Как хранить стекла с гистологией дома: Хранение и перевозка биоптата| Блог UNIM

Хранение и перевозка биоптата| Блог UNIM

Проведение любого морфологического исследования требует наличия гистологического материала пациента. Биопсийный материал для гистологического исследования получают из патологически измененного очага: из его центральной зоны и зоны, граничащей с неизмененными тканями. Важным условием получения качественного биоптата является применение методов, сохраняющих границы среза в неизменном виде. Для этого подходят методы классической хирургии, использование электрических или радиоволновых методов может привести к ухудшению качества образца.

Затем образцы ткани незамедлительно помещают в специальную фиксирующую жидкость. Это необходимо для сохранности материала до гистологического исследования. Время с момента получения материала до его консервации не должно составлять более 2 часов. Фиксирующей жидкостью для хранения и транспортировки материала для гистологического исследования является 10% формалин, в соотношении материал:жидкость не менее чем 1:10. Емкость должна быть плотно закрыта для предотвращения испарения формалина и высыхания биоматериала. Затем материал необходимо сохранять при температуре +4..+6 °C до доставки в патоморфологическую лабораторию.

Изготовление гистологических стекол и блоков из биоптата

На этапе изготовления блоков и стекол материал попадает в патоморфологическую лабораторию, где его специальным образом подготавливают и обрабатывают, получая гистологические стекла и блоки. Эта подготовка включает в себя несколько этапов:

— Первичная визуальная оценка врачом-патологом биопсийного материала, вырезка отдельных участков для проведения исследования

— Проводка материала (процесс специальной подготовки биопсийного материала, в результате которого получается гистологический (парафиновый) блок)

— Микротомирование (процесс обработки блока на микротоме и нарезки из него пластин биопсийного материала толщиной около 1 микрона)

— Окраска гистологических препаратов в процессоре (иммуногистостейнере) с получением еще одной формы материала – гистологических стекол

— Микроскопия (изучение гистологических препаратов под электронным микроскопом)

Как хранятся гистологические стекла и блоки

После проведения морфологического исследования гистологические материалы не выбрасывают. Они поступают на хранение в архив онкологического диспансера. Блоки, на основании которых был поставлен онкологический диагноз, хранятся пожизненно (ранее, взятые до 1999 г. и при СССР блоки хранились 25 лет). Блоки, на основании которых был поставлен доброкачественный диагноз, хранятся в течение 5 лет. Они хранятся при температуре от +10 до +25°C вне холодильника в сухом помещении, в тёмном месте (коробке, футляре). Стёкла в лабораториях сохраняются лишь при наличии онкологической патологии.

Сохранение гистологических материалов необходимо для того, чтобы у врачей  пациента была возможность по прошествии времени удостовериться в диагнозе, отправить материалы на пересмотр в другую патоморфологическую лабораторию. При необходимости пересмотра курьер транспортирует гистологические материалы в специальных футлярах в сумке-холодильнике, чтобы обеспечить сохранность материала для исследования. Доставка гистологических материалов и заключений при любом морфологическом исследовании или пересмотре гистологии в ЮНИМ проводится бесплатно.

Пересмотр гистологических стекол

Гистологическое исследование – самый точный метод диагностики рака и ряда других заболеваний. Если во время изучения ткани патологического образования под микроскопом обнаружены злокачественные клетки, то диагноз не вызывает сомнений. Тем не менее, даже тут возможны ошибки и неточности. Это приводит к тому, что назначенное лечение работает недостаточно хорошо или вовсе неэффективно, ухудшается прогноз для пациента.

Избежать ошибок и уточнить диагноз помогает такая услуга, как пересмотр гистологических стекол. Для этого не нужно проводить повторную биопсию – снова получать образец патологически измененной ткани. Можно использовать гистопрепараты, которые уже были приготовлены ранее и хранятся в лаборатории.

В Международной клинике Медика24 пересмотр гистологических стекол и блоков проводят ведущие патоморфологи с применением новейшего оборудования. Это позволяет провести максимально точную диагностику и выбрать оптимальную схему лечения.

В каких случаях требуется пересмотр гистопрепаратов?

Даже если диагноз не вызывает сомнений, повторная патоморфологическая верификация зачастую не будет лишней. Пересмотр гистопрепаратов не нужен, если исследование было проведено в крупной современной лаборатории, где применяется новейшее оборудование, работают опытные специалисты, и в заключении указаны все необходимые данные в соответствии с актуальными стандартами диагностики онкологических заболеваний. Во всех остальных случаях результат не помешает перепроверить. Такое решение нужно принимать индивидуально вместе с лечащим врачом.

