Полиоксидоний или бронхомунал что лучше: Бронхо-Мунал или Полиоксидоний! Отличия состава

01.01.197230.09.2022 alexxlab 0 Комментариев

Содержание

Что эффективнее Бронхомунал или Полиоксидоний?

Иммунная система – мощный инструмент, который природа подарила человеку для защиты организма от болезней и нейтрализации вредоносных бактерий. К сожалению, в настоящее время состояние иммунитета у большей части населения оставляет желать лучшего.

Причины ослабления иммунной защиты могут быть различными. Неблагоприятная экологическая обстановка, тяжелые и вредные условия труда, неразумное отношение к своему здоровью и многое другое.

Если человек «подхватывает» ОРВИ, бронхит, простуду минимум 4-5 раз в году, это означает, что ослабленный иммунитет не в состоянии дать достойный отпор атакам болезнетворных вирусов и бактерий.

В таких ситуациях врачи прописывают фармацевтические средства, направленные на поддержку и укрепление защитных сил организма – иммуностимуляторы. К их числу относятся «Бронхомунал» и «Полиоксидоний».

«Бронхомунал»: характеристика препарата

«Бронхомунал» — иммуностимулирующее лекарственное средство микробного происхождения.

Его действие направлено на активизацию местного иммунитета и повышение сопротивляемости организма к вирусным и бактериальным инфекциям.

Отмечается высокая эффективность медикамента в повышении защитных сил организма против инфекционных патологий дыхательных путей.

Обладает корригирующим воздействием на показатели иммунитета. Во время лечения отмечается снижение завышенных и, соответственно, повышение заниженных показателей. Иными словами, происходит нормализация иммунного статуса.

Благодаря корригирующим свойствам препарат широко применяется при терапии бронхиальной астмы, а также тех болезнях, в период которых наблюдается большое увеличение числа клеток, участвующих в иммунной активности.

Под воздействием медикамента происходит усиление выработки новых Т-лимфоцитов, а также макрофагов – «клеток-воинов», захватывающих и уничтожающих чужеродные микроорганизмы.

Кроме того, начинают активно вырабатываться вещества, препятствующие возникновению воспалительных реакций. Растет защитная сила организма против вредоносных атак бактериальных и вирусных агентов.

Клинически доказано, что лечение препаратом сокращает частоту возникновения острых инфекций дыхательного тракта, уменьшает их продолжительность. Вследствие этого потребность приема иных медикаментов, особенно антибиотических средств, значительно снижается.

Состав и форма выпуска

Основной действующий компонент «Бронхомунала» — бактериальные лизаты (смесь обезвреженных патогенных бактерий).

В данную смесь входят фрагменты клеточных стенок 8-и видов микробов:

Стрептококк вириданс.
Пневмококк.
Гемофилюс инфлюэнца.
Моракселла катарлис.
Клебсиелла пневмонии.
Золотистый стафилококк.
Пиогенный стрептококк.

Золотистый стафилококк.

Структурообразующими компонентами выступают: глютаминат натрия, желатин, пропилгаллат, крахмал, титана диоксид и др. «Бронхомунал» имеет только одну форму выпуска – желатиновые капсулы.

В каждой капсуле содержится 7 мг бактериального лизата. Для детского приема существует «Бронхомунал П». Доза активного вещества в нем составляет 3,5 мг на капсулу. Производится в Словении, фармацевтической компанией «LEK».

Показания и противопоказания

Показаниями к применению иммуностимулятора являются:

ЛОР-инфекции острого и хронического типа (синусит, ларингит, ринит, сфеноидит).
Инфекционно-воспалительные патологии органов дыхательного тракта (пневмония, бронхит, трахеобронхит, трахеит).

Также используют как профилактическое средство для укрепления иммунитета, предотвращения рецидивов и обострений хронических заболеваний, проявляющихся поражением органов дыхания.

В случае терапии заболевания острой формы и при обострении хронических патологий «Бронхомунал» принимают в течение 10-и дней.

Для профилактического лечения курс приема также 10 дней. После этого делают перерыв на 20 дней. Затем курс повторяют.

Противопоказаниями являются:

Аллергия на компоненты.
Период ГВ.
Беременность.
Возраст до 6-и мес. (капсулы 3,5 мг).
Возраст до 12-и лет (капсулы 7 мг).

Побочные действия встречаются нечасто. В некоторых случаях отмечается тошнота, диарея, боль в эпигастрии, слабость, аллергические явления.

«Полиоксидоний»: характеристика препарата

«Полиоксидоний» — высокомолекулярный иммуностимулятор, обладающий широким спектром действия. Повышает сопротивляемость организма к генерализованным, локальным инфекциям, различным грибковым заболеваниям.

Входит в группу лекарств с иммунокорригирующими и дезинтоксикационными свойствами. Это позволяет использовать его не только для стимуляции работы иммунитета, но и для выведения из организма различных токсинов, устранения симптомов интоксикации.

Иммуномодулирующее действие заключается в прямом воздействии на фагоциты путем их стимуляции. Фагоциты становятся более активными и начинают интенсивно поглощать патогенные бактерии, частицы распавшихся тканей, грибы.

В результате этого риск заражения инфекционным заболеванием значительно снижается, чужеродные микроорганизмы быстрее выводятся. Если же инфекция уже развилась, то процесс выздоровления заметно ускоряется.

Помимо этого, медикамент обладает антиоксидантным и противовоспалительным

действием. За счет этого осуществляется блокировка свободных радикалов и снижение их вредного воздействия, а также усиливается выработка противовоспалительных медиаторов, тормозящих развитие воспалительного процесса.

Использование препарата при возникших вторичных иммунодефицитах улучшает эффективность терапии, сокращает сроки лечения. При этом уменьшается потребность в использовании таких медикаментозных средств, как антибиотики, бронхолитики, глюкокортикоиды.

Состав и форма выпуска

Главным действующим веществом препарата является азоксимера бромид. «Полиоксидоний» представлен тремя лекарственными формами:

Таблетки. В каждой пилюле содержится 12 мг активного компонента.
Суппозитории ректально-вагинальные (по 6мг и 12 мг).
Порошок лиофилизированный для приготовления раствора для местного применения и инъекций (по 3мг и 6 мг).

Дополнительные компоненты представлены маннитолом, маслом какао, повидоном, крахмалом картофельным, моногидратом лактозы, кислотой стеариновой и др.

Выпуск медикамента осуществляется в России. Производитель: НПО «Петровакс фарм».

Показания и противопоказания

Показаниями к назначению служат:

Острые инфекции, спровоцированные грибками, бактериями, вирусами.
Туберкулез разной формы.
Хирургические инфекции (в составе комплексного лечения).
Урогенитальные патологии (пиелонефрит, уретрит, простатит, кольпит и др.).
Аутоиммунные заболевания.(целиакия, эндометриоз, узелковая эритема и др.)
Хронические инфекции органов дыхания с частыми рецидивами.
ЛОР-патологии вирусной или бактериальной этиологии
Реабилитация детей группы ЧБ (часто болеющие).
Лучевая и химиотерапия опухолей (как часть комплексного лечения).

Трофические язвы, ожоги, переломы (для стимуляции процессов регенерации).

Также препарат демонстрирует высокую эффективность как лечебное и профилактическое средство сезонных болезней вирусной или бактериальной природы (ОРВИ, грипп).

Длительность лечения и дозировка рассчитываются врачом исходя из симптомов конкретного заболевания и состояния пациента.

Противопоказания к применению. Для таблеток:

Аллергия на составляющие компоненты.
Беременность.
Этап ГВ.
Непереносимость лактозы.
Почечная недостаточность (острая форма).
Возраст менее 3-х лет (для дозировки 12 мг)
Возраст менее 6-и мес. (для 6 мг).

