Энтерококки у грудничка в кале: Энтерококки в кале у ребенка: норма и причины повышения

энтерококки в кале — 25 рекомендаций на Babyblog.ru

В последнее время в поликлинике произошли глобальные изменения — то капитальный ремонт затеяли, то молочку уже не по рецепту получать, то теперь не пускают грудничков в другие дни, кроме вторника, то еще что-то. В общем наш педиатр назначила нам прием в четверг, так как нам нужно как раз делать прививки (АКДС и полиомелит). Занимая очередь, мне сообщают, что наш доктор заболел и его заменяет другой, соответственно и медсестра тоже другая.Ну в итоге нас приняли последними, так как мы с другого участка, еще и предъявили почему не в свой день пришли. Я сказала, что нам назначили и тихонько свалила на врача — все равно она болеет… Выписали нам направление на прививки, ну и заодно померили и взвесили.

Вес: 8700 кг — поправились на смеси, так как стала давать на ночь. Рост: 70,5 — без изменений.

Хирург-ортопед: Нас посмотрели, попросили показать как мы стоим — разрешили уже носить обувь. Диагноз: здорова. На прием в годик.

Ну и наш любимый аллерголог:

Начну с того, что мы сдали анализ кала на копрологию и снова на дисбактериоз. Результаты не очень хорошие:

— В копрологии обнаружено повышенное кол-во лейкоцитов, а это значит, что в кишечнике какой-то воспалительный процесс.

— Дисбактериоз тоже не обрадовал, наоборот появилось много новых гадостей! Зато бифидобактерий стало немного больше, это хорошо.

Бифидобактерии 9 — норма 10-11 (в предыдущем анализе было 7)

Клостридии 5 — > или = 3

Энтерококки 8 — норма 5-7

Грибы рода Candida 5 — > или = 3

Наблюдается снижение содержания бифидобактерий. Повышено содержание клостридий, энтерококков, дрожжеподобных грибов рода Candida. Остальные показатели в пределах нормы. Наблюдается снижение содержания бифидобактерий. Повышено содержание клостридий, энтерококков, дрожжеподобных грибов рода Candida. Остальные показатели в пределах нормы.

Наши высыпания до сих пор продолжают нас преследовать. Аллерголог посоветовала вести пищевой дневник, но я ничего такого не замечаю, чтобы было хуже от каких-то продуктов, кроме банана, но его мы давно исключили, да и аллерголог сказала, что с тропическими фруктами нужно быть осторожнее. Внешнее раздражение сказала снимать Целестодермом (на данный момент это единственное, что нам помогает, хоть это и гормональный препарат, мазь), после ванны мазать увлажняющим кремом, желательно Локобейз-репиа, и прописала нам месяц пить нормофлорины Л и Б. Жуть какая гадость, да и не в каждой аптеке продается. На прием в конце ноября.

Теперь про прививки: Сделали нам третий этап прививок, осталось АКДС и полиомелит. На этот раз нам сделали один укол и капли в ротик. Как всегда плакала, да и спать очень хотела еще, гномик мой сонный — намучала тебя мамка.. Реакция на прививку проявилась в виде бессонной ночи мамы и Сони, опять у нее был жар и поднялась температура, правда небольшая 36,8. К утру Софи уснула, а после завтрака температура была уже 37,3, но мы все же отправились гулять в последние теплые деньки. А к вечеру вместо температуры, на месте прививки у нас появились высыпания, которые разошлись по всем ножкам (хотя, ножки у нас были чистые — без высыпаний), которые до сих пор не проходят,

что это, нужно ли лечить?

По результатам обследования на дисбактериоз могут быть обнаружены энтерококки в кале у ребенка.

Что это означает, есть ли причины для беспокойства и нужно ли что-то с этим делать – стоит узнать маме еще до рождения малыша.

Польза и вред энтерококков

Энтерококки – это мелкие микробы, имеющие округлую форму, не образовывающие капсулы и споры.

Не так давно они были выделены в отдельную группу, которая представлена грамположительными микробами 15 видов (ранее энтерококк причисляли к стрептококкам).

Наиболее распространены 2 вида: энтерококк фекальный и энтерококк фэциум (наиболее патогенным является первый из них, поскольку способен возбудить инфекционные заболевания мочевыделительной системы, органов малого таза и внутренней оболочки сердца).

Эти микробы – важная составляющая человеческой микрофлоры, отвечают за формирование иммунной системы ребенка.

Поселяются энтерококки в организме в первые дни жизни малыша, новорожденный получает их с материнским молоком или, если он находится на искусственном вскармливании, через руки матери, персонала родильного дома и воздушно-капельным путем.

В основном они дислоцируются в тонком и толстом кишечнике. Нормальное количество энтерококков для взрослого – 100 миллионов на грамм кала.

Такое высокое, на первый взгляд, содержание, является безобидным и необходимо для выполнения целого ряда функций: уничтожения патогенных микроорганизмов, синтеза витаминов, расщепления и переработки углеводистой пищи, усвоения сахара, повышения иммунитета.

Применяются штаммы энтерококков и в пищевой промышленности: для сквашивания молока, уничтожения патогенной микрофлоры в продуктах, гидролиза лактозы.

Используются они в производстве кисломолочной продукции и сыроварении. В медицинские препараты энтерококки добавляют для восстановления нормальной микрофлоры кишечника человека.

Однако количество энтерококков очень важно держать в норме и иногда контролировать, тем более у детей.

В то время, когда защитные силы организма снижены (в результате длительного лечения антибиотиками, перенесенного хирургического вмешательства, после употребления кортикостероидов), начинается развитие условно патогенных микроорганизмов, в том числе энтерококкового ряда.

Они способны приводить к развитию заболеваний, с трудом поддающихся лечению. Кроме того, патогенными энтерококки становятся в том случае, если попадают в места, не являющиеся типичными для их обитания (в почки или мочевыделительную систему).

В таких случаях микроорганизмы могут стать возбудителями патологий мочеполовой системы, дивертикулита толстой кишки, септического артрита, бактериемии, эндокардита, гастрита, энтерита и менингита.

Энтерококковые инфекции

В детском возрасте наиболее часто встречается резкое увеличение количества энтерококков, поскольку иммунитет ребенка еще не в состоянии подавлять их размножение.

Факторами, провоцирующими рост патогенной микрофлоры, могут стать такие причины, как:

• переохлаждение малыша;
• простудные заболевания;
• прием антибиотиков, подавляющих микрофлору, в том числе полезную;
• проведение исследований с помощью инвазивных методик.

Верный симптом того, что у ребенка повышены энтерококки – проявления диареи, однако точную картину даст лишь биохимический анализ кала ребенка.

Получив на руки результаты анализов, можно увидеть, не превышено ли в кале у ребенка содержание микробов: нормальным у младенца до года принято считать количество от ста тысяч до десяти миллионов на грамм фекалий, у детей постарше – до ста миллионов.

Если число энтерококков меньше указанной нормы, то никакой причины для беспокойства нет, патологией это не является.

Высокое число микроорганизмов может свидетельствовать о воспалении органов брюшной полости и малого таза. У девочек неконтролируемый рост энтерококков часто свидетельствует о вульвовагинитах и вульвитах.

Однако чаще всего дети страдают  от дисбактериоза, который является следствием увеличения патогенной микрофлоры.

Видео:

Типичными симптомами этого заболевания являются ухудшение аппетита, тошнота, метеоризм, расстройство стула, общая интоксикация организма.

Кал во время дисбактериоза, вызванного энтерококками, имеет кислый или гнилостный запах. Дети становятся непривычно вялыми, имеют плохой сон и не хотят играть.

Наиболее тяжело дисбактериоз переносится в грудном возрасте, когда организм не в состоянии регулировать баланс «хороших» и «плохих» микроорганизмов.

Энтерококки в кале у грудничка могут повышаться даже из-за небольших повреждений кожного покрова или слизистой.

Лечение в этом случае нужно начинать незамедлительно, в противном случае младенец рискует столкнуться с множеством заболеваний инфекционного характера.

Лечение и профилактика

Лечение инфекций, вызванных энтерококками, проводится под контролем врача. Для точной постановки диагноза одной копрограммы не всегда достаточно, например, при проявлении первых признаков заболеваний мочевыводящей системы обязательно берут на анализ мочу.

Диагноз считается подтвержденным, если количество энтерококков в ней выше ста тысяч микроорганизмов на  грамм свежесобранного материала. Схема лечения и препараты зависят от возраста пациента.

Лечение инфекций, вызванных энтерококками, у детей старше года проводится антибиотиками (чаще «Ампициллином» в таблетированной форме) и сопровождается обязательным  приемом витаминных комплексов.

Видео:

В случаях, когда лечение таблетками не принесло ожидаемого эффекта, доктора назначает внутримышечные инъекции.

Помимо этого, для обеспечения высокой эффективности лечения перед назначением препаратов проводится бакпосев, позволяющий точно определить вид энтерококка и, соответственно, подобрать антибиотик, к которому он восприимчив.

Легкая форма заболевания лечится с применением аминогликозидов (Сизомицин, Тобрамицин, Амикацин).

Помимо этого, терапия эхинококкоза проводится с применением свечей или таблеток, способных восстановить баланс микрофлоры (пробиотиков Ацилакт, Лактонорм, Бифидумбактерин, Бифиформ, Линекс), и иммуномодулирующих препаратов, направленных на восстановление защитных ресурсов организма. Длительность восстановительного периода обычно составляет не менее двух недель.

Снижение количества энтерококков в кале грудничка достигается посредством применения интести-бактериофагов, поскольку лечение антибиотиками может навредить крохе, иммунная система которого еще только формируется.

Бактериофаг в жидкой форме дают ребенку трижды в день перед едой; в тех случаях, когда напоить малыша не представляется возможным, практикуют клизменное введение.

Лечение длится в течение 5-6 дней. В тех случаях, когда анализы говорят об улучшении, но полное выздоровление еще не наступило, можно продлить курс на 2-3 дня.

Стоит отметить, что лечение бактериофагами уступает избавлению от энтерококков антибиотиками, однако для младенцев выбирают наиболее щадащий вариант.

Главной причиной роста энтерококков в кале детей является низкая иммунная защита, поэтому лучшей профилактикой может стать правильный режим питания и регулярные прогулки.

Видео:

Мамам грудничков нужно соблюдать время кормлений и их продолжительность,  младенцам-искусственникам необходимо подобрать оптимальную смесь.

Появление любого из признаков развивающегося дисбактериоза, регулярные расстройства кишечника должны стать причиной посещения педиатра.

Энтерококки в фекалиях ребенка далеко не всегда являются поводом для беспокойства, поскольку в норме они помогают нормальному функционированию организма.

Небольшое превышение их количества легко исправляется с помощью корректировки питания.

Сдерживание же ускоренного роста энтерококков проводится с применением определенных медикаментов, правильно подобрать которые в состоянии только врач-педиатр.

Понравилась статья? Поделитесь:

причины, норма у грудничка, лечение антибиотиками

Под энтерококками подразумевают род бактерий Enterococcacea, которые относятся к грамположительным коккам, относящиеся к подклассу лактобактерий. На сегодняшний день ученым известно около 15 видов энтерококков.

Эти бактерии обитают в теле и мужчин и женщин, их относят к условно-патогенной микрофлоре.

В самом кишечнике человеческого организма проживают такие виды энтерококков:

• Фекальный.
• Фэциум.

Эти разновидности бактерий образуют состав нормальной микрофлоры желудочно-кишечного тракта (ЖКТ). Эти же бактерии могут наносить и вред человеческому организму, а именно спровоцировать прогрессирование различных заболеваний (менингит, пищевые отравления, дисбактериоз и другие).

Патогенная активность именно фекального энтерококка и продуцирует развитие воспалительных процессов.

Энтерококки участвуют:

1. в процессе переработки углеводов;
2. в производстве витаминов;
3. влияют на благоприятное создание местного иммунитета (непосредственно в кишечнике).

Для того чтобы царила полная гармония, необходимо достижение такого состояния взаимодействия, при котором количество кишечных палочек не будет превышать количество энтерококков. Нарушение этой гармонии приводит к развитию огромного ряда серьезных заболеваний.

Показатели нормы

В норме показатели энтерококков будут следующие:

• Для детей до одного года 105-107.
• Для более старшего возраста 105-108.
• Для взрослых показатель в пределах 105-108.

Причины появления энтерококков

Причины появления энтерококков в кале очень часто раскрываются через нарушения работы микрофлоры кишечника.

Это может быть вызвано:

• Достаточно длительным приемом антибактериальных препаратов.
• Заражением через кожные и слизистые повреждения. Это чаще всего может наблюдаться при проведении манипуляций в больничных учреждениях, при использовании недостаточно обработанных инструментов.
• Гормональным дисбалансом у женщин.
• У беременных женщин, как результат постоянных количественных изменений эстрогенов и андрогенов.
• Изменениями, происходящими через эндокринные процессы в организме.

Польза энтерококков для организма

Можно выделить такие важные функции энтерококка в организме:

• Расщепление и переработка углеродов.
• Укрепление иммунитета.
• Понижение кислотности желудка, общего смягчающего действия на него.
• Процесс уничтожения патогенных микроорганизмов.
• Синтез витаминов.
• Благотворное влияние на усвоение сахара.

Опасность энтерококков в организме

Опасность скрывается за целой цепочкой серьезных заболеваний. Важно следить за тем, чтобы показатели данного вида бактерий были в пределах нормы.

Полезные бактерии энтерококки становятся патогенными вследствие:

• затяжных болезненных процессов;
• перенесенных операций;
• приема препаратов антибиотиков и кортикостероидов

Патогенными энтерококки становятся и тогда, когда проникают в места нетипичного их обитания (например, попадание их в мочевыводящие пути или почки).

Заболевания, вызванные повышением энтерококков

Энтерококки могут вызвать такие заболевания:

• Дивертикулит толстой кишки – это болезненный процесс образования на стенках кишки различных образований. Зачастую они имеют мешковидную форму. Это заболевание нарушает процесс нормальной моторики кишечника.
• Различные патологии мочеполовой системы, несвоевременное лечение этих заболеваний может приобрести хроническую форму, которая будет проявляться периодическими рецидивами.
• Эндокардит. Это инфекционно-воспалительное заболевание сердца, может иметь как острый, так и хронический характер. Патогенные организмы поражают внутреннюю оболочку предсердий и желудочка, поражению подвергается также клапанный аппарат.
• Септический артрит — инфекционное поражение одного или нескольких суставов.
• Бактериемия — наличие патогенных бактерий в крови человека.
• Менингит представляет собой инфекционное воспаление оболочки спинного или головного мозга.
• Хронический гастрит – это поверхностное воспаление оболочки желудка
• Хронический энтерит. Длительно протекающее воспалительное заболевание тонкой кишки

Диагностика заболеваний, вызванных энтерококками

Общие лабораторные анализы и дополнительные:

• кровь;
• моча;
• анализ каловых масс.

С помощью последнего анализа можно точно подтвердить или отклонить вероятность подозрения инфекционной основы того или иного заболевания.

Лечение болезней, вызванных энтерококками

После проведения диагностирующих процедур, по изучению нарушения микрофлоры кишечника, а именно в случае наличия энтерококков, превышающих показатели нормы, актуальным будет лечение антибиотиками.

Для того чтобы определить к каким антибиотикам чувствителен штамм энтерококка, следует произвести посев. С помощью аминогликозидов осуществляется борьба с инфекциями, которые имеют легкую форму.

Микрофлора кишечника восстанавливается благодаря приему специальных терапевтических таблеток и свечей. Прием иммуномодуляторов способствует восстановлению и укреплению защитных сил организма.

Лечение взрослых и детей старшей возрастной категории

Лечение необязательно с применением щадящей терапии. Так как чаще всего причиной выступает ослабленный иммунитет, то все методы лечения должны быть направлены на повышение иммунных процессов организма.

Одним из вариантов лечения можно рассматривать:

1. применение антипаразитарного прибора Паркес;
2. лечение ампициллином и ванкомицином;
3. использование бактериофага- происходит за счет полного поражения этим препаратом патогенных бактерий. Курс лечения в основном длится 5-6 дней, после чего в большинстве случаев диагностируется улучшение общего состояния;
4. антибиотикотерапия (например, ампициллином), в основном длится в течение пяти дней, если есть положительная динамика, курс лечения максимально может продлиться до нескольких недель.

Лечение грудничка

Лечение обусловлено особенностью маленького организма, в лечении которого терапия антибиотиками абсолютно не приемлема. У грудного ребенка не достаточно сформирован иммунитет, а в такой ситуации прием антибиотиков существенно ухудшит состояние больного. Как выглядит кал грудничка, его нормы и отклонения читайте здесь.

В такой ситуации применяется щадящее лечение:

• с помощью бактериофагов;
• препарата Креон 1000, который и стабилизирует микрофлору малыша;
• восстановление режима грудного вскармливания;
• длительные и регулярные прогулки на свежем воздухе.

Если грудное вскармливание уже невозможно, то при подборе детской молочной смеси следует подобрать именно достаточно качественное питание, что будет соответствовать потребностям маленького организма.

Помимо терапии, снижающей количество патогенных бактерий, следует помнить о необходимости приема важных для организма витаминных комплексов.

Профилактика заболевания дисбактериоза

Профилактика очень важна как для взрослого, так и ребенка, а тем более грудничка. Родителям следует достаточно уделять внимания изменениям в настроении детей, что может свидетельствовать о начале негативной симптоматики.

Важно придерживаться не сложных, но очень важных правил, для профилактики этого заболевания:

• Правильный режим питания и регулярные прогулки на свежем воздухе будут положительно влиять на любой организм, как не имеющий достаточного иммунитета (грудничок), так и для уже взрослого человека.
• Обязательным правилом для мам грудных детей — соблюдение режима и общую продолжительность кормления младенца.
• Отказ от вредных привычек, существенно снижающих защитные силы организма.
• Регулярные занятия спортом и закаливание

Микрофлора кишечника, правильно функционирующая, это не всегда стабильное состояние человека. Превращение положительно настроенных бактерий, в связи с рядом причин, в патогенные вредители, может произойти за очень короткий промежуток времени.

Обращение к медицинскому специалисту и проведение необходимых диагностических процедур поможет не допустить усугубления ситуации.

Особое внимание следует уделить малышам грудного возраста, у которого иммунитет недостаточно сформированный, что делает грудничков наиболее беззащитными перед наплывом различных инфекций.

Здоровый и активный образ жизни не только укрепляет защитные силы организма, но и способствуют общему иммунитету к большинству различных инфекций. Правильное питание, как детей, так и взрослых станет основой здорового организма.

Энтерококки в кале у грудничка

Новорожденный ребенок нуждается в постоянном динамическом наблюдении со стороны педиатра. В один месяц малышу назначают большое количество анализов, позволяющих оценить состояние здоровья малыша. В том числе врач может назначить сдать кал на дисбактериоз. По результатам анализов он может обнаружить, что в кале у ребенка повышены энтерококки.

Начиная с самого рождения, энтерококки заселяют микрофлору кишечника. У ребенка в возрасте до одного года их количество составляет примерно 100 миллионов на один грамм фекалий. Первоначально они выполняют достаточно полезную функцию: способствуют усвоению сахара, синтезу витаминов, уничтожению условно-патогенных микроорганизмов. Однако превышение их количества требует пристального внимания, так как способны вызывать ряд серьезнейших заболеваний:

• менингит;
• дивертикулит;
• бактериемия;
• поражение мочеполовой системы;
• хронический энтерит;
• колит;
• хронический гастрит.

Энтерококки в кале у грудничка: нужно ли их лечить?

Энтерококки могут содержаться и в грудном молоке. Поэтому если малыш находится на грудном вскармливании, вполне возможно, что именно мама «заражает» его. В таком случае необходимо сдать грудное молоко в лабораторию для исследования. Грудное вскармливание при этом не прекращают.

Поскольку в столь раннем возрасте иммунная система малыша еще слабо развита и находится только на этапе формирования, то любое лечение, подразумевающее прием антибиотиков, может способствовать росту энтерококков. Поэтому важно не столько лечить у ребенка фекальный энтерококк, сколько восстанавливать микрофлору кишечника, чтобы обеспечить оптимальный уровень бифидо- и лактобактерий. В таком случае врач может назначить креон или бактериофаг. Однако следует помнить, что лечение можно начинать только при условии, что количество энтерококков в кале значительно превышает нормативные показатели. Если же их повышение некритично, то энтерококки у детей не нуждаются в лечении.

 

как вылечить, причины, симптомы, профилактика, консультация врача, последствия

Диагностика и лечение энтерококков у ребенка

Для обнаружения повышенного числа этих грамположительных микробов проводится копрограмма. В норме количество энтерококков в кале у ребенка колеблется в пределах 106—107 бактерий на 1 г. биологического материала.