Вы можете обратиться за консультацией к одному из ведущих онкологов в Международной клинике Медика24. Врач изучит результаты обследования, оценит вашу ситуацию и расскажет, какие дополнительные методы диагностики требуются в вашем случае, нужно ли пересмотреть гистопрепараты. Наши доктора действуют исключительно в интересах пациентов и назначают исследования строго по показаниям, только те, которые на самом деле необходимы в конкретном случае.

Почему результаты гистологического исследования бывают ошибочными?

Патоморфологические исследования – очень трудоемкий и сложный процесс. Здесь важна каждая мелочь. Стоит упустить небольшой нюанс – и диагноз окажется недостаточно точным, что приведет к снижению эффективности лечения.

Основные причины неточностей и ошибок во время патоморфологических исследований:

• Нарушение правил забора материала во время биопсии. Врач может получить ткань не из того места, или опухолевых клеток в образце может оказаться очень мало, чтобы сделать правильные выводы.
• Нарушение правил транспортировки материала из клиники в лабораторию.
• Нарушение правил подготовки гистологических препаратов в лаборатории.
• Неправильная фиксация и окрашивание материала.
• Недостаточный опыт, уровень квалификации сотрудника лаборатории, который проводит исследование.

Как видно, в зависимости от причин, в одних случаях можно использовать материал, который уже был получен ранее и хранится в лаборатории, а в других случаях биопсию приходится проводить повторно – например, потому что в первый раз врач неправильно осуществил забор образца ткани, или материал был поврежден во время транспортировки. Врачи в Международной клинике Медика24 разберутся в вашей ситуации и найдут правильное решение. Если потребуется повторная биопсия – ее можно провести в нашей клинике. Благодаря высокой квалификации наших докторов и применению современного оборудования, ошибки во время забора материала практически исключены.

Что оценивают во время пересмотра гистологических стекол?

Во время гистологического исследования специалист может оценить следующие показатели:

• Внешний вид клеток. Это помогает разобраться, являются ли они атипичными, злокачественными, отнести их к определенному гистологическому типу и подтипу (всего существует более 500 подтипов злокачественных опухолей).
• Глубина инвазии – насколько злокачественные клетки вторглись в окружающие ткани.
• Край резекции – оценивается после хирургического удаления злокачественных опухолей. Если рядом с линией разреза обнаруживаются опухолевые клетки (позитивный край резекции), то это означает, что они могли остаться и в организме пациента, и это грозит рецидивом. Если раковых клеток возле края разреза нет (негативный край резекции), значит, злокачественная опухоль, скорее всего, была удалена полностью.
• Степень злокачественности показывает агрессивность злокачественной опухоли, это влияет на то, как быстро будет прогрессировать онкологическое заболевание, насколько оно склонно к рецидивированию.
• Опухолевые очаги в лимфатических узлах и различных органах (отдаленные метастазы) помогаю уточнить стадию заболевания.

При необходимости могут быть выполнены дополнительные исследования, которые помогут уточнить подтип злокачественной опухоли, ее чувствительность к различным противоопухолевым препаратам:

• Иммуногистохимический анализ (иммуногистохимия) – обнаружение определенных белков при помощи меченых антител.
• Полимеразная цепная реакция – генетическое исследование, во время которого многократно копируют определенный участок ДНК, после чего его можно изучить.
• Флуоресцентная гибридизация in situ (FISH) – метод выявления «неправильных» генов с помощью ДНК-зондов.
• Секвенирование нового поколения (NGS) – наиболее инновационная методика генетического тестирования, которая позволяет «прочитать» генетический код и выявить наиболее распространенные мутации, связанные с онкологическими заболеваниями. Ее применяют у пациентов, у которых перестали работать все противоопухолевые препараты из стандартных протоколов лечения. NGS помогает подобрать персонализированную терапию, которая будет эффективна у конкретного пациента, с учетом молекулярно-генетического профиля злокачественной опухоли.

При некоторых онкологических заболеваниях методы молекулярно-генетической диагностики необходимы всегда, без них невозможно подобрать оптимальное лечение. Например, злокачественные опухоли молочной железы всегда нужно проверять на наличие рецепторов к женским половым гормонам, белка-рецептора HER2. В Международной клинике Медика24 доступны все эти виды диагностики.

Какой материал можно отправить на пересмотр?

Чтобы образец ткани можно было изучать под микроскопом, его нужно соответствующим образом подготовить. Сначала материал заливают специальным фиксирующим раствором, чтобы предотвратить разрушение клеток ферментами. Затем его помещают в парафин, чтобы придать плотность – получаются парафиновые блоки. На пересмотр можно отправить такой целый блок – дальнейшие этапы подготовки будут проведены уже на месте.