Для суппозиториев и лиофилизата:

ОПН.
Беременность.
Грудное вскармливание.
Индивидуальная непереносимость.

Возраст до 6-и лет (для ректальных свечей 6 мг).
Возраст менее 18-и лет (для свечей по 12 мг).

Больным с ХПН применять все формы медсредства нужно с осторожностью, не более 2-х раз в 7 дней.

Побочных действий, по заявлению производителей, медсредство не имеет. Изредка встречались реакции на парентеральное введение. Отмечалось повышение температуры, озноб, болезненность в месте укола.

Чем похожи препараты

Оба рассматриваемых лекарственных средства относятся к классу иммуностимуляторов.
Их общая цель – укрепление иммунной системы человека, а также терапия и профилактика инфекционных заболеваний.
Обладают высокой эффективностью в борьбе с поражениями органов дыхательного тракта, вызванными вторжением инфекционных микроорганизмов.
Совпадают многие пункты в перечне противопоказаний.
Не рекомендованы к приему беременным и кормящим женщинам.
Хорошо сочетаются с любыми другими лекарствами, включая антибиотики.
В аптеке отпускаются без рецепта, за исключением инъекционных форм «Полиоксидония».

В чем отличия

К параметрам, по которым средства отличаются друг от друга относятся:

Разная структура активных компонентов. «Бронхомунал» имеет в основе фрагменты клеток бактерий, «Полиоксидоний» — бромид азоксимера (синтетическое вещество).
Спектр воздействия. Первое средство, в основном, применяется при болезнях верхних и нижних путей. Второе – при воспалительных патологиях многих органов, включая кожу и суставы.
Страны-производители. «Бронхомунал» — Словения, «Полиоксидоний» — Россия.
Формы выпуска. Российское фармсредство представлено многообразным форматом. Оно более удобно в применении.
Побочные действия. У словенского лекарства они присутствуют. Российский же медикамент, как заявлено в инструкции, побочных эффектов вообще не имеет. Отмечаются лишь реакции на уколы.
Цена. Отечественный фармпрепарат дороже импортного примерно на 30-40%.

Что лучше выбрать

Эффективность в терапии и профилактике болезней дыхательных путей инфекционного происхождения демонстрируют оба препарата. В таких ситуациях пациент может выбрать любой из них.

Людям, имеющим заболевания ЖКТ, лучше остановить выбор на лекарстве российского производства, так как побочные эффекты «Бронхомунала» проявляются негативными реакциями именно со стороны органов ЖКТ (диарея, рвота и т.п.).

Пациентам с патологиями почек выбирать «Полиоксидоний» крайне нежелательно, потому что его выведение происходит именно через почки, что может спровоцировать ухудшение состояния.

Также нужно обращать внимание на дополнительные компоненты препаратов. Так, например, пациентам с непереносимостью лактозы не следует выбирать таблетки «Полиоксидоний», из-за присутствия в них этого компонента.

Российский фармпрепарат более предпочтителен в запущенных случаях заболевания, а также при отсутствии должного эффекта от аналогичных лекарств. Он считается сильнодействующим препаратом.

В каждой конкретной ситуации назначение иммуномодуляторов должен осуществлять врач. Это особенно актуально, если речь идет о лечении ребенка. Бесконтрольное применение препаратов, влияющих на иммунную систему может обернуться тяжелыми последствиями.

Медицина и здоровьеКомментировать

Чем нас лечат: Бронхо-Мунал. Вакцина в капсуле

Чем капсулы напоминают вакцину, чем вакцина отличается от сыворотки, зачем в кишечнике нужны пейеровы бляшки, что такое лизаты (и почему «ТрансАвтоЛиз» — это смешно), а также поможет ли Бронхо-Мунал от бактериальных инфекций и ОРВИ, читайте на Indicator.Ru.

Мы долго не хотели брать в рубрику «Чем нас лечат» Бронхо-Мунал, ведь названием он похож на еще одно средство из муколитической плеяды (где мы уже разбирали Мукалтин, Бромгексин и амброксол) и работает на тех же действующих веществах. В общем, скучно, господа! Оказалось, что этот препарат на самом деле содержит лизаты бактерий, которые должны приучить иммунную систему давать отпор врагам — а это совсем другое дело! Давайте же рассмотрим его.

Из чего же, из чего

Для начала развеем ореол таинственности вокруг словосочетания «лизаты бактерий». Разумеется, чтобы создать их, не нужно ничего лизать. Слово происходит от греческого корня λύσις, связанного с разрушением или разделением. «Лиз» часто используется в биологии в этом смысле — вспомнить хотя бы органоиды лизосомы, наполненные ферментами и готовые переварить и разложить все что плохо лежит. Есть и тип клеточной гибели под названием автолиз, при котором ставшие ненужными клетки разрушаются, а их «кусочки» мирно скармливаются окружающим клеткам (поэтому каждый раз, читая надписи «ТрансАвтоЛиз» по дороге на биофак, плачет половина маршрутки). Лизис клетки можно провести, добавив ферменты, которые могут проткнуть или разорвать ее мембрану. Часть вирусов-бактериофагов тоже так делают, за что их жизненный цикл называют лизогенным, то есть вызывающим лизис. Некоторые антибиотики и антисептики тоже поступают с бактериями так. Подытожим: лизаты бактерий — продукты, которые мы получаем после лизиса: куски клеточной оболочки, обрывки ДНК, РНК, белков и другие клеточные «запчасти».

Препарат Бронхо-Мунал содержит фрагменты оболочек бактерий Haemophilus influenzae B, Klebsiella ozenae, Klebsiella pneumoniae, Moraxella сatarrhalis, Staphylococcus aureus, Streptococcus pneumoniae, Streptococcus pyogenes, Streptococcus gr. viridans. На основе тех же бактериальных лизатов производят препараты для внутреннего применения Бронхо-Ваксом и OM-85, а также лекарства для местного применения — спрей ИРС-19 и Имудон.

Зачем принимать этот строительный биомусор? Все просто: чтобы научиться распознавать бактерию, иммунной системе человека не обязательно встретить этот микроорганизм собственной персоной. Все равно ни один отдельный молекулярный «датчик» наших лимфоцитов не охватит бактерию целиком. «Кирпичиков» их клеточной стенки, которые можно ассоциировать с грядущей опасностью, вполне достаточно. Так работают и вакцины: сегодня во многих случаях не используются целые бактериальные клетки или вирусные частицы, даже ослабленные. Все те же обрывки и кусочки хорошо обучат иммунитет распознавать врага.

Вы можете научиться разбираться в лекарствах самостоятельно на авторском онлайн-курсе «Чем нас лечат» от редактора Indicator.Ru Екатерины Мищенко: https://clck.ru/Pnmtk

Пить или колоться

В чем может быть подвох? Как мы знаем, все, что мы едим, разбирается на «кирпичики» в пищеварительном тракте, чтобы клетки организма могли использовать это как топливо или запчасти. Поэтому лизаты, если их пить, в кровь и лимфу в сколько-нибудь значимых количествах не попадут. Другое дело — инъекции, при которых содержимое шприца минует чаша сия. Но, может быть, клетки иммунной системы успеют чему-то научиться, пока лизаты передвигаются по пищеварительному тракту?

В тонкой кишке, к примеру, есть пейеровы бляшки, где обитают антигенпрезентирующие клетки, которые могут взять образцы бактериальных «кусочков» и показать их клеткам иммунитета B-лимфоцитам (подробнее о ролях разных иммунных клеток мы рассказывали в статье про АСИТ, где есть целая диаграмма аллергии с елочными шариками).

