Отзывы клиника эхинацея: Отзывы 48 пациентов о клинике «Эхинацея» в Москве

Содержание

Отзывы о клинике Эхинацея в Москве

Отзыв о враче: Шляпников Кирилл Александрович (Невролог, Аллерголог, Иммунолог)

Приношу огромную благодарность Кириллу Александровичу Очень грамотный доктор , консультировал меня совершенно бесплатно, так как я из другой страны , помог чем мог , я и не думал вначале , что доктор мне даже ответит , но занялся очень плотно моими анализами , МРТ и всем остальным , человек очень хороший , и очень грамотный доктор . У кого есть возможность попасть у нему , всем рекомендую , с таким доктором у вас будет правильный диагноз, и правильное лечение , мои доктора меня добили ( почти все профессора ) .

– 

Виталий.

,

Отзыв о враче: Дмитриев Вадим Юрьевич (Остеопат, Рефлексотерапевт)

Восхитительный врач, очень внимательный, чувствуется, что настоящий профессионал!!! От лечения я получила результат, превышающий мои ожидания. Стоимость лечения тоже порадовала.

– 

Нина

,

Отзыв о враче: Ханукаева (Агаронова) Зоя Борисовна (Отоларинголог, Сомнолог)

Один из лучших и заботливейших врачей, которых когда-либо встречал. За несколько лет вылечила мне около четырех ангин.

Улыбчивая, вежливая, внимательная. При выдаче рецепта очень доступно и познавательно рассказывала какого рода у меня проблема, и какое лекарство как на нее действует. Недавно с помощью Зои Борисовны прошел предоперационные обследования и прооперировался, при этом доктор помогла мне подобрать клинику по моему бюджету.

– 

Александр

,

Отзыв о враче: Шлёнская Ольга Сергеевна (Невролог, Эпилептолог, Педиатр)

Когда поняли, что приступы у дочки повторяются и усиливаются, обратились за помощью к доктору Шлёнской. Благодаря опыту и профессионализму Ольги Сергеевны теперь мы точно знаем, что эпилепсия – не приговор, лишь бы лечение было правильным и своевременным. Нашей доченьке значительно лучше!

– 

Светлана

,

Отзыв о враче: Павлова Анастасия Александровна (Кардиолог)

Хоть и не старый ещё вроде, но сердечко уже пошаливает. Обратился за помощью к Анастасии Александровне и не пожалел. Очень хороший кардиолог, сама диагностику провела, поставила диагноз, назначила лечение. Мне значительно помогло!

– 

Валентин

,

Отзыв о враче: Шляпников Кирилл Александрович (Невролог, Аллерголог, Иммунолог)

Надоело постоянно болеть, пришёл на приём к доктору Шляпникову. Отличный специалист оказался. Круто, что один врач может помочь и с аллергиями, и с проблемами иммунитета, и неврологию лечит.

– 

Стас

,

ООО Клиника «Эхинацея», в Москве

УЗИ матки и придатков

УЗИ предстательной железы

УЗИ мошонки

УЗИ щитовидной железы

УЗИ желчного пузыря с определением функции

УЗИ поджелудочной железы

УЗИ селезенки

УЗИ почек

УЗИ мочевого пузыря с определением остаточной мочи

УЗИ коленного сустава

УЗИ тазобедренного сустава

УЗИ мелкого сустава

УЗИ обзорное всех органов

УЗИ скрининг 1 триместра

УЗИ скрининг 2 триместра

УЗИ скрининг 3 триместра

УЗИ молочных желез

УЗИ обзорное (трансабдоминально)

УЗИ обзорное (трансвагинально/трансректально)

УЗИ паращитовидных желез

УЗИ слюнных желез

УЗИ печени

УЗИ желчного пузыря

УЗИ мочевого пузыря

Удаление спирали (ВМС)

Установка спирали (ВМС) без стоимости спирали

Кольпоскопия

Биопсия шейки матки

Удаление полипа шейки матки (цервикального)

Пайпель-биопсия эндометрия

ЭКГ (кардиограмма)

ЭКГ по Холтеру

Суточное мониторирование артериального давления (АД)

Суточное мониторирование АД и ЭКГ

Гастроскопия (ФГДС)

Колоноскопия (ФКС)

Акушерство

Гинекология

Кардиология

ЛОР

Мануальная терапия

Неврология

Офтальмология

Психиатрия

Терапия

Эндокринология

Психотерапия

Ревматология

Аллергология

Иммунология

Остеопатия

Сексология

Удаление серной пробки

Тимпанометрия

Клиника «Эхинацея» | отзывы и цены , Москва, Складочная улица, дом 6, строение 7, метро Дмитровская

Клиника «Эхинацея»

в этом разделе можно посмотреть всю общую информацию по медучреждению

О медучреждении

Клиника «Эхинацея»:
  • Широкий перечень услуг;
  • 34 специализации;
  • Рейтинг удовлетворенности пациентов 100%, на основании 16 отзывов;
  • Отзывы о врачах;
  • График работы с 09:00 до 21:00 согласно официальному сайту;
  • Адрес — Москва, Складочная улица, дом 6, строение 7;
  • Клиника «Эхинацея» — это клинико-диагностический медицинский центр, который находится по адресу Москва, Складочная улица, дом 6, строение 7. В клинике работает 15 врачей по 34 специализациям. Сегодня в нашей базе 16 отзывов о клинике Клиника «Эхинацея», 100.0% пациентов довольны клиникой. На Медкомпас.ру вы можете узнать подробную информацию о клинике Клинико-диагностический медицинский центр: информация и отзывы о врачах, актуальные цены на медицинские услуги, а также записаться на прием к врачу по телефону или онлайн.

    На карте

    развернуть карту

    Фотографии медучреждения

    Всего 12 фотографий, посмотреть все

    Прайс-лист на лечение

    последнее обновление — 19 марта 2015 г.

    Основные преимущества:

    У нас работают думающие врачи.

    Наши врачи не гоняют пациента «по кругу».

    Наши врачи разговаривают с пациентом, а не с его медицинской картой.

    Методы оплаты

    ДМС

    Добровольное медицинское страхование Работает со страховыми компаниями

    Клиника для восстановления после инсульта.

    Клинику «Эхинацея», её руководителя и владельца врача невролога Кирилла Александровича Шляпникова знаю давно. Еще до инсульта я и моя семья обращались в его клинику за помощью. Не было ни одного раза, чтобы мы её не получили. Это ни как не было связано с темой инсульта.

    Но вот он у меня случился. Я попал в больницу. Как тогда казалось состояние у меня было тяжелое. Я стал плохо говорить. С трудом ходил. Мог сидеть и держать предметы в руках. Как оказалось это было только начало.

    На третий день состояние резко ухудшилось. Меня парализовало.  Речь пропала. Я превратился в не громко мычащий овощ. Вот это было уже действительно тяжелое состояние!

    Острый период я провел в больнице. Выписался  в инвалидной коляске.

    Так началось моё восстановление после инсульта. При выписке сказали, что мне требуется помощь невролога, логопеда и специалиста ЛФК.

    Проводить поиски с подробным изучением рынка медицинских услуг возможности и времени у нас не было. Оперативно был проведен семейный совет. Участвовали: Жена Лена, Сын Никита и я с правом мычаще-совещательного голоса))). Решили обратиться к тому, в ком были уверены, к Доктору Шляпникову.

    Я был не транспортабелен. Лена от меня, в тот момент не отходила, поэтому Никита поехал в клинику «Эхинацея» один. Съездил, получил четкие и понятные инструкции. Он вернулся домой и рассказал нам, как спокойно и уверенно ему всё объяснил Кирилл Александрович. После паники и сумятицы первых дней мы наконец почувствовали, что не одни. Рядом настоящий, ответственный и грамотный доктор.

    На следующий день к нам домой приехали два врача из клиники «Эхинацея». Невролог и терапевт. Они должны были меня наблюдать, пока я прохожу восстановление после инсульта. Чем они добросовестно и занялись. Посетив меня, врачи докладывали ситуацию Доктору Шляпникову. Как человек ответственный, он весь процесс строго контролировал. Лена и Никита с ним были в плотном контакте.

    Первые шесть месяцев восстановления, каждые четыре недели я сдавал анализы. Затем приезжали врачи. На основе полученных в анализах данных вносили корректировки в моё питание и режим занятий. Давали новые упражнения. Назначали/отменяли лекарства.

    На шестом месяце восстановления я смог первый раз добраться до клиники «Эхинацея» , чтобы живьём показаться Доктору Шляпникову. 

    После шести месяцев восстановления моё состояние стало значительно лучше. Я научился ходить. Пусть не уверенно, но без поддержки и опоры. На ВИДЕО снято, как я ходил в то время. 

    Анализы и врачи теперь стали реже, раз в три месяца.

    Так прошел год, как я начал восстановление после инсульта, интервалы моих техосмотров))) увеличились. Раз в шесть месяцев. В настоящий момент раз в год.

    Мы получили в клинике»Эхинацея» квалифицированную, профессиональную   помощь и поддержку. Это было важно, особенно в первое время. Когда не знаешь куда бежать и кого спасать. Мне было проще всех. Соображал я плохо. Но даже в состоянии полуфабриката я понимал, что Доктор Шляпников не подведёт))).

    Когда я начал вести ИНСУЛЬТ БЛОГ мне вновь понадобилась его помощь. Чем больше я занимался восстановлением, тем больше возникало вопросов о том, как делать это эффективнее и быстрее. Решил вновь обратиться к Кириллу Александровичу. Понимал что вопросы которые возникли у меня интересует каждого, кто проходит восстановление после инсульта. Статьи на сайт должны были получиться интересные. Поэтому решил:

    -наше общение провести в форме интервью.

    -записать ответы Доктора Шляпникова на видео. Так как многим людям после инсульта тяжело читать. Пусть смотрят и слушают

    -выложить видео на моём Youtube канале INSULT BLOG.

    Думал что получиться один ролик. Как бы не так. Вышло тринадцать! Вот два первых из них. Посмотрите и узнаете много полезного о восстановлении:

     

     

     

     

     

     

     

    Доктор Шляпников не только подробно и обстоятельно ответил на мои вопросы, но ещё и свою клинику «Эхинацея» показал. Мы прошли по кабинетам где располагается классное оборудование. Оно используется при восстановление после инсульта. А тек же для его диагностики. Ведь часто из-за не понимания причин инсульта, человек получает повторный. Вот как раз для того чтобы это предотвратить и требуется специальное мед оборудование и специалисты, которые на нем умеют грамотно работать. И то и другое в клинике «Эхинация» есть. Доктор Шляпников объяснил, как и для чего используется каждая установка и прибор. Я то же это снял на видео и получились полноценные обзоры оборудования. Эти обзоры НЕ для специалистов. Они для тех, кто восстанавливается после инсульта:

     

    Это были мои первые обзоры и интервью в жизни. Но ни отсутствие опыта, ни моя речь))) не смогли испортить результат. Видео о клинике»Эхинацея» посмотрели около 7000 раз. Важно, что это смотрят конкретные люди, проходящие восстановление после инсульта, 

    Или их близкие, которые им помогают. Первым и вторым очень нужна реальная и квалифицированная помощь от опытных и ответственных специалистов. Именно поэтому видео — интервью с Доктором Шляпниковым посмотрело столько людей. 

    После публикации я получил много писем, с вопросами к Доктору Шляпникову от читателей и зрителей ИНСУЛЬТ БЛОГ. С увеличением просмотров росло и количество вопросов. Я рассказал про это Кириллу Александровичу и попросил ещё об одной встрече. Он согласился.

    Всего вопросов набралось около двухсот. Я сгруппировал похожие, убрал те на которые уже были ответы на моём сайте. Сухой остаток двадцать один вопрос. Получилось еще 11 видео с ответами на вопросы читателей и зрителей ИНСУЛЬТ БЛОГ. Вот некоторые из них:

    эхинацея отзывы врачей — 17 рекомендаций на Babyblog.ru

    Болеть в одном месяце по два раза — это про нас… Замучилась, если честно, и стала искать выходы. Слышала много хороших отзывов про гомеопатию, и вот наткнулась на очень интересную и познавательную статью. Может кому-то окажется полезной.

    Гомеопатические препараты для детей


    Основоположником гомеопатии является немецкий доктор Самуэль Ганеман. Он в 18 веке сформулировал базовые принципы системы лечения, которые сохранились и поныне. Лечение подобного подобным — основа гомеопатии. Например, если хинин вызывает лихорадку, то ее лечить необходимо малыми дозами этого вещества. Дозировки лечащих веществ при этом очень маленькие, поэтому и лечение длится долго. Итак, рассмотрим, как и какими гомеопатическими препаратами лечат разные детские заболевания.

    Гомеопатические препараты для детей для повышения иммунитета

    Сегодня категория часто болеющих малышей возрастает. Таким детям обязательно нужно проводить укрепление иммунитета. Хорошо справляется с этой задачей у детей дошкольного возраста немецкое средство Галиум-Хеел. Оно применяется для активации иммунных клеток организма, профилактики вирусных и бактериальных болезней.

    Энгистол — препарат, зарекомендовавший себя как эффективное средство укрепления иммунитета при вирусных поражениях. Он ускоряет обменные процессы в детском организме, применяется в периоды эпидемий.

    Эхинацея Композитум применяют для снятия воспалительных процессов у детей и ускорения выведения токсинов.

    Существуют гомеопатические средства, одновременно лечащие простуды и повышающие иммунитет. Это Инфлюцид, Антигриппин, Афлубин.

    Инфлюцид выпускается Немецким Гомеопатическим Союзом в форме таблеток и раствора. Он рекомендован детям младшего дошкольного возраста. Если говорить об отечественных комплексных гомеопатических препаратах, то родителям можно рекомендовать для повышения иммунитета их чад Эдас, Силицею композитум и Лахезис композитум, Оциллококцинум, Цинфил, Коризалию.

    Также с этой целью используются органопрепараты, представляющие вытяжки из организма животных. Это Муцоса цомп, Ларинх цомп, Тонсилла цомп.

    Гомеопатические препараты для лечения аденоидов у детей

    Основой гомеопатии при аденоидах у детей является противовоспалительный эффект и улучшение обменных процессов. Четкое соблюдение рекомендаций врача-гомеопата и длительное лечение такими средствами дает возможность избежать оперативного вмешательства при аденоидах у малышей. Обычно врачи рекомендуют в качестве монопрепарата масло туи.

    Комплексным действием обладает Барбарис Комп Иов Малыш. В его составе есть туя, йод, берберис, евпаторий. Комплексный аэрозоль Эуфорбиум композитум Назентропен С применяется для орошения полости горла и имеет в составе несколько растительных компонентов.

    Лечение вышеуказанными препаратами аденоидов у детей дает возможность добиваться рассасывания самих образований. Уже через 6 месяцев приема таких средств прекращаются воспалительные процессы в носоглотке и горле, сопутствующие аденоидам. Однако лечить этот детский недуг гомеопатией рекомендуется не менее года с точным выполнением предписаний доктора и его регулярным контролем.

    Гомеопатические препараты для лечения щитовидной железы у детей

    К большому сожалению, сегодня педиатры и эндокринологи все чаще диагностируют у детей снижение функции щитовидки, то есть гипотиреоз. Недуг проявляется слабостью всех процессов, протекающих в организме. Заподозрить неладное со щитовидной железой у ребенка можно по таким симптомам: прибавка веса, сонливость, вялость, зябкость, одышка, понижение артериального давления, замедление работы кишечника (регулярные запоры), нарушение функций почек (отечность).

    Большинство представителей официальной медицины при гипотиреозе назначают детям гормоны. Последствия такого лечения, как правило, проявляются набором веса и ожирением.

    Выбор гомеопатических препаратов при заболеваниях щитовидной железы детей зависит от симптоматики. Например, Калькарея карбоника назначается полным детям с большим животом. У них, как правило, поздно прорезываются зубы, длительное время не зарастают роднички, прослеживается ночная потливость головы и склонность к аллергиям. Часто у таких деток увеличены лимфатические узлы.

    Также Калькарея карбоника подойдет для лечения девочек-подростков с заболеванием щитовидки и обильными менструациями.

    Кальциум карбоникум — препарат, назначаемый при клинике гипотиреоза детей с задержкой умственного и полового развития. У таких детей наблюдается позднее развитие речи и снижение интеллекта.

    Аргентум нитрикум — средство, рекомендуемое для лечения токсического зоба. Этой болезни характерны импульсивность и торопливость ребенка, колющие боли в горле, тремор конечностей, склонность к похудению. Аналогичное действие оказывает и препарат Нукс вомика.

    Гомеопатические препараты для детей от кашля и насморка; для лечения ОРЗ, гриппа, простуды

    Простудные заболевания детей — самые частые. Их лечение предполагает выбор из большого ассортимента гомеопатических средств:

    1. Ацонитум напеллус. С его помощью лечат простуду, возникшую у малыша после переохлаждения. Препарат хорошо справляется с сухим кашлем, жаром. Эффективным средство будет лишь тогда, когда родители начнут применять его при первых признаках заболевания.
    2. Алиум сера. Хороший препарат для лечения ринита. При обильных, слизистых выделениях из носа, раздражающих ноздри, средство поможет снять симптомы и нормализовать носовое дыхание.
    3. Арсеницум албум. Это средство тоже используется для лечения детского насморка. Оно смягчает тревожность и раздражительность ребенка, уменьшает сильный озноб, нормализует дыхание носом.
    4. Феррум пхоспхорицум. Гомеопатическое лекарство отлично справляется с жаром на ранней стадии простуды, ОРЗ, гриппа. Он снимает покраснение горла и лица.
    5. Гелсемиум. Если при гриппе и ОРЗ дитя беспокоит головокружение, холод в спине, ломота мышц и головные боли, то препарат поможет справиться с такими симптомами.
    6. Мерцуриус солубилис либо вивус. Гомеопатический препарат, используемый при густых выделениях из детского носа, обложенности языка, воспалении горла.
    7. Нух вомица. Чаще средство используется при гриппе с кашлем и чиханием.
    8. Пулсатилла — средство устранения лихорадки и выделений из носа при гриппе.

    Если ваш ребенок часто болеет простудными заболеваниями, то ему обязательно нужно проводить несколько раз в год курсы гомеопатии для повышения иммунитета. Тогда простуды и ОРЗ будут возникать значительно реже, проходить в более легкой форме. Малыш станет более стойким к заражению вирусами, инфекционными заболеваниями.

    Гомеопатические препараты для детей от аллергии

    Аллергические реакции сегодня имеют тенденцию к учащению проявления в детском возрасте. И если взрослые более терпеливы, то зуд и раздражение кожи как симптомы аллергии детьми переносятся с трудом. Они расчесывают тело до крови и тем самым способствуют занесению инфекций. Препарат Рхус тохицодендрон применяют для уменьшения зуда, возникающего при экземе, крапивнице, атопическом дерматите. Рус 3 имеет аналогичное назначение.

    Беладонна 3 назначается гомеопатами при первых проявлениях аллергии, покраснении кожи и отечности.

    Алюмина 6 — гомеопатическое средство, помогающее при обострении зуда в теплом помещении.

    Коффеа 6 применяется на ночь для того, чтобы успокоить сильный зуд кожи ребенка.

    Из вышеупомянутых препаратов часто изготовляют мази для наружного применения. Их накладывают детям непосредственно на очаги зуда. Делают это 2-3 дня подряд.

    Лечение аллергии гомеопатическими препаратами помогает родителям и детям спокойней переносить ночи, когда традиционно усиливается зуд и покалывание кожи.

    Стоит отметить, что иногда применение подобных средств при аллергии у деток приводит к увеличению их подвижности и укреплению иммунитета при условии четкого соблюдения советов врача-гомеопата. Как правило, достигнув стойкой ремиссии, доктора назначают и средства для повышения иммунитета, очищения детского организма.

    Успокоительные гомеопатические препараты для детей: при прорезывании зубов, при нервозах, для сна

    Большинство мам знает, какими тяжелыми могут быть периоды прорезывания зубчиков у детей первого года жизни. В это время у деток происходит общий разлад в организме. Это повышение температуры, диарея, нервозность, рвота. Помочь девочке или мальчику в устранении таких сопутствующих симптомов могут проверенные гомеопатические средства. Так, например, Хамомилла (Чамомилла), или ромашка, применяется при повышенной температуре тела и опухании десен. Препарат успокоительный, устраняет беспокойство. Если же прорезывание зубов у малыша проходит на фоне кашля, насморка и обильного слюноотделения, то ребенку может помочь гомеопатическая ртуть Мерцуриум солубилис.

    Боракс — гомеопатический корректор при боли десен, их воспалении. Он снимает болевые ощущения и успокаивает дитя при прорезывании молочных зубов.

