Бенс джонса белок в инвитро: Белок Бенс-Джонса в моче, скрининг с применением иммунофиксации и количественное определение (Bence-Jones Protein, Urine: Immunofixation, Quantification)

10.05.202316.03.2023 alexxlab 0 Комментариев

Содержание

Белок Бенс-Джонса в моче, скрининг с применением иммунофиксации и количественное определение (Bence-Jones Protein, Urine: Immunofixation, Quantification)

Метод определения Электрофорез и иммунофиксация.

Исследуемый материал Моча (проба разовой утренней или суточной мочи) не менее 20 мл

Доступен выезд на дом

Выявление белка Бенс-Джонса в моче методом электрофореза и иммунофиксации.

Белок Бенс-Джонса является первым из описанных онкомаркеров, и со времени его открытия Генри Бенс-Джонсом в 1847 году до наших дней используется в качестве диагностического теста множественной миеломы (опухоли плазматических клеток). Структура белка Бенс-Джонса представлена полимерами с молекулярной массой 22-24 кДа, состоящими из свободных легких цепей иммуноглобулинов. У здоровых людей небольшое количество свободных легких цепей продуцируется постоянно, наряду с полными молекулами иммуноглобулинов. В связи с небольшой молекулярной массой и нейтральным зарядом они фильтруются в первичную мочу через базальную мембрану клубочка, затем реабсорбируются и подвергаются метаболизму в проксимальных канальцах, не попадая в конечную мочу.

При моноклональных гаммапатиях, прежде всего, при множественной миеломе, идиопатическом первичном амилоидозе, реже – при макроглобулинемии Вальденстрема, наблюдается значительная продукция аномальных иммуноглобулинов злокачественным клоном плазматических клеток. Это приводит к избытку свободных легких цепей в первичной моче и появлению белка Бенс-Джонса в конечной моче.

Белок Бенс-Джонса отмечается у 2/3 пациентов с множественной миеломой. Выработка моноклональных полных иммуноглобулинов (обычно IgA и IgG) сопровождается синтезом вариабельного количества легких цепей. Около 20% случаев миеломы характеризуются продуцированием исключительно моноклональных легких цепей (болезнь легких цепей). При электрофорезе белков сыворотки крови белок Бенс-Джонса обычно не выявляется, поскольку легко выводится в мочу, в которой может быть обнаружен благодаря эффекту концентрирования. Определение белка Бенс-Джонса в моче имеет не только диагностическое, но и прогностическое значение, т. к. его избыточное поступление в почки оказывает на них повреждающее действие, приводит к атрофии канальцев, выраженному склерозу интерстиция почки.

Вероятность такого воздействия усиливается предрасполагающими факторами (дегидратация, гиперкальциемия, применение рентгеноконтрастных средств, некоторых лекарственных препаратов), что может вести к необратимой почечной недостаточности, являющейся одним из наиболее грозных проявлений миеломной болезни.

Особо надежным методом выявления моноклональных легких цепей в моче служит электрофорез белков мочи с иммунофиксацией. Белок Бенс-Джонса с помощью метода иммунофиксации можно обнаружить даже на фоне минимальной протеинурии в дебюте болезни при еще не измененной функции почек. Выполнение скринингового иммунофиксационного теста позволяет не только выявить белок Бенс-Джонса, являющийся маркером миеломы, но и определить его количественное содержание, что можно использовать в контроле терапии. При обнаружении белка Бенс-Джонса необходимо его типирование с целью оценки патологического воздействия на почки, поскольку патогенное действие белка Бенс-Джонса типа лямбда выше, чем белка типа каппа (см.

тест №1553).

Скрининг белка Бенс-Джонса в моче (иммунофиксация с поливалентной антисывороткой)

Скрининг мочи на белок Бенс-Джонса c поливалентной сывороткой — определение наличия парапротеина, его содержания, протеинурии. Первичный тест для обследования пациентов с протеинурией.

Синонимы русские

М-градиент.