Именно пейеровы бляшки помогают следить за микроорганизмами в нашем кишечнике. Другое дело, что по пути до кишечника лизаты бактерий должны пройти через раствор соляной кислоты в желудке и подвергаться нападению ферментов, расщепляющих молекулы на еще более маленькие кусочки. Не совсем понятно, насколько узнаваемыми остаются фрагменты микроорганизмов после таких испытаний. Спасать их от этих невзгод должна капсула, которая растворится только в кишечнике.

Сомнительна и рекомендация некоторых врачей использовать препарат против острых респираторных инфекций, ведь они более чем в 90% случаев вызываются вирусами и лишь иногда сопровождаются бактериальными осложнениями (по этой же причине в корне неверно принимать антибиотики при простуде, пока вмешательство бактерий не доказано).

Еще один спорный момент: препарат назначают не только для профилактики, но и для комплексной терапии инфекций. Но когда человек уже заражен, странно скармливать ему лизаты бактерий, ведь образцов для распознавания у иммунитета уже предостаточно. Те же вакцины не колют, если пациент уже заболел. Вместо них могут использовать сыворотки, содержащие не кусочки возбудителя инфекции, а готовые антитела, которые помогут в борьбе с тяжелым заболеванием, когда собственный иммунитет не справляется с объемами работы или не успевает к дедлайнам (особенно если первая половина слова понимается в буквальном значении).

В списках (не) значился

Помогают ли ответить на эти вопросы результаты экспериментов? Сама инструкция по применению Бронхо-Мунала, где механизм действия объясняется через пейеровы бляшки, опубликована на сайте Государственного регистра лекарственных средств, и регистрация у препарата в нашей стране есть, его клинические испытания в этом регистре отсутствуют.

Тем не менее, научные публикации о Бронхо-Мунале на русском нетрудно отыскать в открытых источниках. Так, обзор в журнале «Практическая пульмонология» (с более чем скромным импакт-фактором 0,758) открывает нам подробности механизма действия чудо-лекарства. Посреди обзора, как это часто бывает в наших медицинских журналах, красуется реклама Бронхо-Мунала, занимающая целую страницу.

Импакт-фактор — показатель, отражающий частоту цитирования статей научного журнала за определенный период (как правило, два года). Например, для одного из самых крупных медицинских журналов The Lancet импакт-фактор составляет порядка 53, а в среднем для хороших журналов он составляет 4.

Indicator.Ru

Справка

Если лизаты бактерий вводят в дыхательные пути мыши, они увеличивают производство в дыхательных же путях иммуноглобулинов и интерлейкинов, которые помогают борьбе с инфекциями (правда, интерлейкины — со всеми подряд и понемногу, то есть неспецифически). На клетках легких человека in vitro наблюдается тот же эффект. Похожие данные (но уже при оральном введении) получены у мышей в этой статье, опубликованной в Clinical and Diagnostic Laboratory Immunology. В обзоре говорится и о миграции лимфоцитов: можно подумать, что наши нападки напрасны и лимфоциты легко могут передислоцироваться из пейеровых бляшек прямиком в нос или глотку, где и будут ждать врага. Но маршруты этих клеток связаны со стадиями их взросления: обычно они циркулируют в организме между кровью и лимфой, «узнают» чужеродный антиген в лимфоузле или селезенке, а потом несут свою вахту по всему организму, пока не обнаружат свой антиген вновь.

Итак, допустим, мы получили (но это не точно) мало лимфоцитов, которые рассеются по всему организму (значит, концентрация их в отдельных местах будет невысока) и будут распознавать болезнетворные бактерии, если они осмелятся покуситься на наше здоровье. Мы повысили местно неспецифический иммунитет у мышей и на клетках человеческого легкого вне человека. Судя по этим результатам, было бы полезно десантировать лизаты сразу в том месте, куда бактерии вскоре придут (так как во многих экспериментах, упомянутых в том же обзоре, иммунитет создается местный). В жизни же лимфоциты двигаются по организму хаотично, а лизаты нам предлагают пить в капсулах, а не заливать в нос. Дают ли они клинически значимый эффект на людях?

Дети, взрослые, монахини

Тот же обзор в главе про клинические испытания говорит о хронических болезнях вроде хронического фарингита или даже обструкции легких. Не упоминается, были ли хоть в каком-то из перечисленных исследований и наблюдений, которые не раз проводились на пациентах разного возраста, группы сравнения (не говоря уже о рандомизации и «ослеплении»).

Двойной слепой рандомизированный плацебо-контролируемый метод — способ клинического исследования лекарств, при котором испытуемые не посвящаются в важные детали проводимого исследования. «Двойной слепой» означает, что о том, кого чем лечат, не знают ни испытуемые, ни экспериментаторы, «рандомизированный» — что распределение по группам случайно, а плацебо используется для того, чтобы показать, что действие препарата не основано на самовнушении и что данное лекарство помогает лучше, чем таблетка без действующего вещества. Этот метод мешает субъективному искажению результатов. Иногда группе контроля дают другой препарат с уже доказанной эффективностью, а не плацебо, чтобы показать, что препарат не просто лечит лучше, чем ничего, но и превосходит аналоги.

Indicator.Ru

Справка

Зато в PubMed ряд рандомизированных контролируемых испытаний найти можно. Так, в исследовании польских ученых эффективность лизатов сравнивали c действенностью аутовакцины (микроорганизмов, полученных от самого пациента) и контролем (не плацебо). Пациентов авторы не «ослепляли», оправдывая это тем, для результатов использовались объективные показатели — анализ уровня иммуноглобулинов в крови и подсчет бактерий. В итоге аутовакцина в виде капсул оказалась более эффективной против стрептококков, чем лизаты в такой же форме, а против устойчивого штамма золотистого стафилококка не помог ни один из методов.

Достаточно много статей сравнивают между собой несколько типов лизатов, например полученные химическим и механическим путем, но здесь исследования открытые, а группы контроля нет (1, 2 — любопытно, что обе статьи опубликованы итальянцами в одном и том же немецком журнале).

Небольшое когортное двойное слепое исследование (результаты которого были опубликованы в 1998 году), сравнивающее бактериальный лизат и плацебо в профилактике возвращения рекуррентной (повторяющейся) инфекции дыхательных путей показало, что вероятность повторно заболеть и продолжительность болезни снижается на более чем 40% и у детей, и у взрослых (даже с поправкой на плацебо). Но вот многоцентровое исследование, проведенное на 4965 пациентах из Европы, Латинской Америки и Азии, не установило какой-либо пользы бактериальных лизатов для людей с повторно возвращающимися инфекциями дыхательных путей. В этой работе ослепления, однако, тоже не было. Несмотря на огромную лазейку для сознательного или несознательного влияния на результат, доказать клинически значимые изменения у пациентов в группе иммуностимулирующего лечения не удалось. Зато двойное слепое исследование на 120 пациентах, статья о котором вышла в 2014 году, показывает, что лизаты бактерий снижают количество эпизодов повторных болезней. Однако оно было профинансировано производителем этой марки, которому выгоден лишь положительный результат (исследования с отрицательным результатом в таких случаях очень часто скрывают).

В маленьком, но гордом параллельном (это когда плацебо-группа и группа препарата в конце меняются местами и снова проходят те же испытания) двойном слепом плацебо-контролируемом исследовании на монахинях авторам удалось показать, что заболеваемость респираторными инфекциями во время приема препарата снижалась по сравнению с контрольной группой.