    Галкин Алексей Владимирович

    Последние несколько лет возникали постоянные насморки. С каждым разом промежутки между ремиссиями сокращались,а нос дышал все хуже.И вот летом перестал дышать совсем! Воздух не проходил не туда не обратно,капли никакие не помогали вообще .Состояние было ужасным.
    Обратился в поликлинику по записи к ЛОР врачу. Вердикт хронический полипозный ринусинусит и после снимка выявился еще и гайморит. Направление на операцию в больницу.
    В больнице выяснил,что операцию будут проводить «дедовским методом» удаление полипов петлей и радикальную операцию гайморотомия.Изучив вопрос подробнее,решил отказаться от такого «счастья» и начал искать клинику,где смогли бы сделать современными методами,малотравмотичную.
    Знакомая доктор рекомендовала обратить внимание на эту клинику.
    Выбрал доктора Алексея Владимировича Галкина и ни разу не пожалел!
    Он назначил дополнительное КТ исследование на котором кроме множественных полипов так же выяснилось что имеется инородное тело в правой пазухе (пломбировочный материал) и большая киста в ней же. А так же кривая перегородка.
    Рекомендована операция септопластика,турбинопластика,шейверная полипотомия,инфундибулотомия с двух сторон,удаление кисты и инородного материала.
    Алексей Владимирович подробно рассказал как будет делать операцию,ответил на все волнующие меня вопросы…
    Сдал все предоперационные анализы и назначили операцию на 4.09.18 . Операция под общим наркозом была первая в моей жизни,немного волновался.Напрасно.
    Операция прошла успешно,на следующий день вынули тампоны и через сутки отпустили домой.Реабилитация прошла быстро,а самое главное нос стал дышать как никогда до этого не дышал! Даже стал дышать когда вынули тампоны и был небольшой послеоперационный отек! Стал чувствовать запахи! Воздух через нос идет как буд -то с турбонаддувом))
    Прошло чуть больше месяца после операции,сегодня Алексей Владимирович осмотрел,все отлично! Слизистая здоровая! Нос дышит и чувствует запахи!
    Огромное человеческое спасибо этой клинике и Алексей Владимировичу в частности! Персонал в клинике кстати действительно учтивый,вежливый и чуткий и не навязчивый.
    Всем рекомендую не болеть,но если случилось только туда!

    7 отзывов, инструкция по применению

    Эхинацея — растительный иммуностимулятор от Natur Produkt Europe (Нидерланды). Выпускается в таблетках для рассасывания. Действующее вещество — экстракт эхинацеи узколистной. Несмотря на обилие современных синтетических иммуностимуляторов, растительные препараты продолжают оставаться популярными как среди врачей, так и среди их пациентов. Одними из наиболее заметных представителей данного класса являются лекарственные средства на основе эхинацеи. Эффективно проведенная профилактика ОРВИ и гриппа является лучшим аргументом, подталкивающим человека ограничить прием синтетических препаратов в пользу растительных. А в условиях не самой благоприятной экологической обстановки подобный подход приобретает все большее число адептов. На чашах весов дополнительная фармакологическая нагрузка, сопряженная с приемом токсических химических соединений и растительные препараты, обладающие благоприятным профилем безопасности и проявляющие минимум побочных эффектов. Естественная природа эхинацеи позволяет одновременно лечить основное заболевание (грипп, ОРВИ и т.д.) и укреплять иммунный статус, в то время как антибиотики снижают собственные защитные силы организма. Эхинацея повышает резистентность к бактериальным, вирусным и грибковым патогенам. Препарат является естественным активатором иммунного ответа: он повышает неспецифическую устойчивость, воздействует на макрофаги, Т-лимфоциты, гранулоциты, стимулирует фагоцитоз. Под действием Эхинацеи отмечается стимуляция коры надпочечников, что наделяет действие препарата противоаллергическим и противоревматическим компонентами.

    Усиление секреции цитокинов (информационных молекул иммунной системы) способствует более активному росту и развитию иммунокомпетентных клеток, способных определять антиген и отвечать на его присутствие соответствующей защитной реакцией. Под действием Эхинацеи увеличивается содержание в крови пропердина — белка с неблагозвучным названием, участвующего в специфических иммунных реакциях. Некоторые содержащиеся в экстракте эхинацеи фитокомпоненты обладают противовирусным эффектом (это дает возможность использовать препарат при вирусах гриппа и простого герпеса), а также блокирующим действием в отношении гиалуронидазы бактерий. Эхинацея показана к приему начиная с 12-летнего возраста. Разовая доза — 1 таблетка. Кратность приема — 3-4 раза в день. Таблетки следует рассасывать, не проглатывая. Терапевтический курс не должен быть короче 7 дней. Максимальное время фармакотерапии — 2 месяца. Благодаря естественности состава, Эхинацея практически не обладает клинически значимыми побочными эффектами. Упоминания достойны лишь крайне редкие аллергические реакции. Препарат имеет очень высокий порог токсичности. О случаях передозировки до настоящего времени не сообщалось. Возможности взаимодействия Эхинацеи с другими лекарственными средствами в медицинской литературе не описаны.

    Обзор, применение, побочные эффекты, меры предосторожности, взаимодействие, дозировка и обзоры изменение экспрессии лейкоцитов hsp70, увеличение количества лейкоцитов и улучшение антиоксидантной защиты эритроцитов.

    Дж. Клин Фарм Тер. 2005;30(4):363-369. Посмотреть реферат.

    Бенш К., Тиралонго Дж., Шмидт К., Матиас А., Боун К.М., Леманн Р. и Тиралонго Э.Исследования антиадгезивной активности растительных экстрактов в отношении Campylobacter jejuni. Phytother.Res 2011;25(8):1125-1132. Посмотреть реферат.

    Бургер, Р. А., Торрес, А. Р., Уоррен, Р. П., Колдуэлл, В. Д., и Хьюз, Б. Г. Индуцированная эхинацеей продукция цитокинов макрофагами человека. Int.J Immunopharmacol. 1997;19(7):371-379. Посмотреть реферат.

    Чен Ю., Фу Т., Тао Т., Ян Дж., Чанг Ю., Ван М., Ким Л., Цюй Л., Кэссиди Дж., Скальцо Р. ., и Wang, X. Эффекты активации макрофагов новыми алкамидами из корней видов эхинацеи.J Nat.Prod. 2005;68(5):773-776. Посмотреть реферат.

    Hou, CC, Chen, CH, Yang, NS, Chen, YP, Lo, CP, Wang, SY, Tien, YJ, Tsai, PW и Shyur, LF Сравнительный метаболомический подход в сочетании с клеточными и генными анализами для классификации видов и подтверждения противовоспалительной биологической активности растений эхинацеи. J Nutr.Biochem. 2010;21(11):1045-1059. Посмотреть реферат.

    Hu, C. and Kitts, D.D. Исследования антиоксидантной активности экстракта корня эхинацеи.J Agric Food Chem 2000;48(5):1466-1472. Посмотреть реферат.

    Кемп, Д. Э. и Франко, К. Н. Возможная лейкопения, связанная с длительным использованием эхинацеи. J Am Board Fam.Pract. 2002;15(5):417-419. Посмотреть реферат.

    Лиатсос Г., Элефсиниотис И., Тодорова Р. и Мулакакис А. Тяжелая тромботическая тромбоцитопеническая пурпура (ТТП), вызванная или усугубляемая иммуностимулирующим растением эхинацеей. Am J Гематол. 2006;81(3):224. Посмотреть реферат.

    Луо Ю., Пан Дж., Пан Ю., Хан З.и Чжун Р. Оценка защитных эффектов китайских трав против повреждения биомолекул, вызванного пероксинитритом. Biosci.Biotechnol.Biochem. 2010;74(7):1350-1354. Посмотреть реферат.

    Маасс, Н., Бауэр, Дж., Пауликс, Б.Р., Бомер, Б.М., и Рот-Майер, Д.А. Эффективность эхинацеи пурпурной в отношении производительности и иммунного статуса у свиней. J Anim Physiol Anim Nutr. (Берл) 2005; 89 (7-8): 244-252. Посмотреть реферат.

    Маскатия, З. К. и Бейкер, К. Гиперэозинофилия, связанная с употреблением эхинацеи.South.Med J 2010;103(11):1173-1174. Посмотреть реферат.

    Мораццони П., Кристони А., Ди Пьерро Ф., Аванзини К., Раварино Д., Сторнелло С., Зукка М. и Муссо Т. Иммуностимулирующие препараты in vitro и in vivo действие нового стандартизированного экстракта корня эхинацеи узколистной (Polinacea). Фитотерапия 2005;76(5):401-411. Посмотреть реферат.

    Моуз, Дж. Р. [Влияние эхинацина на фагоцитоз и естественные клетки-киллеры]. Med Welt 12-30-1983;34(51-52):1463-1467. Посмотреть реферат.

    Парнэм М.Дж.Оценка пользы и риска выжатого сока эхинацеи пурпурной (Echinacea purpurea) для длительной пероральной иммуностимуляции. Фитомед 1996;3:95-102.

    Penzak, SR, Robertson, SM, Hunt, JD, Chairez, C., Malati, CY, Alfaro, RM, Stevenson, JM, and Kovacs, JA Эхинацея пурпурная значительно индуцирует активность цитохрома P450 3A, но не изменяет лопинавир-ритонавир экспозиции у здоровых людей. Фармакотерапия 2010;30(8):797-805. Посмотреть реферат.

    Салюк-Ющак, Ю., Павлачик И., Олас Б., Колодзейчик Дж., Пончек М., Новак П., Цириготис-Волощак М., Вахович Б. и Ганцарц Р. Эффект полифенольно-полисахаридных конъюгатов из отдельных лекарственных растений семейства сложноцветных на индуцированные пероксинитритом изменения белков тромбоцитов крови. Int.J Biol.Macromol. 12-1-2010;47(5):700-705. Посмотреть реферат.

    Шарма М., Шуп Р., Сутер А. и Хадсон Дж. Б. Потенциальное использование эхинацеи при акне: контроль роста и воспаления Propionibacterium acnes.Phytother.Res 2011;25(4):517-521. Посмотреть реферат.

    Steinmuller, C., Roesler, J., Grottrup, E., Franke, G., Wagner, H., and Lohmann-Matthes, ML Полисахариды, выделенные из культур растительных клеток Echinacea purpurea, повышают устойчивость мышей с ослабленным иммунитетом к системным инфекции Candida albicans и Listeria monocytogenes. Int.J Immunopharmacol. 1993;15(5):605-614. Посмотреть реферат.

    Томпсон, К. Д. Противовирусная активность Viracea против чувствительных к ацикловиру и устойчивых к ацикловиру штаммов вируса простого герпеса.Антивирусные исследования 1998;39(1):55-61. Посмотреть реферат.

    Toselli, F., Matthias, A., Bone, KM, Gillam, EM, and Lehmann, RP Метаболизм основного алкиламида эхинацеи N-изобутилдодека-2E,4E,8Z,10Z-тетраенамида под действием рекомбинантных ферментов цитохрома P450 человека и микросомы печени человека. Phytother.Res 2010;24(8):1195-1201. Посмотреть реферат.

    Тубаро А., Трагни Э., Дель Негро П., Галли С. Л. и Делла Лоджия Р. Противовоспалительная активность полисахаридной фракции эхинацеи узколистной.J Фарм. Фармакол. 1987;39(7):567-569. Посмотреть реферат.

    Wacker, A. и Hilbig, W. [Ингибирование вируса эхинацеей пурпурной (авторский перевод)]. Planta Med 1978;33(1):89-102. Посмотреть реферат.

    Woelkart, K., Koidl, C., Grisold, A., Gangemi, JD, Turner, R.B., Marth, E. и Bauer, R. Биодоступность и фармакокинетика алкамидов из корней Echinacea angustifolia у людей. J Clin Pharmacol 2005;45(6):683-689. Посмотреть реферат.

    Вулкарт, К., Март, Э., Suter, A., Schoop, R., Raggam, R.B., Koidl, C., Kleinhappl, B., and Bauer, R. Биодоступность и фармакокинетика препаратов эхинацеи пурпурной и их взаимодействие с иммунной системой. Int J Clin Pharmacol Ther 2006;44(9):401-408. Посмотреть реферат.

    Абдель-Наби Авад О.Г. Эхинацея может помочь с азитромицином в профилактике рецидивирующего тонзиллита у детей. Am J Отоларингол. 2020;41(4):102344. doi: 10.1016/j.amjoto.2019.102344. Посмотреть реферат.

    Абдул М.И., Цзян X, Уильямс К.М. и др.Фармакокинетические и фармакодинамические взаимодействия эхинацеи и поликозанола с варфарином у здоровых людей. Br J Clin.Pharmacol. 2010;69:508-15. Посмотреть реферат.

    Аванг ДВК, Киндак Д.Г. Эхинацея. Кан Фарм Дж. 1991; 124:512-6.

    Барретт Б., Браун Р., Ракел Д., Рабаго Д. и др. Эффекты плацебо и простуда: рандомизированное контролируемое исследование. Ann.Fam.Med 2011;9:312-22. Посмотреть реферат.

    Барретт Б., Браун Р., Ракел Д. и др. Эхинацея для лечения простуды: рандомизированное исследование.Энн Интерн Мед 2010;153:769-77. Посмотреть реферат.

    Barrett B, Vohmann M, Calabrese C. Эхинацея для лечения инфекций верхних дыхательных путей. J Fam Pract 1999;48:628-35. Посмотреть реферат.

    Барретт Б. Лекарственные свойства эхинацеи: критический обзор. Фитомедицина 2003;10:66-86. Посмотреть реферат.

    Барретт Б.П., Браун Р.Л., Локен К. и др. Лечение насморка нерафинированной эхинацеей. Рандомизированное двойное слепое плацебо-контролируемое исследование. Энн Интерн Мед 2002;137:939-46.. Посмотреть реферат.

    Binns SE, Purgina B, Bergeron C. Опосредованная светом противогрибковая активность экстрактов эхинацеи. Завод Мед 2000;66:241-4. Посмотреть реферат.

    Бокхорст Х., Голлник Н., Гуран С. и др. [Терапия простого герпеса на практике. Отчет о лечении простого лабиального герпеса препаратом Эсберитокс. ZFA.(Штутгарт.) 11-20-1982;58:1795-98. Посмотреть реферат.

    Боссар Дж.Б. и Одл Б.Л. Возможное взаимодействие этопозида с эхинацеей. J.Diet.Suppl 2012;9:90-5. Посмотреть реферат.

    Бринкеборн Р.М., Шах Д.В., Дегенринг Ф.Х. Echinaforce и другие препараты из свежих растений эхинацеи при лечении насморка. Рандомизированное плацебо-контролируемое двойное слепое клиническое исследование. Фитомедицина 1999;6:1-6.. Посмотреть тезисы.

    Будзински Дж.В., Фостер Б.С., Ванденхук С., Арнасон Дж.Т. Оценка in vitro ингибирования цитохрома P450 3A4 человека выбранными коммерческими травяными экстрактами и настойками. Фитомедицина 2000;7:273-82. Посмотреть реферат.

    Карузо Т.Дж., Гуолтни Дж.М. мл.Лечение простуды эхинацеей: структурированный обзор. Clin Infect Dis 2005;40:807-10. Посмотреть реферат.

    Кассано Н., Феррари А., Фай Д. и др. Пероральные добавки с нутрицевтиками, содержащими эхинацею, метионин и антиоксидантные/иммуностимулирующие соединения, у пациентов с кожными вирусными бородавками. G.Ital Дерматол Венереол. 2011;146:191-95. Посмотреть реферат.

    Чавес М.Л., Чавес ИП. Эхинацея. Хосп Фарм 1998;33:180-8.

    Далл’Аква С., Периссутти Б., Грабнар И., Фарра Р., Комар М., Агостинис С. и др.Фармакокинетика и иммуномодулирующее действие липофильного экстракта эхинацеи в мягких желатиновых капсулах. С и др. Евр Джей Фарм Биофарм. 2015 ноябрь; 97 (часть A): 8–14. doi: 10.1016/j.ejpb.2015.09.021. Посмотреть реферат.

    Ди Пьерро Ф., Рапачоли Г., Феррара Т., Тони С. Использование стандартизированного экстракта эхинацеи узколистной (Polinacea) для профилактики инфекций дыхательных путей. Altern Med Rev 2012; 17:36-41. Посмотреть реферат.

    Фачино Р.М., Карини М., Альдини Г. и др. Конъюгаты эхинакозида и кофеила защищают коллаген от деградации, вызванной свободными радикалами: потенциальное использование экстрактов эхинацеи для предотвращения фотоповреждений кожи.Планта Мед 1995;61:510-4. Посмотреть реферат.

    Габранис И., Куфакис Т1, Папакривос И., Батала С. Острый холестатический гепатит, связанный с эхинацеей. J Постград Мед. 2015;61(3):211-2. Посмотреть реферат.

    Галло М., Саркар М., Ау В. и др. Исход беременности после гестационного воздействия эхинацеи: проспективное контролируемое исследование. Arch Intern Med 2000;160:3141-3. Посмотреть реферат.

    Giles JT, Palat CT III, Chien SH, et al. Оценка эхинацеи для лечения простуды.Pharmacother 2000;20:690-7. Посмотреть реферат.

    Gilroy CM, Steiner JF, Byers T, et al. Эхинацея и правда в маркировке. Arch Intern Med 2003; 163: 699-704. Посмотреть реферат.

    Гоэл В., Ловлин Р., Бартон Р. и др. Эффективность стандартизированного препарата эхинацеи (Эхинилин) для лечения простуды: рандомизированное двойное слепое плацебо-контролируемое исследование. J Clin Pharm Ther 2004; 29:75-83. Посмотреть реферат.

    Гоэл В., Ловлин Р., Чанг С. и др. Запатентованный экстракт растения эхинацеи (Echinacea purpurea) усиливает системный иммунный ответ при простуде.Phytother. Res 2005; 19: 689-94. Посмотреть реферат.

    Goey AK, Meijerman I, Rosing H, et al. Влияние эхинацеи пурпурной на фармакокинетику доцетаксела. Br J Clin Pharmacol 2013;76(3):467-74. Посмотреть реферат.

    Gorski JC, Huang S, Zaheer NA, et al. Влияние эхинацеи (корень эхинацеи пурпурной) на активность цитохрома P450 in vivo. Clin Pharmacol Ther 2003;73 (Abstract PDII-A-8):P94. Посмотреть реферат.

    Grbic J, Wexler I, Celenti R, et al. Испытание фазы II трансмукозного травяного пластыря для лечения гингивита.J Am Dent.Assoc. 2011; 142:1168-75. Посмотреть реферат.

    Гримм В., Мюллер Х.Х. Рандомизированное контролируемое исследование влияния жидкого экстракта эхинацеи пурпурной на частоту и тяжесть простудных и респираторных инфекций. Am J Med 1999; 106:138-43. Посмотреть реферат.

    Gunning K. Эхинацея в лечении и профилактике инфекций верхних дыхательных путей. West J Med 1999; 171:198-200. Посмотреть реферат.

    Герли Б.Дж., Гарднер С.Ф., Хаббард М.А. и др. In vivo оценка ботанических добавок на фенотипы человеческого цитохрома P450: Citrus aurantium, Echinacea purpurea, расторопша пятнистая и пальметто. Clin Pharmacol Ther 2004;76:428-40. . Посмотреть реферат.

    Haller J, Freund, TF, Pelczer, KG, et al. Анксиолитический потенциал и психотропные побочные эффекты препарата эхинацеи у лабораторных животных и здоровых добровольцев. Фитотер.Рес. 2013;27:54-61. Посмотреть реферат.

    Haller J, Krecsak L, Zámbori J. Двойное слепое плацебо-контролируемое исследование анксиолитического действия стандартизированного экстракта эхинацеи. Phytother Res, 2020;34(3):660-8. Посмотреть реферат.

    Хансен Т.С., Нильсен О.Г.Метаболизм CYP3A4 in vitro: ингибирование эхинацеей пурпурной и выбор субстрата для оценки ингибирования травами. Basic Clin Pharmacol Toxicol 2008;103:445-9. Посмотреть реферат.

    Hoban CL, Byyard RW, Musgrave IF. Анализ спонтанных побочных реакций на эхинацею, валериану, цимицифугу и гинкго в Австралии с 2000 по 2015 год. J Integr Med. 2019;17(5):338-343. Посмотреть реферат.

    Hoheisel O, Sandberg M, Bertram S, et al. Лечение эхинагардом сокращает течение простуды: двойное слепое плацебо-контролируемое клиническое исследование. Eur J Clin Res 1997; 9: 261-268.