Для постановки точного диагноза анализ кала не всегда является единственным маркером наличия расстройства. При выраженных признаках воспаления мочевыделительной системы показан анализ мочи. Диагноз устанавливается, если содержание энтерококков в моче у ребенка превышает сто тысяч микробных тел на 1 мл. свежевыпущенной жидкости.

Для эффективного лечения сначала определяют вид энтерококка, вызвавшего развитие инфекции. Больным показан прием жидкого интести-бактериофага. Этот антибактериальный препарат используют для терапии широкого круга болезней пищеварительного тракта, ассоциированных с деятельностью чувствительных микроорганизмов. Во избежание побочных эффектов у младенцев первые два дня лекарственное средство разводят кипяченой водой. При отсутствии негативной реакции по истечении этого срока бактериофаг можно принимать неразведенным.

Детям старше 3 лет перед употреблением препарата следует выпить раствор, состоящий из 0,5 стакана воды и половины чайной ложки соды.

Антибиотики, конечно, намного лучше подавляют патогенную микрофлору, однако бактериофаги более безопасны для маленького ребенка. Именно это и служит определяющим фактором для педиатра при составлении конечной схемы лечения.

Профилактика, консультация педиатра по вопросу энтерококков у ребенка

Наличие инфекции сложно не заметить. Поэтому, как только у маленького пациента появились первые признаки болезни, нужно записаться на прием к педиатру. В ходе первой консультации врач оценивает состояние малыша на основании сведений анамнеза, физикального осмотра и медицинской документации.

Дальнейшая диагностика проводится с целью подтверждения микробной природы патологии и выбора оптимальной лечебной тактики. Своевременное обращение к доктору – залог эффективного подавления инфекции и нормализации кишечной микрофлоры.

Основными методы профилактики энтерококковых инфекций заключаются в раннем удалении мочевых, венозных катетеров (устанавливаются для проведения различных медицинских манипуляций) и иссече­нии некротических тканей. Кроме того, регулярное посещение профилактических обследований – надежный способ выявить болезнь на ранней стадии.

Анализ кала на дисбактериоз

Анализ кала на дисбактериоз

Представлены обобщенные сведения о традиционном микробиологическом анализе кала культурально-зависимым способом (бакпосевом).

О новых методиках анализа кишечной микробиоты информация ниже.

Анализ кала на дисбактериоз или Бактериологический посев (посев или бакпосев). Посев — это биологическое исследование испражнений, которое определяет состав и примерное количество микроорганизмов, обитающих в кишечнике человека. Для этого используется внесение частиц кала на разные питательные среды, на которых растут 3 группы микроорганизмов: нормальные (необходимы для переваривания пищи), условно-патогенные (способные при снижении естественной резистентности макроорганизма вызывать заболевания, для которых характерно отсутствие нозологической специфичности) и патогенные (болезнетворные). Указанное лабораторное исследование используется в медицинской практике с профилактической целью и при подозрении на инфекционное заболевание желудочно-кишечного тракта. 

Данное исследование позволяет определить содержание бактерий в толстом кишечнике. В кишечнике человека содержится огромное количество бактерий, которые активно участвуют в переваривании и усвоении питательных веществ. Анализ кала на дисбактериоз назначается по большей части детям, в таких случаях, когда имеются следующие нарушения работы кишечника: диарея, запор, боли в животе, метеоризм, а также после длительного лечения антибиотиками (антибиотики помимо того, что борются с инфекциями, уничтожают и нормальные бактерии кишечника). Существую три группы бактерий кишечника – «нормальные» бактерии (бифидобактерии, лактобактерии и эшерихии) они активно участвуют в работе кишечника, условно-патогенные бактерии  (энтерококки, стафилококки, клостридии, кандиды) при определенных обстоятельствах могут превратиться в патогенные бактерии и вызвать различные заболевания, и патогенные бактерии (шигелла, сальмонелла) которые при попадании в кишечник вызывают серьезные инфекционные заболевания кишечника.

Нормы анализа кала на дисбактериоз

(КОЕ / г фекалий)

	Дети до 1 года	Дети старшего возраста	Взрослые
Бифидобактерии	1010 – 1011	109 – 1010	108 – 1010
Лактобактерии	106 – 107	107 – 108	106 – 108
Эшерихии	106 – 107	107 – 108	106 – 108
Бактероиды	107 – 108	107 – 108	107 – 108
Пептострептококки	103 – 105	105 – 106	105 – 106
Энтерококки	105 – 107	105 – 108	105 – 108
Сапрофитные стафилококки	≤104	≤104	≤104
Патогенные стафилококки	—	—	—
Клостридии	≤103	≤105	≤105
Кандида	≤103	≤104	≤104
Патогенные энтеробактерии	—	—	—

Бифидобактерии

Норма бифидобактерий

Дети до 1 года	1010 – 1011
Дети старшего возраста	109 – 1010
Взрослые	108 – 1010

Около 95% всех бактерий в кишечнике – бифидобактерии. Бифидобактерии участвуют в производстве таких витаминов как В₁, В₂, В₃, В₅, В₆, В₁₂,К. Помогают всасыванию витамина D, при помощи специальных вырабатываемых ими веществ борются с «плохими» батериями, а также участвуют в усилении иммунитета.

Причины снижения количества бифидобактерий

• Медикаментозное лечение (антибиотики, нестероидные противовоспалительные средства (НПВС) такие как анальгин, аспирин, слабительные средства)
• Неправильное питание (избыток жиров или белков или углеводов, голодание, неправильный режим питания, искусственное вскармливание)
• Кишечные инфекции (дизентерия, сальмонеллез, вирусные инфекции)
• Ферментопатии (целиакия, лактазная недостаточность)
• Хронические заболевания ЖКТ (хронический гастрит, панкреатит, холецистит, язвенная болезнь желудка или двенадцатиперстной кишки)
• Иммунные заболевания (иммунные дефициты, аллергии)
• Смена климатических зон
• Стресс

Лактобактерии

Норма лактобактерий

Дети до 1 года	106 – 107
Дети старшего возраста	107 – 108
Взрослые	106 – 108

Лактобактерии занимают около 4-6% от общей массы бактерий кишечника. Лактобактерии являются не менее полезными, чем бифидобактерии. Их роль в организме следующая: поддержка уровня pH в кишечнике, производство большого количества веществ (молочная кислота, уксусная кислота, перекись водорода, лактоцидин, ацидофилин), которые активно используются для уничтожения патогенных микроорганизмов, а также вырабатывают лактазу.

Причины снижения количества лактобактерий

• Медикаментозное лечение (антибиотики, нестероидные противовоспалительные средства (НПВС) такие как анальгин, аспирин, слабительные средства)
• Неправильное питание (избыток жиров или белков или углеводов, голодание, неправильный режим питания, искусственное вскармливание)
• Кишечные инфекции (дизентерия, сальмонеллез, вирусные инфекции)
• Хронические заболевания ЖКТ (хронический гастрит, панкреатит, холецистит, язвенная болезнь желудка или двенадцатиперстной кишки)
• Стресс

Эшерихии (E.coli типичные)

Норма эшерихий

Дети до 1 года	107 – 108
Дети старшего возраста	107 – 108
Взрослые	107 – 108

Эшерихии появляются в организме человека с рождения и присутствуют в нем на протяжении всей жизни. Выполняют следующую роль в организме: участвуют в образовании витаминов группы В и витамина К, участвуют в переработке сахаров, вырабатывают антибиотикоподобные вещества (колицины) которые борются с патогенными организмами, усиливают иммунитет.

Причины снижения количества эшерихий

• Гельминтозы
• Лечение антибиотиками
• Неправильное питание (избыток жиров или белков или углеводов, голодание, неправильный режим питания, искусственное вскармливание)
• Кишечные инфекции (дизентерия, сальмонеллез, вирусные инфекции)

Бактероиды

Норма бактероидов в кале

Дети до 1 года	107 – 108
Дети старшего возраста	107 – 108
Взрослые	107 – 108

Бактероиды участвуют в пищеварении, а именно в переработке жиров в организме. У детей до 6 месяцев в анализах кала не обнаруживаются, их можно обнаружить, начиная с возраста 8-9 месяцев.

Причины увеличения содержания бактероидов

• Жировая диета (употребление большого количества жиров в пищу)
• Лечение антибиотиками
• Кишечные инфекции (дизентерия, сальмонеллез, вирусные инфекции)

Причины снижения содержания бактероидов

• Лечение антибиотиками
• Кишечные инфекции (дизентерия, сальмонеллез, вирусные инфекции)

Пептострептококки

Нормальное количество в кале

Дети до 1 года	103 – 105
Дети старшего возраста	105 – 106
Взрослые	105 – 106

В норме пептострептококки живут в толстом кишечнике, при увеличении их количества и  попадании в любую другую область нашего организма, они вызывают воспалительные заболевания. Участвуют в переработке углеводов и молочных белков. Вырабатывают водород, который в кишечнике превращается в перекись водорода и помогает контролировать рН в кишечнике.

Причины увеличения содержания пептострептококков

• Употребление большого количества углеводов
• Кишечные инфекции
• Хронические заболевания ЖКТ

Энтерококки

Норма энтерококков

Дети до 1 года	105 – 107
Дети старшего возраста	105 – 108
Взрослые	105 – 108

Энтерококки участвуют в переработке углеводов, в производстве витаминов, а также играют роль в создании местного иммунитета (в кишечнике). Количество энтерококков не должно превышать количество кишечных палочек, если их количество увеличивается, они могут вызвать ряд заболеваний.

Причины увеличения содержания энтерококков

• Снижение иммунитета, иммунные заболевания
• Пищевые аллергии
• Гельминтозы
• Лечение антибиотиками (в случае резистентности энтерококков к применяемому антибиотику)
• Неправильное питание
• Снижение количества кишечной палочки (эшерихии)

Стафилококки (сапрофитные стафилококки и патогенные стафилококки)

Норма сапрофитных стафилококков

Дети до 1 года	≤104
Дети старшего возраста	≤104
Взрослые	≤104

Норма патогенных стафилококков

Дети до 1 года	—
Дети старшего возраста	—
Взрослые	—

Стафилококки делятся на патогенные и непатогенные. К патогенным относятся: золотистый, гемолитический и плазмокоагулирующий, наиболее опасен золотистый. К непатогенным стафилококкам относятся негемолитический и эпидермальный.

Стафилококк не относится к нормальной микрофлоре кишечника, он попадает в организм из внешней среды вместе с пищей. Золотистый стафилококк, попадая в ЖКТ, обычно, вызывает токсические инфекции.

Причины появления стафилококка 

Стафилококк может попасть в организм человека разными путями, начиная грязными руками, вместе с продуктами питания и заканчивая внутрибольничными инфекциями.

Клостридии

Норма клостридий

Дети до 1 года	≤103
Дети старшего возраста	≤105
Взрослые	≤105

Клостридии участвуют в переработке белков, продуктом их переработки являются такие вещества как индол и скатол, которые по сути являются ядовитыми веществами, однако в небольших количествах эти вещества стимулируют перистальтику кишечника тем самым улучшая функцию эвакуации каловых масс. Однако при увеличении количества клостридий в кишечнике вырабатывается большее количество индола и скатола, что может привести к развитию такого заболевания как гнилостная диспепсия.

Причины увеличения количества клостридий

• Большое количество белка употребляемого в пищу

Кандида

Норма кандид

Дети до 1 года	≤103
Дети старшего возраста	≤104
Взрослые	≤104

При увеличении количества кандид в кишечнике может развиться бродильная диспепсия, а также заметное увеличение количества кандид может спровоцировать развитие различных видов кандидоза.

Причины увеличения количества кандид

• Употребление большого количества углеводов в пищу
• Лечение антибиотиками (без применения в комплексе противогрибковых препаратов)
• Использование гормональных противозачаточных средств
• Беременность
• Сахарный диабет
• Стресс

Анализ кала на патогенную флору

Анализ кала на патогенную флору является тем же самым анализом кала на дисбактериоз. В бланке с результатами анализов он занимает место – Патогенные энтеробактерии. К группе патогенных энтеробактерий относят Сальмонеллу и Шигеллу как основных возбудителей инфекционных заболеваний кишечника.

Патогенные (болезнетворные) бактерии (pathogenic bacteria,  греч. pathos — страдание и genes — порождающий, рождающийся; греч. bacterion — палочка) — бактерии, паразитирующие на других организмах и способные вызывать инфекционные заболевания человек, среди которых особое место занимают кишечные инфекции. Кишечные инфекции — целая группа заразных заболеваний, которые в первую очередь повреждают пищеварительный тракт. Заражение происходит при попадании возбудителя инфекции через рот, как правило, при употреблении зараженных пищевых продуктов и воды. Всего таких заболеваний более 30, в частности, к ним относятся: холера, брюшной тиф, ботулизм, сальмонеллез, дизентерия и т.п. Среди кишечных заболеваний самое безобидное — это пищевое отравление. Возбудителями кишечных инфекций могут быть как сами бактерии (сальмонеллез, брюшной тиф, холера), так и их токсины (ботулизм). Некоторые бактерии могут вызывать язвенную болезнь и рак желудка, а также хронический гастрит.

 Сальмонелла

В норме сальмонеллы в результате анализа быть не должно!

Вызывает такое заболевание как сальмонеллез, которое проявляется сильным токсическим поражением кишечника. Основными переносчиками являются водоплавающие птицы.
Причины появления сальмонеллы

• Употребление плохо обработанного или сырого мяса
• Употребление плохо обработанных или сырых яиц
• Контакт с переносчиками
• Контакт с водой зараженной сальмонеллой
• Грязные руки

Шигелла

В норме шигеллы в результате анализа быть не должно!

Вызывает такое заболевание как дизентерия, которое также поражает кишечник и проявляется сильным токсическим поражением кишечника. Основными путями заражения являются молочные продукты, сырые овощи, зараженная вода, люди больные дизентерией.

Причины появления шигеллы

• Употребление или контакт с зараженной водой
• Употребление зараженных продуктов питания
• Контакт с людьми болеющими дизентерией
• Грязные руки и контакт с зараженными поверхностями (посуда, игрушки)

Часто задаваемые вопросы

 

Как правильно подготовиться к анализу?

Применение некоторых медикаментов может повлиять на результат анализа кала. Поэтому их применение необходимо приостановить или прекратить в период подготовки к сдаче анализа кала после консультации с вашим врачом.

• Отменить прием препаратов (после личной консультации Вашего лечащего врача). К препаратам, которые могут повлиять на результаты анализов кала, относятся следующие:

1. Противодиарейные препараты (Смекта, Неосмектин, Полифан, Имодиум, Энтерол)
2. Противогельминтные препараты (Немозол, Декарис, Вермокс, Гельминтокс)
3. Антибиотики — любые виды
4. Лечебные и очищающие клизмы
5. Слабительные препараты (Бисакодил, Экстракт сенны, Форлакс, Порталак)
6. НПВП – нестероидные противовоспалительные препараты (Аспирин, Парацетамол, Ибупрофен)

• Также нельзя использовать кал который был в контакте с чистящими или дезинфицирующими средствами, которые используются для чистки унитаза, водой или мочой.

 Как правильно собрать кал для анализа?

1. Помочитесь перед сбором материала, для того чтобы моча не попала в кал.
2. Необходимо взять чистую, сухую ёмкость, куда будет проводиться дефекация.
3. Из полученного материала необходимо взять 8-10 см³ (~2 чайные ложки). Кал забирается при помощи специальной «ложки» которая встроена в крышку специального контейнера, который вам должны выдать для сбора кала.
4. Кал для анализа собирается из разных участков каловых масс (сверху, с боков, изнутри)
5. Материал (кал) кладется в выданный вам контейнер, и плотно закрывается.
6. Необходимо подписать контейнер (Ваше имя и фамилию, дату сбора анализа)

Как хранить кал перед отправкой в лабораторию? 

Материал для анализа кала на дисбактериоз и на кишечную инфекцию необходимо доставить в лабораторию в максимально короткие сроки 30-40 минут (максимум 1,5 -2 часа). Чем больше времени прошло со времени сбора материала и момента доставки материала в лабораторию, тем менее достоверны будут анализы. Проблема в том, что большая часть бактерий кишечника являются анаэробными, то есть они живут в среде без кислорода, при контакте с ним умирают. Это может повлиять на достоверность результата. Поэтому хранить хоть какое либо время свыше рекомендуемых максимальных 2 часа, категорически не рекомендуется.

---

Примечание

Полный (максимально подробный и точный) микробиологический анализ кала (анализ микробиоты толстой кишки) невозможно провести культурально зависимым способом, т.к. не все бактерии можно выделить и культивировать в искусственных условиях. В общем, проблема с микробиомом состоит в том, что мы можем выращивать в лаборатории менее 5% видов микробов, остальные просто слишком привередливы. Сегодня используются более технологичные культурально-независимые методы анализа:

Обзор популярных методов анализа микробиоты

 

Современные анализы кишечной микробиоты проводятся культурально-независимыми способами, среди которых можно выделить два наиболее известных на сегодняшний день в России метода — метод газовой хроматографии масс-спектрометрии микробных маркеров и метагеномный анализ микробиоты с помощью секвенирования нуклеиновых кислот. Обе методики имеют свои преимущества и недостатки (стоимость, время), включая погрешности в самих результатах и ограничения в использовании, а поэтому они совершенствуются до сих пор. Но несмотря на определенные недочеты, указанные технологии при грамотном использовании все же являются мощным инструментарием на пути к достижению целей персонализированнной медицины.

Информация к разделу: Дисбактериоз

См. отдельно: Типичный анализ микробиома кишечника по образцам стула (метод метагеномики)

Будьте здоровы!

 

ССЫЛКИ К РАЗДЕЛУ О ПРЕПАРАТАХ ПРОБИОТИКАХ

1. ПРОБИОТИКИ
2. ДОМАШНИЕ ЗАКВАСКИ
3. БИФИКАРДИО
4. КОНЦЕНТРАТ БИФИДОБАКТЕРИЙ ЖИДКИЙ
5. ПРОПИОНИКС
6. ЙОДПРОПИОНИКС
7. СЕЛЕНПРОПИОНИКС
8. МИКРОЭЛЕМЕНТНЫЙ СОСТАВ
9. ПРОБИОТИКИ С ПНЖК
10. БИФИДОБАКТЕРИИ
11. ПРОПИОНОВОКИСЛЫЕ БАКТЕРИИ
12. ПРОБИОТИКИ И ПРЕБИОТИКИ
13. СИНБИОТИКИ
14. РОЛЬ МИКРОБИОМА В ТЕРАПИИ РАКА
15. АНТИОКСИДАНТНЫЕ СВОЙСТВА
16. АНТИОКСИДАНТНЫЕ ФЕРМЕНТЫ
17. АНТИМУТАГЕННАЯ АКТИВНОСТЬ
18. МИКРОФЛОРА КИШЕЧНОГО ТРАКТА
19. МИКРОБИОМ ЧЕЛОВЕКА
20. МИКРОФЛОРА И ФУНКЦИИ МОЗГА
21. ПРОБИОТИКИ И ХОЛЕСТЕРИН
22. ПРОБИОТИКИ ПРОТИВ ОЖИРЕНИЯ
23. МИКРОФЛОРА И САХАРНЫЙ ДИАБЕТ
24. ПРОБИОТИКИ и ИММУНИТЕТ
25. МИКРОБИОМ И АУТОИММУННЫЕ БОЛЕЗНИ
26. ПРОБИОТИКИ и ГРУДНЫЕ ДЕТИ
27. ПРОБИОТИКИ, БЕРЕМЕННОСТЬ, РОДЫ
28. ДИСБАКТЕРИОЗ
29. ВИТАМИННЫЙ СИНТЕЗ
30. АМИНОКИСЛОТНЫЙ СИНТЕЗ
31. АНТИМИКРОБНЫЕ СВОЙСТВА
32. СИНТЕЗ ЛЕТУЧИХ ЖИРНЫХ КИСЛОТ
33. СИНТЕЗ БАКТЕРИОЦИНОВ
34. ФУНКЦИОНАЛЬНОЕ ПИТАНИЕ
35. АЛИМЕНТАРНЫЕ ЗАБОЛЕВАНИЯ
36. ПРОБИОТИКИ ДЛЯ СПОРТСМЕНОВ
37. ПРОИЗВОДСТВО ПРОБИОТИКОВ
38. ЗАКВАСКИ ДЛЯ ПИЩЕВОЙ ПРОМЫШЛЕННОСТИ
39. НОВОСТИ

Копрограмма: что это за исследование?

ВАЖНО!

Информацию из данного раздела нельзя использовать для самодиагностики и самолечения. В случае боли или иного обострения заболевания диагностические исследования должен назначать только лечащий врач. Для постановки диагноза и правильного назначения лечения следует обращаться к Вашему лечащему врачу.

Напоминаем вам, что самостоятельная интерпретация результатов недопустима, приведенная ниже информация носит исключительно справочный характер.