Indicator.Ru рекомендует: не пейте от вирусов и смотрите в завтрашний день

Дальновидными производителями препарат в основном продвигается для лечения ОРИ, а не ОРВИ. Однако мы знаем, что респираторные инфекции в подавляющем большинстве случаев имеют вирусную природу, и лишь иногда провоцируются бактериями или сопровождаются бактериальными осложнениями. Чек-лист для распознавания бактериальной инфекции можно найти в статье про Граммидин. Как Бронхо-Мунал (который к тому же, в отличие от вакцин, не вводится шприцем, а отправляется в кишечник) поможет избежать по большей части вирусных респираторных инфекций, неизвестно. Допустим, он будет увеличивать продукцию веществ, связанных с неспецифическим иммунитетом. Но насколько эффективным будет этот подход против вирусов? Не будет ли он в перспективе усиливать аллергии или провоцировать аутоиммунные проблемы (тем более, что принимать препарат в некоторых случаях предлагают курсами на протяжении нескольких месяцев)? Мы не знаем. Есть даже исследования (например, EOLIA), гласящие, что все наоборот, и лизаты бактерий спасают от усиления аллергической астмы. В общем, с иммунитетом, как обычно, все непросто.

Несмотря на это, лекарство может похвастаться списком и десятков небольших клинических испытаний, и парочкой положительных обзоров (1, 2). Но и их авторы осторожны: даже профинансированные производителями статьи говорят, что результаты «обнадеживающие» и «перспективные», но интерпретировать их надо с осторожностью, а для однозначности требуется больше исследований.

Кохрейновская библиотека — база данных международной некоммерческой организации «Кохрейновское сотрудничество», участвующей в разработке руководств Всемирной организации здравоохранения. Название организации происходит от фамилии ее основателя — шотландского ученого-медика XX века Арчибальда Кохрейна, который отстаивал необходимость доказательной медицины и проведения грамотных клинических испытаний и написал книгу «Эффективность и действенность: случайные размышления о здравоохранении». Ученые-медики и фармацевты считают Кохрейновскую базу данных одним из самых авторитетных источников подобной информации: публикации, включенные в нее, прошли отбор по стандартам доказательной медицины и рассказывают о результатах рандомизированных двойных слепых плацебо-контролируемых клинических исследований.

Indicator.Ru

Справка

Однако большой вопрос, будут ли дальнейшие исследования как-то прояснять эту картину: большинство клинических испытаний проведено в конце прошлого века, и тема лизатов в форме капсулы, да еще и от вирусных инфекций, потихоньку затихает. Возможно, их целесообразно использовать у некоторых групп пациентов — в частности, Кохрейновский обзор говорит о том, что препарат может снизить частоту острых респираторных инфекций у подверженных им детей на целых 40%. Но и здесь авторы призывают системы здравоохранения разных стран подключиться к проведению исследований более высокого качества, а не включать лизаты бактерий во все врачебные рекомендации.

Можно возразить, что положительные данные (например, в борьбе против реккурентных инфекций дыхательных путей или при профилактике бактериальных осложнений) отбросить нельзя. Но что делать с отрицательными? На данный момент эффективность препарата можно признать потенциальной. Запрещать его и отказываться наотрез призывать не будем, потому что это не антибиотик, использование которого во всех ситуациях без разбору будет предательством всего человечества на радость мультирезистентным бактериям. Возможно, Бронхо-Мунал и правда поможет в профилактике бактериальных осложнений, когда ОРВИ уже началась, или спасет от возвращения бактериальной инфекции. Однако Бронхо-Мунал вряд ли поможет в профилактике и лечении самой ОРВИ, а также в лечении бактериальных инфекций, и весьма сомнительно, что кто-то сможет доказать обратное в клинических испытаниях с грамотным дизайном.

Понравился материал? Добавьте Indicator.Ru в «Мои источники» Яндекс.Новостей и читайте нас чаще.

Подписывайтесь на Indicator.Ru в соцсетях: Facebook, ВКонтакте, Twitter, Telegram, Одноклассники.

таблетки с 3 лет, свечи с 6 лет, инструкция по применению

Полиоксидоний для детей от гриппа и ОРВИ: таблетки с 3 лет, свечи с 6 лет, инструкция по применению

Коронавирус

Почему дети переносят заболевание тяжелее,

чем взрослые?

Незрелость иммунных процессов — высокий риск развития осложнений и увеличение срока элиминации вируса¹.

Низкая продукция интерферонов — белка, принимающего активное участие в борьбе с вирусом. Уровень, как у взрослых, достигается к 12–18 годам¹.

Иммунные процессы в слизистых оболочках незрелые, снижены защитные свойства слизистых¹.

Симптомы интоксикации (боль в мышцах, жар, озноб) обычно более выражены, чем у взрослых.

Полиоксидоний

^®: комплексное действие
при ОРВИ и гриппе

Полиоксидоний^® способствует:

снижению вирусной нагрузки² за счет увеличения выработки собственного интерферона

облегчению тяжести течения заболевания за счет снижения воспаления и интоксикации³

предупреждению развития бактериальных осложнений⁴

повышению защитных свойств слизистых за счет увеличения выработки лизоцима⁵

Форма выпуска

Детям с 3-х лет

Схема приема таблеток 12 мг при лечении острых
респираторных инфекций

С 3-х до 10 лет

½ таблетки

2 раза в день под язык

Курс — 7 дней

С 10 лет

1 таблетка

2 раза в день под язык

Курс — 7 дней

Детям от 1 года

Суппозитории 6 мг при лечении
острых респираторных инфекций

С 1 года

1 суппозиторий 6 мг

1 раз в сутки через день

Курс — 5 суппозиториев

От 6 до 18 лет

1 суппозиторий 6 мг

Ежедневно

Курс — 10 10 суппозиториев

Инструкция и схемы

Полиоксидоний

^® для детей

Свойства препарата подтверждены множеством исследований, в том числе наивысшим стандартом доказательной медицины — мета-анализом исследований среди детей от 3 до 18 лет³

Совместим со многими лекарственными препаратами⁵

Химически чистый препарат, не содержит компонентов растительного или животного происхождения. Подходит детям с аллергопатологиями5⁵

20-летний опыт применения в терапии и педиатрии

Полиоксидоний^® не вызывает гиперактивации иммунной системы⁶

Полиоксидоний

^® для профилактики вирусных инфекций

В 2020 году мы очередной раз увидели, как важна роль иммунитета при столкновении с вирусной инфекцией. Важно помогать детскому иммунитету в течение всего года.

Полиоксидоний

^® может оказывать пролонгированное профилактическое действие:

помогать укреплять иммунную систему⁵
активировать факторы ранней защиты от вирусных инфекций⁵
снижать частоту повторных ОРВИ и гриппа⁷

Большинство детей могут выходить из группы часто и длительно болеющих детей после проведенного лечения⁸

Схема приема препарата Полиоксидоний

^® таблетки 12 мг для профилактики острых респираторных инфекций

Детям с 3 до 10 лет

Для профилактики респираторных вирусных инфекций

½ таблетки

1 раз в день под язык

Курс — 7 дней

Детям с 10 лет

Для профилактики респираторных вирусных инфекций

1 таблетка

1 раз в день под язык

Курс — 7 дней

Инструкция по медицинскому применению препарата Полиоксидоний^®.
Ярилин А.А. Иммунология. М.: ГЭОТАР-Медиа. — 2010. — с. 752. — c. 520.
Исаева Е.И и др. Изучение противовирусной активности Полиоксидония на экспериментальной модели in vitro // Журнал Инфектологии. — 2019. — Т. 11. — №1. — Приложение 1. — с. 5–13.
Караулов А.В., Горелов А.В. Применение азоксимера бромида в терапии инфекционно-воспалительных заболеваний органов дыхания у детей: мета-анализ контролируемых клинических исследований // Журнал инфектологии. — 2019. — Т. 11. — №4. — с. 31–41.
Морозова С.В. «Применение иммунокорригирующего препарата Полиоксидоний® при острой инфекционно-воспалительной патологии ЛОР-органов» Российский Медицинский Журнал. — Т. 18. — №24. — 2010.
Письмо РААКИ.
Харит С.М., Галустян А.Н. Азоксимера бромид – безопасный и эффективный препарат при лечении острых респираторных инфекций верхних дыхательных путей у детей: обзор результатов двойных слепых плацебо-контролируемых рандомизированных клинических исследований II и III фазы // Педиатрия (прил. к журналу Consilium Medicum). — 2017. — 2.
Мустафаев Д.М., Егоров В.И. Иммуномодулирующая терапия в ЛОР-практике // Медицинский совет. — 2016. — №18.