    Хантли А.Л., Томпсон Кун Дж., Эрнст Э. Безопасность растительных лекарственных средств, полученных из видов эхинацеи: систематический обзор. Drug Saf 2005; 28:387-400. Посмотреть реферат.

    Джалло М.А., Грегори П.Дж., Хейн Д. и др. Взаимодействие пищевых добавок с антиретровирусными препаратами: систематический обзор. Int J STD AIDS. 2017 янв; 28(1):4-15. Посмотреть реферат.

    Джавад М., Шуп Р., Сутер А. и др. Профиль безопасности и эффективности эхинацеи пурпурной для предотвращения эпизодов простуды: рандомизированное двойное слепое плацебо-контролируемое исследование.Комплемент на основе Evid Alternat Med 2012; 2012: 841315. Epub 2012, 16 сентября. Посмотреть аннотацию.

    Karsch-Völk M, Barrett B, Kiefer D, Bauer R, Ardjomand-Wielkart K, Linde K. Эхинацея для профилактики и лечения простуды. Cochrane Database Syst Rev.2014;(2):CD000530. doi: 10.1002/14651858.CD000530.pub3. Посмотреть реферат.

    Karsch-Völk M1, Barrett B2, Linde K1. Эхинацея для профилактики и лечения простуды. ДЖАМА. 2015;313(6):618-9. doi: 10.1001/jama.2014.17145. Посмотреть реферат.

    Kocaman O, Hulagu S, Senturk O. Тяжелый острый гепатит, вызванный эхинацеей, с признаками холестатического аутоиммунного гепатита. Европейский медицинский стажер 2008; 19:148. Посмотреть реферат.

    Лоуренсон Дж. А., Уоллс Т., Дэй А. С. Острая печеночная недостаточность, вызванная эхинацеей, у ребенка. J Paediatr Child Health 2014;50(10):841. Посмотреть реферат.

    Ли А.Н., Верт В.П. Активация аутоиммунитета после приема иммуностимулирующих растительных добавок. Арч Дерматол 2004; 140:723-7. Посмотреть реферат.

    Линде К., Барретт Б., Волкарт К. и др.Эхинацея для профилактики и лечения простуды. Cochrane Database Syst Rev 2006;(1):CD000530. Посмотреть реферат.

    Линденмут Г.Ф., Линденмут Э.Б. Эффективность препарата из травяного чая из эхинацеи в отношении тяжести и продолжительности симптомов верхних дыхательных путей и гриппа: рандомизированное двойное слепое плацебо-контролируемое исследование. J Altern Complement Med 2000; 6: 327-34. Посмотреть реферат.

    Логан Дж. Л., Ахмед Дж. Критический гипокалиемический почечный тубулярный ацидоз из-за синдрома Шегрена: связь с предполагаемым иммуностимулятором эхинацеи.Клин Ревматол 2003; 22:158-9. Посмотреть реферат.

    Лопрести А.Л., Смит С.Дж. Исследование успокаивающего и улучшающего настроение действия эхинацеи узколистной (EP107 ™): рандомизированное двойное слепое плацебо-контролируемое исследование. J Affect Disord 2021; 293: 229-237. Посмотреть реферат.

    Luettig B, Steinmuller C, Gifford GE, et al. Активация макрофагов полисахаридом арабиногалактаном, выделенным из культур растительных клеток эхинацеи пурпурной. J Natl Cancer Inst 1989;81:669-75.Посмотреть реферат.

    Мартин Т.Д., Грин М.С., Уайтхед М.Т., Шеетт Т.П., Вебстер М.Дж., Хадсон Г.М. Шесть недель перорального приема эхинацеи пурпурной не увеличивают выработку эритропоэтина в сыворотке или эритропоэтический статус у рекреационно активных мужчин с аэробной подготовленностью выше среднего. Appl Physiol Nutr Metab. 2019;44(7):791-795. Посмотреть реферат.

    Мелхарт Д., Вальтер Э., Линде К. и др. Экстракты корня эхинацеи для профилактики инфекций верхних дыхательных путей: двойное слепое плацебо-контролируемое рандомизированное исследование.Arch Fam Med 1998; 7: 541-5. Посмотреть реферат.

    Менгс У., Клэр С.Б., Пойли Дж.А. Токсичность эхинацеи пурпурной. Исследования острой, подострой и генотоксичности. Arzneimittelforschung 1991;41:1076-81. Посмотреть реферат.

    Мистранжело М., Корналья С., Пиццио М. и др. Иммуностимуляция для уменьшения рецидивов после операции по поводу остроконечных кондилом анального канала: проспективное рандомизированное контролируемое исследование. Colorectal Dis 2010;12:799-803. Посмотреть реферат.

    Молто Дж., Валле М., Миранда С. и др.Лекарственное взаимодействие между эхинацеей пурпурной и дарунавиром-ритонавиром у ВИЧ-инфицированных пациентов. Противомикробные агенты Chemother 2011;55(1):326-30. Посмотреть реферат.

    Молто Дж. , Валле М., Миранда С. и др. Лекарственное взаимодействие между эхинацеей пурпурной и этравирином у ВИЧ-инфицированных пациентов. Противомикробные агенты Chemother 2012;56(10):5328-31. Посмотреть реферат.

    Muller-Jakic B, Breu W, Probstle A, et al. Ингибирование in vitro циклооксигеназы и 5-липоксигеназы алкамидами из видов Echinacea и Achillea.Planta Med 1994;60:37-40.. Посмотреть реферат.

    Mullins RJ, Heddle R. Побочные реакции, связанные с эхинацеей: опыт Австралии. Энн Аллергия Астма Иммунол 2002;88:42-51. Посмотреть реферат.

    Маллинз Р.Дж. Анафилаксия, связанная с эхинацеей. Med J Aust 1998; 168:170-1. Посмотреть реферат.

    Маллинз Р.Дж. Аллергические реакции на эхинацею. J Allergy Clin Immunol 2000;104:S340-341 (резюме 1003).

    O’Neil J, Hughes S, Lourie A, Zweifler J. Влияние эхинацеи на частоту симптомов верхних дыхательных путей: рандомизированное двойное слепое плацебо-контролируемое исследование.Энн Аллергия Астма Иммунол 2008;100:384-8. Посмотреть реферат.

    Огал М., Джонстон С.Л., Кляйн П., Шуп Р. Эхинацея снижает использование антибиотиков у детей за счет профилактики инфекций дыхательных путей: рандомизированное, слепое, контролируемое клиническое исследование. Евр J Med Res. 2021 8 апр; 26(1):33. Посмотреть реферат.

    Oláh A, Szabó-Papp J, Soeberdt M, et al. Алкиламиды, полученные из эхинацеи пурпурной, обладают мощным противовоспалительным действием и облегчают клинические симптомы атопической экземы. J Дерматол Sci.2017 окт;88(1):67-77. Посмотреть реферат.

    Ондрижек Р.Р., Чан П.Дж., Паттон В.К., Кинг А. Альтернативное медицинское исследование воздействия трав на проникновение ооцитов хомяка без зоны и целостность дезоксирибонуклеиновой кислоты спермы. Фертил Стерил 1999;71:517-22. Посмотреть реферат.

    Ондрижек Р.Р., Чан П.Дж., Паттон В.К., Кинг А. Ингибирование подвижности сперматозоидов человека специфическими травами, используемыми в альтернативной медицине. J Assist Reprod Genet 1999;16:87-91. Посмотреть реферат.

    Парнэм М.Дж.Оценка пользы и риска выжатого сока эхинацеи пурпурной (Echinacea purpurea) для длительной пероральной иммуностимуляции. Фитомедицина 1996;3:95-102.

    Пеппинг Дж. Эхинацея. Am J Health Syst Pharm 1999; 56:121-3. Посмотреть реферат.

    Perri D, Dugoua JJ, Mills E, Koren G. Безопасность и эффективность эхинацеи (Echinacea augustafolia, e. purpurea и e. pallida) во время беременности и кормления грудью. Can J Clin Pharmacol 2006;13:e262-7. Посмотреть реферат.

    Перри Н.Б., ван Клинк Дж.В., Берджесс Э.Дж. и др.Уровни алкамидов в эхинацеи пурпурной: последствия обработки, сушки и хранения. Планта Мед 2000;66:54-6. Посмотреть реферат.

    Пресс-релиз: Препараты на основе эхинацеи не следует применять детям младше 12 лет. Агентство по регулированию лекарственных средств и изделий медицинского назначения (Великобритания). 20 августа 2012 г. Доступно по адресу: www.mhra.gov.uk/NewsCentre/Pressreleases/CON180627. (По состоянию на 21 октября 2012 г.)

    Raus K, Pleschka S, Klein P, Schoop R, Fisher P. Эффект горячего напитка на основе эхинацеи по сравнению с осельтамивиром при лечении гриппа: рандомизированный, двойной слепой, двойной фиктивный, многоцентровый, клиническое исследование не меньшей эффективности.. Curr Ther Res Clin Exp. 2015;20;77:66-72. doi: 10.1016/j.curtheres.2015.04.001. Посмотреть реферат.

    Samuels N, Grbic JT, Saffer AJ, et al. Влияние травяного ополаскивателя для рта на предотвращение воспаления пародонта в модели экспериментального гингивита: пилотное исследование. Compend.Contin.Educ.Dent. 2012;33:204-11. Посмотреть реферат.

    Сэмюэлс Н., Саффер А., Векслер И.Д. и др. Локальное уменьшение воспаления десен с помощью местной терапии с использованием местного десневого пластыря. J.Clin.Dent.2012;23:64-7. Посмотреть реферат.

    Шаповал А., Бергер Д., Кляйн П. и др. Эхинацея/шалфей или хлоргексидин/лидокаин для лечения острых болей в горле: рандомизированное двойное слепое исследование. Eur.J Med Res 9-1-2009;14:406-12. Посмотреть реферат.

    Шооп Р. , Кляйн П., Сутер А., Джонстон С.Л. Эхинацея в профилактике простудных заболеваний, вызванных риновирусом: метаанализ. Клин Тер 2006; 28:174-83. Посмотреть реферат.

    Шредер-Аасен Т., Молден Г., Нильсен О.Г. In vitro ингибирование CYP3A4 многокомпонентным коммерческим продуктом Sambucus Force и его основными компонентами Echinacea purpurea и Sambucus nigra.Phytother Res 2012;26(11):1606-13. Посмотреть реферат.

    Шультен Б., Булитта М., Баллеринг-Брюль Б. и др. Эффективность эхинацеи пурпурной у больных простудой. Плацебо-контролируемое рандомизированное двойное слепое клиническое исследование. Arzneimittelforschung 2001;51:563-8.. Посмотреть аннотацию.

    Schwarz E, Metzler J, Diedrich JP, et al. Пероральное введение свежевыжатого сока трав эхинацеи пурпурной не стимулирует неспецифический иммунный ответ у здоровых молодых мужчин: результаты двойного слепого плацебо-контролируемого перекрестного исследования.J Immunother 2002;25:413-20.. Посмотреть реферат.

    Шах С. А., Сандер С., Уайт К.М. и др. Оценка эхинацеи для профилактики и лечения простуды: метаанализ. Lancet Infect Dis 2007;7:473-80. Посмотреть реферат.

    Сун С.Л., Кроуфорд, Род-Айленд. Рецидивирующая узловатая эритема, связанная с лечением травами эхинацеи. J Am Acad Dermatol 2001;44:298-9. Посмотреть реферат.

    Спербер С.Дж., Шах Л.П., Гилберт Р.Д. и др. Эхинацея пурпурная для профилактики экспериментальной риновирусной простуды.Clin Infect Dis 2004; 38:1367-71. Посмотреть реферат.

    Сперони Э., Говони П., Гиззарди С. и др. Противовоспалительное и заживляющее действие эхинацеи бледной. экстракт корня. Дж. Этнофармакол 2002;79:265-72. Посмотреть реферат.

    Стивенсон Д.Л., Кришнан С., Иниго М.М., Стаматикос А.Д., Гонсалес Д.Ю., Купер Д.А. Биологически активная добавка на основе эхинацеи не увеличивает максимальную аэробную способность у мужчин и женщин, тренирующихся на выносливость. Приложение J диета. 2016;13(3):324-38. дои: 10.3109/193

    .2015.1036189. Посмотреть реферат.

    Стимпел М., Прокш А., Вагнер Х. и др. Активация макрофагов и индукция цитотоксичности макрофагов очищенными полисахаридными фракциями из растения Echinacea purpurea. Infect Immun 1984;46:845-9. Посмотреть реферат.

    Taylor JA, Weber W, Standish L, et al. Эффективность и безопасность эхинацеи при лечении инфекций верхних дыхательных путей у детей: рандомизированное контролируемое исследование. JAMA 2003;290:2824-30.. Посмотреть аннотацию.

    Трагни Э., Тубаро А., Мелис С., Галли КЛ.Доказательства противовоспалительного действия натурального экстракта из двух классических тестов на раздражение, Echinacina B. Food Chem Toxicol 1985;23:317-9.. Посмотреть аннотацию.

    Тернер Р.Б., Бауэр Р., Вулкарт К. и др. Оценка Echinacea angustifolia при экспериментальных риновирусных инфекциях. N Engl J Med 2005;353:341-8. Посмотреть реферат.

    Тернер Р.Б., Райкер Д.К., Гангеми Д.Д. Неэффективность эхинацеи для профилактики экспериментальных риновирусных простуд. Противомикробные агенты Chemother 2000;44:1708-9. Посмотреть реферат.

    Veraldi S., Santambroggio A., Schianchi R., Carminati G., Benzecry V. Оральная эхинацея для профилактики рецидивов контагиозного моллюска. G Ital Dermatol Venereol. 5 октября 2020 г. doi: 10.23736/S0392-0488.20.06644-4. Посмотреть реферат.

    Вонау Б., Чард С., Мандалия С. и др. Влияет ли экстракт растения Echinacea purpurea на клиническое течение рецидивирующего генитального герпеса? Int J STD AIDS 2001;12:154-8. Посмотреть реферат.

    Валь Р.А., Олдос М.Б., Уорден К.А. и др.Эхинацея пурпурная и остеопатическое мануальное лечение у детей с рецидивирующим средним отитом: рандомизированное контролируемое исследование. BMC.Complement Altern.Med 2008; 8:56. Посмотреть реферат.

    Whitehead MT, Martin TD, Scheett TP, et al. Экономия бега и максимальное потребление кислорода после 4 недель перорального приема эхинацеи. J Прочность Cond Res 2012; 26: 1928-33. Посмотреть реферат.

    Yale SH, Glurich I. Анализ ингибирующего потенциала Ginkgo biloba, Echinacea purpurea и Serenoa repens на метаболическую активность цитохрома P450 3A4, 2D6 и 2C9. J Altern Complement Med 2005; 11: 433-9. Посмотреть реферат.

    Yale SH, Liu K. Терапия эхинацеей пурпурной для лечения простуды: рандомизированное двойное слепое плацебо-контролируемое клиническое исследование. Arch Intern Med 2004; 164: 1237-41. Посмотреть реферат.

    Зедан Х., Хофни Э.Р. и Исмаил С.А. Прополис как альтернативное лечение кожных бородавок. Int.J Dermatol 2009;48:1246-49. Посмотреть реферат.

    Эхинацея как потенциальная сила против коронавирусных инфекций? Мини-обзор рандомизированных контролируемых исследований у взрослых и детей

    1.Введение

    Зооноз описывает передачу патогенов от животных человеку, что само по себе не является новым явлением. Более ранние случаи зооноза включали передачу Yersinia pestis от грызунов-блох (чума) или лихорадку Эбола, распространяющуюся от обезьян, что привело к миллионам смертей в Европе и Африке. Респираторные вирусы, такие как грипп, неоднократно пересекали межвидовые барьеры от животных к людям, вызывая вспышки смертельных заболеваний, таких как эпидемии испанского (h2N1), азиатского (h3N2) или гонконгского (h4N2) гриппа, а также недавний птичий грипп, вызванный птичьим вирусом H5N1. 1].

    В 21 веке была отмечена еще одна зоонозная ветвь, коронавирусы, с успешно сдерживаемыми вспышками SARS-CoV в 2002/2003 гг. или ближневосточного респираторного синдрома (MERS-CoV), произошедшими с 2012 по 2015 гг. [2]. Можно проследить, что большинство коронавирусов имеют животное происхождение, тогда как верблюды, летучие мыши или циветты, вероятно, являются естественными хозяевами или переносчиками [3,4]. Существуют доказательства того, что даже русский грипп был вызван не гриппом, а штаммом коронавируса OC43 из-за его очень похожей симптоматики на текущий Covid-19 [5].Примечательно, что большинство эндемичных коронавирусов, которые мы знаем сегодня, первоначально произошли от других видов, как описано в другом месте [6]. Из-за их высокой патогенности и довольно короткого инкубационного периода предыдущие вспышки коронавируса было относительно легко обуздать, и поэтому они ограничивались ограниченными территориями. Напротив, SARS-CoV-2 гораздо сложнее сдержать из-за его способности распространяться через «молчаливые передатчики» в течение длительного инкубационного периода до 14 дней [7]. Поскольку недавно появившийся SARS-CoV-2 был классифицирован как патоген с высоким риском 29 февраля 2020 г. и достиг статуса пандемии 11 марта 2020 г., мир стремится контролировать распространение вируса [8].

    Вакцины являются высокоэффективным средством профилактики заболеваний в целом, и их разработка в настоящее время значительно сократилась. Тем не менее, от первого случая (нулевой пациент), выделения и определения вируса до крупномасштабного производства, распространения вакцин и окончательного достижения коллективного иммунитета проходит драгоценное время. По мере того, как пандемия продолжается, новые варианты SARS-CoV-2 появляются в результате неточной генетической репликации с измененным биологическим поведением и приспособленностью. Тем временем было обнаружено несколько из этих вызывающих озабоченность вариантов (VOC), которые демонстрируют по сравнению с исходным штаммом WUHAN более серьезную патогенность и потенциал уклонения от иммунного ответа (например,грамм. дельта вариант В. 1.671.2 или Омикрон В.1.1.529) [9–12].

    Поскольку профилактический потенциал вакцинации никогда не бывает полным и зависит от циркулирующих вариантов, времени иммунизации или иммунного статуса человека, потребность в новых противовирусных препаратах для сдерживания коронавирусных инфекций остается высокой [13]. Некоторые препараты и методы утверждают, что укрепляют иммунную защиту, чтобы держать в страхе и преодолевать любую потенциальную вирусную инфекцию. Несмотря на отсутствие доказательств эффективности в отношении конкретного патогена, эти препараты интенсивно потребляются.

    В 2020 году ученые размышляли, поможет ли использование минералов, витаминов или растительных препаратов для профилактики или лечения болезни Covid-19, но рекомендации в основном основывались на теоретических соображениях, эпидемиологических наблюдениях, экспериментах in vitro, а не на контролируемых интервенционных испытаниях. и поэтому оставались спекулятивными [14–17]. Эхинацея , известная как иммунная трава, пользовалась большим спросом во время нынешней пандемии, и продажи резко выросли с 2019 по 2020 год на 36. 8% в США [18]. В 2020 году Сигнер и соавт. опубликованные данные in vitro, показывающие широкую вирулицидную активность Echinacea purpurea (гидроэтанольный экстракт (65% об.) свежесобранных трав и корней Echinacea purpurea , изготовленных в соответствии с требованиями GMP) против всех видов коронавирусов, начиная от типичной простуды CoV-229E к высокопатогенным вирусам SARS-CoV-2 [19]. Клиническая значимость результатов, однако, оставалась неопределенной, поскольку непосредственный контакт возбудителя с экстрактом был предпосылкой для полной активности, что, как считалось, имело место при рассасывании таблеток/полоскании настойки в глотке.

    Помимо противовирусного действия, Эхинацея влияет на иммунную систему способом, который лучше всего описывается как адаптивная иммуномодуляция, а не чистая иммунная стимуляция. Эхинацея значительно снижала уровень воспалительных цитокинов TNF-альфа и IL-1-бета до 24% по сравнению с исходным уровнем и повышала уровень противовоспалительного цитокина IL-10. Кроме того, наблюдалось увеличение до 50% IFN-γ [20,21]. Было показано, что дополнительные иммуномодулирующие механизмы Echinacea включают мощную активацию эндоканнабиноидной системы (ECS) специфическими алкиламидами через рецептор CB2 [22,23].Некоторые из этих биоактивных N-алкиламидных принципов структурно аналогичны эндоканнабиноидам (например, анандамиду), которые влияют на среду цитокинов в цельной крови человека при низких наномолярных концентрациях [24]. Во время прогрессирования COVID-19 активация эндоканнабиноидной системы (ECS) может быть дополнительным подходом против системного воспаления и цитокинового шторма [25]. Таким образом, Echinacea может уменьшать воспалительные процессы за счет синергетического иммунофармакологического воздействия на CB-рецепторы, мягкого ингибирования амидгидролазы жирных кислот (FAAH) или переноса эндоканнабиноидов [26,27].В дополнение к иммуновоспалительным изменениям во время вирусных инфекций макрофаги и нейтрофилы могут продуцировать многочисленные АФК, включая перекись водорода (h3O2), супероксид (O2•-) и гидроксильные (OH•) радикалы, которые дополнительно активируют несколько сигнальных путей и вызывают воспаление и гибель клеток. во многих органах, включая легкие [28].