Парафиновые блоки нужно нарезать на очень тонкие слои – менее 8 микрометров. Это делают с помощью инструмента, который называется микротомом. После окраски препараты помещают на стекла, и их можно изучать под микроскопом. Готовые гистологические стекла, которые хранятся в лаборатории, тоже можно отправить на пересмотр.

Иногда для исследования получают образцы, в которых содержатся только отдельные клетки, например, мокроту, выделяющуюся во время кашля, жидкость, которая находится в брюшной, плевральной полости. Если биопсию проводят с помощью тонкой иглы (тонкоигольная биопсия), то полноценный образец ткани получить тоже не удается. В таких случаях выполняют цитологическое исследование. И его результаты тоже могут быть пересмотрены.

Чем это поможет пациенту?

Результаты пересмотра гистопрепаратов помогают:

• уточнить диагноз и стадию опухоли;
• подобрать оптимальное лечение;
• правильно оценить прогноз и улучшить его;
• сохранить время, которое могло бы быть потеряно на неэффективное лечение – в такой сфере медицины, как онкология, это особенно важно.

Как получить гистопрепараты из лаборатории и воспользоваться услугой их пересмотра?

В соответствии с п.30 Приказа №179н от 24.03.2016 г. Минздрава России, все образцы тканей при опухолевых и опухолеподобных процессах должны храниться в патолого-анатомическом отделении в 10% растворе формалина не менее одного года с момента оформления протокола исследования. Парафиновые блоки и гистологические стекла хранятся в течение нескольких лет – в зависимости от того, как долго хранится медицинская документация пациента.

Гистологические стекла, блоки, направления и протоколы, в соответствии с п.31 того же закона, могут быть выданы на руки пациенту или его законным представителям – в том числе для пересмотра и дополнительных исследований в других медицинских учреждениях.

Чтобы получить на руки гистопрепараты, нужно обратиться в медучреждение, где проводилось исследование, и написать заявление.

Преимущества пересмотра гистологических стекол и блоков в Международной клинике Медика24

• Исследование материала выполняют специалисты экспертного уровня, в лаборатории, оснащенной новейшим оборудованием.
• Доступны все виды молекулярно-генетической диагностики, которые помогают уточнить диагноз и подобрать оптимальное лечение.
• Генетические анализы методом секвенирования нового поколения (NGS) и подбор персонализированной терапии.
• По результатам пересмотра можно получить консультацию у одного из наших ведущих онкологов.
• После уточнения патоморфологического диагноза можно сразу приступить к дальнейшему обследованию и лечению в нашей клинике. Мы работаем в соответствии с современными международными протоколами, применяем противоопухолевые препараты новейших поколений.
• Всегда действуем в интересах пациента.

Хранение и транспортировка слайдов/блоков — расходные материалы для гистологии

Toggle Nav

Поиск

Поиск

Посмотреть как Сетка Список

Позиции 1-15 из 30

Страница

• Вы сейчас читаете страницу 1
• Страница 2
• Страница Следующий

Показать

9 15 30 Все

на страницу

Сортировать по Должность наименование товара Номер предмета Цена Цвет Рекомендуемый продукт Горячий продукт Бестселлер Заказать Установить нисходящее направление

Посмотреть как Сетка Список

Позиции 1-15 из 30

Страница

• Вы сейчас читаете страницу 1
• Страница 2
• Страница Следующий

Показать

9 15 30 Все

на страницу

Сортировать по Должность наименование товара Номер предмета Цена Цвет Рекомендуемый продукт Горячий продукт Бестселлер Заказать Установить нисходящее направление

Подготовка предметного стекла для гистологии: 5 простых шагов

Если вы участвуете в биологических исследованиях, есть вероятность, что на каком-то этапе вы отправили образцы тканей в гистологическую лабораторию. Каким-то волшебным образом они создали для вас прекрасные слайды, каждый из которых содержал тонкие срезы ваших образцов, готовые для микроскопической оценки.

Задумывались ли вы когда-нибудь, как лаборант-гистолог готовит препарат для гистологического исследования? Читайте о пяти важных этапах производства гистологических препаратов.

Пять этапов подготовки гистологического препарата

1. Фиксация ткани

Подготовка препарата начинается с фиксации образца ткани. Это важный шаг в подготовке тканей, и его целью является предотвращение аутолиза и гниения тканей. Для достижения наилучших результатов образцы вашей биологической ткани следует сразу же после сбора перенести в фиксатор.

