет аннотированной базы данных для генома или соответствующих данных транскриптома Hirudo , что сделало невозможным для нас определение идентичности белковых пятен в гелях.

Рисунок 4. Примеры двухмерных гелей, приготовленных с использованием белковых экстрактов из центральных частей передних частей тела некормленной и накормленной пиявки.

A — некормленная пиявка, B — пиявка, получавшая кровь свиньи в течение 30 мин непосредственно перед приготовлением. Белки разделяли в соответствии с их pI с помощью изоэлектрического фокусирования (горизонтальная ось), а затем в соответствии с их массами с помощью электрофореза в SDS (вертикальная ось) и окрашивали серебром. Пятна, отмеченные черными кружками, регулярно присутствовали в образцах от некормленных, а также от недавно накормленных пиявок, в то время как пятна, отмеченные красными кружками, обычно присутствовали у некормленных пиявок, но отсутствовали у накормленных пиявок.Белки, представленные пятнами, отмеченными красным цветом, считались секреторными белками слюнных желез, которые мобилизуются во время кормления и передаются хозяину.

https://doi.org/10.1371/journal.pone.0073809.g004

Таблица 1. Относительное и абсолютное содержание белков, молекулярные массы и гипотетические концентрации отдельных белков слюнных желез в кровотоке человека-хозяина (объем распределения: 5 л).

https://дои.org/10.1371/journal.pone.0073809.t001

Мы рассчитали относительную оптическую плотность для каждого пятна (табл. 1, столбец 1) по отношению к сумме всех пятен (табл. 1, столбец 2). Эти данные были использованы для расчета количества каждого отдельного белка (в мкг), присутствующего в резервуарах всех клеток слюнных желез одной пиявки, в виде доли 1,2±0,7 мг белка на пиявку (табл. 1, столбец 3). Из белковых стандартов, используемых во втором измерении 2D-анализа, мы рассчитали молекулярные массы отдельных белковых пятен (табл.1, столбец 4) и использовали эти данные для определения молярного количества каждого белка (табл. 1, столбец 5). Наконец, предполагая, что все белковое содержимое клеточных резервуаров слюнных желез попадает в рану и вымывается в кровоток потенциального человека-хозяина (объем плазмы 5 л), мы рассчитали максимально достижимую концентрацию каждого из белковых соединений. в плазме человека (табл. 1, столбец 6). Как показано в табл. 1, максимально достижимые концентрации этих белков клеток слюнных желез у человека-хозяина составляли от 3 до 236 пмоль/л.

Обсуждение

Пиявкам-гематофагам, таким как медицинская пиявка Hirudo verbana , необходимо питаться биологическими жидкостями теплокровных позвоночных. Поскольку они редко получают возможность питаться настоящими хозяевами, они, как правило, поглощают кровь хозяина, в 5–8 раз превышающую их собственный вес тела, за один прием пищи и сохраняют концентрированную суспензию белков плазмы и клеток крови в зобе в течение нескольких месяцев, переваривая части этого материала для поддержания роста и размножения [3].Чтобы получить кровь хозяина, пиявка должна оставаться незамеченной, разрезая покровы хозяина периодическими движениями пилообразных челюстей. Во время поступления крови и интерстициальной жидкости в зоб, которое может занимать от 30 мин до 1 ч [22], пиявка должна предотвратить свертывание клеток крови, воспалительные реакции и восприятие боли хозяином. Предполагается, что на эти физиологические процессы манипулируют различные компоненты слюнного секрета, выделяемые из резервуаров клеток одноклеточных слюнных желез [23], [24], расположенных в передних сегментах пиявки.Удлиненные участки клеток слюнных желез соединены с небольшими порами, расположенными на краю челюстей, через которые слюнный материал высвобождается непосредственно в рану на коже хозяина [2], [25].

Насколько нам известно, это первое исследование, в котором представлены полуколичественные оценки количества секреторных белков слюнных желез, присутствующих в медицинской пиявке и выделяемых ею во время приема пищи с кровью.

Хотя структура и функциональные аспекты клеток слюнных желез челюстных пиявок были исследованы ранее [22]–[24], были лишь расплывчатые оценки общего числа клеток слюнных желез.Marshall & Lent [26] подсчитали, что в одной пиявке должно быть не менее 2000 железистых клеток. Наши результаты трехмерной реконструкции блока ткани из передних сегментов некормленной пиявки (рис. 3) свидетельствуют о гораздо большем количестве клеток слюнной железы (в данном случае 36 960). Поскольку мы изучали окрашенные азаном поперечные срезы разных пиявок и не наблюдали очевидных индивидуальных различий в плотности клеточных тел в ткани из одной и той же области тела, мы предполагаем, что общее количество клеток слюны может скорее зависеть от размера животного.Таким образом, по нашим оценкам, пиявки среднего размера могут содержать от 30 000 до 40 000 клеток слюнных желез на одно животное.