    Таким образом, доклинические исследования приписывают фармакологическое действие Echinacea , которое может быть полезным для профилактики и лечения вирусных заболеваний.Цель этого обзора состояла в том, чтобы выявить коронавирусные инфекции в клинических исследованиях эхинацеи и оценить профилактические и лечебные преимущества.

    2. Материалы и методы

    Мы провели поиск доступной литературы по MEDLINE и EMBASE с момента создания до 23 марта 2021 г., ограничиваясь исследованиями на людях, и включили все синонимы следующих терминов MeSH: Эхинацея виды ИЛИ коронавирус ИЛИ вирусные инфекции И Roter Sonnenhut или Эхинацея пурпурная ИЛИ Echinacea purpurea ИЛИ клинические исследования на людях ИЛИ инфекции дыхательных путей И термины, относящиеся к дизайну исследования (РКИ).Подробная стратегия поиска приведена в Приложении 1.

    Полученные статьи были в дальнейшем отобраны для клинических испытаний по изучению инфекций дыхательных путей у человека и выявлению респираторных вирусов независимо друг от друга с помощью SN и GG. В случае разногласий в отношении приемлемости статей между всеми авторами добивался консенсуса перед включением или отклонением. Результат исследования должен был быть представлен в виде блок-схемы в соответствии с требованиями PRISMA [29]. В случае несоответствия или отсутствия информации, для получения дополнительной информации связывались с соответствующими авторами опубликованной статьи.Европейские и американские регистры клинических испытаний, EudraCT и Clinicaltrials.gov были проверены на наличие клинических исследований Echinacea и инфекций дыхательных путей, и с исследователями связались для получения возможных результатов.

    Извлечение данных было проведено с использованием предварительно определенной формы, в которой была получена следующая информация: имя основного автора, дата публикации, страна, дизайн исследования, размер выборки, исследуемые виды растений и препарат, продолжительность лечения (профилактика или экстренное лечение), дозировка, заболеваемость коронавирусными вирусными инфекциями и концентрация вируса (значения Ct), информация о развитии симптомов (т. g., общая оценка симптомов, продолжительность эпизода, площадь под кривой и т.п.). Методологическое качество включенных исследований оценивали с использованием критериев, предложенных Джададом [30]. Результаты предоставляются для безопасности (SAF), намерения лечить (ITT) или в соответствии с протоколом (PP) популяций.

    3. Результаты

    В результате поиска в базе данных, включая PubMed и EMBASE, было идентифицировано N=1687 статей с использованием комбинации ключевых слов, которая включает термины Medical Subject Headings (MeSH)/Emtree (Embase Subject Headings).Дополнительные сведения см. в Приложении 1.

    N=988 статей были исключены при первоначальном просмотре из-за дублирования и неактуальности статей. Для полной текстовой оценки было отобрано 60 потенциально релевантных статей, из которых 58 были дополнительно исключены из-за исследований, в которых не сообщалось об инфекциях дыхательных путей или коронавирусе, видов эхинацеи , не-РКИ и исследованиях на людях (n = 57) или их комбинации Zingiber officinale и Echinacea (N=1), что подробно показано на блок-схеме PRISMA (рис. 1).Наконец, для систематического обзора были отобраны два исследования, которые соответствовали критериям приемлемости текущего исследования (таблица 1).

    Таблица 1.

    Включены исследования с подробным описанием методологии и результатов.

    Рисунок 1: Блок-схема

    PRISMA для систематических обзоров с подробным описанием поиска в базе данных, количества проверенных публикаций и извлеченных подходящих результатов.

    Из-за малого количества упомянутых исследований мы воздержались от проведения количественного метаанализа. Вместо этого мы решили качественно обсудить наблюдаемые результаты двух вкладов, которые подробно описаны ниже.

    Первое клиническое исследование было проведено Jawad et al. в Университете Кардиффа, Великобритания, в качестве двойного слепого плацебо-контролируемого моноцентрового РКИ. В течение 4 месяцев участники из Кардиффа, Уэльс, Великобритания старше 18 лет должны были применять раствор по 0,9 мл 3 раза в день. Водно-этанольный экстракт (57,3 % масс. /масс.) из свежесобранных надземных частей Echinacea purpurea до 95 % с добавлением 5 % экстракта корней Echinacea purpurea использовали из коммерческого препарата (Echinaforce® капли, A.Vogel AG, Швейцария, лицензирован там как фитопрепарат), стандартизированный до содержания 5 мг/100 г изобутиламида додекатетраеновой кислоты на основании измерений высокоэффективной жидкостной хроматографии. Это соответствовало стандартной дозировке для взрослых 2 400 мг/сутки экстракта списсума от того же производителя, из которых 1 200 мг/сутки использовались в качестве рекомендуемой дозы для детей во втором испытании. Раствор плацебо был похож по форме, цвету, консистенции, запаху, вкусу и количеству алкоголя [31]. Пациентам рекомендовалось держать лекарство во рту в течение 10 секунд перед проглатыванием.В исследовании рассматривалась частота холодных дней и эпизодов респираторных заболеваний, как это определено Jackson et al. и оценивали симптомы с помощью дневника [32]. Наряду с регистрацией симптомов пациенты должны были брать один образец из носоглотки на 3-й день каждого эпизода для идентификации респираторного патогена с помощью мультиплексной панели xTag FAST Track Multiplex Panel (Luminex, Остин, Техас). Анализ был проведен провинциальными органами здравоохранения, PHSA; Центр контроля заболеваний Британской Колумбии, Ванкувер, Канада. Были проверены следующие патогены: грипп A h2/h4, грипп B, респираторно-синцитиальный вирус, коронавирус 229E/OC43/NL63/HKU1, вирус парагриппа 1–4, метапневмовирус человека, энтеро-риновирус, аденовирус и бокавирус человека.Методологическое качество согласно Jadad et al. достиг максимального балла 5.

    В целом, N=755 субъектов были рандомизированы для получения E. purpurea или плацебо, и N=717 субъектов соответствовали критериям для анализа в соответствии с коллективной безопасностью (SAF). Сообщалось о профилактических преимуществах на уровне общего количества эпизодов простуды, кумулятивных дней простуды и повторных эпизодов. Группа Echinacea (N=355) предоставила 86 образцов из носоглотки по сравнению со 115 образцами из контрольной группы (N=362), из которых 54, соответственно.74 образца дали положительный результат на любой респираторный вирус (p = 0,0663). В 24, соотв. В 47 образцах было подтверждено наличие оболочечных вирусов, и полученное отношение шансов OR = 0,49 было рассчитано как статистически значимое (p = 0,0114, критерий X2). Первоначальная публикация, однако, не содержала дополнительной информации о коронавирусных инфекциях, которую можно было получить по переписке с авторами этого исследования: в группе Echinacea 9 обнаружений CoV-229E, 11 HKU1 и 1 OC43 в совокупности составили 21 коронавирус. инфекции (общая заболеваемость 5.9%) по сравнению с 15 обнаружениями CoV-229E, 17 с HKU1 и 1 с OC43, что составляет 33 инфекции для плацебо (общий уровень заболеваемости 9,1%). Полученная вероятность заражения была OR = 0,63, аналогичной общим результатам для кумулятивных оболочечных вирусов (OR = 0,49; 0,0114, тест X2) (рис. 2). Профилактическое воздействие на коронавирусы было статистически значимым в коллективе участников ( Эхинацея N=163 и плацебо N=165), которые активно использовали свои дневники пациентов, чтобы сообщать о нежелательных явлениях и/или симптомах, связанных с простудой (анализ подгруппы ITT). [33]).Здесь общий уровень заболеваемости 5,5% для Echinacea противопоставляется уровню 14,6% для плацебо (p = 0,010, тест X2). Значения Ct для отдельных обнаружений вируса в этом исследовании не анализировались, поэтому выводы относительно вирусной нагрузки невозможны. Хотя при использовании экстракта эхинацеи было выявлено меньше коронавирусных инфекций, средняя продолжительность эпизодов осталась неизменной: 5,8 дня [95% ДИ: 4,4–7,2] по сравнению с 5,9 днями [95% ДИ: 4,4–7,5].

    Рисунок 2.

    Эхинацея значительно предотвращала инфицирование оболочечными вирусами (синяя полоса, * p = 0.0114) и соответствующие коронавирусы 229E, HKU, NL63 и OC43 (оранжевая полоса, ♯ p>0,05) по данным Jawad et al. 2012. Профилактика коронавирусов была значимой для подгруппы ИТТ (p=0,010).

    Во втором двойном слепом многоцентровом РКИ тот же экстракт эхинацеи в таблетках давался детям в возрасте от 4 до 12 лет, проживающим в центральной Швейцарии [34]. Здесь авторы выбрали низкие дозы витамина С 3 раза по 50 мг/день в качестве контроля. Коммерческим продуктом был препарат Echinacea , подходящий для детей (таблетки Echinaforce® Junior, тот же производитель A.Vogel AG, Швейцария, также зарегистрирован там как фитопрепарат) с рекомендуемой дозой 1200 мг/сутки для детей старше 4 лет. В этом испытании приняли участие 203 практически здоровых ребенка в зимний сезон 2016/17 г., из которых N=103 были рандомизированы для приема эхинацеи 3×400 мг/сут, а N=98 – для приема витамина С 3×50 мг/сут. Препараты вводили в течение 4 мес, включая 1-недельный перерыв в лечении через 2 мес. Родители регистрировали и сообщали о симптомах у своих детей, используя проверенное руководство по подсчету баллов, разработанное Тейлором и его коллегами, и брали образец из носоглотки на 2-й день любого эпизода [35].Зонд был отправлен на анализ с помощью полуколичественной ОТ-ПЦР (Allplex Respiratory Full Panel Assay Seegene, Южная Корея) и протестирован на следующие патогены: риновирус, аденовирус, энтеровирусы, респираторно-синцитиальный вирус, вирусы гриппа и коронавирусы (229E, OC43 и NL63). ). Методологическое качество по Джададу снова было высоким на 4 балла [30].

    В целом, 57 и 72 образца были положительно протестированы на мРНК любого респираторного вируса во время профилактики эхинацеей и контроля соответственно (p=0.0074, критерий хи-квадрат). Подобно результатам, полученным у взрослых, эхинацея значительно снижала частоту оболочечных вирусных инфекций у детей с общим количеством образцов N = 29 по сравнению с контролем с N = 47, что дает значимое отношение шансов OR = 0,43 (p = 0,0038, хи-квадрат). тестовое задание). Опять же, информация, касающаяся подтипов коронавируса, была получена от авторов исследования: заболеваемость коронавирусом с 13 и 11 положительными образцами в выборке с намерением лечить незначительно различалась между вмешательствами (p>0.1). Два эпизода CoV в каждой группе уже существовали при посещении включения и не учитывались для анализа профилактики, а для оценки преимуществ лечения. В отличие от более раннего исследования Jawad et al., здесь значения Ct были определены для соответствующих тестов на заболеваемость, оценивая количество копий РНК как меру концентрации вируса в образце из носоглотки. Чем выше значение Ct, тем ниже вирусная нагрузка, представленная уровнем РНК в образце. Эхинацея значительно увеличила среднее значение Ct на 6.1 Ct единиц от 25,0 [95% ДИ: 20,5; 29,5] до 31,1 [95% ДИ: 26,3; 35,9], что указывает на сильное, -1,81 log или 98,5% снижение концентрации коронавируса (p = 0,0479, критерий Уилкоксона) по сравнению с витамином C. Аналогичные значения ΔmCt 5,53 и 11,92 наблюдались для вариантов NL63 и OC43, что соответствует логарифмическому снижению вируса на -1,67 и -3,59 (рис. 3), что соответствует абсолютному снижению вируса на 97,8% и 99,97%.

    Рисунок 3:

    Профилактическое лечение детей значительно снизило концентрацию коронавируса в носоглотке на 98.5% по сравнению с контролем (витамин С, р<0,05).

    3.1. Рисунки, таблицы и схемы

    Далее мы проанализировали симптоматическое развитие подтвержденных коронавирусных инфекций у детей, получавших эхинацею или в контроле. С этой целью была составлена ​​агрегированная общая сумма симптомов: «насморк», «заложенность носа», «чихание», «головная боль и ломота в конечностях», «боль в горле», «кашель», «зябкость», «нарушение сна». качество ребенка», «недомогание», «потребность в дополнительном уходе», каждое из которых оценивалось как «отсутствует», «легкая», «умеренная», «тяжелая» или «тяжесть не поддающаяся оценке».Площадь под кривой (AUC) показала сильное снижение на 64,2% с 75,8 [95% ДИ: 39,8–111,7] до 27,1 [95% ДИ: 14,8–39,4] баллов у детей, получавших добавки с эхинацеей (p = 0,0036). . Результаты представлены для коллектива с намерением лечить (ITT), но не изменились соответствующим образом в группе по протоколу (PP). Судя по всему, коронавирусные инфекции во время профилактики Echinaforce были значительно менее тяжелыми с самого первого дня эпизода до конца 10-дневной оценки.

    4. Обсуждение

    Эхинацея имеет давнюю традицию профилактики и неотложного лечения инфекций дыхательных путей, а недавние исследования приписывают лекарственному растению противовирусное, иммуномодулирующее и противовоспалительное фармакологические действия [20,26,36–38 ].Было показано, что широкий ряд респираторных вирусов чувствителен к липофильным экстрактам свежесобранных Echinacea purpurea , и можно было подтвердить очевидную специфичность к оболочечным патогенам [39]. Экстракт, по-видимому, блокирует взаимодействие вирусных стыковочных рецепторов (например, гемагглютинина при гриппе) со структурами клетки-мишени и, таким образом, ожидается, что он предотвратит инфекцию, хотя подробный механизм действия еще предстоит выяснить [37]. Противовирусное действие на эндемичные коронавирусы, вызывающие типичные симптомы простуды (CoV-229E), и на высокопатогенные типы SARS-CoV-1 и MERS-CoV изучались in vitro в течение нескольких лет вплоть до недавнего времени.Эти эффекты также могут быть подтверждены для недавно возникшего SARS-CoV-2 [19]. Сигнер и др. пришли к выводу об общеприменимом принципе действия против коронавирусов, но указали, что для подтверждения их выводов in vitro необходимы клинические данные. Эта работа была направлена ​​на сбор любых доказательств активности in vivo против коронавирусных инфекций из уже опубликованных клинических исследований.

    Несмотря на большое количество клинических испытаний эхинацеи, мы выявили только два клинических исследования, в которых собирали образцы из носоглотки для тестирования на вирус [31,34]. Оба исследования точно описывают ослепление, рандомизацию, должным образом контролируются и относятся к набору данных почти 1000 пациентов, получавших в течение 4 месяцев либо настойку, либо таблетки из одного и того же 65% (об./об.) этанольного экстракта из Echinacea purpurea . Из-за небольшого количества включенных исследований мы воздержались от объединения результатов, но качественно описали результаты исследований.

    Профилактическое противовирусное действие эхинацеи при коронавирусных инфекциях наблюдалось в обоих исследованиях по разным параметрам.4-месячный прием эхинацеи у взрослых и детей снижал заболеваемость коронавирусами за счет влияния на оболочечную вирусную инфекцию и концентрацию вируса в носоглотке у последних соответственно. Джавад не измерял концентрации вируса (значение Ct), поэтому эта информация отсутствовала. Огал использовал более новый, более чувствительный метод обнаружения, который смог обнаружить всего лишь 100 копий вирусного генома. Мы предполагаем, что противовирусные эффекты эхинацеи в целом уменьшали количество вирусов, которые в исследовании Jawad подавлялись ниже пределов обнаружения, что приводило к снижению заболеваемости эхинацеей, а в исследовании Ogal et al. привело к более низким значениям Ct, поскольку даже остаточные субклинические концентрации вируса все еще можно было идентифицировать.

    Интересно, что профилактика с помощью эхинацеи уменьшала развитие симптомов только у детей, а не у взрослых. Джавад и др. не брали образцы постоянно, а только при симптоматических инфекциях, и могли пропустить потенциальные субклинические инфекции с verum по вышеуказанным причинам. Таким образом, снижение заболеваемости (как в случае с эхинацеей) автоматически приведет к пропущенным эпизодам с отсутствием или слабой симптоматикой и искажает любую оценку на этом уровне.Напротив, низкий предел обнаружения вируса у Ogal et al. могли бы выявить более легкие/субклинические эпизоды, которые могли бы еще больше уменьшить симптомы при лечении эхинацеей у взрослых, как это наблюдается у детей. В этом отношении заболеваемость (выявления) и симптоматика/значения Ct должны рассматриваться как дополнительные параметры, указывающие на противовирусные эффекты эхинацеи. Принимая это во внимание, мы делаем вывод, что профилактическое лечение эхинацеей оказывает благотворное влияние на коронавирусную инфекцию как у взрослых, так и у детей.В предшествующей инфекции можно было предотвратить, тогда как у детей наблюдалось значительное снижение вирусной нагрузки, уменьшение симптомов, а также сокращение продолжительности болезни. В обоих случаях профилактические эффекты эхинацеи против коронавирусов можно было установить в контролируемых клинических условиях.

    Ни в одном из упомянутых исследований не был обнаружен вновь появившийся SARS-CoV-2, а были обнаружены только эндемичные штаммы коронавируса, поскольку оба были проведены до 2019 года. на поддержку иммунитета растительными препаратами в наши дни и важно дать оценку на основании доказательств.

    Все коронавирусы имеют структурное сходство, например особенность оболочечной мембраны, охватывающей генетический материал, то есть РНК и шиповидные белки для прикрепления к клеткам-мишеням. Эхинацея, с другой стороны, широко ингибирует оболочечные респираторные вирусы в физиологических концентрациях in vitro и in vivo, тогда как точный механизм действия еще предстоит выяснить. Благодаря этому широкому спектру активности, деактивируя все измеренные типы коронавирусов, включая альфа-(CoV-229E) и бета-штаммы (MERS-CoV, SARS-CoV-1, SARS-CoV-2), можно реально предположить общеприменимое ингибирование. и текущие результаты этого исследования указывают на клиническую значимость результатов in vitro.Хотя не всегда достигая статистической значимости для конкретного вируса, эффекты эхинацеи против коронавирусов отражают и перекрывают эффекты, наблюдаемые против мембранных вирусов.

    Кроме того, на сайте Clinictrials.gov было обнаружено завершенное дополнительное клиническое исследование (ID: NCT05002179), в котором изучался препарат Echinacea purpurea из свежих трав в дозах 2400–4000 мг/сут экстракта в день в течение 5 месяцев в течение 5 месяцев. по сравнению с отсутствием лечения.Тот же препарат, что и в Ogal et al. использовался, но в рекомендованной дозировке для взрослых. Исследование проводилось с участием N = 120 взрослых с ноября 2020 года по май 2021 года, и у них регулярно собирались образцы назо-/ротоглотки/крови для выявления респираторных вирусных инфекций, включая SARS-CoV-2. Результаты свидетельствуют о значительно сниженном риске заражения SARS-CoV-2, измеренном либо по симптоматическому заболеванию Covid-19, либо по положительному образцу RT-PCR, либо по сероконверсии. Суммируя все этапы профилактики, 21 и 29 образцов дали положительный результат на любой вирус в группе Echinacea и контрольной группе, из которых 5 и 14 образцов дали положительный результат на SARS-CoV-2 (RR=0.37, критерий хи-квадрат, р=0,03). Всего произошло 10 и 14 симптоматических эпизодов, из которых 5 и 8 были связаны с COVID-19 (RR=0,70, критерий хи-квадрат, p>0,05). Лечение ЭФ при применении во время острых эпизодов значительно снижало общую вирусную нагрузку по крайней мере на 2,12 log10 или прибл. 99% (t-тест, p<0,05), время до элиминации на 8,0 дней для всех вирусов (критерий Вилкоксона, p=0,02) и на 4,8 дня для SARS-CoV-2 (p>0,05) по сравнению с контролем . Наконец, лечение эхинацеей значительно сократило число дней с лихорадкой (1 день по сравнению с 3 днями). 11 дней, тест Хи-квадрат, р=0,003) [40].