Копрограмма, общий анализ кала: показания к назначению, правила подготовки к сдаче анализа, расшифровка результатов и показатели нормы.

Показания к назначению исследования

Копрограмма – это лабораторное исследование кала, с помощью которого оцениваются его различные характеристики и выявляются некоторые заболевания желудочно-кишечного тракта (ЖКТ), включая воспалительные процессы и дисбактериоз микрофлоры кишечника.

При отсутствии патологий ЖКТ вся пища, которую употребляет человек, проходя через желудочно-кишечный тракт, подвергается интенсивному воздействию желудочного сока, желчи, пищеварительных ферментов и т.д. В результате пищевые продукты расщепляются на простейшие вещества, которые всасываются через слизистую оболочку кишечника в кровь и лимфу. В толстый кишечник попадают непереваренные пищевые остатки, где из них частично всасывается вода. В норме в прямую кишку попадают каловые массы, примерно на 70% состоящие из воды и на 30% из сухих пищевых остатков.

Если нарушается какая-либо функция органов желудочно-кишечного тракта, начинаются сбои в процессе всасывания пищевых продуктов, что отражается на характеристиках кала.

Таким образом, общий анализ кала назначают для диагностики заболеваний органов желудочно-кишечного тракта (патологии печени, желудка, поджелудочной железы, двенадцатиперстной, тонкой и толстой кишки, желчного пузыря и желчевыводящих путей), при подозрении на кишечные инфекции, для оценки результатов терапии заболеваний ЖКТ, в ходе диагностики злокачественных новообразований и генетических патологий, а также для установления непереносимости различных продуктов.

Подготовка к процедуре

Подготовка к копрограмме требует соблюдения некоторых рекомендаций, которые позволяют получить корректный результат исследования.

• Исключить прием слабительных, ферментативных препаратов, сорбентов, введение ректальных свечей, масел.
• По возможности сдавать общий анализ кала не ранее, чем через семь дней после окончания приема антибиотиков.
• Ограничить прием лекарственных препаратов и продуктов, способных изменить цвет кала за трое суток до сдачи анализа.

• Накануне исследования не проводить диагностические процедуры, оказывающие раздражающее действие на анальное отверстие и прямую кишку (клизмы, ректороманоскопию, колоноскопию).

• После рентгенологического исследования желудка и кишечника анализ кала следует сдавать не ранее, чем через двое суток.
• При необходимости выявления скрытых кровотечений желудочно-кишечного тракта необходима 4-5-дневная диета с исключением мяса, рыбы, яиц и зеленых овощей, а также препаратов железа, магния и висмута.

Сбор кала в специальный контейнер

Специальный контейнер для сбора кала вы можете взять в любом медицинском офисе ИНВИТРО или купить в аптеке. Его использование позволит предотвратить загрязнение собираемого биоматериала.

Забор кала можно выполнить самостоятельно в домашних условиях после самостоятельного акта дефекации (а не после клизмы). Для этого лучше использовать медицинское судно или горшок, предварительно тщательно вымытые, или одноразовую пеленку.

Непосредственно после акта дефекации следует набрать шпателем каловые массы в контейнер, заполнив его примерно на 30%. Важно, чтобы в собираемый биоматериал не попали следы мочи, менструальных выделений или воды из унитаза.

Полученный биоматериал нужно доставить в лабораторию в день сбора, хранить контейнер можно в холодильнике при температуре от +4 до +8°С не более 6-8 часов.

Контейнер для сбора биоматериала

Срок исполнения

До 4 рабочих дней (не включая день взятия биоматериала).

Что может повлиять на результаты

1. Несоблюдение рекомендаций по питанию, применение клизмы, выполнение незадолго до сдачи анализа рентгеноскопического или эндоскопического исследования.
2. Нарушение правил сбора кала, включающее использование нестерильного контейнера для сбора биоматериала или сбор непосредственно из унитаза, в результате чего в него попали чужеродные микроорганизмы из мочи, выделений половых органов, воды из унитаза и т. д.
3. Несоблюдение условий хранения и транспортировки кала (биоматериал доставлен в лабораторию позже максимально установленного времени с момента сбора).

Если результат копрограммы кажется вам некорректным, анализ лучше сдать еще раз, придерживаясь всех рекомендаций по подготовке и правилам сбора.

Копрограмма, общий анализ кала

Сдать копрограмму вы можете в ближайшем медицинском офисе ИНВИТРО. Список офисов, где принимается биоматериал для лабораторного исследования, представлен в разделе «Адреса». Интерпретация результатов исследования содержит информацию для лечащего врача и не является диагнозом. Информацию из этого раздела нельзя использовать для самодиагностики и самолечения. Точный диагноз ставит врач, используя как результаты данного обследования, так и нужную информацию из других источников: анамнеза, результатов других обследований и т. д.

Нормальные значения

Показатель	Значение
Макроскопическое исследование
Консистенция	Плотная
Форма	Оформленный
Цвет	Коричневый
Запах	каловый, нерезкий
pH	6 – 8
Слизь	Отсутствует
Кровь	Отсутствует
Остатки непереваренной пищи	Отсутствуют
Химическое исследование
Реакция на скрытую кровь	Отрицательная
Реакция на белок	Отрицательная
Реакция на стеркобилин	Положительная
Реакция на билирубин	Отрицательная
Микроскопическое исследование
Мышечные волокна с исчерченностью	Отсутствуют
Мышечные волокна без исчерченности	ед. в препарате
Соединительная ткань	Отсутствует
Жир нейтральный	Отсутствует
Жирные кислоты	Отсутствует
Соли жирных кислот	незначительное количество
Растительная клетчатка переваренная	ед. в препарате
Растительная клетчатка непереваренная	ед. в препарате
Крахмал внутриклеточный	Отсутствует
Крахмал внеклеточный	Отсутствует
Йодофильная флора нормальная	ед. в препарате
Йодофильная флора патологическая	Отсутствует
Кристаллы	Отсутствуют
Слизь	Отсутствует
Эпителий цилиндрический	Отсутствует
Эпителий плоский	Отсутствует
Лейкоциты	Отсутствуют
Эритроциты	Отсутствуют
Простейшие	Отсутствуют
Яйца глистов	Отсутствуют
Дрожжевые грибы	Отсутствуют

Расшифровка показателей

Консистенция

Жидкие каловые массы могут говорить об излишне активной перистальтике кишечника, колите, наличии протозойной инвазии.

Слишком тугие каловые массы свидетельствует об избыточном всасывании жидкости в кишечнике, запорах, обезвоживании организма.

Пенистый кал возникает при недостаточности функции поджелудочной железы или нарушении секреторной функции желудка.

Кашицеобразный кал может говорить о диспепсии, колите или ускоренной эвакуации каловых масс из толстого отдела кишечника.

Форма

Горохообразный кал бывает при геморрое, трещинах ануса, язвах, голоданиях, микседеме (слизистом отеке).

Кал в виде тонкой ленты отмечается при стенозе тонкого отдела кишечника, а также при наличии в нем новообразований.

Цвет

Черный цвет (цвет дегтя) каловым массам может придавать употребление в пищу некоторых продуктов (смородины, аронии, вишни), прием препаратов с висмутом или железом, а также кровотечение в желудке или двенадцатиперстной кишке, цирроз печени.

Красный оттенок появляется при кровотечении в толстом отделе кишечника.

Светло-коричневый цвет кала возникает при печеночной недостаточности или закупорке желчных протоков.

Светло-желтый цвет кала бывает при патологиях поджелудочной железы и вследствие чрезмерного употребления молочных продуктов.

Темно-коричневый цвет говорит об избытке мяса в рационе питания, а также о повышении секреторной функции в толстом отделе кишечника.

Зеленый кал – признак брюшного тифа.

Запах

Гнилостный запах возникает из-за образования в кишечнике сероводорода и говорит о наличии язвенного колита или о распаде тканей, туберкулезе, гнилостной диспепсии.

Кислый запах говорит об усилении процессов брожения.

Зловонный запах свидетельствует о нарушении в работе поджелудочной железы, недостатке желчи, поступающей в кишечник.

Кислотность

Повышение pH наблюдается у грудных детей на искусственном вскармливании, у взрослых — при гнилостной диспепсии, а также при высокой активности кишечной микрофлоры.

Снижение pH происходит в случае нарушения процесса всасывания в тонком отделе кишечника, при чрезмерном употреблении в пищу углеводов, при усилении процессов брожения.

Слизь

Слизь может находиться как на поверхности кала, так и внутри него, обнаруживается при язвенном колите и запорах.

Кровь

Кровь в кале определяется при кровотечениях в ЖКТ, вызванных новообразованиями, полипами, язвами, геморроем, воспалительными процессами.

Избыточное количество бактерий и грибов может стать причиной ложноположительного ответа.

Остатки непереваренной пищи

Непереваренная пища в кале (лиенторея) свидетельствует о нарушении функции поджелудочной железы, хроническом гастрите, ускоренной перистальтике.

Непереваренные пищевые волокна в анализе кала

Белок

Наличие в кале белка говорит о патологиях двенадцатиперстной кишки или желудка, колите, энтерите, геморрое и некоторых других заболеваниях ЖКТ.

Стеркобилин

Отсутствие или значительное уменьшение стеркобилина в кале (реакция на стеркобилин отрицательная) указывает на закупорку желчного протока или резкое снижение функциональной активности печени. Увеличение количества стеркобилина в каловых массах наблюдается при усиленном желчеотделении, гемолитической желтухе.

Билирубин

Обнаружение в кале взрослого человека билирубина указывает на нарушение процесса его восстановления в кишечнике под действием микрофлоры. Это говорит о дисбактериозе кишечника, об усилении перистальтики или о приеме антибактериальных препаратов во время подготовки к сдаче анализа или незадолго до этого.

Соединительная ткань и мышечные волокна

Являются недопереваренными остатками мяса и встречаются при недостатке ферментов поджелудочной железы.

Жир

Жир в кале – один из признаков недостаточной функции поджелудочной железы или нарушения отделения желчи.

Избыточное количество жира в кале (стеаторея)

Растительная клетчатка

Большое количество переваренной растительной клетчатки в кале свидетельствует о быстром прохождении пищи через желудок из-за снижения его секреторной функции, отсутствия в нем соляной кислоты, а также об избыточном количестве бактерий в толстом кишечнике и их проникновении в отделы тонкого кишечника. Непереваренная клетчатка диагностического значения не имеет, так как в ЖКТ нет ферментов для ее расщепления.

Крахмал

Повышенное содержание крахмала в кале, появляющееся при недостатке процессов переваривания в желудке, тонкой кишке и нарушении функции поджелудочной железы, называется амилореей. Кроме того, много крахмала может обнаруживаться во время диареи.

Внутриклеточные гранулы крахмала в анализе кала

Йодофильная флора (патологическая)

Присутствие патологической микрофлоры (стафилококков, энтерококков, кишечной палочки и пр.) свидетельствует об уменьшении количества полезных бактерий в кишечнике и, соответственно, о дисбактериозе. При потреблении большого количества углеводов начинают усиленно размножаться клостридии, вызывая бродильный дисбиоз.

Кристаллы

Кристаллы оксалата кальция в кале говорят о недостаточности функции желудка, глистных инвазиях, аллергии.
Кристаллы триппельфосфатов свидетельствуют об усиленном гниении белков в толстой кишке.

Эпителий

Значительное количество цилиндрического эпителия в кале обнаруживается при острых и хронических колитах. Наличие клеток плоского эпителия диагностического значения не имеет.

Лейкоциты

Лейкоциты в каловых массах появляются при колитах и энтеритах кишечника, дизентерии, туберкулезе кишечника.

Эритроциты

Эритроциты появляются в каловых массах при геморрое, трещинах прямой кишки, язвенных процессах в толстом отделе кишечника, при распаде опухолей.

Простейшие

Непатогенные простейшие присутствуют у здоровых людей. Патогенных можно обнаружить в каловых массах, доставленных в лабораторию не позднее двух часов после сбора биоматериала. Их наличие говорит об инвазии.

Яйца глистов

Яйца гельминтов в кале указывают на глистную инвазию.

Личинки круглых червей рода Strongyloides в кале

Дрожжевые грибы

Могут присутствовать в кале при проведении терапии кортикостероидами или антибактериальными препаратами. Наличие грибка Candida albicans говорит о поражении кишечника.

Источники

1. Номенклатура медицинских услуг (новая редакция). Утверждена приказом Министерства здравоохранения и социального развития Российской Федерации от 13 октября 2017 года № 804н. Действует с 01.01.2018. В редакции Приказа Минздрава России от 5 марта 2020 года N 148н (в т.ч. с изменениями вст. в силу 18.04.2020).
2. Шакова Х.Х. Оценка достоверности копрологического исследования в зависимости от времени хранения материала. Успехи современного естествознания, журнал. 2003. № 8. С. 131-131.
3. Бугеро Н.В., Немова И.С., Потатуркина-Нестерова И.И. Факторы персистенции простейших фекальной флоры при дисбиозе кишечника. Вестник новых медицинских технологий, журнал. Т. XVIII. № 3. С. 28-31.

ВАЖНО!

Информацию из данного раздела нельзя использовать для самодиагностики и самолечения. В случае боли или иного обострения заболевания диагностические исследования должен назначать только лечащий врач. Для постановки диагноза и правильного назначения лечения следует обращаться к Вашему лечащему врачу.

границ | Enterococcus faecalis, выделенный из детских фекалий, подавляет токсигенные Clostridioides (Clostridium) difficile

Введение

Clostridioides (Clostridium) difficile — это грамположительная палочка, спорообразующая, анаэробная и токсин-продуцирующая бактерия. Инфекция C. difficile (CDI) является основной причиной диареи, связанной с антибиотиками (AAD) и внутрибольничной диареи, и ее проявления варьируются от легкой диареи до псевдомембранозного колита и смерти (1).В глобальном масштабе заболеваемость и тяжесть ИКД существенно выросли за последнее десятилетие, о чем свидетельствуют высокие показатели заболеваемости и смертности (1, 2).

Распространение C. difficile в медицинских учреждениях обычно связано с эндоспорами (3), которые обладают высокой устойчивостью к химическим веществам и экстремальным температурам и сохраняются в течение месяцев и даже лет. Было обнаружено, что окружающая среда вокруг пациентов с ИКД и толстый кишечник пациентов, получающих антибиотики широкого спектра действия, загрязнены спорами C.difficile . В отсутствие нормальной флоры и в соответствующих условиях споры созревают в вегетативные клетки кишечника, что в конечном итоге приводит к ИКД (2). Вегетативные клетки прикрепляются к эпителиальным клеткам и переносят токсины в клетки. Патогенез CDI опосредуется токсинами, такими как энтеротоксин (TcdA) и цитотоксин (TcdB), которые кодируются генами tcdA и tcdB соответственно (4). Эти токсины являются основными детерминантами вирулентности и проявляют как цитопатическое, так и цитотоксическое действие на клетки млекопитающих.В эпителиальных клетках кишечника эти эффекты опосредуются инактивацией ГТФаз семейства Rho, таких как Rho, Cdc42 и Rac, что приводит к нарушению и дезорганизации цитоскелета F-актина и плотным контактам, морфологическим изменениям и последующей гибели клеток (4, 5 ).

Ванкомицин и фидаксомицин обычно рекомендуются при ИКД. Однако о рецидиве инфекции сообщали до 24% пациентов в течение 2 месяцев после первого эпизода; риск рецидивов увеличивается (50–65%) после последующих эпизодов (5, 6).В странах Европы и Азии показатель устойчивости составляет более 60% (7). Следовательно, исследования с альтернативной профилактикой или лечением ИКД получили известность.

Пробиотики — это «живые микроорганизмы, которые при введении в адекватных количествах приносят пользу здоровью хозяина» (8). Систематические исследования показали, что некоторые пробиотические бактерии, особенно молочнокислые бактерии (LAB) и Bifidobacterium spp., Могут влиять на терапию CDI; В клинических испытаниях было показано, что пробиотики предотвращают AAD (17%) и предотвращают или лечат CDI 3% (9, 10).Пробиотики LAB приписывают различные противомикробные механизмы. К ним относятся конкуренция питательных веществ, предотвращение адгезии клеток слизистой оболочки и интернализация патогенов, таких как C. difficile (9, 11, 12). Более того, штаммы LAB могут продуцировать молочную кислоту и некоторые противомикробные молекулы, такие как перекись водорода, жирные кислоты и бактериоцины, для проявления своей антимикробной активности (13, 14). Кроме того, гидролаза солей желчных кислот (BSH), продуцируемая LAB для преобразования конъюгированной желчной кислоты в неконъюгированную желчную кислоту, может ингибировать прорастание спор C.difficile (10, 15).

Enterococcus spp. принадлежат к LAB (16) и продуцируют молочную кислоту и широкий спектр бактериоцинов (14, 16). Энтерококки повсеместно встречаются в виде микрофлоры в кишечной экосистеме животных и человека, особенно E. faecalis и E. faecium (17). Они также присутствуют в материнском молоке, вагинальных выделениях человека, ферментированных продуктах и ​​молочных продуктах, в первую очередь из-за их устойчивости к экстремальным значениям pH, температуры и солености (16).В предыдущих исследованиях было показано, что пробиотические штаммы Enterococcus служат в качестве функциональных пищевых продуктов, которые смягчают или предотвращают диарею, вызванную патогенами пищевого происхождения, такими как Escherichia coli, C. perfringens и C. difficile (12, 18). . Хотя было показано, что E. faecium NM1015, E. faecalis NM815 и E. faecalis NM915 ингибируют C. difficile in vivo (12), в нескольких исследованиях изучались анти- C.difficile активность энтерококков. В этом исследовании мы идентифицировали подходящие штаммы энтерококков, которые обладают не только антибактериальной активностью против штаммов C. difficile , но и пробиотическими свойствами. Кроме того, мы оценили их защитный эффект на цитопатию C. difficile в клетках HT-29.

Материалы и методы

Сбор образцов кала и выделение LAB

образцов кала ( n = 38) грудных младенцев в больнице Сонгкланакаринд были собраны при необходимом одобрении комитетов по этике медицинского факультета Университета принца Сонгкла (REC.61-064-4-2). Младенцы включались в исследование в соответствии со следующими критериями: возраст <6 месяцев, получение исключительно грудного молока с преобладающими штаммами LAB, вагинальные роды, здоровые младенцы, матери без предшествующих или прошлых неблагоприятных заболеваний, а также доношенная беременность. Кал немедленно культивировали на агаре de Man Rogosa Sharpe (Merck Millipore, Дармштадт, Германия) при 37 ° C в течение 48 часов в анаэробных условиях. После инкубации каждую из выделенных колоний собирали и хранили при -80 ° C в бульоне BHI с 30% глицерином до тестирования.

Бактериальные штаммы и состояние культур

В этом исследовании использовались два контрольных штамма, C. difficile ATCC 630 (риботип 012) и ATCC 43255 (риботип 087), полученные из Американской коллекции типовых культур (АТСС). Два клинических изолята, C. difficile 17 и C. difficile 541, которые были идентифицированы с использованием MALDI-TOF MS / MS, были получены из лаборатории клинической микробиологии больницы Сонгкланагаринд. штаммов C. difficile культивировали на агаре с циклосерином, цефокситином и фруктозой (CCFA, Merck Millipore), и чашки с агаром инкубировали при 37 ° C в течение 48 часов в анаэробных условиях.Колонии переносили в тиогликолятный бульон (Merck Millipore) и инкубировали при 37 ° C в течение 18 часов. Штаммы C. difficile с различной морфологией, образованные подозреваемым энтерококком, до тестирования хранили при -80 ° C в тиогликолятном бульоне с 30% глицерином.

E. faecalis DMST 4736 был получен из Департамента медицинских наук Таиланда (DMST). Этот штамм культивировали на агаре BHI и инкубировали при 37 ° C в течение 18 часов. E. faecalis DMST 4736 хранили при -80 ° C в бульоне BHI с 30% глицерином до тестирования.

Скрининг фекальных изолятов на

C. difficile

Agar well-diffusion assay использовали для тестирования ингибирующей активности выделенных колоний из образцов фекалий против токсигенного C. difficile в соответствии с Nigam et al. (19) с небольшими изменениями. Вкратце, ночные культуры токсигенных C. difficile ATCC43255 и ATCC 630 инокулировали на агаре BHI и вырезали из агара. Каждую лунку заполняли 50 мкл 1 × 10 ⁸ КОЕ / мл отобранных изолятов.Планшеты инкубировали при 37 ° C в течение 48 ч в анаэробных условиях и проверяли на наличие зон ингибирования. Испытания проводились в двух экземплярах.