Метод исследования

Иммунофиксация.

Единицы измерения

Г/л (грамм на литр).

Какой биоматериал можно использовать для исследования?

Суточную мочу, среднюю порцию суточной мочи.

Как правильно подготовиться к исследованию?

Исключить из рациона алкоголь в течение 24 часов до исследования.
Исключить (по согласованию с врачом) прием мочегонных препаратов в течение 48 часов до сбора мочи.

Общая информация об исследовании

Белок Бенс-Джонса – это группа моноклональных свободных легких цепей иммуноглобулинов, которые могут быть определены в моче или в крови. Их появление характерно для лимфопролиферативных заболеваний, таких как множественная миелома. Эта особенность была впервые описана английским врачом Генри Бенс-Джонсом при исследовании образца мочи, что и дало такое название. Впоследствии стало известно, что белок Бенс-Джонса – это, в действительности, гомогенная группа свободных легких цепей иммуноглобулинов, синтезируемых одной плазматической клеткой (моноклональных). Белок Бенс-Джонса – это собирательное название мономеров, димеров, тетрамеров и других полимерных структур, состоящих из легких цепей иммуноглобулинов.

Свободные цепи иммуноглобулинов – это полипептиды с молекулярной массой 22 кДа, которые синтезируются плазматическими клетками и, соединяясь с тяжелыми цепями, образуют молекулы иммуноглобулинов различных классов: IgG, IgM, IgA и других. В зависимости от строения константного домена, различают два класса легких цепей – лямбда (λ) и каппа (κ) цепи. Каждый иммуноглобулин может иметь только один класс легких цепей – или лямбда, или каппа. В норме плазматические клетки синтезируют больше легких, чем тяжелых цепей. Легкие цепи, не вошедшие в состав иммуноглобулинов, называются свободными. Свободные каппа-цепи, как правило, существуют в виде мономера, имеют небольшой размер и поэтому относительно легко фильтруются в первичную мочу. Лямбда-цепи, напротив, обычно существуют в форме димера, что затрудняет их фильтрацию в почечных клубочках. В редких случаях как каппа-, так и лямбда-цепи могут образовывать тетрамеры – крупные комплексы белков, которые в мочу не проникают. В норме практически все количество легких цепей, поступивших в почечные канальцы, подвергается реабсорбции и лишь их незначительная часть выделяется с мочой (не более 0,75-1,8 мг/л). Появление избытка свободных легких цепей иммуноглобулинов в моче (появление белка Бенс-Джонса) может свидетельствовать об их чрезмерной продукции плазматическими клетками (гаммапатии) или о нарушении процесса почечной реабсорбции (заболевания почек). Обнаружение белка Бенс-Джонса может быть использовано для диагностики и контроля лечения этих заболеваний.

Белок Бенс-Джонса определяется у 50-70 % пациентов с множественной миеломой, 30-40 % пациентов с макроглобулинемией Вальденстрема и у 90 % пациентов с первичным амилоидозом. Другими состояниями, при которых может наблюдаться белок Бенс-Джонса в моче, являются лимфома, лейкоз (чаще хронический лимфолейкоз или плазмаклеточный лейкоз), рак поджелудочной железы, медуллярная карцинома щитовидной железы, доброкачественная гаммапатия неясного генеза. При отсутствии какой либо причины появления этого белка в моче говорят об идиопатической протеинурии Бенс-Джонса.

Свободные легкие цепи иммуноглобулинов не могут быть определены с помощью обычного анализа мочи – для этого используются специальные тесты. Как правило, лабораторная диагностика при подозрении на гаммапатию начинается с обычного электрофореза белков плазмы и мочи. Этот шаг необходим для определения концентрации М-белка (парапротеина) и начальной дифференциальной диагностики гаммапатий. Электрофорез, однако, недостаточно чувствительный метод.