    Результаты еще ожидают публикации в рецензируемом журнале, и к ним следует относиться с соответствующей осторожностью. Тем не менее они были упомянуты в текущем обзоре для полноты картины и потому, что они, кажется, подтверждают применимость противовирусных преимуществ эхинацеи к широкому спектру коронавирусов, включая SARS-CoV-2.

    Несмотря на ограничения, связанные с этим обзором (например, небольшое количество исследований), мы считаем, что наши результаты очень актуальны, поскольку они дают довольно последовательную картину противовирусных и профилактических преимуществ эхинацеи при коронавирусных инфекциях в целом.Кроме того, они имеют важное значение для профилактического использования эхинацеи во время эпидемии Covid-19. Снижение нагрузки коронавирусом имеет большое значение с медицинской точки зрения, поскольку концентрации вируса, по-видимому, коррелируют с передачей в сообществе, влияют на тяжесть и прогрессирование заболевания у взрослых и детей [41–44]. Два клинических исследования показали более чем 98,5% снижение концентрации коронавируса в выделениях из носа, полученных от детей и взрослых, получавших эхинацею. До сих пор отсутствуют доказательства того, что вакцины значительно снижают вирусную нагрузку, особенно дельта-варианта SARS-CoV-2, и этот актив мог бы стать решающим аргументом в пользу использования эхинацеи во время пандемии Covid-19.

    Примечательно, что во всех цитируемых исследованиях применялся один и тот же экстракт Echinacea purpurea (Echinaforce®) либо в виде разбавленной настойки, либо в виде таблеток, которые некоторое время держали во рту перед проглатыванием. Как уже предположили Signer et al., глоточное введение экстракта может быть ключом к инактивации респираторных вирусов в основном месте проникновения до заражения [19]. Кроме того, может ли любое ослабление вируса в этой области предотвратить дальнейшее распространение назальных инфекций в легкие, как это наблюдается при тяжелом прогрессировании Covid-19. Действительно, недавний метаанализ показал значительную профилактику пневмонии, вторичной по отношению к вирусным инфекциям дыхательных путей, при профилактике эхинацеей в течение 2–4 месяцев [45].

    (PDF) Фармакотерапия эхинацеи пурпурной: Садовая полка в клинику

    J Pharm Educ Res Vol. 2, выпуск № 2, декабрь 2011 г.

    53

    40. Luettig B, Steinmuller C, Gifford GE, Wagner H, Lohmann-

    Ma tth es ML. Активация макрофагов

    полисахаридом арабиногалактаном, выделенным из растительных клеток

    культур E.пурпурный. J Natl Cancer Inst 1989; 81(9):669–

    75.

    41. Рамасахаям С., Барака Х.Н., Абдель Бар Ф.М., Абуасал Б.С.,

    Видрлехнер М.П., ​​Эль Сайед К.А., Мейер С.А. Влияние

    химически охарактеризованных фракций из надземных частей

    Echinacea purpurea и E. angustifolia на миелопоэз

    у крыс. Планта Мед 2011; 77 (17): 1883-9.

    42. Хаксари Махабади М., Ранджбар Р., Арзи А., Папахн А.А.,

    Наджафзаде Х. Сравнительное исследование эффектов экстракта эхинацеи

    и левамизола на вызванную фенитоином расщелину неба

    у мышей. Регул Токсикол Фармакол 2006; 46:163-166.

    43. Дженсен А.Г., Хансен С.Х., Нильсен Э.О. Адгиперфорин как

    участник эффекта зверобоя продырявленного в

    биохимических моделях антидепрессивной активности. Life Sci

    2001; 68(14):1593-1605.

    44. Садиг-Этегад С., Хаят-Нури Х., Абади Н., Гавами С.,

    Голаби М., Шанебанди Д.Синергетические эффекты перорального

    введения левамизола и эхинацеи пурпурной на

    иммунный ответ у крыс Wistar. Ветнауки 2011 г.; 91(1):82-

    5.

    45. Hájos N, Holdith N, Németh B, Papp OI, Szabó GG,

    Zemankovics R, Freund TF, Haller J. Влияние препарата эхинацеи

    на Синаптическая передача и

    огневые свойства пирамидных клеток C A1 в

    гиппокампе.Phytother Res 2011, 30 июня. doi: 10.1002/

    ptr.3556.

    46. Turner RB, Bauer R, Woelkart K, et al. Оценка E.

    purpurea angustifolia в экспериментальных инфекциях, вызванных вирусом al rhino

    . N Engl J Med 2005; 353:341-348.

    47. Pleschka S, Stein M, Schoop R, Hudson J. Противовирусные

    свойства и механизм действия

    Стандартизированный экстракт E. purpurea против высокопатогенных

    происхождение h2N1

    (S-OIV).Вирол Дж. 2009; 6:197.

    48. Szyszko E, Brokstad K, Cox R, Hovden A, Madhun A,

    Haaheim L. Влияние состава вакцины против гриппа с подробным анализом цитокинового ответа

    . S c и J

    Immunol 2006; 64: 467–75.

    49. Ichinohe T, Lee HK, Ogura Y, Flavell R, Iwasaki A.

    Распознавание вируса гриппа инфламмасомами необходимо

    для адаптивных иммунных реакций. J Exp Med 2009; 206:79–

    87.

    50. Van der Sluijs K, van Elden L, Nijhuis M, Schuurman R,

    Pater J, Florquin S, et al. ИЛ-10 является важным медиатором

    повышенной восприимчивости к пневмококковой пневмонии

    после перенесенной гриппозной инфекции. Дж Иммунол 2004; 172:7603.

    51. Barrett BP, Brown RL, Locken K, Maberry R, ​​Bobula JA,

    D’Alessio D. Лечение простуды с

    неочищенный E. purpurea: рандомизированный, двойной слепой ,

    плацебо-контролируемое исследование.Энн Интерн Мед 2002; 137:939–

    46.

    52. Melchart D, Walther E, Linde K, Brandmaier R, Lersch C.

    Экстракт корня E. purpurea для профилактики инфекций верхних дыхательных путей

    : плацебо-

    контролируемое рандомизированное исследование. Arch Fam Med 1998; 7: 541–5.

    53. Линденмут Г.Ф., Линденмут Э.Б. Эффективность Э.

    состав препарата из травяного чая purpurea на тяжесть

    и продолжительность симптомов верхних дыхательных путей и гриппа:

    рандомизированное двойное слепое плацебо-контролируемое исследование.J Altern

    Complement Med 2000; 6:327– 34.

    54. Melchart D, Linde K, Fischer P, Kaesmayr J. E. purpurea

    для профилактики и лечения простуды. [Обзор]

    Cochrane Database Syst Rev 2000; (2):CD000530.

    55. Isbaniah F, Wiyono WH, Yunus F, Setiawati A, Totzke U,

    Verbruggen MA. Эхинацея пурпурная вместе с цинком,

    селеном и витамином С для облегчения обострений хронической

    обструктивной болезни легких: результаты рандомизированного

    контролируемого исследования.J Clin Pharm Ther 2011; 36(5):568-76.

    56. Mainous III Arch G. E. purpurea неэффективен при

    инфекциях верхних дыхательных путей у детей. Доказательная база

    Здравоохранение 2004; 8: 165–167.

    57. Штимпель М., Прокш А., Вагнер Х., Ломанн-Маттес М.Л.

    Активация макрофагов и индукция цитотоксичности макрофагов

    очищенными полисахаридными фракциями из

    растения E. purpurea. Инфект Иммун 1984; 46(3):845–9.

    58. Брукс Г.Ф., Бутел Дж.С., Орнстон Л.Н., ред. Джавец, Мельник и

    Медицинская микробиология Адельберга. 19 изд. Норуолк, Коннектикут:

    Appleton & Lange; 1991.

    59. Busse WW, Lemanske RF Jr, Dick EC. Взаимосвязь

    вирусных респираторных инфекций и астмы. Грудь 199 2;

    101:3855-3885.

    60. Шарма М., Шуп Р., Хадсон Дж.Б. Эффективность эхинацеи

    в трехмерной модели ткани эпителия дыхательных путей человека.Phytother

    Res 2010; 24(6):900-4.

    61. Caruso TJ, Gwaltney JM Jr. Лечение простуды

    с помощью E. purpurea: структурированный обзор. Clin Infect Dis 2005;

    40:807-810.

    62. Barnes J, Anderson L, Phillipson D. Herbal Medicines 2nd

    Edition. Лондон: Фармацевтическая пресса; 2002.

    63. Melchart D, Linde K, Fischer P, Kaesmayr J. Echinacea для профилактики и лечения простуды

    (обзор Co ch ra ne

    ).В: Кокрановская библиотека, выпуск 2, 2004 г. John Wiley

    & Sins, Чичестер, Великобритания.

    Супер настойка эхинацеи — Healing Waters Clinic & Herb Shop

    Herb Pharm Настойка супер эхинацеи

    Herb Pharm Super Echinacea Tincture представляет собой смесь экстрактов эхинацеи, предназначенную для более полного представления преимуществ эхинацеи. Усилитель иммунной системы и детоксикант.*

    Супер настойка эхинацеи представляет собой экстракт широкого спектра действия, содержащий водорастворимые и спирторастворимые иммуномодулирующие компоненты эхинацеи.

    Настойка

    Super Echinacea представляет собой запатентованную смесь экстрактов корня эхинацеи, семян эхинацеи, листьев и цветков эхинацеи. Листья и цветы сертифицированных органических растений эхинацеи пурпурной собирают летом на наших собственных фермах. Мы собираем семена и укореняем каждую осень. Корень, семена, листья и цветы извлекаются отдельно в соответствии с их уникальными биохимическими профилями, а затем смешиваются для получения формулы широкого спектра действия.

    Ботаническое название: Эхинацея пурпурная
    Традиционное использование: Поддерживает здоровую функцию иммунной системы.Обеспечивает комплексную, глубокую поддержку иммунной системы как в краткосрочной, так и в долгосрочной перспективе.*
    Экстрагированные части растений:

    • Корень эхинацеи (Echinacea purpurea) Сертифицированный органический, свежий и сочный
    • Лист и цветок эхинацеи (Echinacea purpurea) Сертифицированный органический, свежий и сочный
    • Семена эхинацеи (Echinacea purpurea) Сертифицированный органический продукт
    • Другие ингредиенты: Сертифицированный органический зерновой спирт и дистиллированная вода.

    Herb Pharm использует свежесобранный Echiancea purpurea сертифицирован как органически выращенный на нашей собственной ферме и собранный с оптимальной эффективностью.

    Трава экстрагируется небольшими партиями с сертифицированным органическим тростниковым спиртом для поддержания баланса фитохимических веществ, присутствующих в растении. Herb Pharm подтверждает идентичность трав с помощью макроскопического и органолептического анализа, а затем они подтверждают ее с помощью таких методов, как ВЭТСХ, специфичных для каждой травы.Жидкие экстракты Herb Pharm легко дозируются, принимаются в жидкой форме и добавляются в воду или другую жидкость.

    Внимание! Хранить в недоступном для детей месте.

    *Эти утверждения не были оценены Управлением по санитарному надзору за качеством пищевых продуктов и медикаментов. Этот продукт не предназначен для диагностики, лечения, излечения или предотвращения каких-либо заболеваний.

    Только зарегистрированные клиенты, которые приобрели этот продукт, могут оставить отзыв.

    Эхинацея узколистная – обзор

    Десять наиболее часто используемых пищевых добавок

    Эхинацея

    Эхинацея ( Эхинацея пурпурная, Эхинацея узколистная, Эхинацея бледная ) обычно используется для профилактики простуды и других инфекций дыхательных путей.Перорально он также используется в качестве антисептика, противовирусного и иммуностимулятора. Он часто встречается в комбинированных препаратах с другими витаминами, травами и минералами. В настоящее время нет сообщений о документальном влиянии эхинацеи на гемостаз.

    Женьшень

    Еще одна очень популярная пищевая добавка, женьшень, встречается отдельно, в комбинированных добавках и в популярных энергетических напитках. Потребителям доступны два распространенных вида — американский женьшень ( Panax quinquefolius ) и азиатский или китайский женьшень ( Panax ginseng ). Сибирский женьшень ( Eleutherococcus senticosus ), также доступный на рынке, не является настоящим женьшенем (т. Все три используются в качестве общеукрепляющего средства для улучшения самочувствия, повышения устойчивости к стрессам окружающей среды и повышения физической выносливости. Не сообщалось, что элеутерококк влияет на гемостаз или взаимодействует с антикоагулянтами.

    При приеме отдельно американский или азиатский женьшень может увеличить риск кровотечения из-за своей антитромбоцитарной активности. 5 При приеме американского или азиатского женьшеня с варфарином может наблюдаться изменение международного нормализованного отношения (МНО). Сообщалось как о снижении, так и о повышении МНО; однако наиболее часто сообщаемым эффектом является снижение эффективности варфарина. 6,7 В рандомизированном контролируемом исследовании, проведенном Юанем и его коллегами, 8 Американский женьшень, вводимый в течение 2 недель субъектам, принимающим варфарин, значительно снижал МНО по сравнению с плацебо. Однако исследование фармакокинетики на крысах не выявило изменений уровней варфарина и влияния на протромбиновое время после 90–251 P.вводили женьшень . 9 Хотя эти травы родственны, они содержат разные компоненты, что может частично объяснить различия, отмеченные в лабораторных данных.

    Гинкго

    Гинкго двулопастный обычно принимают для облегчения слабоумия и потери памяти, нарушений настроения, трудностей с концентрацией внимания и сексуальной дисфункции. Было показано, что гинкго снижает функцию тромбоцитов, подавляя агрегацию тромбоцитов. 10 Сообщения о четырех отдельных случаях показали, что спонтанное кровотечение может быть связано с употреблением гинкго. 7,11 Тем не менее, проспективное двойное слепое рандомизированное плацебо-контролируемое исследование было проведено с участием 32 молодых здоровых добровольцев мужского пола в качестве средства оценки эффектов трех доз гинкго (120, 240 и 480 мг). в сутки) на гемостаз, коагуляцию и фибринолиз. После 14 дней приема гинкго не вызывал значительных изменений времени кровотечения, функции тромбоцитов или факторов свертывания при любой дозировке по сравнению с плацебо. 12 В сочетании с варфарином наблюдается повышенный риск кровотечения из-за влияния растения на функцию тромбоцитов.Однако недавнее исследование на здоровых взрослых показало, что гинкго при приеме в рекомендуемых дозах не изменял МНО, фармакокинетику или фармакодинамику варфарина, когда пациентам давали однократную большую дозу варфарина (25 мг) после 1 недели предварительного лечения с помощью гинкго. 13 Kohler и коллеги, 14 , используя 50 здоровых мужчин-добровольцев, не смогли найти доказательств, указывающих на какое-либо влияние гинкго на функцию тромбоцитов у этих субъектов. В настоящее время истинное влияние гинкго на гемостаз или взаимодействие с варфарином неясно.

    Чеснок

    Чеснок ( Allium sativum ) используется в качестве ароматизатора в пищевых продуктах и ​​рекламируется как пищевая добавка для лечения пациентов с гипертонией и гиперлипидемией, а также для профилактики сердечно-сосудистых заболеваний. Чеснок используется для предотвращения различных видов рака, включая колоректальный рак, рак желудка, молочной железы и простаты. В нескольких исследованиях было показано, что прием чеснока ингибирует агрегацию тромбоцитов, что, возможно, объясняет обоснование его использования для профилактики сердечно-сосудистых заболеваний. 15–17 После 26 недель употребления чеснока у здоровых мужчин-добровольцев, которые ежедневно употребляли 3 г (примерно 1 зубчик) свежего чеснока, наблюдалось примерно 80-процентное снижение уровня тромбоксана в сыворотке крови. 18 Приготовленный чеснок оказывает более слабое ингибирующее действие на агрегацию тромбоцитов, чем сырой чеснок. 19 Случаи послеоперационного кровотечения во время увеличивающей маммопластики 20 и трансуретральной резекции предстательной железы 21 были зарегистрированы у пациентов, принимавших чеснок до операции.Сообщалось также о спонтанной эпидуральной гематоме позвоночника. 22 Отсутствуют доказательства прямого взаимодействия варфарина с чесноком. Небольшое контролируемое исследование не выявило каких-либо значительных изменений значений МНО среди пациентов, стабилизировавшихся на терапии варфарином (целевое значение МНО от 2 до 3), которые начали принимать 1200 мг экстракта старого чеснока (AGE) в течение 2 месяцев по сравнению с группой плацебо. . 23

    Глюкозамин

    Иногда продается в сочетании с хондроитинсульфатом, глюкозамин широко продается как средство от артрита; это полезно для остеоартрита и артрита височно-нижнечелюстного сустава.Мета-анализ подтвердил утверждения о том, что глюкозамин, по крайней мере, умеренно эффективен при использовании для облегчения симптомов остеоартрита. 24 Хотя о случаях спонтанного кровотечения или взаимодействия с антитромбоцитарными препаратами не сообщалось, в одном отчете описывается возможное взаимодействие с варфарином. 25 У пациента, который получал стабильную дозу варфарина с терапевтическими значениями МНО, развились сверхтерапевтические значения после 4 недель приема добавки глюкозамин-хондроитин (3000 мг глюкозамина и 2400 мг хондроитина в день). 23 Возможно, что усиление эффекта варфарина было связано с глюкозамином, хондроитином или обоими при приеме в дозах, превышающих рекомендуемые. 26 Рекомендуемые суточные дозы составляют 1500 мг глюкозамина в день и до 1200 мг хондроитина в день. 6

    Зверобой

    Зверобой ( Hypericum perforatum ) принимают при депрессии, тревоге, обсессивно-компульсивном расстройстве, синдроме дефицита внимания-гиперактивности и других расстройствах настроения.Сообщалось о нерегулярных менструальных кровотечениях и прорывных кровотечениях у женщин, принимавших зверобой одновременно с пероральными контрацептивами. 27 Клинические испытания подтвердили это открытие и предполагают, что учащение прорывных кровотечений связано с индукцией активности фермента цитохрома P450 3A, что приводит к индукции метаболизма пероральных контрацептивов и снижению эффективности контрацептивов. 28,29 Известно, что зверобой снижает действие варфарина и связан со снижением МНО. Варфарин связывается с некоторыми компонентами зверобоя продырявленного in vitro, что может снижать биодоступность варфарина. 30 Зверобой также индуцирует метаболизм и клиренс варфарина в системе цитохрома Р450. 31 Снижение МНО у пациентов, которые стабильно принимают варфарин, предполагает возможную индукцию цитохрома P450 2C9. 32

    Мята перечная

    Листья мяты перечной ( Mentha piperita X) или масло используются при диспепсии, простуде, кашле, тошноте, синдроме раздраженного кишечника и головной боли напряжения.Не сообщалось, что это растение изменяет гемостаз или взаимодействует с антикоагулянтами или антитромбоцитарными препаратами.

    Рыбий жир/Омега-3 жирные кислоты

    Рыбий жир принимают перорально для лечения пациентов с гипертриглицеридемией, ишемической болезнью сердца, гипертонией, возрастной макулопатией, биполярным расстройством, ожирением, инсультом, ревматоидным артритом и различными другими заболеваниями. . Рыбий жир обычно получают из холодноводной рыбы, такой как сельдь, скумбрия, сардина, форель или лосось.Масла имеют высокую концентрацию длинноцепочечных полиненасыщенных жиров, называемых омега-3 жирными кислотами. Омега-3 жирные кислоты, полученные из рыбьего жира, обладают противовоспалительными и антитромботическими свойствами, поскольку они конкурируют с арахидоновой кислотой в циклооксигеназном и липоксигеназном путях метаболизма тромбоцитов. Омега-3 жирные кислоты уменьшают агрегацию тромбоцитов. 33,34 Некоторые данные свидетельствуют о том, что чрезмерное потребление рыбьего жира может увеличить риск геморрагического инсульта. 35,36 Рандомизированное плацебо-контролируемое исследование 11 пациентов, получавших хроническую антикоагулянтную терапию варфарином, не выявило изменений значений МНО после того, как они принимали 3 или 6 г рыбьего жира ежедневно в течение 4 недель. 37 Со времени проведения этого исследования сообщалось об увеличении МНО после того, как пациентка, длительно принимающая антикоагулянты варфарина, удвоила дозу рыбьего жира со 1000 мг до 2000 мг в день. 38

    Имбирь

    Перорально имбирь ( Zingiber officinale ) используется при тошноте, головокружении, диспепсии, артрите, потере аппетита и мигрени. Считается, что имбирь снижает агрегацию тромбоцитов через путь арахидоновой кислоты. 11,39,40 В одном исследовании сообщалось о снижении уровня тромбоксана в сыворотке B 2 при пероральном введении имбиря крысам. 41 Учитывая это потенциальное антитромботическое свойство, имбирь следует использовать с осторожностью у пациентов, принимающих антитромбоцитарные препараты. При приеме с варфарином это растение может привести к усилению эффекта варфарина и повышению МНО. В опубликованном отчете о клиническом случае описывается 76-летняя женщина, длительно получавшая антикоагулянтную терапию варфарином, у которой значения МНО стали выше терапевтических после того, как она начала употреблять сырой имбирь и чай, приготовленный из имбирного порошка. 42 Ее INR вернулся к стабильным значениям после того, как она прекратила прием травы. Повышение МНО в результате начала употребления имбирных продуктов было задокументировано у другого пациента, длительно принимающего фенпрокумон, 43 пероральный ингибитор витамина К из класса препаратов кумарина. В недавнем клиническом исследовании 12 пациентов предварительно лечили имбирем в течение 1 недели в рекомендованных суточных дозах. 13 Затем пациентам была назначена однократная доза 25 мг варфарина. Не было обнаружено связи между потреблением имбиря и МНО или фармакокинетикой и фармакодинамикой варфарина.