Что лучше БРОНХО-МУНАЛ или ВИФЕРОН — Сравнение лекарств

в Иммуноcтимуляторы

Препарат БРОНХО-МУНАЛ
Препарат ВИФЕРОН

БРОНХО-МУНАЛ отзывы о препарате

Посмотреть цены на пепарат

Имя: Денис Ширяев
Отзыв: ребенку посоветовали дать бронхомунал, врачи говорят очень хорошее средство, если пройти весь курс лечения. Кто нибудь знает правда ли оно такое хорошее?

Имя: Артём Беляков
Отзыв: ребенку посоветовали дать бронхомунал, врачи говорят очень хорошее средство, если пройти весь курс лечения. Кто нибудь знает правда ли оно такое хорошее?

Имя: Karina K
Отзыв: ребенку посоветовали дать бронхомунал, врачи говорят очень хорошее средство, если пройти весь курс лечения.

Кто нибудь знает правда ли оно такое хорошее?

Имя: MARSIPAN
Отзыв: ребенку посоветовали дать бронхомунал, врачи говорят очень хорошее средство, если пройти весь курс лечения. Кто нибудь знает правда ли оно такое хорошее?

Имя: Настя Филиппова
Отзыв: а никто не пробовал полиоксидоний???

Имя: Дашкевич Елена
Отзыв: У меня ребенок пропил первый курс бронхомунала сразу после бронхита с лечением антибиотиками, на третий день приема все началось по новой да еще с абструкцией, только, что выбрались с трудом из этого состояния надо пить второй курс—не рискну!

Имя: Александра Тимонина
Отзыв: моему ребенку был год и 2 мес, когда впервые после перенесенного орви у нас начался обструктивный бронхит, чего нам только не назначали, антибиотики тоже принимали…Потом поменяли врача, нам назначили бронхомунал, попробовали- кашель на третий день практически не беспокоил, хрипы в легких стали уменьшаться! поправились быстро.

месяц назад ребенок снова заболел орви, обструктивный бронхит осложнился бронхоспазмом с дыхательной недостаточностью! 4 дня лежали в больнице, без антибиотиков! после выписки, через 2 дня снова температура поднялась, снова кашель возник, ну, думаю, все с начала…, уже готова была бежать покупать антибиотики.., но врач переубедила меня, сказала, что если так часто будем принимать антибиотики, иммунитет ребенка вообще перестанет реагировать на инфекции! но (!) бронхомунал снова стала ему давать, на 4-ый день выкарабкались!!! уже дважды убедились, что лекарство здорово помогает!!!

Имя: Нина
Отзыв: В прошлом году пили курсом 3 раза, что то я не припомню что мой ребенок переставал болеть….. Как болел все орз с абструкциями так и болел….доктор снова посоветовала, но я что то думаю что смысла нет. Нам сейчас 3 года. Это сугубо мое впечатление, никому не навязываю. Да и вообще… как перестает принимать противовирусные так сразу сваливается с еще большими проблемами.

Имя: Светлана Косенкова
Отзыв: бронхо мунал помогает.

хотя были сомнения по поводу приема.

Имя: mashulenka341
Отзыв: а никто не пробовал полиоксидоний???

Имя: Татьяна Блинова
Отзыв: у меня астма смешанного типа,может кто сталкивался такой же проблемой,чем больше читаю в интер.у меня дипрессия,Может есть средства хотя бы держать под контролем дыхания,я замучилась.СПАСИБО

Имя: Раяна Чудо:)
Отзыв: Добрый день! У меня астма смешанного типа, были одни мучения,пока не начала принимать 2 раза в день АСД фракцию.Через 1,5 месяца уже стало гораздо лучше,пью уже 5 месяцев,на лето сделаю перерыв ,а осенью снова начну.У препарата очень сильный противный запах,но ради здоровья можно потерпеть.В инете все про препарат написано.

Имя: Татьяна Седых
Отзыв: у меня астма смешанного типа,может кто сталкивался такой же проблемой,чем больше читаю в интер.у меня дипрессия,Может есть средства хотя бы держать под контролем дыхания,я замучилась.СПАСИБО

Имя: кинель-черкасский филиал №1
Отзыв: Здравствуйте, Ирина.

Спасибо, что ответили. Я совсем недавно узнала свои диагнозы — ХОБЛ, эмфизема, бронхоэктазы. Естественно, напугана. Болела с раннего детства бронхитами, пневмониями. Вот так и пришла к этому. Теперь вот роюсь в инете. Но чем больше роюсь, тем хуже (морально) мне становится. Расскажите о себе. Как долго вы болеете, чем лечитесь. Может, народные какие-то средства? Где вы живете? Я из Башкирии, село Красноусольское. Мне 39. Очень хочется надеяться, что все не так страшно. Буду ждать вашего ответа.

Имя: Elena
Отзыв: ребенку посоветовали дать бронхомунал, врачи говорят очень хорошее средство, если пройти весь курс лечения. Кто нибудь знает правда ли оно такое хорошее?

Имя: Наталочка
Отзыв: Мучался от рецидивирующего ОРВИ, бывало по два месяца — только вылечусь и снова заболеваю, кто-нибудь на меня покашлял — сразу заболеваю, жрал уже по два-три куса антибиотиков в год, при этом имунные пробы нормальные, т.е. беда в локальном иммунитете верхних дыхательных путей.

Пропил бронхо-мунал — не перестал заболевать, но любое простудное заболевание стало проходить за один, максимум два дня. Пропил несколько лет, потом забил на него, опять началось рецедивирующее ОРВИ, причем летом. Опять пропил курс (3 раза по 10 дней с 20-дневным перерывами) — все вокруг болеют, а я — держусь.

Имя: Скаловская Ирина Георгиевна
Отзыв: у меня астма смешанного типа,может кто сталкивался такой же проблемой,чем больше читаю в интер.у меня дипрессия,Может есть средства хотя бы держать под контролем дыхания,я замучилась.СПАСИБО

Имя: Гульнара Галиева
Отзыв: а можно детям давать дозировку 7 мг?

Имя: ~~M@DiN@~~
Отзыв: мой знакомый вылечил астму(встал с инвалидного кресла),обычным кетотифеном ,а девушка знакомая,у нее астма с детства,последствия лечения антибиотиками,спасалась приемом угля,который они получали сжигая в лесу березовые бревна.

Имя: Татьяна Седых
Отзыв: Моя знакомая, борется с астмой, принимая уголь, который они сами получают, в лесу, находят сухую березу и сжигают ее, получают уголь и она ест его,сколько именно не знаю, очень довольна,говорит, ей этот уголь помогает бороться, подробней не знаю.