Материал, хранящийся в резервуарных частях клеток слюнной железы, по-видимому, почти полностью высвобождается в течение 30-минутного периода кормления (рис. 1), что означает, что кормящая пиявка может выделить общее количество белка слюнной железы примерно 1 мг в рана. Этот белковый коктейль состоит как минимум из 23 различных белков с молекулярной массой от 15 до 60 кДа (рис.4) и белков и пептидов более низкой молекулярной массы, не рассматриваемых в данном исследовании. Многие из пятен, появляющихся в 2D-гелях, приготовленных с белковыми экстрактами некормленных пиявок (рис. 4 А), также видны в окрашенных серебром гелях, приготовленных с экстрактами сытых пиявок (рис. 4 Б), и относятся к фракции с высокой численностью белки. Мы пришли к выводу, что эти пятна могут быть не секреторными белками слюны, а представлять собой другие типы белков, связанных с клетками слюнных желез или окружающей тканью. Чтобы избежать переоценки конечных концентраций белков пиявки в организме хозяина, мы исключили все эти белки (обозначены черным цветом на рис.4 А) из списка потенциальных секреторных белков слюны. Однако предполагалось, что белки, пятна которых присутствовали в экстрактах некормленных пиявок, но не были видны в гелях, приготовленных с экстрактами кормящихся пиявок (обозначены красным на рис. 4А), представляют собой секреторные белки слюны.

Если бы эти белки были полностью переданы от кормящей пиявки хозяину и были бы равномерно распределены в системе кровообращения хозяина, их конечная концентрация в плазме хозяина колебалась бы от 3 до 236 пмоль/л.Это предположение, вероятно, слишком оптимистично, поскольку некоторая часть материала, попадающего в рану, может быть легко повторно проглочена питающейся пиявкой. Таким образом, мы старались избежать переоценки конечных концентраций в хозяине, рассматривая все возможные ошибки, приводящие к изменчивости измеряемых параметров в наших расчетах, в наименее благоприятном ключе. Расчеты конечных концентраций белка в организме хозяина с использованием значений «среднее значение минус стандартное отклонение» для концентраций белка в отдельных клетках слюнных желез и для плотности пятен в 2D-гелях голодных животных привели к конечным концентрациям в плазме отдельных белков пиявки в плазме хозяина в диапазон от 1 до 103 пмоль/л.

Асензи и др. [10] проанализировали кинетические параметры взаимодействия гирудина с изоформами тромбина человека и сообщили константы связывания ( К  = 8,3×10 13 моль –1 • л, при рН 7,5 и 21°С), которые указывают на очень высокое сродство между ингибитором и протеазой. Stone и Hofsteenge [27] сообщили, что константа ингибирования гирудина для α-тромбина составляет 2,3 пмоль • 1 -1 . Эти данные подтверждают ожидание того, что длительные эволюционные процессы адаптации этих паразитов к своим хозяевам могли привести к структурно оптимизированным эффекторным молекулам в слюне пиявки, которые идеально подходят для конкретных молекул-мишеней в позвоночном хозяине.К сожалению, имеются лишь очень ограниченные сведения о кинетических параметрах других веществ слюны пиявок по отношению к потенциальным мишеням-хозяевам [28]. Однако данные, полученные в этом исследовании, указывают на то, что белки слюнных желез пиявки, переносимые человеку-хозяину всего одной кормящейся пиявкой, могут достигать концентраций в плазме (таблица 1), которые позволяют фармакологически воздействовать на локальные механизмы-мишени, которые служат пиявке для завершения ее жизнедеятельности. прием пищи и, кроме того, на системные механизмы в организме хозяина. Таким образом, пиявка действительно может оказывать профилактическое или терапевтическое воздействие на хозяина в отношении определенных состояний здоровья.Наши данные подтверждают мнение о том, что сообщаемые положительные эффекты лечения пиявками основаны не только на психологических, но и на фармакологических механизмах.

Авторские взносы

Задумал и разработал эксперименты: GU JPH. Выполнены опыты: SL CM EL. Проанализированы данные: SL CM. Предоставленные реагенты/материалы/инструменты для анализа: SL CM EL GU JPH. Написал статью: SL JPH.