    Соя

    Соевые бобы ( Glycine max ) являются наиболее важным пищевым источником изофлавонов, которые представляют собой встречающиеся в природе растительные соединения, обычно называемые «фитоэстрогенами» и названные в честь их сходства по структуре с молекулой эстрогена и способности связываться с эстрогеновый рецептор. 5,44 Фитоэстрогены рекламируются как терапевтическая альтернатива при различных гормонозависимых состояниях, включая рак молочной железы и предстательной железы, симптомы менопаузы, остеопороз и сердечно-сосудистые заболевания.

    Вопрос о том, влияет ли соя на параметры свертывания крови, остается спорным. Дент и его коллеги 45 обнаружили, что 40 г соевого белка не изменяют фибринолитические факторы или факторы свертывания крови у женщин в перименопаузе. Однако в исследованиях на животных и in vitro было обнаружено, что соя и изофлавоны сои потенциально ингибируют агрегацию тромбоцитов. 46–49 Schoene and Guidry 46 продемонстрировали, что при скармливании богатого изофлавонами соевого белка (содержащего 1,45 мг на грамм изофлавонового генистеина) у крыс развивались изменения функции тромбоцитов, которые могли приводить к снижению активации и агрегации тромбоцитов. .При приеме в сочетании с варфарином соя может снижать антикоагулянтный эффект и МНО. 50

    Растительные добавки

    Что такое травяные добавки?

    Травяные добавки — это продукты, полученные из растений и/или их масел, корней, семян, ягод или цветов. Травяные добавки использовались на протяжении многих веков. Считается, что они обладают целебными свойствами.

    Каковы формы травяных добавок?

    Травяные продукты выпускаются в различных формах и могут применяться внутрь или наружно.Формы растительных продуктов включают:

    • Жидкие экстракты.
    • Чаи.
    • Таблетки и капсулы.
    • Соли для ванн.
    • Масла.
    • Мази.

    Каковы некоторые распространенные травяные добавки и их применение?

    Существует множество травяных добавок, которые можно использовать по-разному. Ниже приведены некоторые из наиболее распространенных:

    Алоэ Вера : применяется местно при ожогах, псориазе и остеоартрите. Используется в пероральной форме при проблемах с пищеварением, таких как гастрит или запор.

    Черный кохош: используется для лечения приливов, ночной потливости, сухости влагалища и симптомов менопаузы.

    Ромашка: используется для лечения бессонницы, беспокойства, расстройства желудка, газов и диареи. Он также используется местно при кожных заболеваниях. Осторожно людям с аллергией на амброзию.

    Эхинацея: используется для борьбы с симптомами простуды и гриппа.

    Льняное семя: используется для снижения уровня холестерина. Хороший источник клетчатки и омега-3 жирных кислот.

    Гинко: используется для лечения проблем с памятью и шума в ушах (звон в ушах). Может использоваться вместе с антидепрессантами, селективными ингибиторами обратного захвата серотонина (СИОЗС), для повышения полового влечения и сексуальной активности у людей, у которых есть побочные эффекты от приема антидепрессантов. Осторожность у людей, принимающих препараты для разжижения крови.

    Масло перечной мяты: используется для лечения проблем с пищеварением, таких как тошнота, расстройство желудка, проблемы с желудком и кишечные расстройства.

    Соя: используется для лечения симптомов менопаузы, проблем с памятью и высокого уровня холестерина. Органические, цельные соевые продукты предпочтительнее, чем соевые добавки и обработанные соевые продукты, такие как соевые хот-доги.

    Зверобой: используется для лечения депрессии, беспокойства и нарушений сна. ПРИМЕЧАНИЕ. Эта трава имеет много других взаимодействий с лекарствами и травами. Проконсультируйтесь с вашим лечащим врачом, прежде чем начать принимать эту добавку.

    Масло чайного дерева: используется местно для лечения нескольких заболеваний, включая акне, микоз, грибок ногтей, раны, инфекции, вши, молочницу, герпес и перхоть.

    Насколько популярны травяные добавки?

    Травяные добавки широко используются в Соединенных Штатах. В исследовании Центров по контролю за заболеваниями говорится, что более половины людей в стране ежедневно принимают травяные добавки.

    Безопасны ли растительные добавки?

    Закон о санитарном просвещении в области диетических добавок от октября 1994 г. не требует от производителей продуктов растительного происхождения доказывать, что их продукты безопасны или эффективны, прежде чем они будут выпущены на рынок. Однако Управление по санитарному надзору за качеством пищевых продуктов и медикаментов (FDA) несет ответственность за контроль безопасности продукта после того, как он стал доступен для потребителей.

    Во многих случаях люди используют травяные добавки с прописанными лекарствами. Это может привести к серьезным проблемам со здоровьем из-за лекарственного взаимодействия. Всегда консультируйтесь со своим лечащим врачом, прежде чем начать использовать травяную добавку.

    Если вы принимаете аспирин, дигоксин, диуретики, гипогликемические средства, нестероидные противовоспалительные препараты, спиронолактон или варфарин, НЕ ПРИНИМАЙТЕ растительные добавки без предварительной консультации с врачом.

    Название REMEDY использует риски
    Ephedra (Ephedra Sinica, также называемые Ma-Huang) для лечения кашля и ожирения давление. Имеет потенциально фатальные взаимодействия со многими сердечными препаратами.
    Чеснок (Allium sativum) Для снижения уровня холестерина; для профилактики и лечения простуды и некоторых инфекций Чрезмерное кровотечение у людей, принимающих антикоагулянты, такие как варфарин (кумадин).
    Гинкго (Ginkgo biloba) Для улучшения умственной деятельности, кровообращения; для предотвращения высотной болезни Увеличивает риск чрезмерного кровотечения при приеме с антикоагулянтами. Препятствует действию диуретиков.
    Goldenseal (Hydrastis canadensis) Для лечения запоров; действует как противовоспалительное средство Содержит вещества, которые изменяют способ обработки организмом многих лекарств, поэтому его следует использовать с осторожностью вместе с сердечными препаратами.
    Боярышник (вид Crataegus) Для лечения застойной сердечной недостаточности и высокого кровяного давления Не следует принимать лицам, принимающим сердечные препараты без указания врача.
    Корень солодки (Glycyrrhiza glabra) Для лечения кашля, цирроза печени и язвы желудка Не следует использовать людям с сердечными заболеваниями или принимающим сердечные лекарства. Повышает артериальное давление.

    Высокий уровень витамина К также является проблемой, так как витамин К взаимодействует с варфарином.Многие продукты содержат большое количество витамина К, что может повлиять на действие варфарина. Листовые зеленые овощи имеют самое высокое содержание витамина К; Другие продукты с высоким содержанием витамина К включают брюссельскую капусту, белокочанную капусту, брокколи, спаржу, бамию и замороженный горох. Важно, чтобы ваш рацион был последовательным. Избегать продуктов, содержащих витамин К, не обязательно, если вы принимаете варфарин, но поговорите со своим лечащим врачом, чтобы скорректировать дозу в зависимости от того, сколько витамина К содержится в вашем рационе, или если вы планируете внести серьезные изменения в свой рацион.

    Другие добавки, которые могут вызвать проблемы с сердцем, независимо от того, принимает ли человек также сердечные препараты:

    • Алоэ : используется внутрь для облегчения запоров и наружно для успокоения раздраженной кожи и ожогов. При приеме внутрь он может снизить уровень калия, поэтому избегайте алоэ, если вы принимаете диуретики и дигоксин.
    • Арника (Arnica montana) : применяется наружно для уменьшения боли от ушибов, болей и растяжений, а также для облегчения запоров.Арника потенциально токсична для сердца и может повышать кровяное давление при приеме внутрь.
    • Цимицифуга кистевидная (Cimicifuga racemosa) : используется для облегчения симптомов менопаузы. Может снизить кровяное давление при приеме в высоких дозах или с антигипертензивными препаратами.
    • Бета-каротин : антиоксидант, предназначенный для борьбы со свободными радикалами (веществами, которые вредят организму, если их не контролировать). Использование витаминных добавок, содержащих бета-каротин, следует активно пресекать из-за повышенного риска смерти.Выбирайте добавки со смешанными каротинами.
    • Пиретрум (Tanacetum parthenium) : считается, что он предотвращает и лечит мигрень, артрит и аллергию. Пиретрум может препятствовать свертыванию крови при приеме внутрь.
    • Имбирь : считается, что он облегчает тошноту и укачивание, снижает уровень холестерина в крови, уменьшает агрегацию тромбоцитов и действует как пищеварительная помощь и антиоксидант. Имбирь может препятствовать свертыванию крови.
    • Женьшень (Panax ginseng) : считается, что он замедляет старение, повышает умственные и физические способности, повышает сексуальную активность и повышает иммунитет.Его нельзя принимать людям с гипертонией (высоким кровяным давлением).
    • Крапива (Urtica dioica) : считается, что она борется с инфекциями мочевыводящих путей, камнями в почках и мочевом пузыре и ревматизмом. Используется наружно для борьбы с перхотью. Крапиву не следует принимать людям с задержкой жидкости, вызванной снижением функции сердца или почек.
    МедВотч

    Программа отчетности по продуктам медицинского назначения FDA отслеживает сообщения о серьезных побочных эффектах продуктов. С MedWatch можно связаться по телефону 888.723.3366 (www.fda.gov/medwatch). Вы также можете позвонить на горячую линию FDA для потребителей по телефону 1.888.INFO.FDA (1.888.463.6332).

    Этанольные экстракты эхинацеи пурпурной содержат смесь цитокин-подавляющих и цитокин-индуцирующих соединений, в том числе тех, которые происходят из эндофитных бактерий

    Образец цитирования: , и другие. (2015) Ethanolic Экстракты Echinacea purpurea содержат смесь цитокин-подавляющих и цитокин-индуцирующих соединений, в том числе некоторые из эндофитных бактерий.ПЛОС ОДИН 10(5): е0124276. https://doi.org/10.1371/journal.pone. 0124276

    Академический редактор: Горацио Бах, Университет Британской Колумбии, КАНАДА

    Получено: 19 декабря 2014 г .; Принято: 12 марта 2015 г.; Опубликовано: 1 мая 2015 г.

    Авторские права: © 2015 Todd et al. Эта статья находится в открытом доступе и распространяется в соответствии с лицензией Creative Commons Attribution License, которая разрешает неограниченное использование, распространение и воспроизведение на любом носителе при условии указания автора и источника

    Доступность данных: Все соответствующие данные находятся в документ и его вспомогательные информационные файлы.

    Финансирование: Этот проект был поддержан грантом № 1R15AT007259 Национального центра дополнительной и альтернативной медицины (NCCAM), входящего в состав Национального института здравоохранения.

    Конкурирующие интересы: Авторы заявили об отсутствии конкурирующих интересов.

    Введение

    Эхинацея — третье по популярности растительное лекарственное средство в США с годовым объемом продаж более 100 миллионов долларов [1]. Препараты из нескольких видов этого растения (чаще всего E . пурпурный и E . angustifolia ) используются для лечения вирусных инфекций верхних дыхательных путей, таких как простуда и грипп, и существуют серьезные разногласия по поводу их эффективности для этой цели (обзор в [2]). Несколько клинических испытаний продемонстрировали положительные результаты. Например, Джавад и др. . [3] лечили пациентов в течение 4 месяцев и обнаружили значительное снижение как общего числа, так и тяжести эпизодов простуды. С другой стороны, Барретт и др. .[4] не обнаружили эффекта, когда Echinacea применяли в течение нескольких дней для лечения простуды после появления симптомов. Сбивающим с толку фактором при интерпретации результатов клинических испытаний является сложность и изменчивость протестированных продуктов Echinacea . Препараты эхинацеи , используемые в клинических испытаниях, были извлечены из разных видов, разных частей растения (содержащих разные компоненты) и с помощью разных процессов. В упомянутых выше исследованиях Джавад и др. .[3] использовали коммерческий препарат под названием «Эхинафорс», этанольный экстракт листьев (95%) и корней (5%) E . purpurea , а исследование, проведенное Барреттом и др. . [4] использовали корни из E . пурпурный и Е . angustifolia , которые измельчали ​​целиком и отпускали в виде таблеток. В настоящее время не хватает знаний о том, как приготовить экстракты эхинацеи с определенной желаемой биологической активностью и какие компоненты служат соответствующими биомаркерами этой активности.

    В попытке пролить свет на механизм действия препаратов эхинацеи их иммуномодулирующая активность была протестирована in vitro , главным образом в исследованиях, посвященных макрофагам и эпителиальным клеткам. Во время респираторной вирусной инфекции активация различных рецепторов распознавания образов хозяина (PRR) на макрофагах и эпителиальных клетках приводит к продукции провоспалительных цитокинов, хемокинов и липидов. Эти молекулы, в свою очередь, связываются с рецепторами на различных типах клеток, в различных органах и тканях и вызывают хорошо известные симптомы, сопровождающие респираторные инфекции, включая лихорадку, недомогание, избыточное образование слизи и анорексию [5, 6].По этой причине ряд исследователей предположили, что предполагаемое облегчение, обеспечиваемое экстрактами эхинацеи , возникает из-за ингибирования выработки провоспалительных медиаторов. In vitro эта гипотеза была проверена путем добавления экстрактов эхинацеи к культурам макрофагов и эпителиальных клеток и наблюдения за влиянием на продукцию медиаторов воспаления. К сожалению, результаты этих экспериментов также оказались запутанными и противоречивыми. Шарма и др. . [7] (испытывавшие Echinaforce) обнаружили обширное ингибирование продукции цитокинов при использовании ряда различных респираторных вирусов для заражения эпителиальных клеток и макрофагов. Подавление продукции цитокинов и липидных медиаторов также было отмечено с помощью алкиламидов (также называемых алкамидами), которые являются жирнокислотными компонентами Echinacea после стимуляции макрофагов как респираторными вирусами [8], так и бактериальными ЛПС [9, 10]. Однако не все экстракты эхинацеи подавляют продукцию цитокинов in vitro .В исследовании, в котором мы исследовали 17 E . purpurea корневых экстрактов (приготовленных на 75% этаноле) из растений, выращенных на разных фермах, мы обнаружили, что, несмотря на высокие уровни алкиламида, лишь немногие подавляли продукцию медиаторов PGE 2 и TNF-α из клеток RAW 264.7, стимулированных с помощью штамм гриппа А PR/8/34 [8]. На самом деле, многие экстракты фактически стимулировали выработку этих медиаторов. Аналогичным образом, используя процедуры водной, органической и детергентной экстракции, Tamta et al .[11] и Пью и др. др. [12, 13] обнаружили стимуляцию продукции растворимых медиаторов макрофагоподобными клеточными линиями RAW 264.7 и THP-1. Эти авторы приписали эту активность липополисахаридам (ЛПС) бактериального происхождения и липопротеинам, обнаруженным в экстрактах, и предположили, что эти соединения произошли от эндофитных бактерий, живущих в растениях Echinacea . Подавление и/или стимуляция клеточной активности экстрактами эхинацеи также было показано на Т-клетках. Сасагава и др. .[14] использовали 95%-ный этанольный экстракт E . purpurea листьев и цветков и продемонстрировал ингибирование фитогемагглютинин-зависимой продукции IL-2 с помощью линии Т-клеток человека Jurkat, что впоследствии было связано с ингибированием ядерного рецептора PPARγ [15]. Совсем недавно с помощью водного раствора E . Экстракт purpurea с высоким содержанием полисахаридов, Fonseca et al . [16] также сообщили об ингибировании функции Т-клеток Jurkat при низкой плотности клеток.Однако эти авторы также сообщили о стимуляции клеточной функции этим экстрактом, когда клетки Jurkat выращивали при более высокой плотности клеток [16]. Причина такого расхождения неясна.

    Наши лаборатории заинтересованы в понимании in vitro эффектов экстрактов эхинацеи и их компонентов. Могут ли эти модели в конечном счете использоваться для прогнозирования активности in vivo ? Использование разных экстрактов разными лабораториями, дающее сложные и запутанные результаты in vitro , побудило нас сделать шаг назад и более тщательно проанализировать химическую основу иммуномодулирующей активности in vitro одного экстракта.Информация, полученная в результате таких экспериментов, должна затем быть полезной для обоснования рационального дизайна терапии на основе эхинацеи in vivo . В этих экспериментах мы предположили, что сложные экстракты эхинацеи содержат сложные смеси молекул как растительного, так и бактериального происхождения, способных по-разному модулировать функцию иммунных клеток. Наша цель в этих исследованиях состояла в том, чтобы проверить эту гипотезу, сравнив эффекты E . пурпурная (Л.) Спиртовой экстракт корня Moench (Asteraceae), его компоненты и фракции на продукцию цитокинов и хемокинов макрофагоподобной клеточной линией RAW 264.7. Мы также стремились изучить потенциальную роль LPS из эндофитных бактерий в определении иммуномодулирующей активности in vitro E . Экстракты пурпуреа . Мы сосредоточились именно на E . purpurea в этих исследованиях, потому что это вид Echinacea , который наиболее широко использовался в медицинских целях в США [17].

    Материалы и методы

    Приборы

    Разделение методом флэш-хроматографии

    проводили с использованием автоматизированной системы Isco CombiFlash RF на колонках с силикагелем (Teledyne Isco, Lincoln, NE). Разделение высокоэффективной жидкостной хроматографией (ВЭЖХ) выполняли с использованием системы ВЭЖХ Varian (насосы ProStar 210, коллектор фракций ProStar 710, матричный фотодиодный детектор ProStar 335) с программным обеспечением Galaxie Chromatography Workstation (версия 1. 9.3.2). Для всех анализов ЖХ-МС использовали систему сверхвысокоэффективной жидкостной хроматографии (СВЭЖХ) Acquity (Waters Corporation, Милфорд, Массачусетс), соединенную с масс-спектрометром LTQ Orbitrap XL Hybrid (Thermo Fisher Scientific, Уолтем, Массачусетс).Спектры ЯМР получали с помощью ЯМР-спектрометра JNM-ECS 400 МГц (JOEL USA, Пибоди, Массачусетс). Если не указано иное, все растворители, используемые в химических анализах, были приобретены у Thermo Fisher Scientific (Waltham, MA).

    Приготовление и фракционирование в больших масштабах

    E . пурпурная экстракт корня

    Корни Echinacea purpurea были приобретены у Pacific Botanicals (Grants Pass, OR). Образец ваучера (NCU 633811) был депонирован в Гербарии Северной Каролины.Корни промывали, грубо нарезали и сушили при 37°С в течение 1 недели. Высушенный корневой материал измельчали ​​механически с использованием стандартной модели Wiley Mill № 3 (Arthur H. Thomas Co., Филадельфия, Пенсильвания) до размера ячеек 2 мм. Измельченный корневой материал (1,9 кг) мацерировали в течение семи дней в 75% этаноле (Pharmaco-AAPER, Shelbyville, KY) в соотношении 5:1 (мл растворителя:г высушенного корневого материала). Полученный экстракт фильтровали под вакуумом с использованием фильтровальной бумаги Whatman 24,0 см класса 1, отфильтрованный экстракт концентрировали с помощью ротационного испарителя и подвергали двухстадийному разделению жидкость-жидкость (рис. 1).Первая стадия состояла из обезжиривания путем распределения между гексаном и 10%-ным водным раствором метанола (1:1). Слои разделяли и сушили с помощью ротационного испарителя. Затем высушенный водно-метанольный слой разделяли, используя воду:метанол:хлороформ (4:1:5), в результате чего получали два слоя, которые разделяли и снова подвергали ротационному выпариванию. Слой хлороформа фракционировали с помощью нормально-фазовой флэш-хроматографии на колонке с силикагелем RediSep Rf, используя градиент от 100% гексана до 100% хлороформа до 100% метанола. Элюент колонки объединяли в 13 объединенных фракций на основе ЖХ-УФ хроматограмм, фракции выпаривали и хранили в сухом виде при 4°C до тех пор, пока они не понадобятся для биоанализа или химического анализа.