Идентификация бактерий

Бактерии были идентифицированы с помощью окрашивания по Граму, микроскопического исследования и активности каталазы, проведенных в соответствии с руководством Bergey (20), и подтверждены с помощью MALDI-Biotyper ^® (Karlsruhe, Германия) в соответствии с инструкциями производителя. Кроме того, изоляты были идентифицированы путем амплификации их генов 16S рРНК с использованием универсальных праймеров 27F и 1492R (21) и секвенирования на 6 Applied Biosystems 3730xl (Macrogen, Корея).Последовательности были выровнены с базой данных NCBI с использованием инструмента поиска BLAST для установления сходства последовательностей (22).

Характеристика свойств пробиотиков

Выживание в условиях желудочно-кишечного тракта (ЖКТ)

Толерантность к низкому pH (pH 2,0, 3,0 и 4,0) и желчным солям проверяли в соответствии с процедурой, описанной Rodríguez et al. (23). Толерантность к моделированному пищеварению желудка и поджелудочной железы определялась с использованием описанного протокола, но с небольшими изменениями (24).Переносимость определяли путем смешивания 1 мл стимулированного желудочного (3 г / л, pH 2) или панкреатического сока (1 г / л, pH 8) с 0,5 мл бульона BHI, содержащего 10 ⁸ КОЕ / мл бактериальных клеток. Смеси инкубировали при 37 ° C в течение 3 или 4 часов для желудочных или панкреатических состояний соответственно. Количество колоний на чашках BHI до и после инкубации со стимулированным желудочным и панкреатическим соками подсчитывали с использованием метода свободных чашек.

Уровень выживаемости (%) = [Конечный (Log КОЕ / мл) / Начальный (Log КОЕ / мл)] × 100

Анализ гидрофобности клеточной поверхности

Гидрофобность изолятов определяли с помощью анализа экстракции ксилолом (25).Процент гидрофобности (H%) рассчитывали следующим образом:

H% = [(A0-A) / A0] × 100,

, где A ₀ и A — значения оптической плотности, измеренные до и после экстракции ксилолом.

Анализ адгезии клеток кишечника человека

Адгезионная способность пробиотических штаммов прикрепляться к эпителиальным клеткам кишечника способствует их колонизации и исключению патогенов при адгезии к эпителиальным клеткам кишечника. Адгезию бактериальных изолятов к клеткам аденокарциномы толстой кишки человека (клетки HT-29) измеряли, как описано Monteagudo-Mera et al.(24). Количество бактерий, прикрепившихся к клеткам HT-29, рассчитывали следующим образом:

% Адгезионная способность = (V1 × 100) / V0,

, где V ₀ — начальное количество жизнеспособных клеток, а V ₁ — количество жизнеспособных клеток, прикрепленных к клеткам HT-29 после инкубации.

Скрининг на бактериоцины

Бактериоцины измеряли модифицированным методом (22). Вкратце, бактерии (10 ⁸ КОЕ / мл) центрифугировали (7000 × г в течение 10 мин), и pH супернатанта доводили до 6.5 с 1 н. NaOH. Нейтрализованные супернатанты инкубировали с или без 1 мг / мл протеиназы К при 30 ° C в течение 2 часов, а затем нагревали при 80 ° C в течение 10 минут для инактивации протеазы. Супернатанты фильтровали через мембранные фильтры 0,2 мкм. Аликвоты супернатантов наносили на соответствующие чашки с агаром BHI, которые предварительно покрывали ночной культурой патогенных индикаторных бактерий, и инкубировали в аэробных условиях при 37 ° C в течение 48 часов. В зависимости от того, продуцируют ли тестируемые бактерии бактериоцины, вокруг лунок, инкубированных с 1 мг / мл протеиназы K.Их сравнивали с лунками, которые не обрабатывали протеиназой К.

.

Производство пероксида водорода (H

₂ O ₂ ) и активность гидролазы желчных солей (BSH)

H ₂ O ₂ Производство выбранных изолятов (26) и их активности BSH (27) были протестированы в соответствии с описанными процедурами.

Оценка безопасности

Факторы вирулентности

Гены, кодирующие потенциальные факторы вирулентности, были обнаружены с использованием методов амплификации с помощью полимеразной цепной реакции (ПЦР).Праймеры показаны в дополнительной таблице 1. Фенотипические анализы, продукция желатиназы, гемолитическая активность и деградация муцина выполнялись, как сообщалось ранее (28).

Чувствительность к антибиотикам

Чувствительность к антибиотикам

определялась в соответствии с рекомендациями Института клинических и лабораторных стандартов (CLSI) 2019 г. (29). Антибиотики, выбранные для тестирования, включают ампициллин (10 мкг), пенициллин (10 мкг), имипенем (10 мкг), ванкомицин (30 мкг), гентамицин (10 мкг), эритромицин (15 мкг), тетрациклин (30 мкг) и ципрофлоксацин. (5 мкг).

Вирулентность в

Galleria mellonella Модель

Модель G. mellonella была использована для определения токсичности предполагаемых пробиотических штаммов, как описано ранее (30). Вкратце, личинки были инфицированы через гемоцель последней левой ложной ноги с использованием стерилизованного инсулинового шприца с 10-мкл инокулятами различных штаммов E. faecalis , содержащих 5 × 10 ⁸ КОЕ / мл. E. faecalis DMST 4736 в качестве патогенного штамма и PBS также исследовали в тех же условиях, что и вирулентный контроль и неинфицированный контроль, соответственно.После инъекции личинок инкубировали в темноте при 37 ° C в течение 5 дней. Выживаемость личинок регистрировали каждый день.

Оценка потенциальной пробиотической активности против

C. difficile и его спор

Agar Well-Diffusion Assay

Agar well-diffusion assay был использован для тестирования ингибирующей активности выделенных колоний из образцов фекалий против токсигенного C. difficile в соответствии с описанной процедурой (19) с небольшими изменениями.Вкратце, ночные культуры токсигенных штаммов C. difficile ( C. difficile ATCC630, ATCC43255, 17 и 541) суспендировали в бульоне BHI для достижения плотности клеток 1 × 10 ⁸ КОЕ / мл и распределяли по чашки с агаром BHI. Из агара вырезали пять лунок (каждая диаметром 9 мм). Каждую лунку заполняли 50 мкл 1 × 10 ⁸ КОЕ / мл выбранного изолята. Планшеты инкубировали при 37 ° C в течение 48 ч в анаэробных условиях и измеряли зоны ингибирования.Каждый тест проводился в трех экземплярах.

Очистка спор

Этот метод был модифицирован из (31). C. difficile выращивали на агаре BHI в течение ночи при 37 ° C. Единственную колонию из чашки с агаром BHI инокулировали в 10 мл бульона BHI с 0,5% дрожжевого экстракта и 0,1% L-цистеина (Merck Millipore, Дармштадт, Германия) и инкубировали при 37 ° C в течение ночи в анаэробных условиях и 1 мл культуру BHI субкультивировали в агар BHI с 0,1% L-цистеином и инкубировали при 37 ° C в анаэробном сосуде в течение 7 дней.После 7 дней инкубации при 37 ° C эффективность споруляции была подтверждена с помощью фазово-контрастной микроскопии и измерения термостойких КОЕ и споровых культур, собранных сразу или после инкубации в течение ночи при 4 ° C. Споры дважды промывали PBS; суспендирован в PBS, содержащем 125 мМ Трис, 200 мМ EDTA, 0,3 мг / мл протеиназы К (Amresco, США) и 1% саркозила; и инкубировали при осторожном встряхивании при 37 ° C в течение 2 часов. Споры центрифугировали (6500 × г, , 10 мин), осадок ресуспендировали в воде и промывали 10 раз.После окончательного суспендирования в воде споры подвергали термообработке (60 ° C, 20 мин) для уничтожения любых остаточных клеток. Супернатанты спор хранили при 4 ° C до тестирования. Для расчета КОЕ спор аликвоты серийно разводили в PBS и высевали на агар BHI с добавлением 0,1% таурохолата натрия (Merck Millipore). Планшеты инкубировали 48 ч перед подсчетом КОЕ.

Тест на подавление прорастания

Тест на всхожесть был проведен по методу, измененному по протоколу (32).Вкратце, 15 мкл суспензии спор (5 × 10 ⁶ спор / мл) добавляли в 96-луночные планшеты, содержащие 135 мкл бульона BHI и 0,01% таурохолата, с или без 10 ⁸ КОЕ / мл специфического E .faecalis и инкубировали в анаэробных условиях при 37 ° C в течение 30 мин. Прорастающие споры подсчитывали путем посева на колониеобразующие единицы (КОЕ) на агаре BHI, и процент прорастания рассчитывали следующим образом:

Процент прорастания = [КОЕ после анализа / исходное КОЕ] × 100.

Тест ингибирования споруляции

Следуя Carlson et al., Было измерено ингибирование споруляции (32). Спорообразование оценивали на бульонных культурах. Лог-фазовые культуры C. difficile BHI были инокулированы в бульоне с триптозным дрожжевым экстрактом (3% триптозный и 2% дрожжевой экстракт) с начальной плотностью 1 × 10 ⁶ КОЕ / мл с 10 ⁸ КОЕ / мл или без них. / мл штаммов E. faecalis . После 48 ч культивирования образцы анализировали на наличие вегетативных клеток и спор с помощью микроскопии.Рассчитывали процент споруляции.

% споруляции = [количество спор / (количество спор × количество вегетативных клеток] × 100

Совместное культивирование пробиотиков и токсигенных

C. difficile с клетками HT-29

Метод, описанный Valdes-Varela et al. был адаптирован для проверки влияния воздействия пробиотиков на цитопатические эффекты C. difficile на клетки HT-29. Шесть штаммов E. faecalis культивировали в бульоне BHI и инкубировали при 37 ° C в течение 18 часов в анаэробных условиях. Клетки E. faecalis дважды промывали PBS и ресуспендировали (10 ⁸ КОЕ / мл) в среде для культивирования клеток HT-29 с добавлением токсигенных C. difficile , а затем инкубировали в течение 1 ч в анаэробных условиях при перемешивании ( 300 об / мин). Затем эти супернатанты непосредственно использовали для тестирования их цитотоксичности на монослоях HT-29; Клетки HT-29 высевали на 96-луночные планшеты для культивирования тканей (5 × 10 ⁴ клеток на лунку). Планшеты инкубировали при 37 ° C в 5% CO ₂ до образования конфлюэнтного монослоя.К клеткам HT-29 добавляли по 20 микролитров каждого супернатанта. Планшеты инкубировали в течение 24 ч при 37 ° C в 5% CO ₂ . Затем клетки исследовали под инвертированным микроскопом на морфологические изменения. На цитопатический эффект указывало более 50% клеток округлой формы.

Иммунофлуоресцентный анализ

Процедура была адаптирована из ранее описанного метода (33, 34). Вкратце, клетки HT-29, подвергнутые обработке различными супернатантами, анализировали с помощью конфокальной микроскопии.Для этого в лунки 8-луночного планшета засевали 300 мкл (2 × 10 ⁶ клеток HT-29 / мл) и инкубировали в течение 20 ч для достижения конфлюэнтного состояния. Затем супернатант удаляли, и лунки заполняли одинаковым объемом каждого супернатанта, содержащего различные бактериальные штаммы, с токсигенной средой C. difficile или DMEM (отрицательный контроль). Инкубацию продолжали еще 24 часа. Затем супернатант удаляли из каждой лунки и клетки HT-29 фиксировали 300 мкл 3.7% формальдегида в течение 15 мин. Образцы трижды промывали PBS в течение 5 минут и повышали проницаемость с помощью PBS, содержащего 0,1% Triton X-100, в течение 15 минут. Сайты неспецифического связывания блокировали обработкой 1% BSA в течение 20 минут, и клетки снова промывали PBS. Зонд Phalloidin-Alexa-Fluor-488 (Invitrogen, США) в отношении F-актина добавляли в 100 мкл PBS (конечная концентрация 1:40), и образцы инкубировали в течение 1 ч при 4 ° C в темноте. После трехкратной промывки PBS ядра клеток HT-29 окрашивали DAPI (Sigma Chemical Co.) при разведении 1: 1000 (конечное разведение в PBS) и инкубировали в течение 20 мин. Наконец, образцы были промыты и добавлено 50 мкл средств для фиксации против выцветания (Invitrogen) перед визуализацией под лазерным сканирующим конфокальным микроскопом сверхвысокого разрешения; SR-LSCM (ZEISS, Германия) с масляным объективом 63 × / 1,4.

Статистический анализ

Все анализы независимо выполняли трижды. Результаты выражены в виде среднего значения ± стандартное отклонение, а различия между группами оценивались с помощью теста Стьюдента t или одностороннего дисперсионного анализа (ANOVA) с использованием GraphPad Prism 5.Статистически значимым считалось значение p <0,05. Функция выживаемости Каплана-Мейера программного обеспечения Stata была применена для анализа выживаемости ( p <0,05).

Результаты

Выделение и скрининг бактерий, активных против

C. difficile

Восемьдесят пять различных колоний LAB были собраны из фекалий 38 грудных детей. Из них девять выделенных штаммов проявили антимикробную активность против C. difficile ATCC 43355 и ATCC 630.

Идентификация активных изолятов

Первоначально девять изолятов в форме кокков были грамположительными, каталазонегативными, толерантными к 6,5% NaCl и продуцировали эскулин желчи. Эти фенотипические свойства указывали на то, что изоляты были энтерококками. Кроме того, последовательности 16S рРНК всех изолятов показали> 97% гомологию с E. faecalis . Более того, выравнивание последовательностей генов 16S РНК изолятов между собой не показало 100% идентичности, что позволяет предположить наличие различных штаммов.MALDI-TOF MS-анализ изолятов показал соответствие штамму E. faecalis CLB21560 с оценкой от 2,302 до 2,443, что свидетельствует о достоверности идентификации видов.

Характеристика пробиотических свойств

Выживание в условиях ЖКТ требует толерантности к кислому pH, пепсину, панкреатину и солям желчных кислот. Это важные свойства пробиотических штаммов. Данные о выживаемости девяти изолятов E. faecalis и контрольного пробиотического штамма [ Lactobacillus plantarum ATCC14917 (TISTR 877)] в условиях ЖКТ суммированы в таблице 1.Девять изолятов E. faecalis могли выжить после воздействия pH 2–4 в течение 2 часов; однако снижение процента выживаемости (от 67,25 ± 2,01% до 96,55 ± 1,52%) наблюдалось при pH 2. При том же pH полностью ингибировалось L. plantarum ATCC14917. Когда изоляты E. faecalis были имплантированы в пепсин (pH 2), его выживаемость (от 54,06 ± 1,72% до 36,94 ± 1,92%) была значительно выше, чем у L. plantarum ATCC14917 (нежизнеспособный). E. faecalis PK2502 показал самый высокий процент выживаемости (54.06 ± 1,72%), затем E. faecalis PK1801 (49,97 ± 1,47%) и E. faecalis PK2004 (46,55 ± 1,86%). Кроме того, все штаммов E. faecalis показали хорошую выживаемость (от 122,32 ± 1,12% до 119,97 ± 0,16%) в присутствии фермента поджелудочной железы в течение 4 часов. Хотя жизнеспособность штаммов E. faecalis и L. plantarum ATCC 14917 в среде, содержащей соли желчных кислот, снизилась через 4 часа, процент выживаемости каждого штамма E. faecalis в солях желчных кислот был значительно выше, чем у штаммов E. faecalis . Л.plantarum ATCC 14917 (от 75,68 ± 6,43% до 74,16 ± 5,14% по сравнению с 30,97 ± 0,37%).

Таблица 1 . Тест на переносимость штаммов E. faecalis в смоделированных условиях желудочно-кишечного тракта.

Гидрофобность девяти исследованных штаммов E. faecalis варьировала от 47,51 ± 3,02% до 85,00 ± 2,93%. Гидрофобность каждого штамма, кроме E. faecalis PK1202, была значительно выше, чем у L. plantarum ATCC 14917 (41.08 ± 0,89%) (рис. 1А). Анализ адгезии кишечных клеток человека проводили для подтверждения адгезии девяти штаммов E. faecalis к эпителиальным клеткам НТ-29 кишечника. Результаты показали, что девять штаммов E. faecalis более прочно прилипали к клеткам HT-29 по сравнению с L. plantarum ATCC 14917. E. faecalis PK1801 продемонстрировал самую высокую адгезионную способность (78,83 ± 4,16%) (Рисунок 1B). .

Рисунок 1 . Адгезия изолятов E. faecalis, и L.plantarum ATCC 14917 в линию клеток человека. (A) Адгезионная способность. (B) % гидрофобности. Планки погрешностей указывают на стандартное отклонение трех независимых экспериментов. * p <0,05.

Безопасность

изолятов E. faecalis

Профили чувствительности к антибиотикам штаммов E. faecalis приведены в таблице 2. Все девять штаммов были чувствительны к ампициллину, пенициллину, имипенему и ванкомицину, но были устойчивы к гентамицину (100%).Пять штаммов E. faecalis (PK1003, PK1301, PK2003, PK2004 и PK2502) были устойчивы к эритромицину (55,56%) и тетрациклину (66,67%), и только штаммов E. faecalis PK1801 были устойчивы к тетрациклину. Интересно, что ни один из выделенных штаммов не был устойчив к ванкомицину. ПЦР-анализ не обнаружил генов Van-A или Van-B . Более того, результаты ПЦР-скрининга на наличие генов вирулентности энтерококков показали, что эти штаммы несли разные генные паттерны (таблица 3).Гены cpd, cob, ccf и cad кодируют детерминанты половых феромонов, которые способствуют конъюгации бактерий. В то время как cpd и cob переносились некоторыми штаммами E. faecalis , ccf и cad не были обнаружены ни в одном из штаммов E. faecalis . Все девять штаммов несли генов efaAfs и gel E, которые участвуют в адгезии клеток и кодируют желатиназу соответственно.

Таблица 2 .Чувствительность к антибиотикам штаммов Enterococcus .

Таблица 3 . Резюме анализов полимеразной цепной реакции и фенотипического скрининга детерминант вирулентности.

Фенотипические анализы продемонстрировали, что ни один из девяти штаммов E. faecalis не обладал детектируемой активностью желатиназы и не был способен разлагать муцин. Более того, три штамма E. faecalis , несущие esp , проявили гемолитическую активность на чашках с кровяным агаром.Поэтому эти штаммы были исключены как потенциальные пробиотики.

Вирулентность оставшихся шести штаммов была признана безопасной и подтверждена с помощью анализа уничтожения G. mellonella . Патогенный штамм E. faecalis ATCC 4736 может убить личинок G. mellonella (85%). Напротив, выживаемость личинок варьировала от 80 до 100%, когда им вводили шесть штаммов E. faecalis , даже при высоких дозах E. faecalis .Аналогичные результаты наблюдались с L. plantarum ATCC 14917. Эти данные позволяют предположить, что эти шесть штаммов E. faecalis были безопасны для использования в качестве потенциальных пробиотиков.

Бактериоцин-опосредованная антимикробная активность

E. faecalis

В первую очередь, шесть изолятов E. faecalis проявили антимикробную активность против C. difficile . Зоны ингибирования находились в диапазоне от 10,90 ± 0,10 до 14,00 ± 0,00 мм. Чтобы установить участие белковых агентов, бесклеточные супернатанты E.faecalis нейтрализовали до pH 7,2 и обрабатывали протеиназой K для переваривания растворимых белков в супернатанте. Четкая зона ингибирования не была обнаружена, что указывает на то, что ингибирующая активность штаммов E. faecalis против токсигенных C. difficile опосредована бактериоцинами. Кроме того, хотя активность BSH была обнаружена во всех штаммах E. faecalis , кроме PK1301 и PK1302, продукция H ₂ O ₂ не была обнаружена ни в одном из шести отобранных штаммов E.faecalis штаммов.

Потенциальный пробиотик

E. faecalis Активность против токсигенных штаммов C. difficile , их образование спор и прорастание

Существенным свойством пробиотика является его способность подавлять рост бактериальных патогенов. Отобранные шесть штаммов E. faecalis продемонстрировали сильную способность ингибировать четыре токсигенных штамма C. difficile , включая C. difficile ATCC 630, C. difficile ATCC 43255 и два клинических изолята ( C.difficile 17 и C. difficile 541) (Таблица 4). Чтобы установить пробиотическую природу шести штаммов E. faecalis , мы изучили их способность ингибировать споруляцию и образование спор в токсигенных штаммах C. difficile .

Таблица 4 . Ингибирование токсигенных штаммов C. difficile изолятами Enterococcus (мм).

Способность подавлять споруляцию была протестирована на шести штаммах E. faecalis и L.plantarum ATCC 14917. Процент образования спор штаммов C. difficile колебался от 44,20 ± 15,97% до 78,07 ± 7,30%. После обработки шестью штаммами E. faecalis и L. plantarum ATCC 14917 процент споруляции C. difficile значительно снизился (с 1,19 ± 2,06% до 13,89 ± 12,49%) по сравнению с необработанными ( Фигура 2).