По этой причине на втором этапе обследования рекомендуется проведение более чувствительного теста – иммунофиксации белков мочи. Это позволяет избежать диагностических ошибок, учитывая, что гаммапатии могут иметь нормальный результат электрофореза белков. Метод иммунофиксации позволяет идентифицировать белки на электрофореграмме без потери наглядности и четкости классической электрофоретической картины. В месте расположения белка, прореагировавшего с родственной ему антисывороткой, образуется преципитат, который полностью сохраняет форму и положение изучаемой фракции. Предварительно отмыв несвязавшиеся белки солевым раствором, пластины окрашивают. Зону миграции белка уточняют, соотнося положение преципитата, образованного этим белком, с контрольной фореграммой.

Помимо высокой специфичности и разрешающей способности, достоинством метода является его высокая чувствительность. Это объясняется накоплением белка (антител) в зоне градиента при образовании специфического преципитата и минимальной диффузией антигена при реакции с антисывороткой.

При иммунофиксации можно выявить следовые М-градиенты, которые не видны на окрашенной электрофореграмме. Основная сложность — подбор адекватного разведения образца для получения плотного, хорошо видимого преципитата. Если образец разведен недостаточно, то преципитат может раствориться в избытке антигена (исследуемый белок). При слишком большом разведении образца образовавшийся преципитат можно не увидеть. В обоих случаях имеет место ложноотрицательный результат.

Белок Бенс-Джонса также может не определяться в моче на ранней стадии заболевания, когда избыток свободных легких цепей еще может быть реабсорбирован в почечных канальцах (вплоть до 1 г в день при нормальной функции почек), и в редких случаях, когда свободные легкие цепи образуют тетрамеры, не фильтрующиеся в почечном клубочке.

Ложноположительный результат может быть получен при приеме некоторых лекарственных средств (например, аспирин и пенициллин в высоких дозах), хронической почечной недостаточности или при некоторых системных заболеваниях (ревматоидный артрит, СКВ, полимиозит).

Учитывая эти ограничения метода иммунофиксации, интерпретация результатов должна проводиться с учетом дополнительных анамнестических, лабораторных и инструментальных данных.

Для чего используется исследование?

Для диагностики и контроля лечения моноклональных гаммапатий (множественной миеломы, болезни легких цепей, макроглобулинемии Вальденстрема).

Когда назначается исследование?

При подозрении на наличие злокачественного гематологического заболевания;

при проведении дифференциального диагноза между множественной миеломой, остеопорозом, метастазами в кости и рядом других заболеваний, сопровождающихся множественными переломами и болями в костях.

Что означают результаты?

Референсные значения

Легких цепей (белка Бенс-Джонса) и моноклональных иммуноглобулинов не обнаружено. Протеинурии не обнаружено.

Положительный результат:

первичный амилоидоз;
моноклональная гаммапатия неясного генеза;
криоглобулинемия;
синдром Фанкони;
гиперпаратиреоз;
множественная миелома;
остеомаляция;
макроглобулинемия Вальденстрема;
медуллярный рак щитовидной железы;
аденокарцинома поджелудочной железы;
лимфома;
лейкоз;
идиопатическая протеинурия Бенс-Джонса.

Отрицательный результат:

норма;
эффективное лечение заболевания.

Что может влиять на результат?

Стадия заболевания: белок Бенс-Джонса может не определяться в моче на ранней стадии заболевания;
прием аспирина и пенициллина в высоких дозах может приводить к получению ложноположительного результата;
наличие системных заболеваний (ревматоидный артрит, СКВ, полимиозит) и хронической почечной недостаточности может приводить к получению ложноположительного результата;
наличие тетрамеров лямбда- или каппа-легких цепей (не попадающих в мочу) может приводить к получению ложноотрицательного результата.

Важные заменчания

Белок Бенс-Джонса в моче обнаруживается при ряде злокачественных гематологических заболеваний. Однако его отсутствие не позволяет исключить наличие онкологического заболевания. Кроме того, результат может быть ложноположительным в случае наличия у пациента аутоиммунного заболевания. Чтобы верно интерпретировать результат исследования, нужна комплексная оценка результатов остальных анализов, а также других медицинских данных.