    Рис. 1. Схема распределения экстракта Echinacea purpurea .

    Сушеный E . корня purpurea (1,9 кг) экстрагировали смесью 75:25 этанол:вода в соответствии со стандартной практикой в ​​производстве пищевых добавок. Спиртовой экстракт упаривали на роторном испарителе и подвергали двум стадиям разделения жидкость:жидкость с помощью гексана:метанола и хлороформа.Полученный слой хлороформа разделяли на тринадцать объединенных фракций с использованием флэш-хроматографии с нормальной фазой. Эти фракции были затем профилированы по химическому составу и подвергнуты биологическим анализам. Марк, остаток после экстракции; EE, этанольный экстракт; HL — гексановый слой, ML — метановый слой; AL, водный слой; ХЛ, слой хлороформа.

    https://doi. org/10.1371/journal.pone.0124276.g001

    Выделение и идентификация ксантиенопирана

    Фракции 9 и 10, приготовленные, как описано в предыдущем разделе, были объединены на основе схожей противовоспалительной активности и профиля ЖХ-МС с общим выходом 747.7 мг. Этот объединенный образец подвергали нормально-фазовой флэш-хроматографии с использованием колонки с силикагелем RediSep Rf и системы растворителей гексан:хлороформ:метанол при скорости потока 40 мл/мин. Градиент начинался при 50:50 (гексан:хлороформ) и увеличивался до 100% хлороформа в течение 3 объемов колонки, поддерживался при 100% хлороформе в течение 3 объемов колонки, уменьшался линейно до 10:90 (метанол:хлороформ) в течение 5 объемов колонки, затем линейно уменьшалось до 20:80 (метанол:хлороформ) на 10 объемах колонки, линейно уменьшалось до 50:50 (метанол:хлороформ) на 4 объема колонки, уменьшалось до 100% метанола на 2 объема колонки и выдерживалось при 100% метаноле в течение 2 тома колонки.Фракции объединяли в 8 объединенных фракций (A-H) на основе поглощения УФ-излучения.

    Фракция E элюировалась из колонки после 14 объемов колонки и давала 392,9 мг. Эту фракцию подвергали дополнительной стадии флэш-хроматографии на колонке с силикагелем Gold с использованием системы растворителей гексан:этилацетат:метанол и скорости потока 30 мл/мин. Градиент начинался при 50:50 (гексан:этилацетат) и увеличивался до 100% этилацетата в течение 2 объемов колонки, продолжался изократически при 100% этилацетате в течение 5 объемов колонки, линейно уменьшался до 10:90 (метанол:этилацетат) в течение 5 объемов колонки, продолжали уменьшаться линейно для 10 объемов колонки до 20:80 (метанол:этилацетат), уменьшали до 100% метанола в течение 2 объемов колонки и поддерживали 100% метанола в течение 2 объемов колонки.Элюент объединяли в 3 объединенные фракции (I-III) на основе поглощения УФ-излучения.

    Фракция I содержала элюент из первых трех объемов колонки (выход: 174,9 мг) и подвергалась дальнейшему разделению с использованием ВЭЖХ на колонке Gemini-NX 5 мкм, 250 × 21,2 мм C-18 (Phenomenex Inc. , Торранс, Калифорния). . Образцы элюировали из колонки с использованием бинарной системы растворителей с растворителем А, состоящим из воды (Barnstead Nanopure Diamond, Thermo Fisher) с 0,1% муравьиной кислоты, и растворителем В, состоящим из ацетонитрила (чистота для ВЭЖХ) с 0.1% муравьиной кислоты при скорости потока 21 мл/мин. Градиент начинался с 60:40 (A:B) и линейно уменьшался до 20:80 (A:B) в течение 20 минут, затем линейно уменьшался до 0:100 (A:B) в течение 5 минут. и выдерживали в изократических условиях в течение 5 мин. Элюент объединяли в три объединенных фракции (a-c) на основе поглощения УФ-излучения. Вторая фракция (б) давала 3,2 мг ксантиенопирана чистоты 95% ( 1 ). Для подтверждения идентификации выделенного соединения применяли ЯМР и ЖХ-МС высокого разрешения.

    Количественный анализ алкиламидов

    Концентрацию

    алкиламидов определяли с помощью ЖХ-МС.Перед анализом каждый образец ресуспендировали в метаноле до концентрации 1 мг/мл, и проводили серийные разведения этих растворов для достижения концентрации в пределах линейного диапазона калибровочной кривой. Ввод 3 мкл каждого образца элюировали из колонки (Acquity UPLC BEH C18 1,7 мкм, 2,1 × 50 мм, Waters Corp.) при скорости потока 0,25 мл/мин с использованием следующего бинарного градиента с растворителем А, состоящим из воды ( Optima LC/MS) с добавкой 0,1% муравьиной кислоты и растворителем B, состоящим из ацетонитрила (Optima LC/MS) с 0.1% добавка муравьиной кислоты. Градиент начинался при изократическом составе 90:10 (A:B) в течение 1,0 мин, увеличиваясь линейно от 1,0 до 8,0 мин. до 10:90 (A:B), с последующей изократической задержкой 10:90 (A:B) с 8,0–9,0 мин, градиент вернулся к исходным условиям 90:10 (A:B) с 9,0–9,1 мин, и удерживалась на этом составе с 9,1–10 мин. Масс-спектрометр работал в режиме положительной ионизации в диапазоне сканирования 150–1000 при следующих настройках: напряжение на капилляре 5 В, температура капилляра 300°С, смещение тубусной линзы 35 В, напряжение распыления 3 В. .80 кВ, расход защитного газа установлен на 35, а расход вспомогательного газа установлен на 20.

    Алкиламиды

    были идентифицированы путем сравнения времени удерживания и значений m/z с ранее опубликованными литературными значениями [18], как подробно описано в другом месте. Были построены хроматограммы выбранных ионов для шести наиболее распространенных алкиламидов и для каждого была определена площадь пика. Эти площади пиков использовали для сравнения концентрации алкиламида в каждой из фракций. Один из распространенных алкиламидов в экстрактах 75% этанола, изобутиламид додека-2E,4Z-диен-8,10-дииновой кислоты ( 5 ), был количественно определен с помощью линейной регрессии внешней калибровочной кривой, полученной с использованием додека-2E, Стандарт изобутиламида 4Z-диен-8,10-дииновой кислоты ( 5 ) (Chromadex, Irvine CA) (таблица 1).Концентрации остальных 5 алкиламидов оценивали с использованием параметров регрессии для калибровочной кривой изобутиламида додека-2E,4Z-диен-8,10-дииновой кислоты.

    Количественный анализ липополисахаридов

    Для количественного определения уровней липополисахаридов (ЛПС) в экстрактах из стерилизованных E . растений purpurea небольшое количество (0,16–19,55 мг) каждого ресуспендировали в 1 мл этанола (PHARMACO-AAPER, США). Затем каждую суспензию разбавляли 1:1000 водой, свободной от эндотоксинов, и определяли количество ЛПС с помощью анализа Chromo-LAL (Associates of Cape Cod Inc., Фалмут, Массачусетс). Реагенты были предоставлены Associates of Cape Cod Inc., и анализы были выполнены на устройстве для считывания микропланшетов Synergy h5 (BioTek Instruments, Inc, Winooski, VT).

    Выращивание и экстракция

    Echinacea purpurea в асептических условиях

    Е . Семена purpurea были получены от Horizon Herbs, LLC (лот № 6784, Уильямс, Орегон) и ваучер на весь E . пурпурная растения из этого источника находится в файле Гербария Северной Каролины (NCU583422).Для стерилизации семян перед проращиванием использовали два метода. В первом методе, предназначенном для удаления поверхностных бактерий, но не бактериальных эндофитов (бактерий, живущих внутри семян), перикарпий семянки удаляли, а семена подвергали процедуре поверхностной стерилизации, несколько измененной по сравнению с описанной Лейхтманном и Клэем [19]. . Стерилизацию осуществляли последовательным замачиванием в течение 1 мин. в этаноле (70%), затем 4 мин. в растворе гипохлорита натрия (~4,5%) и, наконец, 30 с в этаноле (70%).Затем семена промывали стерильной водой и проращивали, как описано ниже.

    Вторая процедура стерилизации использовалась для уничтожения как поверхностных, так и эндофитных бактерий. Этот процесс включал дополнительную стадию удаления эпидермиса семян перед стерилизацией. Для удаления эпидермиса семена без околоплодника замачивали на водяной бане в течение 20 мин. при 40°C и по отдельности протирали бумажным полотенцем, чтобы разрушить слой одноклеточного эпидермиса. Фрагменты эпидермиса удаляли пинцетом.Затем эти семена подвергали стерилизации тем же способом, который описан выше для семян с интактным эпидермисом.

    Прорастание индуцировали на чашках Петри с водным агаром (1,5%) по семь семян на чашку. Семена ежедневно контролировали на предмет роста бактерий или грибков, и все семена или проростки с признаками такого заражения вырезали и удаляли с агаровой пластины. Через семь дней все оставшиеся бессимптомные проростки были высажены в стерильные контейнеры для культивирования (Plantcon, MP Biomedicals, LLC, Solon, OH), которые содержали 150 мл агара со средой Murashige Skoog [20], доведенной до pH = 7, и содержались в стерильных условиях. при 25/25°C и 12-часовом цикле день/ночь в климатической камере (Adaptis A1000, Conviron, Pembina, Северная Дакота) до сбора урожая.

    Индивидуальный E . Растения purpurea собирали в ламинарном боксе и переносили в стерильные стеклянные флаконы на 100 мл, лиофилизировали в течение 48 часов и хранили при -80°C до экстракции. Каждое растение экстрагировали 8 мл 75% этанола. Экстракты фильтровали с помощью 0,2 мкм фильтра Puradisc (Whatman, GE Healthcare UK Limited, Великобритания), соединенного с апирогенным шприцем (Henke Sass Wolf, Германия). Аликвоту (1 мл) каждого экстракта разбавляли водой 1:1000 и анализировали с использованием анализа Chromo-LAL, как описано ранее.Дополнительную 1 мл аликвоту каждого растительного экстракта выпаривали досуха в предварительно взвешенном флаконе для определения массы растительного материала на объем экстракта.

    Культура клеток

    Этанол использовался в качестве носителя для E . Экстракты, выделения и фракции purpurea во всех экспериментах с клеточными культурами. Максимальная концентрация этанола во всех анализах составляла 1%, и было обнаружено, что она не влияет на продукцию цитокинов. Клетки RAW 264.7 были получены из Американской коллекции типовых культур, США, и культивированы в модификации среды Игла по Дульбекко (DMEM) с добавлением 4 мМ L-глутамина, 4.5 г/л глюкозы и 3,7 г/л бикарбоната натрия, 10% фетальной бычьей сыворотки (FBS) при 37°C с 5% CO 2 . Среды и добавки были получены от Caisson Labs (Логан, Юта) и Sigma Aldrich (Сент-Луис, Миссури). FBS получали от Gemini Bio-Products (Сакраменто, Калифорния).

    Обработка клеток и измерение цитокинов

    Для биоанализа неочищенных экстрактов и разделительных слоев клетки RAW 264.7 высевали в 24-луночные планшеты для тканевых культур (Genesee Scientific, США) с плотностью 1. 5 x 10 5 клеток/лунку и оставляли для прилипания на 24 часа. Экстракт, разделительные слои и фракции добавляли в указанных концентрациях. Экстракты, приготовленные из растений, свободных от эндофитов, тестировали, добавляя 6,7 мкл непосредственно в среду культивирования клеток в условиях, описанных ранее [8]. Для анализа колоночных фракций клетки RAW 264.7 высевали в 96-луночные планшеты в количестве 2,5×10 ×4 клеток/лунку. Лечение включало каждую фракцию или исходный материал отдельно или в сочетании с 10 или 100 нг/мл LPS из Salmonella minnesota R595 (List Biological Laboratories, США) в течение 16–18 часов.Собирали супернатанты, центрифугировали при 16 000 g в течение 5 мин. и хранили при -80°С до анализа. Наборы TNF-α, CCL3/MIP-1α и CCL5/RANTES ELISA были приобретены у R&D Systems, США или eBioscience, США. Оптическую плотность определяли с помощью устройства для считывания микропланшетов Synergy HT (BioTek Instruments, Inc.). Концентрации цитокинов интерполировали из стандартных кривых.

    Анализ цитотоксичности

    клеток RAW 264.7 высевали в 96-луночные планшеты и обрабатывали каждой фракцией или исходным материалом по отдельности в условиях, описанных ранее.Супернатанты собирали через 18 часов. инкубацию и анализ активности лактатдегидрогеназы (ЛДГ) с использованием имеющегося в продаже набора в соответствии с инструкциями производителя (Thermo Fisher Scientific). Вкратце, в 96-луночном планшете 50 мкл супернатанта инкубировали с 50 мкл реакционной смеси, содержащей соль тетразолия, которая восстанавливается до формазана в присутствии ЛДГ. Планшет инкубировали в течение 30 мин. в защищенном от света месте перед добавлением 50 мкл стоп-раствора. Поглощение считывали при 490 нм, при этом поглощение при 690 нм вычитали для удаления фона.Клетки, обработанные носителем, лизировали буфером для лизиса и использовали для максимального высвобождения LDH.

    Статистический анализ

    Значимые различия между средними значениями определяли с помощью Т-критерия Стьюдента с программным обеспечением GraphPad Prism (GraphPad Software, Сан-Диего, Калифорния). Уровни значимости указаны в подписях к отдельным рисункам.

    Результаты и обсуждение

    Широкая цель этих исследований состояла в том, чтобы получить более полное представление о деятельности E .Экстракт purpurea и его составляющие на продукцию цитокинов и хемокинов макрофагами. Для достижения этой цели мы использовали в качестве модели мышиную макрофагоподобную клеточную линию RAW 246.7, а не первичные мышиные макрофаги. С использованием этой клеточной линии стало возможным анализировать большое количество образцов, полученных в результате этих экспериментов. Клетки RAW 264.7 широко использовались в исследованиях продукции цитокинов макрофагами и, подобно первичным мышиным или человеческим макрофагам, продуцируют ряд воспалительных цитокинов и хемокинов после стимуляции агонистами, такими как LPS.Мы показали, что эти клетки продуцируют высокие уровни шести цитокинов и хемокинов после стимуляции ЛПС, включая TNF-α, IL-6, G-CSF, CCL2 (MCP-1), CCL3 (MIP1-α) и CCL5 (RANTES). [21]. В экспериментах, описанных в этой рукописи, мы сосредоточились в основном на продукции TNF-α клетками RAW 264.7. TNF-αas был выбран потому, что он является ключевым воспалительным цитокином, перепроизводство которого было связано с несколькими хроническими и острыми воспалительными заболеваниями, такими как воспалительное заболевание кишечника [22], псориаз [23] и ревматоидный артрит [24].Мы и другие показали, что экстракты эхинацеи способны модифицировать выработку TNF-α [7, 21], и более полное понимание этих эффектов может привести к полезным методам лечения заболеваний. В наших экспериментах мы также стремились получить более широкое представление о влиянии E . purpurea на секреторную активность клеток RAW 264.7, поэтому мы расширили наш анализ, включив в него два хемокина, упомянутых выше (CCL3 и CCL5). Наконец, мы протестировали каждый E .Экстракт или фракция purpurea с использованием двух взаимодополняющих подходов. Способность образцов индуцировать продукцию воспалительных цитокинов и продукцию хемокинов оценивали путем добавления их непосредственно к клеткам RAW 264. 7 в среде с соответствующими контролями растворителя. В качестве альтернативы, ингибирующую активность образцов в отношении продукции воспалительных цитокинов и хемокинов тестировали путем добавления их к клеткам RAW 264.7, которые были активированы добавлением LPS.

    Получение экстракта и влияние на секрецию цитокинов

    В наших исследованиях использовался E .Экстракт purpurea , который был приготовлен в соответствии с методами, обычно используемыми в индустрии пищевых добавок. Е . Корни purpurea собирали, сушили и экстрагировали 75% этанолом. Экстракт этанола (ЭЭ) затем тестировали in vitro на его влияние на продукцию TNF-α клетками RAW 264.7. Этот экстракт воспроизводимо индуцировал продукцию TNF-α (рис. 2), при этом 10 нг/мл обычно накапливались в культурах при 24-часовой обработке. Это количество было одинаковым при тестировании концентраций 50 и 100 мкг/мл экстракта (рис. 2А и 2В), что свидетельствует о достижении максимального уровня стимуляции. С точки зрения сравнения, уровень TNF-α, индуцированный экстрактом, был не очень высоким для этих клеток в данных условиях культивирования. Например, как показано на рис. 2C и 2D, уровни TNF-α могут превышать 30 нг/мл при использовании дозы 100 нг/мл для стимуляции клеток RAW 264.7.

    Рис. 2. Влияние 75% этанольного экстракта и разделения жидкость:жидкость из экстракта Echinacea purpurea на продукцию TNF-α клетками RAW 264.7.

    Экстракт и перегородки тестировали при концентрациях 50 мкг/мл (A и C) и 100 мкг/мл (B и D), выраженных в виде массы экстракта на объем лунки для анализа.Клетки не стимулировали в A и B и стимулировали 100 нг/мл LPS в C и D. Супернатанты собирали через 16–18 часов. и уровни TNF-α, измеренные с помощью ELISA. М, СМИ; Л, ЛПС; EE, этанольный экстракт; HL — гексановый слой, ML — метановый слой; WL, водный слой; ХЛ, слой хлороформа. Показанные значения являются средними +/- SD из одного репрезентативного эксперимента. Статистический анализ проводили с использованием критерия Стьюдента, *p<0,05, **p<0,01, ***p<0,001.

    https://doi.org/10.1371/journal.pone.0124276.g002

    Спиртовой экстракт (EE) также тестировали на его способность ингибировать выработку TNF-α в присутствии LPS (рис. 2C и 2D). При концентрации 50 мкг/мл он проявлял значительную, но слабую подавляющую активность примерно на 10–20% (рис. 2С). Однако при более высокой концентрации, 100 мкг/мл, подавляющий эффект был гораздо более выраженным, приближаясь к 50% (ЕЕ, рис. 2D). По-видимому, молекулы, опосредующие супрессивный эффект, не присутствовали в достаточной концентрации, когда экстракт тестировали при концентрации 50 мкг/мл, и для наблюдения супрессивного эффекта была необходима более высокая концентрация 100 мкг/мл.Вполне вероятно, что эта активность была бы упущена из виду, если бы мы не тестировали более высокие концентрации экстракта. Таким образом, мы пришли к выводу, что этанольный комплекс E . Экстракт purpurea содержит молекулы, способные как стимулировать, так и ингибировать секрецию TNF-α макрофагами, и поэтому крайне важно исследовать диапазон концентраций экстракта для обнаружения этой активности in vitro . Также ясно, что суммарные эффекты этого экстракта по стимуляции или подавлению продукции TNF-α следует рассматривать как сумму нескольких, возможно, противоположных действий, а не как одну стимулирующую или подавляющую активность.В будущем будет интересно определить, являются ли обе активности биодоступными in vivo и компенсируют ли они эффективность друг друга.

    Фракционирование и содержание алкиламидов в экстракте

    Алкиламиды из E . Хорошо известно, что purpurea подавляют продукцию медиаторов воспаления in vitro [8, 9, 25] и используются в качестве маркеров для стандартизации некоторых E . пурпура препараты.Таким образом, мы стремились определить, способна ли комплексная этанольная кислота E . Экстракт purpurea для подавления секреции TNF-α можно объяснить наличием алкиламидов. Количественный анализ содержания алкиламида в этаноле E . Экстракт purpurea показал, что он содержит приблизительно 51 мкг/мг (5,1%) общих алкиламидов, что соответствует концентрации алкиламидов 2,6 мкг/мл на рис. 2C. Ранее сообщалось, что более высокая концентрация алкиламидов необходима для значительного подавления секреции TNF-α с помощью RAW 264.7 клеток (6–12 мкг/мл) [8]. Таким образом, мы заподозрили, что в активность неочищенного E вносят свой вклад компоненты, помимо алкиламидов. Экстракт пурпурной . Для дальнейшего исследования экстракт был частично очищен с помощью двух стадий разделения жидкость-жидкость (рис. 1), и каждый из полученных слоев был протестирован на его способность индуцировать или ингибировать продукцию TNF-α клетками RAW 264.7. Как показано на рис. 2А и 2В, стимулирующая активность обычно сохранялась в слоях метанола и хлороформа (ML и CL соответственно).Слой хлороформа также продемонстрировал значительную подавляющую активность, как и слой гексана (HL) (рис. 2C и 2D).