Рисунок 2 . Процент спор C. difficile с обработкой или без обработки шестью E.faecalis и L. plantarum ATCC 14917.

Шесть отобранных штаммов E. faecalis и L. plantarum ATCC 14917 были проверены на их потенциальную пробиотическую активность против C. difficile путем изучения их способности ингибировать прорастание спор. Результаты показали, что воздействие токсигенных штаммов C. difficile на штаммы E. faecalis и L. plantarum ATCC 14917 привело к полному снижению их всхожести (0% -1.80 ± 2,17%) (таблица 5), что указывает на пробиотические свойства для всех шести штаммов E. faecalis .

Таблица 5 . Относительный процент прорастания токсигенного C difficile при обработке изолятов E. faecalis .

Влияние совместного культивирования изолированного

E. faecalis и токсигенного C. difficile на клетки HT-29

Цитопатические эффекты токсигенного C. difficile на клетки HT-29 оценивали с помощью анализа цитотоксичности.Результаты показали, что обработка клеток HT-29 бесклеточным супернатантом четырех штаммов C. difficile (ATCC 630, ATCC 43255 и клинические штаммы 17 и 541) приводила к изменениям морфологии клеток ( более 50% клеток были круглыми и сферическими), тогда как обработка бесклеточным супернатантом шести штаммов монокультуры E. faecalis и монокультуры L. plantarum ATCC 14917 вызывала только 5–10% ГТ. -29 клеток, чтобы иметь округлую морфологию, аналогичную отрицательному контролю (рис. 3).Более того, когда клетки HT-29 обрабатывали бесклеточными супернатантами E. faecalis , которые ранее инкубировали с клиническими C. difficile 541, они оставались стабильными, а процент округления клеток снижался по сравнению с HT-29. клетки, обработанные бесклеточным супернатантом четырех штаммов C. difficile . Однако, когда клетки HT-29 обрабатывали совместной культурой бесклеточного супернатанта из шести E. faecalis , инкубированных с C.difficile ATCC 630, ATCC 43255 и клинический C. difficile 17,> 50% округлены. Тем не менее, эти клеточные повреждения были меньше, чем наблюдаемые после обработки бесклеточным супернатантом монокультуры C. difficile (фиг. 3).

Рисунок 3 . Сравнение цитотоксических эффектов отдельных штаммов C. difficile , E. faecalis и совместного культивирования E. faecalis с C. difficile на клетках HT-29. (A) Монослойные клетки HT-29. (B – D) Клетки HT-29, обработанные бесклеточным супернатантом токсигенного штамма C. difficile и E. faecalis . (E, F) Клетки HT-29, обработанные бесклеточным супернатантом из совместной культуры E. faecalis и C. difficile .

Кроме того, для изучения клеточных событий, вызванных различными видами лечения, детекцию F -актина проводили с использованием иммунофлуоресцентного анализа.Результаты показали, что в то время как клетки HT-29 контрольной группы демонстрировали типичный цитоскелет F -актина, поглощенное ядро ​​и связанные клетки (Фиг.4), клетки HT-29, обработанные бесклеточным супернатантом индивидуума Монокультура C. difficile показала потерю опосредованных цитоскелетом F -актина взаимосвязей между клетками, а также обнаружила конденсированные ядра, что указывает на начальную стадию апоптоза. Клетки HT-29 стали округлыми, и плотные контакты были нарушены.Изображения клеток HT-29, монокультурных с бесклеточным супернатантом шести E. faecalis или L. plantarum ATCC 14917, были аналогичны изображениям контрольной группы, а актин F- показал нормальную морфологию. Интенсивность окрашивания DAPI ядра этих клеток была сравнима с таковой для контроля, но меньше, чем у клеток HT-29, обработанных бесклеточным супернатантом индивидуума C. difficile .

Рисунок 4 . Иммунофлуоресцентные изображения, полученные с помощью конфокальной сканирующей лазерной микроскопии клеток HT-29 через 24 часа с бесклеточным супернатантом индивидуума C.difficile ATCC630, E. faecalis 1302 и L. plantarum ATCC 14917 и с бесклеточным супернатантом, полученным после инкубации E. faecalis с C. difficile ATCC630 и L. plantarum ATCC 14917 с C. difficile ATCC630. (A) DAPI-окрашенное ядро ​​(синее, возбужденное при 405 нм). (B) F-актин, окрашенный зондом Phalloidin-Alexa-Fluor-488 (зеленый, возбуждение при 490 нм). (C) Комбинация ядра и окрашенного F-актина.

Конфокальные изображения клеток HT-29, обработанных бесклеточными супернатантами, полученные из совместной культуры E. faecalis PK1302 или L. plantarum ATCC 14917 с каждым из четырех токсигенных C. difficile , показали, что HT Клетки -29 были меньше повреждены по сравнению с клетками HT-29, которые обрабатывали бесклеточным супернатантом отдельной монокультуры C. difficile . Некоторые части цитоскелета F -актина имели взаимосвязанную структуру, а клетки имели нормальную морфологию.Хотя ядра большинства клеток были аналогичны ядрам контрольной группы, некоторые ядра были конденсированными.

В целом, эти результаты свидетельствуют о том, что бесклеточные супернатанты E. faecalis снижали цитопатические эффекты C. difficile , противодействуя эффекту токсинов C. difficile .

Обсуждение

Пробиотики изучаются как альтернативный терапевтический вариант лечения и профилактики ИКД (9). Выбор подходящего пробиотика против ИКД очень важен.Это происходит главным образом потому, что не все пробиотические препараты эффективны против ИКД (35, 36).

Различные штаммы потенциальных пробиотиков были выделены из фекалий человека и животных, особенно потому, что этот источник общепризнан как безопасный для употребления в пищу человеком (16, 37). Энтерококки, а именно E. faecium и E. faecalis , преимущественно присутствуют в нормальной флоре кишечного тракта теплокровных животных. Они приносят пользу своему хозяину для здоровья (17).Поэтому новые штаммы энтерококков из фекалий обычно проверяются на предмет потенциальных пробиотических свойств. Штаммы, выделенные из фекалий грудных детей, обладают более высокой способностью выживать при прохождении через желудочно-кишечный тракт по сравнению со штаммами, выделенными из молочной пищи. Они конкурируют с патогенными бактериями за питательные вещества и эффективно колонизируют ЖКТ (38). Более того, в нескольких исследованиях сообщалось о новых пробиотиках из фекалий грудных детей, поскольку в них преобладают бифидобактерии, лактобациллы, энтерококки и другие LAB (23, 39–41).В этом исследовании девять штаммов E. faecalis , PK1003, PK1201, PK1202, PK1301, PK1302, PK180, PK2003, PK2004 и PK2502, были выделены из фекалий грудных детей из-за их высокой толерантности к состояниям ЖКТ. Способность прикрепляться к слизистой оболочке кишечника — важное свойство потенциального пробиотика. Адгезия пробиотических бактерий к эпителиальным клеткам человека может служить важным механизмом для предотвращения колонизации патогенов и предотвращения удаления бактерий из толстой кишки через перистальтику (42, 43).Адгезия к ЖКТ в основном связана с гидрофобностью поверхности бактериальных клеток (44). Здесь все штаммов E. faecalis показали высокую гидрофобность, что позволяет предположить, что они были способны прикрепляться к эпителиальным клеткам кишечника.

E. faecalis обычно используется в качестве пищевого продукта и молочной закваски. Недавно они использовались в качестве пробиотиков для терапевтического лечения, и до сих пор не сообщалось о побочных эффектах (16). Однако около штаммов E. faecalis являются внутрибольничными патогенами.Следовательно, если пробиотик не объявлен «общепризнанным безопасным», его параметры безопасности должны быть определены перед использованием. Устойчивость к антибиотикам является критическим фактором, который необходимо оценивать для оценки безопасности энтерококков, и необходимо убедиться, что они не содержат приобретенных и передаваемых детерминант устойчивости к антибиотикам. В частности, устойчивость энтерококков к ванкомицину является серьезной проблемой для безопасности пробиотиков, поскольку она горизонтально передается другим штаммам (45).Интересно, что все изолированные штаммы были чувствительны к ванкомицину и не содержали генов устойчивости к ванкомицину Van-A и Van-B . Все штаммы несли по крайней мере один вирулентный детерминантный ген; однако наличие генов вирулентности не указывает на патогенные свойства. Из девяти штаммов шесть штаммов E. faecalis представили efaAfs и gel E; efaAfs участвуют в адгезии клеток бактериальных патогенов (28, 46), что, в свою очередь, важно для прилипания пробиотиков к клеткам кишечника. gel E кодирует желатиназу, которая гидролизует коллаген, казеин и гемоглобин (28, 46). Три штамма E. faecalis (PK2003, PK2004 и PK2502), несущие esp , проявили гемолитическую активность на чашках с кровяным агаром. Поэтому эти штаммы были исключены как потенциальные пробиотики. Вирулентность шести штаммов была также определена с помощью теста киллинга G. mellonella , который является полезной моделью для изучения инфекций, вызываемых патогенами человека, поскольку врожденная иммунная система G.mellonella похожа на личинок позвоночных (47). Шесть отобранных штаммов E. faecalis не уничтожили G. mellonella . Взятые вместе, эти результаты подтверждают тот факт, что все шесть штаммов E. faecalis могут быть использованы в качестве потенциальных пробиотических штаммов, которые были безопасными и отвечали всем требованиям пробиотических свойств.

Известно, что пробиотики действуют против ИКД через различные механизмы бактериального антагонизма, такие как конкуренция за адгезию к слизистой оболочке кишечника, продуцирование антимикробных молекул, модуляция воспаления кишечника, снижение токсичности, вызванной C.difficile и ингибирование спор C. difficile (48). Некоторые соединения, продуцируемые пробиотическими бактериями, такие как метаболиты, органические кислоты и бактериоцины, также могут способствовать антимикробной активности против энтеропатогенов (49). Enterococcus spp. может продуцировать энтероцины, такие как энтероцин A, энтероцин AS-48 и энтероцины L50A и L50B, которые могут образовывать поры в клеточной мембране, истощать трансмембранный потенциал и / или градиент pH, приводящий к утечке необходимых внутриклеточных молекул и лизису клеток (14, 16, 50).В этом исследовании бактериоцин был обнаружен во всех шести отобранных штаммах E. faecalis , которые могут ингибировать токсигенные C. difficile .

Споры C. difficile важны для передачи болезни. Они устойчивы к многочисленным воздействиям окружающей среды, включая низкий pH, тепло, радиацию и химические вещества (51). Кроме того, неспособность устранить спор C. difficile может привести к рецидиву ИКД в течение 2–3 месяцев (52). В настоящее время пробиотики используются в некоторых больницах для снижения уровня C.difficile у пациентов, которым вводят антибиотики (53). Результаты исследования Rätsep et al. (15) показали, что комбинация ксилита с L. plantarum inducia подавляет прорастание спор и рост в вегетативные токсин-продуцирующие клетки C. difficile , а также снижает колонизацию кишечника патогеном, что впоследствии снижает CDI. тарифы. Что касается ингибирования, шесть штаммов E. faecalis , идентифицированных в этом исследовании, также проявили значительное ингибирующее действие на образование спор и прорастание C.difficile . Почти все штаммов E. faecalis , выделенных в этом исследовании, продуцировали ферменты BSH, которые участвуют в ингибировании прорастания спор C. difficile (10, 54).

C. difficile продуцирует токсины, в основном энтеротоксин (TcdA) и / или цитотоксин (TcdB). Эти токсины разрушают актиновый цитоскелет и плотные контакты, что приводит к дезорганизации цитоскелета F-актина и плотных контактов кишечных эпителиальных клеток, морфологическим изменениям и последующей гибели клеток (4, 5).В предыдущем исследовании было показано, что энтерококки эффективны в профилактике ААД (16). Было показано, что E. faecalis NM815, E. faecalis NM915 и E. faecium NM1015 ингибируют C. difficile (12). Аналогичным образом, наши результаты показали, что шесть штаммов E. faecalis были способны ингибировать C. difficile , продуцируя бактериоцин и / или BSH. В предыдущем отчете было обнаружено, что некоторые пробиотики ингибируют токсинов C. difficile , продуцируя протеазные белки, которые гидролизуют TcdA и TcdB и ингибируют их связывание с соответствующими рецепторами щеточной каймы кишечника (10, 54).Valdes-Varela et al. проверили бифидобактерии и лактобациллы, которые были способны противодействовать цитотоксическому действию C. difficile на монослой кишечного эпителия HT29 (34). Они показали, что Bifidobacterium longum и Bifidobacterium breve были способны снизить токсические эффекты патогена на клеточные линии HT-29, и округление было предотвращено, а микроструктура F -актина и плотные контакты между соседними клетками были сохранены. E. faecium и L.lactis также помогает защитить эпителиальные клетки от токсинов C. difficile (11). Аналогичным образом, результаты нашего исследования показали, что шесть E. faecalis могут секретировать антибактериальные агенты, которые снижают цитотоксические эффекты токсинов C. difficile и защищают клетки HT-29.

Заключение

Шесть штаммов E. faecalis были идентифицированы как потенциальные пробиотики для предотвращения или контроля колонизации C. difficile или ИКД.Было обнаружено, что они ингибируют токсикогенный эффект C. difficile за счет уменьшения токсического воздействия клостридией на клетки HT-29 и предотвращения образования и прорастания спор C. difficile . Однако необходимы дальнейшие исследований in vivo ингибирования C. difficile с использованием этих штаммов E. faecalis .

Заявление о доступности данных

Исходные материалы, представленные в исследовании, включены в статью / дополнительные материалы, дальнейшие запросы можно направлять соответствующим авторам.

Заявление об этике

Исследования с участием людей были рассмотрены и одобрены этическими комитетами медицинского факультета Университета принца Сонгкла. Письменное информированное согласие на участие в этом исследовании было предоставлено законным опекуном / ближайшими родственниками участников.

Авторские взносы

CR, AT и KS разработали и разработали эксперименты. CR, NI, PS и WC проводили эксперименты. CR и KS проанализировали данные. KS предоставил реагенты, материалы и инструменты для анализа.ЧР, А.А. и К.С. написали рукопись. Все авторы внесли свой вклад в статью и одобрили представленную версию.

Финансирование

Эта работа была поддержана медицинским факультетом Университета принца Сонгкла (номер гранта REC61-064-4-2). CR является стипендиатом медицинского факультета Университета принца Сонгкла.

Конфликт интересов

Авторы заявляют, что исследование проводилось при отсутствии каких-либо коммерческих или финансовых отношений, которые могут быть истолкованы как потенциальный конфликт интересов.

Благодарности

Авторы благодарны доктору Сурасаку Сангкхатхату за предоставление клеток HT-29 и хотели бы поблагодарить Центральную исследовательскую лабораторию медицинского факультета Университета принца Сонгкла за предоставление необходимых лабораторных инструментов.

Дополнительные материалы

Дополнительные материалы к этой статье можно найти в Интернете по адресу: https://www.frontiersin.org/articles/10.3389/fped.2020.572633/full#supplementary-material

Список литературы

1.Мартин Дж. С., Уилкокс М. Х. Инфекция Clostridium difficile : эпидемиология, диагностика и понимание передачи. Nat Rev Gastroenterol Hepatol. (2016) 13: 206–16. DOI: 10.1038 / nrgastro.2016.25

PubMed Аннотация | CrossRef Полный текст | Google Scholar

2. Чепиль Дж., Дроздз М., Питуч Х., Куиджпер Э. Дж., Перуки В., Миелимонка А. и др. Инфекция Clostridium difficile : обзор. евро J Clin Microbiol . (2019) 38: 1211–21. DOI: 10.1007 / s10096-019-03539-6

PubMed Аннотация | CrossRef Полный текст | Google Scholar

3.Бриттон Р.А., Янг В.Б. Взаимодействие между кишечной микробиотой и хозяином при устойчивости к колонизации Clostridium difficile . Trends Microbiol. (2012) 20: 313–9. DOI: 10.1016 / j.tim.2012.04.001

PubMed Аннотация | CrossRef Полный текст | Google Scholar

4. Рупник М., Уилкокс М.Х., Гердинг Д.Н. Clostridium difficile i Инфекция: новые разработки в эпидемиологии и патогенезе. Nat Rev Microbiol. (2009) 7: 526–36. DOI: 10.1038 / nrmicro2164

PubMed Аннотация | CrossRef Полный текст | Google Scholar

5.Кэрролл KC, Бартлетт JG. Биология Clostridium difficile : значение для эпидемиологии и диагностики. Annu Rev Microbiol. (2011) 65: 501–21. DOI: 10.1146 / annurev-micro-0-102824

PubMed Аннотация | CrossRef Полный текст | Google Scholar

6. Вишванатан В.К., Маллоцци М.Дж., Ведантам Г. Инфекция Clostridium difficile : обзор болезни и ее патогенеза, эпидемиологии и вмешательств. Кишечные микробы. (2010) 1: 234–42.DOI: 10.4161 / gmic.1.4.12706

PubMed Аннотация | CrossRef Полный текст | Google Scholar

8. Продовольственная и сельскохозяйственная организация Объединенных Наций / Всемирная организация здравоохранения. Руководство по оценке пробиотиков в пищевых продуктах . Продовольственная и сельскохозяйственная организация Объединенных Наций; Всемирная организация здравоохранения (2002 г.).

Google Scholar

9. McDonald LC, Gerding DN, Johnson S, Bakken JS, Carroll KC, Coffin SE, et al. Руководство по клинической практике для инфекции Clostridium difficile у взрослых и детей: обновление 2017 г., подготовленное Американским обществом инфекционных болезней (IDSA) и Обществом эпидемиологии здравоохранения Америки (SHEA). Clin Infect Dis. (2018) 66: e1–48. DOI: 10.1093 / cid / ciy149

PubMed Аннотация | CrossRef Полный текст | Google Scholar

10. Parkes GC, Sanderson JD, Whelan K. Механизмы и эффективность пробиотиков в профилактике Clostridium difficile -ассоциированной диареи. Lancet Infect Dis. (2009) 9: 237–44. DOI: 10.1016 / S1473-3099 (09) 70059-3

PubMed Аннотация | CrossRef Полный текст | Google Scholar

11. Доуделл П., Чанкамхаенгдеча С., Панбангред В., Джанвилисри Т., Арооннуал А.Пробиотическая активность Enterococcus faecium и Lactococcus lactis , выделенных из таиландских ферментированных колбас, и их защитное действие против Clostridium difficile . Пробиотики Antimicro . (2019) 12: 641–8. DOI: 10.1007 / s12602-019-09536-7

PubMed Аннотация | CrossRef Полный текст | Google Scholar

12. Мансур Н.М., Эльхатиб В.Ф., Абошанаб К.М., Бахр ММА. Ингибирование Clostridium difficile у мышей с использованием смеси потенциальных пробиотических штаммов Enterococcus faecalis NM815, E.faecalis NM915 и E. faecium NM1015: новые кандидаты для борьбы с инфекцией C. difficile (CDI). Пробиотики Антимикроб . (2017) 10: 511–22. DOI: 10.1007 / s12602-017-9285-7

PubMed Аннотация | CrossRef Полный текст | Google Scholar

13. Рацеп М., Наабер П., Кольялг С., Смидт И., Шкут Э. Влияние штаммов Lactobacillus plantarum на клинические изоляты Clostridium difficile in vitro . J Пробное здоровье .(2014) 2: 119. DOI: 10.4172 / 2329-8901.1000119

CrossRef Полный текст | Google Scholar

15. Рятсеп М., Кылйалг С., Сепп Э., Смидт И., Труусалу К., Сонгисепп Э. и др. Комбинация пробиотика и пребиотика может предотвратить прорастание спор Clostridium difficile и инфекцию. Анаэроб. (2017) 47: 94–103. DOI: 10.1016 / j.anaerobe.2017.03.019

PubMed Аннотация | CrossRef Полный текст | Google Scholar

16. Franz CMAP, Huch M, Abriouel H, Holzapfel W, Gálvez A.Энтерококки как пробиотики и их значение для безопасности пищевых продуктов. Int J Food Microbiol. (2011) 151: 125–40. DOI: 10.1016 / j.ijfoodmicro.2011.08.014

PubMed Аннотация | CrossRef Полный текст | Google Scholar

17. Девриезе Л., Баэле М., Бутайе П. Род Enterococcus . В: М. Дворкин, С. Фалькоу, Э. Розенберг, К. Х. Шлейфер, Э. Стакебрандт, редакторы. Прокариоты: Том 4: Бактерии: Firmicutes, Cyanobacteria . Нью-Йорк, штат Нью-Йорк: Springer US (2006).п. 163–74.