Также рекомендуется

[06-004] Альбумин в сыворотке

[06-035] Белок общий в сыворотке

[06-038] Белок общий в моче

[08-010] Суммарные иммуноглобулины G (IgG) в сыворотке

[08-011] Суммарные иммуноглобулины M (IgM) в сыворотке

[06-011] Белковые фракции в сыворотке

[13-056] Иммунофиксация иммуноглобулинов сыворотки крови с антисыворотками IgG, A, M K, L с количественным определение парапротеина

Кто назначает исследование?

Гематолог, онколог, терапевт, врач общей практики.

Литература

NauKC, LewisWD. Multiplemyeloma: diagnosisandtreatment. Am Fam Physician. 2008 Oct 1;78(7):853-9. Review.
Levinson SS, Keren DF. Free light chains of immunoglobulins: clinical laboratory analysis. Clin Chem. 1994 Oct;40(10):1869-78.
Whicher JT, Hawkins L, Higginson J. Clinical applications of immunofixation: a more sensitive technique for the detection of Bence Jones protein. J Clin Pathol. 1980 Aug;33(8):779-80.
Chernecky C. C. Laboratory Tests and Diagnostic Procedures / С.С. Chernecky, В.J. Berger; 5th ed. — Saunder Elsevier, 2008.

белков Бенс-Джонса и легких цепей иммуноглобулинов. XV. Влияние кортикостероидов на синтез и выведение белка Бенс-Джонса

. 1978 г., январь; 61 (1): 97–108.

DOI: 10.1172/JCI108930.

А Соломон

PMID: 618916
PMCID: PMC372518
DOI: 10. 1172/ДЖКИ108930

Бесплатная статья ЧВК

Соломон. Джей Клин Инвест. 1978 Январь

Бесплатная статья ЧВК

. 1978 г., январь; 61 (1): 97–108.

DOI: 10.1172/JCI108930.

Автор

А Соломон

PMID: 618916
PMCID: PMC372518
DOI: 10.1172/ДЖКИ108930

Абстрактный

Влияние кортикостероидов и цитотоксических химиотерапевтических средств на экскрецию белка Бенс-Джонса определяли на сроках от 1 до 62 мес в течение 29 лет. больных множественной миеломой и протеинурией Бенс-Джонса. Определяли количество белка, присутствующего в 24-часовых образцах мочи, собранных до лечения и с частыми интервалами в течение месячных циклов лечения. Поразительные вариации наблюдались в количестве экскреции белка Бенс-Джонса; эти изменения были особенно очевидны, когда 75 мг преднизона давали ежедневно в течение 7 дней в рамках ежемесячного химиотерапевтического режима. В течение 7 дней у семи пациентов практически не было снижения (<25%), тогда как у 13 и 9у пациентов наблюдалось умеренное снижение (25-75%) или заметное снижение (>75%), соответственно, протеинурии Бенс-Джонса по сравнению со значениями до лечения. Уменьшение экскреции белка Бенс-Джонса в этот период было связано главным образом с терапией кортикостероидами из-за преходящего характера ответа у большинства пациентов и отсутствия такого ответа у трех пациентов, когда гормон был исключен. Были проведены исследования биосинтеза для определения in vitro влияния кортикостероидов на синтез белка Бенс-Джонса. Плазматические клетки, полученные из костного мозга 13 больных, инкубировали в питательной среде, содержащей (14)С-меченый лизин и изолейцин и преднизолон в концентрациях до 240 мкг/мл, и иммунохимически определяли количество синтезированного белка Бенс-Джонса. Различий в жизнеспособности между необработанными и обработанными преднизоном клетками не наблюдалось. Тип ответа, проявляемый отдельным пациентом в виде процентного снижения белка Бенс-Джонса, выделяемого после 7 дней лечения преднизоном, был сравним с процентным снижением вновь синтезированного белка Бенс-Джонса, секретируемого опухолевыми клетками при культивировании в присутствии преднизолона в течение 7 дней. концентрация 120 мкг/мл. Заметные различия в способности кортикостероидов влиять на синтез белка Бенс-Джонса, по-видимому, отражают биохимическую гетерогенность новообразований плазматических клеток.