    Был предпринят дополнительный уровень фракционирования с использованием флэш-хроматографии на силикагеле (рис. 1) для дальнейшей очистки компонентов, ответственных за подавляющую цитокины активность E . Экстракт пурпурной . Слой хлороформа был выбран в качестве исходного материала для этих усилий по фракционированию, но примечательно, что в гексановом слое (HL) могут присутствовать дополнительные противовоспалительные компоненты, которые будут в центре внимания будущих исследований.Слой хлороформа разделяли на тринадцать фракций, исходный слой хлороформа и каждую фракцию анализировали на содержание алкиламида. Е . purpurea может образовывать ряд алкиламидов, различающихся длиной и числом цепей, а также размещением двойных и тройных связей в жирнокислотной части молекулы [26]. Анализ слоя хлороформа показал наличие ряда структурно различных алкиламидов (рис. 3). В соответствии с предыдущими сообщениями [8], алкиламид 11a/b был доминирующим алкиламидом.Используемая здесь система нумерации алкиламидов была опубликована ранее [18], и ее можно сопоставить с системой, используемой Бауэром [26].

    Рис. 3. Алкиламиды из Echinacea purpurea .

    Хроматограмма (A) слоя неочищенного хлороформа (CL) из E . Экстракт purpurea , показывающий наличие ряда алкиламидов (3,4,5,8,9,10,11А,11В,14,15), которые были идентифицированы по молекулярной массе и времени удерживания. Относительные количества этих алкиламидов в объединенных фракциях на колонке с силикагелем (1–13) указаны площадями пиков, показанными на панели B.Система нумерации, используемая для этих алкиламидов, соответствует системе, использованной в предыдущем отчете [18]. * указывает на обнаруженные, но не идентифицированные соединения. Структуры для семи алкиламидов, выбранных для представления содержания алкиламидов, показаны на панели C.

    https://doi.org/10.1371/journal.pone.0124276.g003

    В результате разделения содержание алкиламидов в хлороформном слое увеличилось в 2,7 раза по сравнению с этанольным экстрактом, за общее содержание алкиламидов 140 ± 4.7 мкг/мг (табл. 1). Точно так же фракционирование слоя хлороформа привело к концентрации алкиламидов во фракции 6, которая содержала 310 ± 42 мкг/мл алкиламидов (таблица 1), т. е. увеличение в 2,2 раза. Таким образом, слой хлороформа и фракция 6 содержали алкиламиды в пределах диапазона концентраций, ранее продемонстрированного как биологически активный [8], концентрации общего содержания алкиламидов 7,0 мкг/мл и 15,5 мкг/мл, соответственно, для эксперимента, представленного на рис. 2C.

    Тестирование клеток RAW 264.7 показало, что три фракции (2, 3 и 13) сильно стимулировали продукцию TNF-α (фиг. 4A).Напротив, продукция TNF-α значительно ингибировалась фракциями 6–10 (рис. 4B). Эти результаты дополнительно подтверждают наличие как стимулирующей, так и ингибирующей активности, присутствующей в исходном E . purpurea , и указывают, что химические манипуляции могут быть использованы для отделения этих активностей друг от друга. Поэтому можно использовать стандартные химические процессы для получения экстрактов, например, с повышенной подавляющей активностью.

    Рис. 4.Влияние фракций экстракта Echinacea purpurea на продукцию TNF-α.

    Фракции после разделения методом флэш-хроматографии E . Слой экстракта хлороформа (CL) purpurea тестировали на их влияние на продукцию TNF-α клетками RAW 264.7 в отсутствие (A) или в присутствии (B) 10 нг/мл LPS. Лечение длилось 16–18 часов, и уровни TNF-α в супернатантах определяли количественно с помощью ELISA. Каждая фракция тестировалась при 50 и 100 мкг/мл. Все показанные данные являются средними +/- SEM из трех независимых экспериментов.Статистический анализ проводили с использованием критерия Стьюдента, *р<0,05, **р<0,01. М, СМИ; Л, ЛПС; ХЛ, слой хлороформа.

    https://doi.org/10.1371/journal.pone.0124276.g004

    В соответствии с нашим предыдущим прогнозом результаты на рис. 4B показывают, что алкиламиды не несут единоличной ответственности за подавляющие эффекты, отмеченные в слое хлороформа. Как и ожидалось, фракция 6, богатая алкиламидом, действительно подавляла индуцированную ЛПС продукцию TNF-α, но некоторые другие фракции (7–10) также проявляли этот эффект. Подавляющее действие этих фракций следует объяснять присутствием других соединений. Другие биоактивные малые молекулы, о которых ранее сообщалось, что они входят в состав E . purpurea , такие как фенольные соединения кафтариновая кислота и цикоровая кислота [27], а также различные производные кетона [10], могут играть роль в этой активности. В целом, однако, мы подозреваем, что супрессивная активность TNF-α E . Экстракты purpurea обусловлены коллективным действием множества малых молекул, многие из которых еще не идентифицированы.

    Цитотоксичность

    В представленных здесь экспериментах (рис. 2 и 4) мы отметили подавление продукции TNF-α, которое могло бы произойти, если бы добавленные образцы вызывали гибель клеток. Поэтому каждый образец тестировали на лактатдегидрогеназу (ЛДГ), цитозольный фермент, высвобождаемый из умирающих клеток в супернатант культуры. Как показано на рис. 5, слой хлороформа и большинство фракций колонки не проявляли каких-либо цитотоксических эффектов. Низкий уровень цитотоксичности отмечен для фракций 6–9, 1–5% при 50 мкг/мл и 10–25% при 100 мкг/мл соответственно.Хотя клеточная токсичность может в некоторой степени способствовать наблюдаемой активности этих фракций, маловероятно, что они объясняют наблюдаемое 50–90% ингибирование TNF-α (рис. 4).

    Рис. 5. Цитотоксичность фракций экстракта Echinacea purpurea и слоя хлороформа.

    Фракции из колонки с силикагелем и слой хлороформа тестировали на цитотоксичность по отношению к клеткам RAW 264.7. Обработку проводили в течение 24 часов, и цитотоксичность определяли с помощью анализа высвобождения ЛДГ.Каждая фракция тестировалась при 50 и 100 мкг/мл. Показанные данные являются средним значением +/- SEM из трех независимых экспериментов. Статистический анализ проводили с использованием критерия Стьюдента, *p<0,05, **p<0,01, ***p<0,001. М, СМИ; CL — слой хлороформа; Ly, лизирующий буфер.

    https://doi.org/10.1371/journal.pone.0124276.g005

    Идентификация ксантиенопирана

    В попытке определить другие соединения, которые играют роль в противовоспалительной активности E . purpurea фракции колонки, которые значительно подавляли продукцию TNF-α из LPS-стимулированных клеток, но не содержали высокого содержания алкиламида (7–10), подвергали дальнейшей очистке. Некоторые из этих фракций (7 и 8) оказались очень сложными и/или с очень низким выходом, и попытки выделить из них чистые соединения не увенчались успехом. Однако соединение ксантиенопиран ( 1 ) (рис. 6А) было выделено из объединенных фракций 9 и 10. Ранее сообщалось, что ксантиенопиран входит в состав плодов и семян различных видов Xanthium [28], но это первое сообщение об этом соединении от E . пурпурный . Данные ЯМР для ксантиенопирана (рис. S1) согласуются с данными, опубликованными ранее [29]. Кроме того, измеренная моноизотопная масса ([M+H] + = 317,0838) находилась в пределах ошибки массы 2,9 ppm от расчетной массы ([M+H] + = 317,0847).

    Рис. 6. Структура и активность ксантиенопирана.

    Структура ксантиенопирана была выяснена путем сравнения данных ЯМР и МС с опубликованными значениями (А). Влияние ксантиенопирана на секрецию TNF-α с помощью RAW 264.Оценивали 7 макрофагоподобных клеток отдельно (B) или в присутствии 10 нг/мл LPS (C). В качестве сравнения оценивали влияние изобутиламида додека-2E,4E-диеновой кислоты ( 15 ) на секрецию TNF-α макрофагоподобными клетками RAW 264.7 в присутствии 10 нг/мл LPS (C). Лечение длилось 16-18 часов. и уровни TNF-α в супернатантах количественно определяли с помощью ELISA. Показанные данные являются средним значением +/- SEM из трех независимых экспериментов. Статистический анализ проводили с использованием критерия Стьюдента, *p<0.05.

    https://doi.org/10.1371/journal.pone.0124276.g006

    Было показано, что ксантиенопиран ингибирует выработку анионов супероксида в нейтрофилах человека [28], но его влияние на макрофаги ранее не оценивалось. Мы обнаружили, что ксантиенопиран сам по себе не стимулировал продукцию TNF-α (рис. 6B). Однако это вызывало дозозависимое ингибирование LPS-индуцированной продукции TNF-α (фиг. 6C). На основании этих данных была рассчитана IC 50 , равная 3,4 мкг/мл, что очень похоже на IC 50 , равное 1.7 мкг/мл сообщалось об ингибировании продукции супероксида нейтрофилами [28]. В совокупности наши данные позволяют предположить, что алкиламиды и ксантиенопираны вносят вклад в активность E , но не объясняют ее полностью. Экстракт purpurea для подавления LPS-индуцированной продукции TNF-α.

    Широкий характер подавляющего эффекта

    Эксперименты, описанные до сих пор, были сосредоточены на TNF-α как индикаторе продукции медиатора макрофагами. Однако этот цитокин является лишь одним из нескольких цитокинов и хемокинов, продуцируемых RAW 264.7 клеток после обработки LPS или другими молекулярными паттернами, ассоциированными с патогенами. Ранее нами [8] и другими [7, 9] были проведены комплексные исследования экстрактов эхинацеи и их влияния на секреторные продукты макрофагов, и это не было нашей целью в данном исследовании. Однако было интересно оценить, были ли активности, которые мы отслеживали, специфичными для TNF-α или также распространялись на другие цитокины или хемокины. С этой целью мы количественно определили уровни CCL3 и CCL5, хемокинов, которые, как известно, играют важную роль в различных воспалительных процессах [30, 31], в RAW 264.7 клеточных супернатантов. Как и в случае с TNF-α, фракции 2, 3 и 13 сильно индуцировали продукцию CCL3 (фиг. 7А). Меньшие, но значительные количества были индуцированы исходным слоем хлороформа, аналогично отмеченному влиянию этого слоя на продукцию TNF-α. Для CCL5, как показано на фиг. 7B, значительное увеличение снова индуцировалось фракциями 2, 3 и 13, хотя примечательно, что уровни этого хемокина были относительно низкими. Слой хлороформа не вызывал значительного повышения уровня CCL5.

    Рис. 7. Влияние фракции Echinacea purpurea на CCL3 и CCL5.

    Фракции из колонки с силикагелем тестировали на их влияние на продукцию CCL3 (MIP1-α) и CCL5 (RANTES) клетками RAW 264.7 в отсутствие (A и B) или в присутствии (C и D) 10 нг /мл ЛПС. Лечение длилось 16-18 часов. и уровни хемокинов в супернатантах количественно определяли с помощью ELISA. Каждую фракцию тестировали при концентрации 50 мкг/мл. Представленные данные представляют собой средние значения +/- SEM или SD из трех (CCL3) и двух (RANTES) независимых экспериментов.Статистический анализ проводили с использованием критерия Стьюдента, *p<0,05. М, СМИ; ХЛ, слой хлороформа.

    https://doi.org/10.1371/journal.pone.0124276.g007

    CCL3 и CCL5 также количественно определяли в супернатантах клеток RAW 264.7, стимулированных LPS. Как показано на рис. 7C, подавление CCL3 обычно обнаруживалось для тех же образцов, ответственных за подавление TNF-α (образцы 6–10 и CL), хотя в этих анализах подавление фракциями 8 и 10 не достигало статистического уровня значимость.Точно так же тот же набор образцов обычно ингибировал продукцию CCL5, при этом фракции 7 и 8 и слой хлороформа демонстрировали значительное ингибирование. Интересно, что мы также отметили, что фракции 2 и 3 сильно ингибировали выработку CCL5, предполагая, что в этих фракциях существуют дополнительные подавляющие соединения, активность которых становится «видимой» только при низком уровне стимуляции. В целом, наши эксперименты показывают, что стимулирующие и ингибирующие эффекты слоя и фракций хлороформа не являются специфическими для производства TNF-α и, вероятно, представляют собой более общие эффекты на секреторные продукты RAW 264.7 кл. С другой стороны, анализы CCL5 дополнительно подчеркивают сложность экстракта и даже фракций, собранных из колонки с силикагелем. Доминирующие стимулирующие или ингибирующие соединения могут маскировать противоположные активности, и активность этих противоположных соединений не будет выявлена ​​до тех пор, пока доминирующие соединения не будут удалены или активности не будут разделены.

    Роль бактериальных эндофитов в стимулирующей активности

    E . пурпурный

    Тамта и др. .[11] и Пью и др. др. [13] ранее показали, что стимулирующая активность макрофагов E . Экстракты purpurea могут возникать из ЛПС и липопротеинов бактериального происхождения. Основываясь на этих отчетах, мы использовали анализ Chromo-LAL для измерения количества бактериального LPS в исходном этаноле E . Экстракт пурпурной . Было обнаружено, что экстракт содержит ЛПС в концентрации 14,6 ± 8,4 ЕЭ/мг (где 14,6 представляет собой среднее значение двух независимых экспериментов, каждый из которых был проведен в трех повторностях (N = 6) и 8.4 — стандартное отклонение, связанное с этими измерениями). Как показывает плохая точность этих измерений, количественное определение уровней LPS в этанольном экстракте оказалось затруднительным. В анализе экстракта Chrom-LAL наблюдались чрезмерные вариации от лунки к лунке (но не в стандартах ЛПС), и наблюдалось снижение уровней ЛПС в экстракте с течением времени при повторных анализах. Высокая изменчивость от лунки к лунке может быть объяснена неоднородным характером высушенного этанольного экстракта, который имел смолоподобную консистенцию, что очень затрудняло растворение (даже при интенсивной обработке ультразвуком).В литературе имеется прецедент того, что эндотоксин может существовать в виде агрегатов и что природа этих агрегатов определяет биологическую активность [32]. Вполне вероятно, что агрегаты ЛПС в плохо солюбилизированном экстракте неравномерно распределены между лунками для анализа, что приводит к изменчивости результатов анализа.

    Хотя точные измерения уровней LPS в этаноле E . purpurea были трудными, наши эксперименты действительно показали присутствие бактериального LPS в этом экстракте.Продвинув эти эксперименты на шаг вперед, было интересно проверить гипотезу о том, что этот LPS может быть результатом бактериальных эндофитов (бактерий, которые живут в растении, не вызывая явного заболевания). Эта гипотеза ранее была предложена Паско [12, 13], и было показано, что она верна для исследований с растениями люцерны, но не проверена для растений эхинацеи . Оценить роль бактериальных эндофитов в иммуностимулирующей активности E . пурпурный , E . растения purpurea выращивали в стерильных условиях из стерилизованных семян. В возрасте примерно 6 недель растения собирали и экстрагировали 75% этанолом в асептических условиях. Растения были небольшими, поэтому мы использовали все растение целиком, а не только корни, для производства этанольного экстракта. Экстракты затем тестировали на уровни LPS и на их способность стимулировать продукцию TNF-α клетками RAW 264.7. В качестве отрицательного контроля для учета LPS, введенного в результате лабораторных манипуляций, был приготовлен экстракт из пустого сосуда, в который не добавлялся растительный материал.В качестве положительного контроля этот эксперимент включал растение, выращенное в условиях, идентичных стерильным растениям, но из семян, подвергнутых только поверхностной стерилизации (процесс, удаляющий поверхностные бактерии, но сохраняющий эндофиты). Это положительное контрольное растение было выбрано из 44 особей E . purpurea , выращенных из семян, стерилизованных с поверхности, и был выбран намеренно, поскольку экстракция этого растения давала умеренно высокие уровни LPS (растение 49, таблица S1).

    Экстракты, приготовленные из стерильных семян, и отрицательный контроль содержали очень низкие уровни ЛПС (порядка предела обнаружения, рис. 8). Низкие уровни LPS, наблюдаемые в стерилизованных семенах, подтверждают успех метода, используемого для стерилизации; недавние отчеты от Pasco и . и . показали очень сильную корреляцию между уровнями бактериального ЛПС и бактериальной нагрузкой растений [13]. И наоборот, ЛПС легко обнаруживался в растении положительного контроля.Как и ожидалось, ни один из образцов не стимулировал продукцию TNF-α клетками RAW 264.7, за исключением экстракта, приготовленного из растения положительного контроля. Эти данные свидетельствуют о том, что LPS, происходящие из эндофитных бактерий, действительно могут способствовать стимулирующей активности E . Экстракты пурпуреа . Несомненно, как предполагалось ранее [11], также участвуют дополнительные бактериальные компоненты, такие как липопротеины типа Брауна. Интересно, что более ранние исследования приписывали иммуностимулирующую активность E . purpurea на наличие полисахаридов [33–35], продуцируемых E . пурпурное растение . Растительные полисахариды, по-видимому, не ответственны за стимулирующую активность, наблюдаемую в этих экспериментах, учитывая, что активность терялась при стерилизации семян. Примечательно, однако, что предыдущие исследования показали, что полисахариды присутствуют в некоторых водных экстрактах Echinacea , но не в этанольных экстрактах, таких как оцениваемые здесь [36]. Возможная роль растительных полисахаридов по сравнению с бактериальными компонентами в активности водных E .Экстракты purpurea еще предстоит оценить.

    Рис. 8. Эхинацея пурпурная растения, выращенные из стерилизованных семян.

    Е . Семена purpurea стерилизовали после удаления эпидермиса и выращивали в стерильных условиях в течение шести недель. Отрицательный контроль готовили с использованием тех же реакционных сосудов и растворителей, что и для отдельных растений, но без растительного материала. Семена, использованные для выращивания растения 49, подвергали поверхностной стерилизации, но с неповрежденным эпидермисом (см. таблицу S1).Растения собирали и экстракты тестировали на содержание ЛПС (А) и способность индуцировать продукцию ФНО-α клетками RAW 264.7 после 16–18 ч инкубации (В). Данные показывают средние значения ± стандартное отклонение для повторных экспериментов по измерению секреции TNF-α на панели A и среднее значение ± стандартная ошибка среднего для трехкратных измерений содержания LPS на панели B. Статистический анализ проводили с использованием критерия Стьюдента, ***p <0,001.

    https://doi.org/10.1371/journal.pone.0124276.g008

    Выводы

    Эти исследования демонстрируют сложность модуляторных эффектов E .Экстракты purpurea и их компоненты на продукцию цитокинов макрофагоподобными клетками. Ясно, что спиртовые экстракты содержат множество компонентов [включая алкиламиды, ксантиенопиран и другие), которые могут подавлять выработку провоспалительных цитокинов. Однако эта активность может быть частично или полностью замаскирована стимулирующими соединениями, включая (но, вероятно, не ограничиваясь ими) бактериальные ЛПС. Наши исследования подтверждают гипотезу о том, что макрофагистимулирующая активность присутствует у E .Экстракты purpurea могут происходить из бактериальных эндофитов. Однако стоит отметить, что при коммерческом приготовлении экстрактов эхинацеи бактерии (и связанные с ними соединения, стимулирующие макрофаги) также могут поступать из других источников, таких как поверхностное загрязнение ботанических образцов. Наконец, наши результаты также демонстрируют, что, вопреки распространенному мнению в индустрии пищевых добавок, использование этанола в качестве растворителя не препятствует извлечению ЛПС и других потенциально иммуностимулирующих соединений из бактерий.

    Наши выводы очень важны для разработки эффективных экспериментов с растительными лекарствами в лаборатории и клинике. In vitro , даже с одним экстрактом и одним типом клеток, наши эксперименты ясно демонстрируют, что активность сложного растительного препарата нельзя предсказать на основе нескольких маркерных соединений. Потребуется еще много экспериментов, чтобы полностью понять активность этого экстракта и его компонентов в отношении макрофагов. In vivo ситуация, несомненно, более сложная, поскольку на эффективность сложного растительного препарата влияют дополнительные факторы, такие как биодоступность, несколько типов реагирующих клеток и различия в генетике хозяина.Неудивительно, что клинические испытания, проведенные с Echinacea с использованием разных препаратов, разных протоколов и с разными часто поверхностными анализами конечных точек, дали противоречивую информацию.

    .

    Добавить комментарий

    Ваш адрес email не будет опубликован.