Каталожные номера

  1. 1. Баскова И.П., Завалова Л.Л. (2001) Ингибиторы протеиназ медицинской пиявки Hirudo medicalis .Биохимия (Москва) 66: 703–714.
  2. 2. Хильдебрандт Дж. П., Лемке С. (2011) Небольшой укус, сильное воздействие — слюна и молекулы слюны в медицинской пиявке, Hirudo medicalis . Naturwissenschaften 98: 995–1008.
  3. 3. Сойер Р.Т. (1986) Биология пиявки и поведение 2: биология кормления, экология и систематика. Оксфорд: Издательство Оксфордского университета.
  4. 4. Уитакер И.С., Изади Д., Оливер Д.В., Монтеат Г., Батлер П.Е. (2004) Хирудо лекарственный и пластический хирург.Бр Дж. Пласт Сург 57: 348–353.
  5. 5. Pilcher H (2004) Лекарственные пиявки: застряли на тебе. Природа 432: 10–11.
  6. 6. Hach W, Scholz S, Hach-Wunderle V (2005) Die Therapie mit Blutegeln in der Medizin und Gefäßmedizin. Gefäßchirurgie 10: 195–202.
  7. 7. Riede F, Koenen W, Goerdt S, Ehmke H, Faulhaber J (2010)Медицинские пиявки для лечения венозного застоя и гематомы после пластической реконструктивной хирургии. J Dtsch Dermatol Ges 8: 881–888.
  8. 8. Yanes O, Villanueva J, Querol E, Aviles FX (2005)Функциональный скрининг ингибиторов сериновой протеазы в медицинской пиявке Hirudo medicalis под контролем MALDI-TOF MS с затуханием интенсивности. Мол клеточная протеомика 4: 1602–1613.
  9. 9. Мин Г.С., Саркар И.Н., Сиддалл М.Е. (2010)Слюнный транскриптом североамериканской медицинской пиявки, Macrobdella decora . Дж Параситол 96: 1211–1221.
  10. 10. Асензи П., Амикони Г., Колетта М., Лупиди Г., Менегатти Э. и др.(1992) Связывание гирудина с альфа-, бета- и гамма-тромбином человека. Сравнительное кинетическое и термодинамическое исследование. Дж. Мол. Биол. 225: 177–184.
  11. 11. Ригби М., Ореви М., Элдор А. (1996)Ингибиторы агрегации тромбоцитов и коагуляции в слюне пиявки и их роль в лечении пиявками. Семин Тромб Хемост 22: 273–278.
  12. 12. Баскова И.П., Завалова Л.Л., Басанова А.В., Мошковский С.А., Згода В.Г. (2004) Протеиновое профилирование секрета слюнных желез медицинской пиявки методами протеомного анализа.Биохимия (Москва) 69: 770–775.
  13. 13. Баскова И.П., Завалова Л.Л., Кострюкова Е.С., Титова Г.А., Лазарев В.Н., и соавт. (2007) Методы протеомного анализа для характеристики белков секрета слюнных желез медицинской пиявки в разные сезоны года. Биохимия (Москва) 72: 219–225.
  14. 14. Haycraft JB (1884) О действии секрета, полученного из медицинской пиявки, на свертывание крови. Proc R Soc Lond B 36: 478–487.
  15. 15.Новак Г., Шрёр К. (2007) Гирудин – долгий и тернистый путь от антикоагулянтного пептида в слюне медицинской пиявки до рекомбинантного препарата и дальше. Исторический фрагмент. Тромб Хемост 98: 116–119.
  16. 16. Greinacher A, Warkentin TE (2008)Прямой ингибитор тромбина гирудин. Тромб Хемост 99: 819–829.
  17. 17. Заиди С.М., Джамиль С.С., Заман Ф., Джилани С., Султана А. и др. (2011) Систематический обзор медицинского значения кровоядных пиявок.Altern Med Rev 16: 59–65.
  18. 18. Гейб М. (1968) Гистологические методы. Париж: Masson and Cie.
  19. 19. Bradford MM (1976) Быстрый и чувствительный метод количественного определения количества белка в микрограммах, использующий принцип связывания белка с красителем. Анальный биохим 72: 248–254.
  20. 20. Blum H, Beier H, Gross HJ (1987)Улучшенное окрашивание серебром растительных белков, РНК и ДНК в полиакриламидных гелях. Электрофорез 8: 93–99.
  21. 21.Манн К.Х. (1962) Пиявки (Hirudinea). Оксфорд: Пергамон Пресс.
  22. 22. Лент К.М., Флигнер К.Х., Фридман Э., Дикинсон М.Х. (1988)Пищевое поведение и физиология медицинской пиявки. J Exp Biol 137: 513–527.
  23. 23. Опплер П. (1904). Feinere Anatomie der im Kopf- und Halsteil von Hirudo vorkommenden Drüsen. Кандидатская диссертация, Бернский университет.
  24. 24. Damas D (1974) Etude histologique et histochemique des salivaires de la sangsue medicale, Hirudo medicalis (Hirudinee, Gnathobdelle).Arch Zool Exp Gen 115: 279–292.
  25. 25. Damas D (1972) Durcissement de la cuticule des machoires chez Hirudo medicalis (Annelide, Hirudinee). Aboutissant aux Structures dentaires etude histochemique et ultrastructurale. Arch Zool Exp Gen 113: 401–421.
  26. 26. Marshall CG, Lent CM (1988)Возбудимость и секреторная активность клеток слюнных желез челюстных пиявок (Hirudinea: Gnathobdellida).

Добавить комментарий

Ваш адрес email не будет опубликован.