Google Scholar

18. Chen C-C, Lai C-C, Huang H-L, Huang W-Y, Toh H-S, Weng T-C и др. Антимикробная активность видов Lactobacillus в отношении устойчивых к карбапенемам энтеробактерий. Front Microbiol. (2019) 10: 789. DOI: 10.3389 / fmicb.2019.00789

PubMed Аннотация | CrossRef Полный текст | Google Scholar

19. Нигам А., Кумар А., Айенгар М.Х.В., Бхола Н. Скрининг in vitro антибактериальной активности молочнокислых бактерий против общих кишечных патогенов. J Biomed Sci. (2012) 1: 2. DOI: 10.3823 / 1010

CrossRef Полный текст | Google Scholar

20. Павел Д.В. Bergeys Руководство по систематической бактериологии. Фирмы . 2-е изд. Дордрехт; Нью-Йорк, штат Нью-Йорк: Спрингер. (2009).

Google Scholar

21. Hongoh Y, Yuzawa H, Ohkuma M, Kudo T. Оценка праймеров и условий ПЦР для анализа генов 16S рРНК из естественной среды. FEMS Microbiol Lett. (2003) 221: 299–304.DOI: 10.1016 / S0378-1097 (03) 00218-0

PubMed Аннотация | CrossRef Полный текст | Google Scholar

22. Хан С.К., Шин М.С., Пак Х.И., Ким С.И., Ли В.К. Скрининг бактериоцин-продуцирующих штаммов Enterococcus faecalis на антагонистическую активность против Clostridium perfringens . Корейский J Food Sci Anim Resour . (2014) 34: 614–21. DOI: 10.5851 / kosfa.2014.34.5.614

PubMed Аннотация | CrossRef Полный текст | Google Scholar

23.Родригес Э., Аркес Дж. Л., Родригес Р., Пейротен А., Ландете Дж. М., Медина М. Антимикробные свойства пробиотических штаммов, выделенных из младенцев, находящихся на грудном вскармливании. J Funct Foods. (2012) 4: 542–51. DOI: 10.1016 / j.jff.2012.02.015

CrossRef Полный текст | Google Scholar

24. Монтеагудо-Мера А., Родригес-Апарисио Л., Руа Дж., Мартинес-Бланко Х., Наваса Н., Гарсия-Арместо М. Р. и др. In vitro оценка физиологических пробиотических свойств различных штаммов молочнокислых бактерий молочного и человеческого происхождения. J Funct Foods. (2012) 4: 531–41. DOI: 10.1016 / j.jff.2012.02.014

CrossRef Полный текст | Google Scholar

25. Влкова Е., Рада В., Смехилова М., Киллер Дж. Автоагрегационная и коагрегационная способность бифидобактерий и клостридий. Folia Microbiol. (2008) 53: 263–9. DOI: 10.1007 / s12223-008-0040-z

PubMed Аннотация | CrossRef Полный текст | Google Scholar

26. Сонг Ю.Л., Като Н., Мацумиа Ю., Лю С.Х., Като Х., Ватанабе К. Идентификация и выработка перекиси водорода фекальными и вагинальными лактобациллами, выделенными от японских женщин и новорожденных. J Clin Microbiol. (1999) 37: 3062–4. DOI: 10.1128 / JCM.37.9.3062-3064.1999

PubMed Аннотация | CrossRef Полный текст | Google Scholar

27. Ван З., Цзэн Х, Мо И, Смит К., Го И, Лин Дж. Идентификация и характеристика гидролазы желчных солей из Lactobacillus salivarius для разработки новых альтернатив стимуляторам роста антибиотиков. Appl Environ Microbiol. (2012) 78: 8795–802. DOI: 10.1128 / AEM.02519-12

PubMed Аннотация | CrossRef Полный текст | Google Scholar

28.Ревириего К., Итон Т., Мартин Р., Хименес Э., Фернандес Л., Гассон М.Дж. и др. Скрининг детерминант вирулентности в штаммах Enterococcus faecium , выделенных из грудного молока. Дж Hum Lact. (2005) 21: 131–7. DOI: 10.1177 / 08

405275394

PubMed Аннотация | CrossRef Полный текст | Google Scholar

29. CLSI. Методы тестирования антимикробной чувствительности анаэробных бактерий . 29 изд. Уэйн, Пенсильвания: Институт клинических и лабораторных стандартов (2019).

Google Scholar

30. Ян Х-Ф, Пан А-Дж, Ху Л-Ф, Лю И-Й, Ченг Дж, Йе Й и др. Galleria mellonella как модель in vivo для оценки эффективности антимикробных агентов против инфекции Enterobacter cloacae . J Microbiol Immunol. (2017) 50: 55–61. DOI: 10.1016 / j.jmii.2014.11.011

PubMed Аннотация | CrossRef Полный текст | Google Scholar

31. Лоули Т.Д., Краучер Нью-Джерси, Ю. Л., Клэр С., Себайхия М., Гулдинг Д. и др.Протеомная и геномная характеристика высокоинфекционных спор Clostridium difficile 630. J Bacteriol. (2009) 191: 5377–86. DOI: 10.1128 / JB.00597-09

PubMed Аннотация | CrossRef Полный текст | Google Scholar

32. Carlson PE Jr, Kaiser AM, McColm SA, Bauer JM, Young VB, Aronoff DM, et al. Различия в прорастании клинических изолятов Clostridium difficile коррелируют с тяжестью заболевания. Анаэроб. (2015) 33: 64–70. DOI: 10.1016 / j.anaerobe.2015.02.003

PubMed Аннотация | CrossRef Полный текст | Google Scholar

33. Джафари Н.В., Кюне С.А., Минтон Н.П., Аллан Э., Баджадж-Эллиотт М. Clostridium difficil е-опосредованные эффекты на эпителий кишечника человека: моделирование взаимодействий хозяин-патоген в камере вертикальной диффузии. Анаэроб. (2016) 37: 96–102. DOI: 10.1016 / j.anaerobe.2015.12.007

PubMed Аннотация | CrossRef Полный текст | Google Scholar

34. Valdes-Varela L, Alonso-Guervos M, Garcia-Suarez O, Gueimonde M, Ruas-Madiedo P.Скрининг бифидобактерий и лактобацилл, способных противодействовать цитотоксическому действию Clostridium difficile на монослой кишечного эпителия HT29. Front Microbiol. (2016) 7: 577. DOI: 10.3389 / fmicb.2016.00577

PubMed Аннотация | CrossRef Полный текст | Google Scholar

35. Аллен С.Дж., Уэрхэм К., Ван Д., Брэдли С., Хатчингс Н., Харрис В. и др. Lactobacilli и бифидобактерии в профилактике антибиотико-ассоциированной диареи и Clostridium difficile диареи у пожилых стационарных пациентов (PLACIDE): рандомизированное двойное слепое плацебо-контролируемое многоцентровое исследование. Ланцет. (2013) 382: 1249–57. DOI: 10.1016 / S0140-6736 (13) 61218-0

PubMed Аннотация | CrossRef Полный текст | Google Scholar

36. Auclair J, Frappier M, Millette M. Lactobacillus acidophilus CL1285, Lactobacillus casei LBC80R и Lactobacillus rhamnosus CLR2 (Bio-K +): характеристика, производство, контроль конкретных механизмов действия и комбинация пробиотиков для первичной профилактики инфекции Clostridium difficile . Clin Infect Dis. (2015) 60 (Дополнение 2): S135–43. DOI: 10.1093 / cid / civ179

PubMed Аннотация | CrossRef Полный текст | Google Scholar

38. Фернандес Л., Ланга С., Мартин В., Мальдонадо А., Хименес Е., Мартин Р. и др. Микробиота грудного молока: происхождение и потенциальная роль в здоровье и болезнях. Pharmacol Res. (2013) 69: 1–10. DOI: 10.1016 / j.phrs.2012.09.001

PubMed Аннотация | CrossRef Полный текст | Google Scholar

39. Халил Р., Махрус Х., Эль-Халафави К., Камали К., Фрэнк Дж., Эль Сода М.Оценка пробиотического потенциала молочнокислых бактерий, выделенных из фекалий грудных детей в Египте. Afr J Biotechnol. (2007) 6: 939–49.

Google Scholar

40. Механна Н.С., Вали И., Аттиа А.Е., Лотфи В., Тавил А.Е., Механна Н.С. Связь между пробиотическими свойствами изолятов, выделенных из грудного молока и стула младенцев. NutrFood Sci. (2016) 46: 294–305. DOI: 10.1108 / NFS-10-2014-0091

CrossRef Полный текст | Google Scholar

41.Panya M, Lulitanond V, Rattanachaikunsopon P, Srivoramas T., Chaiwong T. Выделение, идентификация и оценка новых пробиотических штаммов, выделенных из фекалий грудных детей. J Med Assoc Thai. (2016) 99 (Дополнение 1): S28–34.

PubMed Аннотация | Google Scholar

43. Джордж Керри Р., Патра Дж. К., Гауда С., Парк Й, Шин Х. С., Дас Дж. Действие пробиотиков для здоровья человека: обзор. J Анал с пищевыми продуктами. (2018) 26: 927–39. DOI: 10.1016 / j.jfda.2018.01.002

PubMed Аннотация | CrossRef Полный текст | Google Scholar

44. Монтеагудо-Мера А., Расталл Р.А., Гибсон Г.Р., Харалампопулос Д., Хатцифрагкоу А. Механизмы адгезии, опосредованные пробиотиками и пребиотиками, и их потенциальное влияние на здоровье человека. Appl Microbiol Biotechnol. (2019) 103: 6463–72. DOI: 10.1007 / s00253-019-09978-7

PubMed Аннотация | CrossRef Полный текст | Google Scholar

46. Лемпиайнен Х., Киннунен К., Мертанен А., фон Райт А.Распространенность факторов вирулентности среди изолятов кишечных энтерококков человека. Lett Appl Microbiol. (2005) 41: 341–4. DOI: 10.1111 / j.1472-765X.2005.01769.x

PubMed Аннотация | CrossRef Полный текст | Google Scholar

48. Goldstein EJC, Johnson SJ, Maziade PJ, Evans CT, Sniffen JC, Millette M, et al. Пробиотики и профилактика инфекции Clostridium difficile . Анаэроб. (2017) 45: 114–9. DOI: 10.1016 / j.anaerobe.2016.12.007

PubMed Аннотация | CrossRef Полный текст | Google Scholar

49.Халиги А., Бехдани Р., Кухестани С. Пробиотики: всесторонний обзор их классификации, механизма действия и роли в питании человека. В: В Рао, Л. Г. Рао, редакторы, Пробиотики и пребиотики в питании и здоровье человека . Риека: InTech (2016). п. 02. doi: 10.5772 / 63646

CrossRef Полный текст | Google Scholar

50. Вимонт А., Фернандес Б., Хаммами Р., Абабса А., Даба Н., Флисс I. Вырабатывающий бактериоцин Enterococcus faecium LCW 44: потенциальный кандидат в пробиотики из сырого верблюжьего молока. Передняя микробиолия. (2017) 8: 865. DOI: 10.3389 / fmicb.2017.00865

PubMed Аннотация | CrossRef Полный текст | Google Scholar

51. Zhu D, Sorg JA, Sun X. Биология Clostridioides difficile: споруляция, прорастание и соответствующие методы лечения инфекции C. difficile . Front Cell Infect Microbiol. (2018) 8:29. DOI: 10.3389 / fcimb.2018.00029

PubMed Аннотация | CrossRef Полный текст | Google Scholar

53. McFarland LV, Ship N, Auclair J, Millette M.Первичная профилактика инфекций Clostridium difficile с помощью специального пробиотика, сочетающего штаммы Lactobacillus acidophilus, L. casei и L. rhamnosus : оценка доказательств. J Hosp Infect. (2018) 99: 443–52. DOI: 10.1016 / j.jhin.2018.04.017

PubMed Аннотация | CrossRef Полный текст | Google Scholar

54. Castagliuolo I, Riegler MF, Valenick L, LaMont JT, Pothoulakis C. Протеаза Saccharomyces boulardii подавляет эффекты Clostridium difficile токсинов A и B в слизистой оболочке толстой кишки человека. Infect Immun. (1999) 67: 302–7. DOI: 10.1128 / IAI.667.1.302-307.1999

PubMed Аннотация | CrossRef Полный текст | Google Scholar

Энтерококковая колонизация младенцев в отделении интенсивной терапии новорожденных: связанные предикторы, факторы риска и сезонные закономерности | BMC Infectious Diseases

1.

Fanaro S, Chierici R, Guerrini P, Vigi V: Кишечная микрофлора в раннем младенчестве: состав и развитие. Acta Paediatr Suppl. 2003, 441: 48-55.

Google Scholar

2.

Mackie RI, Sghir A, Gaskin HR: Микробная экология развития желудочно-кишечного тракта новорожденных. Am J Clin Nutr. 1999, 69 (Дополнение): 1035S-45S.

CAS PubMed Google Scholar

3.

Schwiertz A, Gruhl B, Löbnitz M, Michel P, Radke P, Blaut M: Развитие бактериального состава кишечника у госпитализированных недоношенных младенцев по сравнению с доношенными младенцами, находящимися на грудном вскармливании. Pediatr Res. 2003, 54: 393-99. 10.1203 / 01.PDR.0000078274.74607.7A.

Артикул PubMed Google Scholar

4.

Orrhage K, Nord CE: Факторы, контролирующие бактериальную колонизацию кишечника у младенцев, находящихся на грудном вскармливании. Acta Paediatr Suppl. 1999, 430: 47-57.

Google Scholar

5.

Хайке М.М., Сам Д.Ф., Гилмор М.С.: Энтерококки с множественной лекарственной устойчивостью: природа проблемы и планы на будущее.Emerg Infect Dis. 1998, 4: 239-49.

CAS Статья PubMed PubMed Central Google Scholar

6.

Благородный CJ: Носительство стрептококков группы D в кишечнике человека. J Clin Pathol. 1978, 31: 1182-86. 10.1136 / jcp.31.12.1182.

CAS Статья PubMed PubMed Central Google Scholar

7.

Мюррей Б.Е.: энтерококковые инфекции, устойчивые к ванкомицину.N Engl J Med. 2000, 342: 710-21. 10.1056 / NEJM200003093421007.

CAS Статья PubMed Google Scholar

8.

Маки Д.Г., Эггер В.А.: Энтерококковая бактериемия: клинические особенности, риск эндокардита и лечение. Медицина. 1988, 67: 248-69. 10.1097 / 00005792-198807000-00005.

CAS Статья PubMed Google Scholar

9.

Gewolb IH, Schwalbe RS, Taciak VL, Harrison TS, Panigrahi P: Микрофлора стула у младенцев с крайне низкой массой тела при рождении.Arch Dis Child Fetal Neonatal Ed. 1999, 80: F167-73.

CAS Статья PubMed PubMed Central Google Scholar

10.

Hendley JO, Hayden FG, Winther B: Еженедельная точечная распространенность Streptococcus pneumoniae, Hemophilus influenzae и Moraxella catarrhalis в верхних дыхательных путях нормальных маленьких детей: влияние респираторного заболевания и сезона. АПМИС. 2005, 113: 213-20. 10.1111 / j.1600-0463.2005.apm1130310.x.

Артикул PubMed Google Scholar

11.

Huang YC, Chou YH, Su LH, Lien RL, Lin TY: Метициллин-резистентный Staphylococcus aureus и его связь с инфекцией среди младенцев, госпитализированных в отделения интенсивной терапии новорожденных. Педиатр. 2006, 118: 469-74. 10.1542 / peds.2006-0254.

Артикул Google Scholar

12.

Facklam R, Collins MD: Идентификация видов Enterococcus , выделенных от инфекций человека, с помощью стандартной тестовой схемы. J Clin Microbiol. 1989, 27: 731-4.

CAS PubMed PubMed Central Google Scholar

13.

Национальный комитет по клиническим лабораторным стандартам: Стандарты эффективности тестирования на чувствительность к противомикробным препаратам (приложение). Вилланова, П.А. 1999

Google Scholar

14.

Хименес Э., Фернандес Л., Марин М.Л., Мартин Р., Одриозола Дж. М., Нуэно-Палоп С., Нарбад А., Оливарес М., Хаус Дж., Родригес Дж. М.: Выделение комменсальных бактерий из пуповинной крови здоровых новорожденных, рожденных путем кесарева сечения. Curr Microbiol. 2005, 51: 270-4. 10.1007 / s00284-005-0020-3.

CAS Статья PubMed Google Scholar

15.

Martin R, Langa S, Reviriego C, Jimenez E, Marin ML, Xaus J, Fernandez L, Rodriguez JM: Грудное молоко является источником молочнокислых бактерий для кишечника младенцев.J Pediatr. 2003, 143: 754-8. 10.1016 / j.jpeds.2003.09.028.

CAS Статья PubMed Google Scholar

16.

Heikkilä MP, Saris PEJ: Ингибирование Staphylococcus aureus комменсальными бактериями грудного молока. J Appl Microbiol. 2003, 95: 471-8. 10.1046 / j.1365-2672.2003.02002.x.

Артикул PubMed Google Scholar

17.

Hitti J, Riley DE, Krohn MA, Hillier SL, Agnew KJ, Krieger JN, Eschenbach DA: Цепная реакция бактериальной рибосомной РНК-полимеразы широкого спектра действия для выявления инфекции околоплодных вод у женщин при преждевременных родах.Clin Infect Dis. 1997, 24: 1229-32.

Артикул Google Scholar

18.

Bearfield C, Davenport ES, Sivapathasundaram V, Allaker RP: Возможная связь между инфекцией микроорганизмов околоплодных вод и микрофлорой ротовой полости. Br J Obstet Gynaecol. 2002, 109: 527-33.

Артикул Google Scholar

19.

Rescigno M, Urbano M, Valzasina B, Francolini M, Rotta B, Bonasio R, Granucci F, Kraehenbuhl JP, Ricciardi-Castagnoli P: Дендритные клетки экспрессируют белки плотных контактов и проникают в монослои кишечного эпителия, чтобы взять образцы бактерий.Nat Immunol. 2001, 4: 361-7. 10.1038 / 86373.

Артикул Google Scholar

20.

Мюррей Б.Э .: Жизнь и времена энтерококка. Clin Microbiol Rev.1990, 3: 82-90.

Артикул Google Scholar

21.

Reid KC, Cockerill FR, Patel R: Клинические и эпидемиологические особенности Enterococcus casseliflavus / flavescens и Enterococcus gallinarum бактериемия: отчет о 20 случаях.Clin Infect Dis. 2001, 32: 1540-6. 10.1086 / 320542.

CAS Статья PubMed Google Scholar

22.

Miedema CJ, Kerkhof M, Arends JP, Bergman KA, Kimpen JLL: Факторы риска колонизации энтерококками в отделении интенсивной терапии новорожденных. Clin Microbiol Infect. 2000, 6: 53-10.1046 / j.1469-0691.2000.00019.x.

CAS Статья PubMed Google Scholar

23.

Penders J, Thijs C, Vink C, Stelma FF, Snijders B, Kummeling I, van den Brandt PA, Stobberingh EE: Факторы, влияющие на состав кишечной микробиоты в раннем младенчестве. Педиатр. 2006, 118: 511-21. 10.1542 / peds.2005-2824.

Артикул Google Scholar

24.

Weinstein JW, Roe M, Towns M, Sanders L, Thorpe JJ, Corey GR, Saxton DJ: Устойчивые энтерококки: проспективное исследование распространенности, заболеваемости и факторов, связанных с колонизацией в университетской больнице.Инфекционный контроль Hosp Epidemiol. 1996, 17: 36-41.

CAS Статья PubMed Google Scholar

25.

Бишофф В.Е., Рейнольдс TM, Холл Г.О., Венцель Р.П., Эдмонд МБ: Молекулярная эпидемиология устойчивого к ванкомицину Enterococcus faecium в большой городской больнице в течение 5-летнего периода. J Clin Microbiol. 1999, 37: 3912-6.

CAS PubMed PubMed Central Google Scholar

26.

Prellner K, Christensen P, Hovelius B, Rosen C: носоглоточное носительство бактерий у предрасположенных к отиту и не предрасположенных к отиту детей в детских садах. Acta Otolaryngologica. 1984, 98: 343-50.

CAS Статья Google Scholar

27.

Syrjänen RK, Kilpi TM, Kaijalainen TH, Herva EE, Takal AK: носоглоточное носительство Streptococcus pneumoniae у финских детей младше 2 лет. J Infect Dis.2001, 184: 451-9. 10.1086 / 322048.

Артикул PubMed Google Scholar

28.

Hoberman A, Paradise JL, Greenberg DP, Wald ER, Kearney DH, Colborn DK: Чувствительность пневмококковых изолятов к пенициллину, вызывающих острый средний отит у детей. Pediatr Infect Dis J. 2005, 24: 115-20. 10.1097 / 01.inf.0000151092.85759.6d.

Артикул PubMed Google Scholar

29.

Сеть детских инфекционных болезней по острым инфекциям дыхательных путей. [http://www.pid-ari.net/RL_WebWarn/Saisonberichte.htm]

30.