вещества

Белок Бенс-Джонса — количественная информация | Гора Синай

Легкие цепи иммуноглобулина — моча; Белок Бенс-Джонса 9 в моче0003

Этот тест измеряет уровень аномальных белков, называемых белками Бенс-Джонса, в моче.

Мочевая система состоит из почек, мочеточников, уретры и мочевого пузыря.

Как проводится тест

Необходим чистый образец мочи. Метод чистого сбора используется для предотвращения попадания микробов из полового члена или влагалища в образец мочи. Для сбора мочи медицинский работник может дать вам специальный набор для сбора мочи, который содержит очищающий раствор и стерильные салфетки. Точно следуйте инструкциям, чтобы результаты были точными.

Образец отправлен в лабораторию. Существует много методов, используемых для обнаружения белков Бенс-Джонса. Один метод, называемый иммуноэлектрофорезом, является наиболее точным.

Как будет проходить тест

Тест включает только нормальное мочеиспускание, дискомфорта нет.

Зачем проводится тест

Белки Бенс-Джонса являются частью обычных антител, называемых легкими цепями. Эти белки обычно не находятся в моче. Иногда, когда ваш организм вырабатывает слишком много антител, уровень легких цепей также повышается. Белки Бенс-Джонса достаточно малы, чтобы отфильтровываться почками. Затем белки попадают в мочу.

Ваш врач может заказать этот тест:

Для диагностики состояний, которые приводят к появлению белка в моче
Если у вас много белка в моче
Если у вас есть признаки рака крови, называемого множественной миеломой

Нормальные результаты

Нормальный результат означает, что в моче не обнаружены белки Бенс-Джонса.

Что означают аномальные результаты

Белки Бенс-Джонса редко обнаруживаются в моче. Если они есть, это обычно связано с множественной миеломой.

Аномальный результат также может быть вызван:

Аномальным накоплением белков в тканях и органах (амилоидозом)
Раком крови, называемым хроническим лимфоцитарным лейкозом
Раком лимфатической системы (лимфомой)
Накоплением в крови белок, называемый М-белком (моноклональная гаммапатия неизвестного значения; MGUS)
Хроническая почечная недостаточность

Риски

В этом тесте нет рисков.

Чернецкий CC, Бергер Б.Дж. Электрофорез белков — моча. В: Chernecky CC, Berger BJ, ред. Лабораторные тесты и диагностические процедуры . 6-е изд. Сент-Луис, Миссури: Эльзевир Сондерс; 2013:920-922.

Райли Р.С., Макферсон Р.А. Базовое исследование мочи. В: Макферсон Р.А., Пинкус М.Р., ред. Клиническая диагностика Генри и лечение с помощью лабораторных методов . 24-е изд. Филадельфия, Пенсильвания: Elsevier; 2022: глава 29.

Rajkumar SV, Dispenzieri A. Множественная миелома и родственные заболевания. В: Нидерхубер Дж. Э., Армитаж Дж. О., Кастан М. Б., Дорошоу Дж. Х., Теппер Дж. Э., ред. Клиническая онкология Абелоффа . 6-е изд. Филадельфия, Пенсильвания: Elsevier; 2020: глава 101.

Последнее рассмотрение: 29 апреля 2022 г.

Рецензию сделал: Тодд Герстен, доктор медицинских наук, гематология/онкология, Флоридский институт специалистов по раку и научно-исследовательский институт, Веллингтон, Флорида. Обзор предоставлен VeriMed Healthcare Network. Также рецензировали Дэвид С. Дагдейл, доктор медицинских наук, медицинский директор, Бренда Конауэй, главный редактор, и A.