Имя: Мария Яковлева
Отзыв: Мне лично помогает, чтоб не болели животы надо соответственно что то принимать, также как и при применении других препаратов: антибиотики, противовирусные. Каждый нормальный врач выписывает препараты для желудка и кишечника.

Имя: Юлия Грек
Отзыв: Не могу сказать, ч о это лекарство лечит кашель, но он хорошо помогает в плане повышения иммунитета и профилактики простуд. Лечили кашель мы обычно геделиксом, а вот чтобы не болетьЮ пропили 3 раза курсом бронхомунал. Только после этого стали ходить в садик как все дети, до того постоянно сидели на больничном.

Купить Натуральные средства для иммунитета можно здесь

Купить со скидкой

Промокод для скидки MAT6375

Имя: Юляша
Отзыв: К огромному сожалению, не снимайте со счетов и тот факт, что большое количество лекарств сейчас — пустышки, левак. А уж, если речь идет об известном лекарстве, дорогом, да еще и в капсулах……как-бы не каждые 9 из 10 были-бы просто мел внутри… вот и не помогают лекарства…потому что не лекарства вовсе.

8 лет назад был опыт приема этого препарата, на ноги ставил быстро. Сейчас даже не рискну покупать.

Имя: Евгений Сукач
Отзыв: Пропила 10 капсул и открылся жуткий кашель, всё пошло на бронхи. Ничем не помог! пью антибиотик.

Имя: Тася
Отзыв: Попробуйте закалять ребёнка. Давно забытый способ. Сейчас моя дочь уже взрослая. Но когда была малышкой было всё как у всех, 2 дня садик потом сопли, кашель и прочие «прелести». Особенно тяжело она заболела в пять лет. Тогда одна моя очень хорошая знакомая дала брошюру физкультура и здоровье. Сейчас не знаю можно ли найти что-то такое, поскольку детство наше пришлось ещё на советский период. Так вот в этой брошюре была подробно расписана вся схема закаливания. Очень трудоёмкий процесс. И, конечно, было страшно поначалу обливать её холодной водой, но подруга, вырастившая двоих сыновей, всячески меня поддерживала. В тот раз дочка очень быстро выздоровела. С тех пор мы навсегда забыли что такое кашель, ОРЗ и прочее.

Имя: Elena Gorizwet
Отзыв: Мы принимали бронхомунал в прошлом году нам было 3 года, пошли в сад, нам посоветовали для профилактики и укрепления иммунитета перед садом, пропили несколько дней и заболел ребёнок, после чего были у нас и отиты и бронхиты, хотя до сада о них и не знали, пили бронхомунал два курса, болели почти весь год…так что не знаю, есть ли от него эффект, может все индивидуально…плюс у нас на него побочный эффект, думала может ошибалась, но нет, вот спустя год, нам уже 4, снова садик, вирусы, болеем, в первый же день высокой температуры вызвала врача, прописала лечение, плюс сказала начинать принимать бронхомунал, начали мы на следующий день заболевания, температура была 4 дня, кашель очень сильный, на сегодняшний день выпили 5 таблеток, но все бы ничего, если бы не было побочных эффектов, по ночам болит у ребенка животик, прошлую ночь хныкал, но не сильно, этой ночью просто плакал, ногами и руками стучал, вертелся с боку на бок, как при коликах у нас было первые пол года жизни…дала фосфалюгель, начали выходить газы спустя 5 мин.

, успокоился, спит, а я решила написать отзыв, так как сон прошел….в прошлые разы приема были такие же побочные явления, только сегодня сильнее всего…вот и думаю стоит ли продолжать или нет…((((
Прошлой зимой нам и полиоксидоний врач прописала в связи с тем, что болели часто, пкупили, пошли делать в платной клинике, первый сделали, ребенок жудко плакал, было очень больно…больше не делали, так как прислушалась к словам медсестры, которая сказала, чтониктоизмедиковсвоимдетямнедаютимуностимулирующиеприпаратытаккакимунитетперестанетработатьаондолженсамвырабативаться

Имя: Наталья Пешкун
Отзыв: Сгласна с Тасей, но когда болеешь, ведь пробуешь все? Верно?

Имя: Тася
Отзыв: Мы принимали бронхомунал в прошлом году нам было 3 года, пошли в сад, нам посоветовали для профилактики и укрепления иммунитета перед садом, пропили несколько дней и заболел ребёнок, после чего были у нас и отиты и бронхиты, хотя до сада о них и не знали, пили бронхомунал два курса, болели почти весь год…так что не знаю, есть ли от него эффект, может все индивидуально…плюс у нас на него побочный эффект, думала может ошибалась, но нет, вот спустя год, нам уже 4, снова садик, вирусы, болеем, в первый же день высокой температуры вызвала врача, прописала лечение, плюс сказала начинать принимать бронхомунал, начали мы на следующий день заболевания, температура была 4 дня, кашель очень сильный, на сегодняшний день выпили 5 таблеток, но все бы ничего, если бы не было побочных эффектов, по ночам болит у ребенка животик, прошлую ночь хныкал, но не сильно, этой ночью просто плакал, ногами и руками стучал, вертелся с боку на бок, как при коликах у нас было первые пол года жизни…дала фосфалюгель, начали выходить газы спустя 5 мин.

Имя: С С
Отзыв: ребенку посоветовали дать бронхомунал, врачи говорят очень хорошее средство, если пройти весь курс лечения. Кто нибудь знает правда ли оно такое хорошее?

Имя: Наталья Денисова
Отзыв: В прошлом году пили курсом 3 раза, что то я не припомню что мой ребенок переставал болеть….. Как болел все орз с абструкциями так и болел….доктор снова посоветовала, но я что то думаю что смысла нет.

Нам сейчас 3 года. Это сугубо мое впечатление, никому не навязываю. Да и вообще… как перестает принимать противовирусные так сразу сваливается с еще большими проблемами.

ВИФЕРОН отзывы о препарате

Посмотреть цены на пепарат

Имя: Антон Мандрыка
Отзыв: Ребенка с 6 месяцев лечила этой мазью.Как только начинаем заболевать,используем и свечи и мазь в нос.Очень довольна.И насморк очень быстро проходит.

Имя: Иванова Анна
Отзыв: А мы не мазь, а гель покупаем, но и для профилактики подходит. А мазь покупала сестре — она герпес ей мазала, вроде помогла. Ну а свечки наверно все когда-нибудь ставили, классика так сказать)

Имя: Римма Волобуева
Отзыв: Неделю пользуюсь никакого эффекта.ерунда прорекламированная

Имя: рррмяу.
Отзыв: мазь нравится ! охлаждает и заживляет рецидив быстро !

Имя: Tanya Semenchenya
Отзыв: при герпесной ангине, при рецидивах герпеса в комплексном лечении помогает.

Имя: Pretty Women
Отзыв: Свечки давно знакомы, гелем активно пользуемся для профилактики ОРВИ, а мазь помогала при герпетической инфекции. Считаю, что полезно иметь в домашней аптечке. Особенно весной на фоне сезонного иммунодефицита

Имя: Оксана Васильевна
Отзыв: Виферон помог быстро, встала на ноги за пару дней. Но потом иммунитет сел конкретно, заражалась от всех подряд. В итоге пришлось даже на Барьерный риф разориться, носила его на шее чтобы инфекцию не цеплять, пока иммунитет не восстановится.

Имя: Ирина Белякова
Отзыв: Очень хорошо мне в беременность насморк эта мазь облегчила. Быстро прошло. А то я, вроде, и не сильно болею, а чихаю по полной. А я уже на сносях была, мне все казалось, что с очередного чиха просто рожать поеду))) но нет, помазала три дня вифероном и пошло все на убыль. А сам организм уже все, бороться принципиально отказывался…

Имя: Аля Дыник
Отзыв: Очень хорошо мне в беременность насморк эта мазь облегчила.