Ферех М., Коэнен С., Малхотра-Кумар С., Дворакова К., Хендркс Е., Суэтенс К., Гусенс Х., ESAC Project Группа: Европейский надзор за потреблением антимикробных препаратов (ESAC): использование антибиотиков в амбулаторных условиях в Европе. J Antimicrob Chemother. 2006, 58: 401-7. 10.1093 / jac / dkl188.

CAS Статья PubMed Google Scholar

Детская энтерококковая инфекция: история болезни, патофизиология, эпидемиология

Автор

Мира Варман, доктор медицины Доцент кафедры педиатрии, отделение детских инфекционных заболеваний, Медицинский центр Университета Крейтон

Мира Варман, доктор медицины, является членом следующих медицинских обществ: Американской академии педиатрии, Американского общества микробиологии, инфекционного Американское общество болезней, Общество детских инфекционных заболеваний, Общество эпидемиологии здравоохранения Америки

Раскрытие информации: выступать (d) в качестве докладчика или члена бюро докладчиков для: Pfizer, Sanofi
Получил исследовательский грант от: Merck; MedImmune; Регенрон; Пфайзер; Новартис; Саноф; GSK
Получал гонорары от фармацевтических компаний за выступления и преподавание; Получил грант / средства на исследования от фармацевтических компаний для проведения клинических исследований.

Соавтор (ы)

Арчана Чаттерджи, доктор медицины, доктор философии Профессор и заведующий кафедрой педиатрии, старший заместитель декана по развитию факультета Медицинской школы Сэнфорд, Университет Южной Дакоты

Арчана Чаттерджи, доктор медицинских наук, является членом следующих медицинских обществ : Американская академия педиатрии, Американское общество микробиологии, Общество инфекционных болезней Америки, Международное общество инфекционных заболеваний, Общество педиатрических инфекционных болезней, Общество педиатрических исследований

Раскрытие: нечего раскрывать.

Валид Абухаммур, MD, MBA, CIC, FAAP, FIDSA Профессор педиатрии, Колледж медицины человека Мичиганского государственного университета; Адъюнкт-профессор кафедры педиатрии Хашимитского университета, Иордания; Заведующий педиатрическими инфекционными заболеваниями педиатрического отделения детской больницы Аль-Джалила, ОАЭ

Валид Абухаммур, доктор медицины, магистр делового администрирования, CIC, FAAP, FIDSA является членом следующих медицинских обществ: Американская академия педиатрии, Международное общество инфекционных заболеваний, Международное общество инфекционных заболеваний, Иорданская медицинская ассоциация, Иорданское педиатрическое общество, Мичиганское общество инфекционных болезней, Медицинское общество штата Мичиган, Национальная арабско-американская медицинская ассоциация, Общество детских инфекционных болезней

Раскрытие: нечего раскрывать.

Специальная редакционная коллегия

Мэри Л. Виндл, PharmD Адъюнкт-профессор, Фармацевтический колледж Медицинского центра Университета Небраски; Главный редактор Medscape Drug Reference

Раскрытие информации: нечего раскрывать.

Ларри Лютвик, доктор медицины, FACP , главный редактор, ID Cases; Модератор Программы мониторинга возникающих заболеваний; Адъюнкт-профессор медицины, Медицинский колледж Нижнего штата Нью-Йорка

Ларри Лютвик, доктор медицины, FACP является членом следующих медицинских обществ: Американской ассоциации развития науки, Американской ассоциации изучения заболеваний печени, Американской Колледж врачей, Американская федерация клинических исследований, Американское общество микробиологов, Американское общество инфекционных заболеваний, Общество инфекционных болезней Нью-Йорка, Международное общество инфекционных заболеваний, Нью-Йоркская академия наук, Общество практикующих врачей-терапевтов по делам ветеранов

Раскрытие информации: нечего раскрывать.

Главный редактор

Рассел Стил, доктор медицины Профессор-клиницист, Медицинский факультет Тулейнского университета; Врач-штатный врач, Ochsner Clinic Foundation

Рассел Стил, доктор медицины, является членом следующих медицинских обществ: Американской академии педиатрии, Американской ассоциации иммунологов, Американского педиатрического общества, Американского общества микробиологии, Американского общества инфекционных болезней, Медицинского центра штата Луизиана. Общество, Общество детских инфекционных болезней, Общество педиатрических исследований, Южная медицинская ассоциация

Раскрытие: Ничего не раскрывать.

Дополнительные участники

Хосе Рафаэль Ромеро, доктор медицины Директор программы стипендий по педиатрическим инфекционным заболеваниям, доцент кафедры педиатрии Объединенного отделения детских инфекционных заболеваний, Университет Крейтон / Медицинский центр Университета Небраски

Хосе Рафаэль Ромеро, доктор медицинских наук, является членом следующие медицинские общества: Американская академия педиатрии, Американское общество микробиологии, Американское общество инфекционных болезней, Нью-Йоркская академия наук, Общество педиатрических инфекционных болезней

Раскрытие: Ничего не разглашать.

Благодарности

Авторы и редакторы eMedicine выражают признательность предыдущему автору Уоррену Джонсону III, доктору медицины, за вклад в разработку и написание этой статьи.

Инфекция E. Coli через пищу или воду | Детская больница CS Mott

Обзор темы

Что такое инфекция

E. coli ?

E. coli ( Escherichia coli ) — это название микроба или бактерии, обитающей в пищеварительном тракте людей и животных.

Существует много типов E. coli , и большинство из них безвредны. Но некоторые могут вызвать кровавый понос. Некоторые штаммы бактерий E. coli могут также вызывать тяжелую анемию или почечную недостаточность, что может привести к смерти.

Другие штаммы E. coli могут вызывать инфекции мочевыводящих путей или другие инфекции.

Что вызывает кишечную инфекцию

E. coli ?

Вы заразитесь E. coli при контакте с фекалиями или калом людей или животных.Это может произойти, если вы пьете воду или едите пищу, загрязненную фекалиями.

E. coli в продуктах питания

E. coli может попасть в мясо во время обработки. Если зараженное мясо не было приготовлено до 160 ° F (71 ° C), бактерии могут выжить и заразить вас, когда вы его съедите. Это самый распространенный способ заражения людей в США E. coli . Любая пища, контактировавшая с сырым мясом, также может заразиться.

Другие продукты, которые могут быть инфицированы E. coli , включают:

• Сырое молоко или молочные продукты. Бактерии могут передаваться из вымени коровы в молоко. Проверьте этикетки на молочных продуктах, чтобы убедиться, что они содержат слово «пастеризованные». Это означает, что пища была нагрета для уничтожения бактерий.
• Сырые фрукты и овощи, такие как салат, проростки люцерны, непастеризованный яблочный сидр или другие непастеризованные соки, контактировавшие с инфицированными фекалиями животных.

E. coli в воде

Фекалии человека или животных, инфицированные E. coli , иногда попадают в озера, бассейны и водоемы. Люди могут заразиться, если загрязненный город или городское водоснабжение не было должным образом обработано хлором или когда люди случайно проглотили зараженную воду во время купания в озере, бассейне или оросительном канале.

E. coli при личном контакте

Бактерии также могут передаваться от одного человека к другому, обычно, когда инфицированный человек плохо моет руки после дефекации. E. coli может передаваться от рук инфицированного человека к другим людям или объектам.

Каковы симптомы?

Основными симптомами кишечной инфекции E. coli являются:

• Кровавая диарея.
• Спазмы желудка.
• Тошнота и рвота.

Некоторые люди не замечают никаких симптомов. У детей симптомы появляются чаще, чем у взрослых. Симптомы обычно появляются через 3-4 дня после контакта с E.coli .

Большинство людей поправляются примерно через неделю. Они часто не обращаются к врачу и не знают, что E. coli вызвала их проблемы.

Когда E. coli вызывает серьезные проблемы с кровью или почками, симптомы включают:

• Бледная кожа.
• Лихорадка.
• Слабость.
• Ушиб.
• Выделение лишь небольшого количества мочи.

Как работает

E.coli диагностирована кишечная инфекция?

Ваш врач может заподозрить, что у вас инфекция E. coli , после того, как он или она задаст вам вопросы и сделает экзамен. Ваш стул, вероятно, будет проверен на E. coli .

Как лечится?

Инфекция E. coli обычно проходит сама по себе. Ваше основное лечение — устроиться поудобнее и пить воду глотками. При диарее организм теряет больше воды, чем обычно. Это может привести к обезвоживанию, что особенно опасно для младенцев и пожилых людей.Регулярные небольшие глотки воды помогут предотвратить обезвоживание.

Если у вас кровавый понос, который может быть вызван инфекцией E. coli , не принимайте лекарства от диареи или антибиотики. Эти лекарства могут замедлить процесс пищеварения, давая вашему организму больше времени для поглощения ядов, вырабатываемых E. coli . Вместо этого позвоните своему врачу.

У некоторых людей инфекция E. coli вызывает серьезные проблемы с кровью и почками. Этим людям может потребоваться переливание крови или диализ.Диализ — это лечение, которое помогает отфильтровывать продукты жизнедеятельности из крови, когда почки не работают должным образом.

Как предотвратить кишечную инфекцию

E. coli ?

Продукты питания и вода, зараженные бактериями E. coli , выглядят и пахнут нормально. Но есть кое-что, что можно сделать, чтобы предотвратить заражение:

• Приготовьте говяжий фарш как минимум до 160 ° F (71 ° C).
• На кухне часто мойте руки горячей мыльной водой, особенно после прикосновения к сырому мясу.
• Вымойте все инструменты или кухонные поверхности, которые соприкасались с сырым мясом.
• Используйте только пастеризованное молоко, молочные и соковые продукты.
• Используйте только очищенную или хлорированную питьевую воду.
• Когда вы путешествуете в страны, где может быть небезопасная питьевая вода, не используйте лед и не пейте воду из-под крана. Избегайте сырых фруктов и овощей, за исключением тех, с кожицы которых вы чистите сами.
• Часто мойте руки и всегда мойте их после посещения туалета или смены подгузников.

Симптомы

У детей чаще, чем у взрослых, развиваются симптомы инфекции E. coli . У большинства людей с инфекцией будут:

• Сильные спазмы и болезненность желудка.
• Понос, сначала водянистый, но часто становящийся очень кровянистым.
• Тошнота и рвота.

Некоторые люди, инфицированные бактериями, не замечают никаких симптомов. Они могут передавать бактерии другим, даже не подозревая об этом.

Существует множество состояний с симптомами, аналогичными симптомам кишечной инфекции E. coli . Диагностика инфекции E. coli может быть осложнена тем фактом, что большинство бактериальных инфекций, вызывающих диарею, сопровождаются высокой температурой. Если у вас нет лихорадки или у вас только умеренная температура, ваш врач может подозревать, что ваши симптомы вызывает что-то другое, а не бактерии.

Кровавая диарея часто встречается в подтвержденных случаях кишечной инфекции E. coli , но бактерии также следует рассматривать как возможную причину некровавой диареи.

Для получения дополнительной информации о том, когда обращаться к врачу по поводу диареи без крови, см .:

Симптомы инфекции E. coli обычно проходят примерно через неделю без дальнейших проблем. Но серьезные проблемы с кровью и почками могут возникнуть в течение 2 недель после начала диареи. Эти проблемы могут вызывать почечную недостаточность, а иногда и длительную инвалидность или смерть у некоторых детей и пожилых людей.

Обследования и анализы

Медицинское обследование диареи, которая может быть вызвана болезнью E.coli обычно начинается с медицинского осмотра и изучения истории болезни.

Во время истории болезни ваш врач задаст вопросы о ваших симптомах, например:

• Когда началась диарея, как долго она длилась и как часто бывают испражнения?
• Есть ли кровь при диарее? Если да, то сколько?
• Были ли у вас озноб или жар?
• Были ли у вас спазмы в животе, тошнота или рвота?
• Вы чувствуете усталость или раздражительность?
• Вы упали в обморок или почувствовали головокружение?

Заражение E.coli легко спутать с другими заболеваниями с аналогичными симптомами, например с другими инфекционными заболеваниями.

Врач может заподозрить у вас инфекцию E. coli , если вы подверглись воздействию этих бактерий. Во время истории болезни ваш врач может спросить, были ли вы:

• Были в детском саду, школе, доме престарелых или другом учреждении по уходу за взрослыми.
• Недавно ел в ресторане.
• Потребляли недоваренное мясо или непастеризованное молоко, молочные продукты или соки.
• Общался с кем-либо, у кого недавно или постоянно болела диарея.
• Ездил недавно.
• Недавно принимал антибиотики.

Во время медицинского осмотра врач обычно:

• Измеряет вашу температуру.
• Измерьте артериальное давление и определите частоту пульса.
• Посмотрите на свой цвет кожи, чтобы увидеть, не слишком ли вы бледны.
• Проверьте живот на нежность.
• Проведите ректальное исследование, чтобы узнать, есть ли у вас кровь в стуле.

Врачи, подозревающие инфекцию E. coli , заказывают культуру стула, которая обнаруживает штаммы E. coli . Поскольку бактерии могут покинуть организм всего за несколько дней, образец следует получить как можно скорее после появления симптомов.

Иногда используются другие тесты, когда диагноз неясен, но они еще не широко доступны.

Если у ребенка или пожилого человека диагностирована инфекция E. coli , за ним можно наблюдать на предмет развития серьезных проблем с кровью или почками.Для мониторинга необходимы анализы крови и мочи для измерения основных элементов крови и биологических жидкостей.

Обзор лечения

Лечение инфекций, вызывающих болезнетворных бактерий E. coli , включает лечение осложнений, в основном обезвоживания, вызванного диареей.

Если у вас развиваются симптомы серьезных проблем с кровью или почками, такие как анемия или почечная недостаточность, ваше лечение может включать:

• Тщательное регулирование потребления жидкости и основных минералов.
• Диализ, чтобы отфильтровать отходы из крови. Некоторым людям с почечной недостаточностью, вызванной инфекцией E. coli , требуется диализ.
• Переливание крови для лечения анемии путем введения дополнительных богатых кислородом красных кровяных телец.

Лекарства, которых следует избегать

Большинство людей выздоравливают от инфекций E. coli за 5–10 дней без лекарств. Антибиотики не рекомендуются. Сообщите своему врачу, если вы думаете, что у вас может быть E.coli и принимают антибиотики.

Лекарства от диареи, отпускаемые без рецепта или по рецепту, обычно не используются для лечения инфекции E. coli . Многие противодиарейные продукты замедляют скорость прохождения пищи и продуктов жизнедеятельности через кишечник. Это может дать организму больше времени для поглощения ядов, производимых бактериями, увеличивая риск таких осложнений, как серьезные проблемы с кровью и почками.

Избегайте этих продуктов без рецепта, если у вас есть или вы подозреваете, что у вас есть E.coli :

• Лоперамид. К ним относятся Имодиум, Маалокс и другие противодиарейные средства. Примечание: Следует избегать только тех продуктов, в состав которых входит лоперамид.
• Продукты, содержащие салицилаты. К ним относятся пепто-бисмол и аналогичные противодиарейные продукты на основе висмута, аспирин и ибупрофен (например, Адвил). Салицилаты могут усилить кровотечение из кишечника. Кроме того, салицилаты связаны с синдромом Рея, редким, но серьезным заболеванием у детей.

Лекарства от диареи, отпускаемые по рецепту, могут быть опасными при назначении человеку с инфекцией E. coli . Врач может прописать одно из этих лекарств, если он или она не знает, что E. coli вызвала диарею. Обязательно обсудите свои симптомы со своим врачом. Обмен информацией важен для правильной диагностики вашего состояния.

Избегайте приема этих лекарств, отпускаемых по рецепту, если у вас есть или вы думаете, что у вас инфекция E. coli :

• Дифеноксин с атропином (Мотофен)
• Дифеноксилат с атропином (ломотил)
• Лоперамид (имодиум, отпускаемый по рецепту)

Домашнее лечение

Домашнее лечение инфекционных заболеваний E.coli состоит в том, чтобы чувствовать себя комфортно и предотвращать распространение бактерий. Если вы не инфицированы, примите меры для предотвращения заражения.

Если вы считаете, что вы или кто-то из ваших подопечных инфицированы E. coli , немедленно обратитесь к врачу. Не лечите симптомы диареи какими-либо лекарствами, отпускаемыми без рецепта или по рецепту.

Домашнее лечение диареи или кровавой диареи, вызванной инфекцией

E. coli

• Не используйте противодиарейные препараты, отпускаемые без рецепта, если у вас диарея с кровью или без крови, которая, как вы подозреваете, может быть вызвана E.coli инфекция. Эти продукты включают Imodium и Maalox Anti-Diarrheal. Не принимайте другие лекарства, оставшиеся после перенесенной болезни.
• Часто делайте небольшие глотки воды или напитка для регидратации, чтобы восполнить потерю жидкости и предотвратить обезвоживание. Поскольку обезвоживание может быть более опасным для младенцев, позвоните своему врачу, если вы считаете, что у вашего ребенка может быть обезвоживание. Ваш желудок не может обрабатывать слишком много жидкости за один раз. Обратитесь за медицинской помощью, если у вас появятся признаки умеренного обезвоживания, в том числе:
  • Сухость во рту.
  • Глаза, которые не слезятся.
  • Низкий диурез.
  • Легкомысленность.

Особенно у детей и взрослых в возрасте 65 лет и старше, обратите внимание на симптомы серьезных проблем с кровью и почками, такие как лихорадка, слабость, бледность кожи или выделение небольшого количества мочи. При появлении любого из этих симптомов немедленно обратитесь к врачу .

Советы по защите от заражения

E. coli через зараженную пищу и воду

• Приготовьте говяжий фарш при температуре не менее 160 ° F (71 ° C).Говяжий фарш следует готовить до тех пор, пока не исчезнет весь розовый цвет, но не полагайтесь только на цвет. Проверяйте температуру термометром для мяса. Разрежьте ресторан и домашние гамбургеры, чтобы они были полностью приготовлены. Соки должны быть прозрачными или желтоватыми, без следов розового. Никогда не ешьте сырой или недоваренный говяжий фарш.
• При приготовлении пищи:
  • Часто мойте руки горячей мыльной водой, особенно после работы с сырым мясом.
  • Всегда мойте инструменты для приготовления пищи, разделочные доски, посуду, столешницы и посуду горячей мыльной водой сразу после того, как они соприкоснулись с сырым мясом.Не кладите приготовленное мясо обратно на тарелку, на которой находилось сырое мясо, если тарелка не была тщательно вымыта водой с мылом и высушена.
  • Используйте отдельные разделочные доски для сырого мяса и других продуктов.
  • Храните сырое мясо, птицу и морепродукты отдельно от овощей, фруктов, хлеба и других продуктов, которые уже были приготовлены для употребления в пищу.
• Используйте только пастеризованное молоко, молочные и соковые продукты. Проверьте этикетку продукта на наличие слова «пастеризованный».«Сок из концентрата такой же, как и пастеризованный.
• Используйте только очищенную (хлорированную) питьевую воду.
• Путешественникам в страны, где водоснабжение может быть небезопасным, следует быть особенно осторожными, чтобы не класть лед в напитки и не пить воду из-под крана. Вся употребляемая вода должна быть кипяченой или разлитой по бутылкам. Ешьте горячие блюда. Избегайте сырых фруктов и овощей, за исключением тех, с кожицы которых вы чистите сами.

Советы по предотвращению передачи

E.coli бактерий

• Часто мойте руки и всегда мойте их после дефекации или смены подгузников. Если в вашем доме несколько ванных комнат, ограничьте использование инфицированного человека только одной ванной.
• Тщательно утилизируйте загрязненные подгузники и стул. Если есть подозрение на инфекцию у маленького ребенка, используйте одноразовые подгузники вместо тканевых, пока болезнь не пройдет.
• Взрослые должны следить за тем, чтобы дети, страдающие диареей, тщательно мыли руки после посещения туалета.Дети, инфицированные E. coli , должны избегать контакта с другими детьми, особенно во время плавания.
• Вымойте ручки унитазов и раковин антибактериальным очистителем.
• Людям, у которых была диагностирована инфекция E. coli , не следует обращаться с едой или работать в детском саду или другом учреждении до тех пор, пока они не дадут отрицательный результат на бактерии в двух образцах стула. Если вы принимали какой-либо антибиотик, образец стула следует взять как минимум через 48 часов после приема последней дозы.
• Хлорированная вода в плавательных бассейнах и гидромассажных ваннах.

Список литературы

Консультации по другим работам

• Американская педиатрическая академия (2015). Диарея, вызванная Escherichia coli (включая гемолитико-уремический синдром). В DW Kimberlin et al., Eds., Red Book: 2015 Report of the Committee on Infectious Diseases, 30th ed., Pp. 343–347. Деревня Элк-Гроув, Иллинойс: Американская академия педиатрии.
• Procop GW, Cockerill F III (2001). Энтерит, вызываемый видами Escherichia coli и Shigella и Salmonella. В WR Wilson et al., Под ред., Current Diagnosis and Treatment in Infectious Diseases, pp. 548–556. Нью-Йорк: Макгроу-Хилл.