Хотя существует множество типов фиксаторов, большинство образцов фиксируется в 10% нейтральном забуференном формалине. Оптимальное соотношение формалина к объему образца должно быть не менее 10:1 (например, 10 мл формалина на 1 см ³ ткани). Это позволит большинству тканей адекватно зафиксироваться в течение 24-48 часов. Контейнеры с формалином должны быть герметично закрыты крышками и должным образом маркированы.

2. Перенос образцов в кассеты

После фиксации образцы обрезаются с помощью скальпеля, чтобы их можно было поместить в кассету с соответствующей маркировкой. Образцы не должны быть настолько большими, чтобы заполнить кассету – они обрезаются, чтобы не касаться краев. Кроме того, они не должны быть слишком толстыми (в идеале они должны быть менее 4 мм), иначе они рискуют «расколоться» при закрытии крышки кассеты. Заполненные кассеты с тканями затем хранят в формалине до начала обработки.

3. Обработка тканей

Преобразование тканей в тонкие микроскопические срезы обычно выполняется с использованием парафинового блока следующим образом:

1. Дегидратация , которая включает погружение образца в спирт возрастающей концентрации для удаления воды и формалина из салфетка.
2. Очистка , в которой органический растворитель, такой как ксилол, используется для удаления спирта и обеспечения возможности пропитки парафином.
3. Встраивание , где образцы пропитаны заливочным веществом – обычно парафином. Ткань окружается большим блоком расплавленного парафина, создавая то, что теперь называют «блоком». Когда блок затвердевает, он образует опорную матрицу, позволяющую делать очень тонкие срезы.

4. Создание срезов

Теперь образец ткани можно разрезать на срезы, которые можно поместить на предметное стекло.

1. Воск удаляется с поверхности блока, чтобы обнажить ткань.
2. Перед нарезкой блоки охлаждают на охлаждаемой тарелке или в лотке для льда в течение 10 минут.
3. Микротом используется для срезания очень тонких срезов ткани с блока в форме ленты.

Микротом может быть предварительно настроен на срез различной толщины, но большинство тканей разрезается примерно на 5 мкм. Вы можете узнать больше о способах нарезки срезов ткани здесь.

После разрезания полоски ткани осторожно помещают в ванну с теплой водой. Здесь им позволяют плавать на поверхности, а затем их можно зачерпнуть на горку, помещенную под уровень воды. Лучше всего для этого процесса подходят заряженные предметные стекла — они улучшают прилипание ткани к стеклу и помогают снизить вероятность смыва срезов с предметного стекла во время окрашивания.

Предметные стекла должны быть четко помечены, а затем высушены в вертикальном положении при 37 ^o C в течение нескольких часов, чтобы осторожно расплавить избыток парафина, оставив срез ткани нетронутым.

5. Окрашивание

Большинство клеток прозрачны и кажутся почти бесцветными без окрашивания. Поэтому гистохимические красители (обычно гематоксилином и эозином) используются для обеспечения контраста срезов тканей, что делает структуры тканей более видимыми и более легкими для оценки. После окрашивания на образец ткани на предметном стекле наклеивается покровное стекло с помощью клея для оптики, чтобы защитить образец.

Завершение подготовки гистологических препаратов

Итак, как видите, подготовка гистологических препаратов — это непростое дело — это довольно сложное произведение искусства! Хотя вы, возможно, захотите узнать, как это сделать, чтобы сократить расходы на лабораторию, я бы посоветовал вам дважды подумать об этом и вместо этого отправить образцы в гистологическую лабораторию для этой цели, особенно если оценка ткани является важной частью. вашего исследования. Вы сэкономите много времени и сил, доверив эту работу опытному специалисту по гистологии, и ваши слайды будет намного легче оценивать.

Хотя гистология отлично подходит для визуализации целых тканей с более низким разрешением, она имеет ограничения, если вы хотите исследовать субклеточные структуры, например, при изучении изменений в опухолях головного мозга. В этом случае требуется более детальный и мощный метод, такой как электронная микроскопия рака мозга.

Если гистология имеет достаточное разрешение для ваших нужд, вы предпочитаете делать свои собственные слайды или отправлять ткани в гистологическую лабораторию для обработки? Оставьте комментарий ниже.

Хотите узнать больше о гистологии? Посетите Bitesize Bio Histology Hub, чтобы получить советы и рекомендации по проведению всех ваших гистологических экспериментов.

Дополнительная литература

Если эта статья оказалась вам полезной, вы можете ознакомиться с некоторыми из наших статей по теме ниже:

• Введение в фиксацию для гистологии: подумайте, прежде чем фиксировать!
• Обработка тканей для гистологии: что именно происходит?
• Специальные красители для гистологии: введение и общий обзор
• Гистологические красители от А до Я

Первоначально опубликовано 4 апреля 2012 г.