Быстро прошло. А то я, вроде, и не сильно болею, а чихаю по полной. А я уже на сносях была, мне все казалось, что с очередного чиха просто рожать поеду))) но нет, помазала три дня вифероном и пошло все на убыль. А сам организм уже все, бороться принципиально отказывался…

Имя: Тэсс Майн
Отзыв: Свечки давно знакомы, гелем активно пользуемся для профилактики ОРВИ, а мазь помогала при герпетической инфекции. Считаю, что полезно иметь в домашней аптечке. Особенно весной на фоне сезонного иммунодефицита

Имя: Виктория Осипова
Отзыв: С герпесом давно уже научилась быстро бороться с помощью мази виферон- как только начинает краснеть и зудеть губа, сразу мажу этой мазью, и тогда процесс на этом останавливается и не выскакивает в виде пузырьков.

Имя: Лидия Рожкова
Отзыв: В том году, когда была беременная, без нее из дому не выходила! И домашним ее тыкала)
Благодаря этому не болели практически. Мазь отличная защита от вирусов.

Имя: Галина Шипилова
Отзыв: Единственный момент, мазь нужно хранить в холодильнике. Если нет, может поменять свои особенности. А это никому не интересно. Мажу всем домашним носы, и сразу в холодильник прячу.

ТОП запрсы в категории «Иммуноcтимуляторы»

Полиоксидоний — единственный среди многих | Здоровая жизнь | Здоровье

03.03.2009 15:30

AIF.RU

Примерное время чтения: 5 минут

51156

Дело в том, что Полиоксидоний действительно уникален. Прилагательное «единственный» появляется немедленно, как только начинается рассказ о Полиоксидонии и его воздействии на организм человека.

Полиоксидоний — единственный иммуномодулятор комплексного действия: иммуномодулятор, детоксикант, антиоксидант. Таким образом, он не только восстановит иммунитет, но и выведет токсины, что сразу улучшит самочувствие, а также предотвратит развитие осложнений. Полиоксидоний работает тогда, когда обычные иммуномодуляторы бессильны или не могут быть использованы, например, во время острых состояний — гриппа, простуды, воспалительных инфекций любого генеза. Совместно со стандартным лечением Полиоксидоний наносит двойной удар по болезни: увеличивает эффективность основной терапии, улучшает сопротивляемость организма, удаляет токсины. Иначе говоря — быстро и без осложнений «ставит больного на ноги».

Полиоксидоний — единственный высокомолекулярный иммуномодулятор, не имеющий аналогов, как по структуре, так и по свойствам. Какие преимущества дает эта особенность препарату? Представьте себе, что на борьбу со «злодеями» вышел один «боец». Исход битвы неясен. Недаром говорят — «один в поле не воин». А вот другая ситуация — в сражение вступает регулярная, хорошо вооруженная «часть», вся состоящая из прекрасно обученных «бойцов». Согласитесь, так гораздо лучше! Большая молекула Полиоксидония способна гораздо более эффективно бороться с инфекцией, при этом очищая «поле боя» от вредных и ядовитых остатков — токсинов, разрушенных клеток и т. п.

Полиоксидоний снижает риск и частоту осложнений при острых инфекционных заболеваниях, он существенно уменьшает интоксикацию, сокращает степень повреждений в тканях и само время болезни. В случаях хронических воспалительных заболеваний Полиоксидоний не только снижает симптоматику заболевания (болевой синдром и т.п.), но и способствует полному и окончательному выздоровлению.

Полиоксидоний взаимодействует со всеми звеньями иммунной системы — с моноцитами, нейтрофилами, Т-клетками, В-клетками, NК-клетками. Это значит, что данный препарат эффективен и при вирусных, и при бактериальных, и при грибковых заболеваниях.

Полиоксидоний — это химически чистый иммуномодулятор, продукт высоких технологий. Он не несет на себе чужеродной антигенной нагрузки, не содержит растительных компонентов, которые могут быть опасными для аллергиков. Это еще более повышает профиль безопасности Полиоксидония.

Полиоксидоний — «умный» иммуномодулятор. Он способен повышать сниженные показатели иммунной системы, понижать высокие и никак не влияет на нормальные показатели. Таким образом, Полиоксидоний обладает завидной универсальностью, его можно применять при любом заболевании, связанном с изменением иммунитета. А еще Полиоксидоний экономит средства потребителей. Ведь перед началом его использования исследование иммунной системы вовсе не обязательно.

Несмотря на свою инновационность и уникальность, Полиоксидоний используется в клинической практике уже с 1996 года. За это время он успел доказать свою эффективность и безопасность, завоевать доверие и врачей, и пациентов. Безрецептурный отпуск (свечи, таблетки), разнообразие лекарственных форм (свечи, таблетки, инъекции) делают применение Полиоксидония еще более удобным. Полиоксидоний можно применять в сочетании с любыми другими лекарственными средствами, начиная с самого «нежного» возраста (с 6 месяцев жизни). Полиоксидоний входит в перечень ЖНВЛС (Жизненно Необходимых и Важнейших Лекарственных средств), он признан ВОЗ (Всемирной организацией Здравоохранения).

Вы хотите поддержать иммунитет? Быстро и надежно избавиться от острого воспалительного заболевания? Вылечить, наконец, надоевшую хроническую инфекцию? Полиоксидоний!

В каких случаях можно применять Полиоксидоний:

► Для лечения простудных заболеваний.

► Для сезонной профилактики ОРВИ и гриппа.

► Для восстановления иммунитета после перенесенного инфекционного заболевания.

► При острых инфекционно-воспалительных заболеваниях бактериальной, грибковой, вирусной природы.

► При хронических воспалительных заболеваний любой этиологии, не поддающихся стандартной терапии, как в стадии обострения, так и в стадии ремиссии. Для сезонной профилактики обострений хронических воспалительных заболеваний любой этиологии.

► Для увеличения эффективности основной терапии.

► При применении антибиотиков для нивелирования побочных эффектов.

► Для комплексного лечения и профилактики молочницы и неспецифических вагинитов.

► При герпесе, а также для его профилактики.

► В процессе и после химио- и лучевой терапии опухолей. Для восстановления иммунитета у онкологических больных.

► Для реабилитации часто и длительно болеющих лиц, особенно детей и лиц пожилого возраста.

► Для профилактики снижения иммунитета при повышенных психофизических нагрузках.

► В преддверии отпуска для облегчения периода акклиматизации.

На правах рекламы

Простуда у аллергика: как лечить и чем опасны народные средства →
Меню для щитовидки: как защитить эту важную железу →
Блокаторы кальциевых каналов, влияющие на сердце →

иммунитет

Следующий материал

Также вам может быть интересно

Побочные действия таблеток: какие органы страдают от лекарств?
Загадки железы. Чего нельзя делать при болезнях щитовидки
Куда уходят силы? Шесть причин слабости
Скорая помощь для организма
Другие иммуномодуляторы

Новости СМИ2

Полиоксидоний, 6 мг, лиофилизат для приготовления раствора для инъекций и местного применения, 5 шт.

Таблетки.

Перорально и сублингвально, за 20–30 мин до еды, ежедневно 1, 2 или 3 раза в сутки.

Взрослым — в дозах 12 или 24 мг, подросткам — в дозе 12 мг. Способ и режим дозирования определяется врачом, в зависимости от диагноза, остроты и тяжести процесса.