Кредиты

Текущий по состоянию на: 23 сентября 2020 г.

Автор: Healthwise Staff
Медицинский обзор:
E.Грегори Томпсон, врач-терапевт
Кэтлин Ромито, доктор медицины, семейная медицина
Адам Хусни, доктор медицины, семейная медицина
Элизабет Т. Руссо, врач-терапевт
В. Дэвид Колби, IV Магистр, доктор медицины, FRCPC — инфекционное заболевание

По состоянию на: 23 сентября 2020 г.

Автор: Здоровый персонал

Медицинское обозрение: E.Грегори Томпсон, врач-терапевт и Кэтлин Ромито, доктор медицины, семейная медицина, Адам Хусни, доктор медицины, семейная медицина, Элизабет Т. Руссо, врач-терапевт, и В. Дэвид Колби IV, магистр медицины, доктор медицинских наук, FRCPC — инфекционные болезни

Энтерококковая инфекция у детей

В этой главе представлено понимание этномедицинского использования лекарственных растений коренные племена округа Маюрбхандж, Одиша, Индия. В дополнение к этому главы также научно подтверждено, сколько из этих растений активны для уничтожения бактерий, вызывающих инфекционная диарея.Водные и метанольные экстракты 150 растений были признаны лекарственными. значение, из которых 136 растений были протестированы на антибактериальную активность с использованием диффузии в лунках агара против восемь патогенных бактерий, вызывающих диарею и дизентерию. Результаты показали, что из 136 видов растений, 100 видов проявили антибактериальную активность против одного или нескольких тестов организмы. Всего 288 экстрактов (144 метанольных + 144 водных), 107 метанольных и 74 водных. экстракты с выраженными антибактериальными свойствами. По результатам скрининга семейство растений, а именно.Fabaceae (08), Rutaceae (07), Combretaceae (06), Caesalpinaceae (06), Anacardiaceae (05) и Apocynaceae (04) показал наивысшую антибактериальную активность по количеству опытных растений. Тем не мение, семьи, а именно. Burseraceae, Crassulaceae, Hypoxidaceae, Liliaceae, Lygodiaceae, Musaceae, oxalideceae, Pedaliaceae, Strychnaceae, Trapaceae, Ulmaceae не проявили активности против каких-либо тестовый организм. Более того, молочай моллюсков и рубиновые — два самых крупных семейства, из которых растения не показали значительного результата против бактерий, вызывающих диарею.Среди растения а именно. Acacia leucophloea, Adhatoda vasica, Andrographis paniculata, Annona reticulate, Anogeissus latifolia, Anthocephalus chinensis, Bombax ceiba, Buchanania lanzan, Butea monosperma, Careya arborea, Cassia fistula, Centella asiatica, Cissampelos pareira, Coccinia grandis, Croton roxburghii, Curculigo orchioides, Diospyros melanoxylon, Eleutherine bulbosa, Erycibe paniculata, Ficus racemosa, Flemingia nana, Helicteres isora, Holarrhena pubescens, Helicteres isora, Lannea coromandelica, Litsea glutinosa, Mesua ferrea, Mimusops elengi, Moringa oleifera, Nyctanthes arbortristis, Phyllanthus emblica, Piper longum, Pterocarpus сумчатый, Pterospermum acerifolium, Punica granatum, Quisqualis indica, Semecarpus anacardium, Smilax zeylanica, Terminalia arjun, Terminalia bellirica, Tinospora cordifolia и Экспериментально доказано, что Vitex negundo подавляет большинство бактерий, вызывающих диарею.

Как меняется бактериальное сообщество в кишечнике младенцев — ScienceDaily

Бактериальное разнообразие нашего стула резко меняется в течение первого года жизни. У новорожденных в кишечнике нет бактерий. Во время рождения младенцы подвергаются воздействию бактерий фекалий своей матери. Только когда дети приблизятся к своему первому дню рождения, их бактериальное разнообразие будет таким же большим, как у взрослых. Состав бактерий может существенно повлиять на их здоровье.

Чтобы глубже понять экосистему кишечника, исследователи из Университета Осло изучают, как меняется бактериальное сообщество в кишечнике младенцев с момента их рождения до первого дня рождения.

«Вообще говоря, кишечная флора имеет профиль детей и взрослых. Основная идея нашей работы — изучить нормальное развитие бактериального разнообразия в кишечнике, и в частности, как изменяется флора кишечника, когда ребенок начинает есть. твердых веществ, принимает лекарства, такие как антибиотики, проходит вакцинацию или путешествует за границу », — говорит исследователь Пол Тросвик из Центра экологического и эволюционного синтеза (CEES) Университета Осло.

Тросвик является частью исследовательского центра, которым руководит профессор Нильс Хр. Stenseth — недавно проанализировал генетический материал чумных бактерий, взятый у нескольких тысяч жертв великих эпидемий чумы от железного века до Черной смерти. Анализ ДНК позволил объяснить эволюцию чумных бактерий и предсказать следующую вспышку чумы.

«На этот раз мы будем использовать анализ ДНК для создания математической модели, предназначенной для более глубокого понимания экологического баланса кишечника», — говорит Postdoc Эрик де Мюнк из CEES.

Ежедневные пробы фекалий

Работа неприятная. Два исследователя ежедневно получают образцы фекалий тринадцати младенцев в течение всего года, от рождения до своего первого дня рождения. Чтобы обеспечить достаточно широкий разброс, они получают образцы от детей, живущих с домашними животными, а также от детей без домашних животных, от пары близнецов, а также от детей, родившихся естественным путем, а также от детей, родившихся с помощью кесарева сечения. Дело в том, что дети, рожденные с помощью кесарева сечения, не подвергаются воздействию тех же бактерий при рождении, что и дети, рожденные естественным путем.

Родителям была поручена незавидная задача — собирать фекалии с подгузников своего ребенка.

Это крупнейшее в своем роде исследование младенческих фекалий; почти в сто раз больше, чем предыдущие исследования. В течение года исследователи ежедневно собирали образцы фекалий. Речь идет о почти 5000 образцах фекалий.

Громоздкий анализ

Образцы фекалий будут пропущены через огромную секвенаторную машину.Исследователи до сих пор упорно работали над разработкой наилучшей возможной процедуры извлечения ДНК из бактерий.

«Сегодня это грязная и сложная процедура. Стандартных способов ее выполнения не существует».

Если бы они использовали оригинальный метод, они бы потратили целый год на секвенирование образцов стула, что слишком долго. Поэтому они разработали новый метод генетического секвенирования, который работает во много раз быстрее. В Университете Мичигана в США они получили образец, содержащий более тридцати различных типов бактерий, и продолжали снова и снова секвенировать этот образец в поисках оптимального метода.

Анализ ДНК дает огромное количество данных. Речь идет о нескольких сотнях гигабайт информации.

Чтобы вычислить связь между всеми различными генами, исследователям необходимо использовать самый быстрый в стране калькулятор — высокопроизводительный компьютерный кластер Abel в Университете Осло, который в десять тысяч раз быстрее, чем ваш средний домашний компьютер.

Глубокое погружение

Исследователи надеются, что они узнают много нового об экологическом балансе кишечника.Они также хотят установить, какие группы бактерий влияют друг на друга. Наше понимание этого пока недостаточно.

«Думайте обо всем бактериальном сообществе как о сети. Некоторые бактерии будут влиять друг на друга положительно, другие — отрицательно. Некоторые бактерии питаются большими молекулами, которые они расщепляют на более мелкие молекулы, которые могут принести пользу другим бактериям. Другими словами, эти бактерии производят пища для других бактерий. Некоторые бактерии важны для сети и влияют на множество различных групп бактерий.Мы называем их фундаментальными бактериями. Можно предположить, что в будущем мы сможем использовать эти фундаментальные бактерии в лечебных целях ». Но Пол Тросвик отмечает, что на данный момент это всего лишь научная фантастика.

История Источник:

Материалы предоставлены Университетом Осло . Оригинал написан Ингве Фогтом. Примечание. Содержимое можно редактировать по стилю и длине.

Скрининг свойств пробиотиков и безопасности Enterococcus faecalis у здоровых китайских младенцев

1.

Gomes BC, Esteves CT, Palazzo ICV, Darini AL, Felis GE, Sechi LA, Franco BD, de Martinis EC (2008) Распространенность и характеристика Enterococcus spp . изолированы от бразильских продуктов. Food Microbiol 25: 668–675. https://doi.org/10.1016/j.fm.2008.03.008

CAS Статья PubMed Google Scholar

2.

Starke IC, Zentek J, Vahjen W. (2015) Эффекты пробиотика Enterococcus faecium NCIMB 10415 на выбранных молочнокислых бактериях и энтеробактериях при совместном культивировании.Benef Microbes 6: 345–352. https://doi.org/10.3920/BM2014.0052

CAS Статья PubMed Google Scholar

3.

Strompfová V, Lauková A, Ouwehand AC (2004) Выбор энтерококков в качестве потенциальных пробиотических добавок для собак. Vet Microbiol 100: 107–114. https://doi.org/10.1016/j.vetmic.2004.02.002

Статья PubMed Google Scholar

4.

Gu R, Yang Z, Li Z, Chen S, Luo Z (2008) Пробиотические свойства молочнокислых бактерий, выделенных из образцов стула долгожителей в регионах Хотан, Синьцзян и Бама, Гуанси, Китай.Анаэроб 14: 313–317. https://doi.org/10.1016/j.anaerobe.2008.06.001

CAS Статья PubMed Google Scholar

5.

Pieniz S, Andreazza R, Anghinoni T, Camargo F, Brandelli A (2014) Пробиотический потенциал, антимикробная и антиоксидантная активность штамма Enterococcus durans LAB18s. Food Control 37: 251–256. https://doi.org/10.1016/j.foodcont.2013.09.055

CAS Статья Google Scholar

6.

Marciňáková M, Klingberg TD, Lauková A, Budde BB (2010) Влияние pH, желчи и кальция на адгезионную способность пробиотических энтерококков животного происхождения к линии эпителиальных клеток тощей кишки свиней IPEC-J2. Анаэроб 16: 120–124. https://doi.org/10.1016/j.anaerobe.2009.05.001

CAS Статья PubMed Google Scholar

7.

Li B, Zhan M, Evivie SE et al (2018) Оценка безопасности потенциального пробиотика Enterococcus durans KLDS6.0930 с использованием полногеномного секвенирования и исследования оральной токсичности. Front Microbiol 9. https://doi.org/10.3389/fmicb.2018.01943

8.

Nami Y, Abdullah N, Haghshenas B, Radiah D, Rosli R, Yari Khosroushahi A (2014) Недавно выделенный пробиотик Enterococcus faecalis из микробиоты влагалища. J Appl Microbiol 117: 498–508. https://doi.org/10.1111/jam.12531

CAS Статья PubMed Google Scholar

9.

Arokiyaraj S, Hairul Islam VI, Bharanidharan R, Raveendar S, Lee J, Kim DH, Oh YK, Kim EK, Kim KH (2014) Антибактериальный, противовоспалительный и пробиотический потенциал Enterococcus hirae , выделенного из рубца Bos primigenius . Всемирный журнал J Microbiol Biotechnol 30: 2111–2118. https://doi.org/10.1007/s11274-014-1625-0

CAS Статья PubMed Google Scholar

10.

Popović N, Djokić J, Brdarić E et al (2019) Влияние убитого теплом Enterococcus faecium BGPAS1-3 на экспрессию белка плотных контактов и иммунную функцию в дифференцированных клетках Caco-2, инфицированных Listeria monocytogenes ATCC 19111.Front Microbiol 10. https://doi.org/10.3389/fmicb.2019.00412

11.

Torres-Henderson C, Summers S, Suchodolski J, Lappin MR (2017) Влияние штамма Enterococcus Faecium SF68 на желудочно-кишечные признаки и фекальный микробиом кошек, которым вводили амоксициллин-клавуланат. Top Companion Anim Med 32: 104–108. https://doi.org/10.1053/j.tcam.2017.11.002

CAS Статья PubMed Google Scholar

12.

Морелли Л., Капурсо Л. (2012) Рекомендации ФАО / ВОЗ по пробиотикам: 10 лет спустя. J Clin Gastroenterol 46: S1 – S2. https://doi.org/10.1097/MCG.0b013e318269fdd5

Статья PubMed Google Scholar

13.

Rathnayake IU, Hargreaves M, Huygens F (2012) Характеристики устойчивости к антибиотикам и вирулентности в клинических и экологических условиях Enterococcus faecalis и Enterococcus faecium . Syst Appl Microbiol 35: 326–333.https://doi.org/10.1016/j.syapm.2012.05.004

CAS Статья PubMed Google Scholar

14.

Кафил Х.С., Мобарез AM (2015) Оценка образования биопленок изолятами энтерококков от инфекций мочевыводящих путей с различными профилями вирулентности. J King Saud Univ Sci 27: 312–317. https://doi.org/10.1016/j.jksus.2014.12.007

Статья Google Scholar

15.

Macovei L, Ghosh A, Thomas VC, Hancock LE, Mahmood S, Zurek L (2009) Enterococcus faecalis с фенотипом желатиназы, регулируемым опероном fsr , и способностью к формированию биопленок широко распространены в сельскохозяйственной среде. Environ Microbiol 11: 1540–1547. https://doi.org/10.1111/j.1462-2920.2009.01881.x

CAS Статья PubMed Google Scholar

16.

Темплер С.П., Ронер П., Баумгартнер А. (2008) Связь изолятов Enterococcus faecalis и Enterococcus faecium из пищевых продуктов и клинических образцов.J Food Prot 71: 2100–2104. https://doi.org/10.1089/cmb.2008.C002

CAS Статья PubMed Google Scholar

17.

Togay SO, Keskin AC, Acik L, Temiz A (2010) Гены вирулентности, устойчивость к антибиотикам и плазмидные профили Enterococcus faecalis и Enterococcus faecium из естественно ферментированных турецких продуктов. J Appl Microbiol 109: 1084–1092. https://doi.org/10.1111/j.1365-2672.2010.04763.x

CAS Статья PubMed Google Scholar

18.

Marinho AR, Martins PD, Ditmer EM, d’Azevedo PA, Frazzon J, van der Sand S, Frazzon AP (2013) Формирование биопленки на полистироле при различных температурах с помощью устойчивости к антибиотикам . Braz J Microbiol 44: 423–426. https://doi.org/10.1590/S1517-83822013005000045

CAS Статья PubMed PubMed Central Google Scholar

19.

Диего М.П., ​​Марта Л., Мария А. и др. (2009) Свойства адгезии штаммов Lactobacillus casei к резецированным фрагментам кишечника и компонентам внеклеточного матрикса. Arch Microbiol 191: 153–161. https://doi.org/10.1007/s00203-008-0436-9

CAS Статья Google Scholar

20.

Zhang F, Jiang M, Wan C, Chen X, Chen X, Tao X, Shah NP, Wei H (2016) Скрининг пробиотических штаммов на безопасность: оценка вирулентности и антимикробной чувствительности энтерококков от здоровых китайских младенцев .J Dairy Sci 99: 4282–4290. https://doi.org/10.3168/jds.2015-10690

CAS Статья PubMed Google Scholar

21.

Bobenchik AM, Hindler JA, Giltner CL, Saeki S, Humphries RM (2014) Показатели Vitek 2 для тестирования чувствительности к антимикробным препаратам Staphylococcus spp. и Enterococcus spp. J Clin Microbiol 52: 392–397. https://doi.org/10.1128/JCM.02432-13

CAS Статья PubMed PubMed Central Google Scholar

22.

Maturana P, Martinez M, Noguera ME et al (2017) Селективность липидов в новых антимикробных пептидах: влияние на антимикробную и гемолитическую активность. Коллоидная поверхность B 153: 152–159. https://doi.org/10.1016/j.colsurfb.2017.02.003

CAS Статья Google Scholar

23.

Видана Р., Рашид М.Ю., Озенци В., Вайнтрауб А., Лунд Б. (2016) Происхождение эндодонтического Enterococcus faecalis , исследованное путем сравнения паттернов факторов вирулентности и устойчивости к антибиотикам с изолятами из образцов кала. посев крови и питание.Int Endod J 49: 343–351. https://doi.org/10.1111/iej.12464

CAS Статья PubMed Google Scholar

24.

Martino GP, Espariz M, Gallina Nizo G, Esteban L, Blancato VS, Magni C (2018) Оценка безопасности и функциональные свойства четырех штаммов энтерококков, выделенных из регионального аргентинского сыра. Int J Food Microbiol 277: 1–9. https://doi.org/10.1016/j.ijfoodmicro.2018.04.012

CAS Статья PubMed Google Scholar

25.

Pieniz S, de Moura TM, Cassenego APV et al (2015) Оценка генов устойчивости и факторов вирулентности в пищевых продуктах, выделенных Enterococcus durans с потенциальным пробиотическим эффектом. Food Control 51: 49–54. https://doi.org/10.1016/j.foodcont.2014.11.012

CAS Статья Google Scholar

26.

Jankowska A, Laubitz D, Antushevich H, Zabielski R, Grzesiuk E (2008) Конкуренция Lactobacillus paracasei с Salmonella enterica для адгезии к клеткам Caco-2.J Biomed Biotechnol 2008: 1–6. https://doi.org/10.1155/2008/357964

CAS Статья Google Scholar

27.

Barbosa J, Gibbs PA, Teixeira P (2010) Факторы вирулентности энтерококков, выделенных из традиционных ферментированных мясных продуктов, производимых на севере Португалии. Food Control 21: 651–656. https://doi.org/10.1016/j.foodcont.2009.10.002

CAS Статья Google Scholar

28.

Sauvage E, Kerff F, Fonzé E, Herman R, Schoot B, Marquette JP, Taburet Y, Prevost D, Dumas J, Leonard G, Stefanic P, Coyette J, Charlier P (2002) Кристаллическая структура 2,4-Å пенициллин-резистентный пенициллин-связывающий белок pbp5fm из Enterococcus faecium в комплексе с бензилпенициллином. Cell Mol Life Sci 59: 1223–1232. https://doi.org/10.1007/s00018-002-8500-0

CAS Статья PubMed Google Scholar

29.

Elhadidy M, Elsayyad A (2013) Незавершенная роль энтерококкового поверхностного белка, Esp и происхождение изолятов в производстве биопленок Enterococcus faecalis , выделенных от мастита крупного рогатого скота. J Microbiol Immunol Infect 46: 80–84. https://doi.org/10.1016/j.jmii.2012.02.002

CAS Статья PubMed Google Scholar

30.

Синько А., Вечорек П., Маевски П. и др. (2015) Сравнение устойчивости к антибиотикам и вирулентности между производящими биопленку и непродуцирующими клиническими изолятами Enterococcus faecium .Acta Biochim Pol 62: 859–866. https://doi.org/10.18388/abp.2015_1147

CAS Статья PubMed Google Scholar

31.

Garg S, Mohan B, Taneja N (2017) Способность штаммов энтерококков к образованию биопленок, вызывающих инфекцию мочевыводящих путей, по сравнению с колонизацией и корреляцией с геном энтерококкового поверхностного белка. Индийский журнал J Med Microbiol 35: 48–52. https://doi.org/10.4103/ijmm.IJMM_16_102

Статья PubMed Google Scholar

32.

Franz CMAP, Huch M, Abriouel H, Holzapfel W, Gálvez A (2011) Энтерококки как пробиотики и их значение для безопасности пищевых продуктов. Int J Food Microbiol 151: 125–140. https://doi.org/10.1016/j.ijfoodmicro.2011.08.014

CAS Статья PubMed Google Scholar

33.

Vankerckhoven V, Van Autgaerden T, Vael C et al (2004) Разработка мультиплексной ПЦР для обнаружения генов asa1 , gelE , cylA , esp и hyl в энтерококках и исследование детерминант вирулентности среди европейских больничных изолятов Enterococcus faecium .J Clin Microbiol 42: 4473–4479. https://doi.org/10.1128/JCM.42.10.4473-4479.2004

CAS Статья PubMed PubMed Central Google Scholar

34.

Мишра А.К., Гош А.Р. (2018) Характеристика функциональных, безопасных и пробиотических свойств Enterococcus faecalis AG5, выделенного из крысы Вистар, демонстрируя прилипание к клеткам HCT116 и выживаемость желудочно-кишечного тракта. 10: 435–445. https://doi.org/10.1007/s12602-018-9387-x

35.

Peleg AY, Jara S, Monga D, Eliopoulos GM, Moellering RC, Mylonakis E (2009) Galleria mellonella в качестве модельной системы для изучения патогенеза и терапии Acinetobacter baumannii .