Сублингвально:

— при воспалительных процессах ротоглотки (бактериальной, вирусной и грибковой природы): по 1 табл. 2 раза в день через 12 ч, в течение 10–14 дней. При тяжелых формах герпетической и грибковой инфекции ротовой полости — по 1 табл. 3 раза в день через 8 ч в течение 15 дней;

— при хронических заболеваниях околоносовых придаточных пазух и хронических отитах: по 1 табл. 2 раза в день через 12 ч, в течение 5–10 дней;

— при хроническом тонзиллите: по 1 табл. 3 раза в день через 8 ч в течение 10–15 дней;

— при хронических заболеваниях верхних дыхательных путей: взрослым — по 2 табл. (24 мг) 2 раза в день, подросткам — по 1 табл. (12 мг) 2 раза в день, через 12 ч, в течение 10–14 дней;

— для профилактики гриппа и острых респираторных инфекций: иммунокомпрометированным лицам, болеющим ОРЗ более 4 раз в год, в предэпидемический период взрослым — по 2 табл. (24 мг), подросткам — по 1 табл. (12 мг) 2 раза в день через 12 ч, в течение 10–15 дней.

Перорально:

— при хронических заболеваниях верхних дыхательных путей: взрослым — по 2 табл. (24 мг) 2 раза в день через 12 ч, подросткам — по 1 табл. (12 мг) 2 раза в день, через 12 ч, в течение 10–14 дней.

Лиофилизат для приготовления раствора для инъекций и местного применения

Взрослые

Парентерально, интраназально. Способы применения выбираются врачом в зависимости от тяжести заболевания и возраста больного.

В/м или в/в (капельно): препарат назначают взрослым в дозах 6–12 мг 1 раз в сутки ежедневно, через день или 1–2 раза в неделю, в зависимости от диагноза и тяжести заболевания.

Для в/м введения содержимое ампулы или флакона растворяют в 1,5–2 мл 0,9% раствора натрия хлорида или воды для инъекций. Для в/в (капельного) введения препарат растворяют в 2 мл 0,9% раствора натрия хлорида, Гемодеза-Н, Реополиглюкина или 5% раствора декстрозы, затем стерильно переносят во флакон с указанными растворами объемом 200–400 мл.

Приготовленный раствор для парентерального введения хранению не подлежит.

Интраназально: дозу 6 мг растворяют в 1 мл (20 капель) дистиллированной воды, 0,9% раствора хлорида натрия или кипяченой воды комнатной температуры.

Рекомендуемые схемы лечения взрослых

Парентерально:

— при острых воспалительных заболеваниях: по 6 мг ежедневно в течение 3 дней, далее через день общим курсом 5–10 инъекций;

— при хронических воспалительных заболеваниях: по 6 мг через день 5 инъекций, далее 2 раза в неделю курсом не менее 10 инъекций;

— при туберкулезе: по 6–12 мг 2 раза в неделю курсом 10–20 инъекций;

— у больных острыми и хроническими урогенитальными заболеваниями: по 6 мг через день курсом 10 инъекций в сочетании с химиопрепаратами;

— при хроническом рецидивирующем герпесе: по 6 мг через день курсом 10 инъекций в сочетании с противовирусными препаратами, интерферонами и/или индукторами синтеза интерферонов;

— для лечения осложненных форм аллергических заболеваний: по 6 мг, курс из 5 инъекций — 2 первые инъекции ежедневно, затем через день. При острых аллергических и токсико-аллергических состояниях вводить в/в по 6–12 мг в сочетании с другими противоаллергическими препаратами;

— при ревматоидном артрите: по 6 мг через день — 5 инъекций, далее 2 раза в неделю курсом не менее 10 инъекций.

У онкологических больных:

— до и на фоне химиотерапии для снижения иммунодепрессивного, гепато- и нефротоксического действия химиотерапевтических средств — по 6–12 мг через день курсом не менее 10 инъекций, далее частота введения определяется врачом в зависимости от переносимости и длительности химио- и лучевой терапии;

— для профилактики иммунодепрессивного влияния опухоли, для коррекции иммунодефицита после химио- и лучевой терапии, после хирургического удаления опухоли показано длительное применение препарата Полиоксидоний^® (от 2–3 мес до 1 года) — по 6–12 мг 1–2 раза в неделю.

У больных с острой почечной недостаточностью: назначают не чаще 2 раз в неделю.

Интраназально назначают по 6 мг/сут для лечения острых и хронических инфекций лор-органов, для усиления регенераторных процессов слизистых оболочек, для профилактики осложнений и рецидивов заболеваний, для профилактики гриппа и ОРЗ. По 3 капли в каждый носовой ход через 2–3 ч (3 раза в сутки) в течение 5–10 сут.

Дети

Парентерально, интраназально, сублингвально. Способы применения выбираются врачом в зависимости от диагноза, тяжести заболевания, возраста и массы тела больного.

Парентерально препарат назначают детям от 6 мес в дозе 3 мг (в/м или в/в капельно 0,1–0,15 мг/кг) ежедневно, через день или 2 раза в неделю курсом 5–10 инъекций (расчет дозы указан в таблице).

Для в/м введения препарат растворяют в 1 мл воды для инъекций или 0,9% растворе натрия хлорида.

Для в/в капельного введения препарат растворяют в 1,5–2 мл стерильного 0,9% раствора натрия хлорида, Реополиглюкина, Гемодеза-Н или 5% раствора декстрозы, стерильно переносят во флакон с указанными растворами объемом 150–250 мл.

Интраназально и сублингвально: ежедневно в суточной дозе 0,15 мг/кг в течение 5–10 дней. Препарат вводят по 1–3 капли в один носовой ход или под язык через 2–3 ч. Для приготовления раствора для интраназального и сублингвального применения дозу 3 мг растворяют в 1 мл (20 капель), дозу 6 мг — в 2 мл дистиллированной воды, 0,9 % раствора хлорида натрия или кипяченой воды комнатной температуры. В одной капле приготовленного раствора (50 мкл) содержится 0,15 мг препарата Полиоксидоний^®, которые назначают на 1 кг массы тела ребенка.

Раствор для сублингвального и интраназального применения хранить в холодильнике не более 7 дней. Перед использованием пипетка с раствором должна быть нагрета до комнатной температуры (20–25 °C).

Рекомендуемые схемы лечения детей:

— при острых воспалительных заболеваниях: по 0,1 мг/кг через день курсом 5–7 инъекций;

— при хронических воспалительных заболеваниях: по 0,15 мг/кг 2 раза в неделю курсом до 10 инъекций;

— при острых аллергических и токсико-аллергических состояниях: в/в капельно в дозе 0,15 мг/кг в сочетании с противоаллергическими препаратами;

— для лечения осложненных форм аллергических заболеваний в сочетании с базисной терапией: в/м по 0,1 мг/кг курсом 5 инъекций с интервалом 1–2 дня.

Интраназально вводят по 1–3 капли в один носовой ход через 2–3 ч (2–4 раза в сутки). Для интраназального и сублингвального введения расчет суточной дозы для детей представлен в таблице.

Масса тела ребенка, кг	Количество капель в сутки	Объем вводимого раствора, мл
5	5	0,25
10	10	0,5
15	15	0,75
20	20	1,0

Сублингвально: по всем показаниям — ежедневно в суточной дозе 0,15 мг/кг в течение 10 дней, для лечения дисбактериоза кишечника в течение 10–20 дней. Капают 1–3 капли под язык через 2–3 ч.

Суппозитории

Ректально или вагинально по 1 супп. (6 и 12 мг) 1 раз в сутки. Способ и режим дозирования определяется врачом в зависимости от диагноза, остроты и тяжести процесса. Полиоксидоний^® может применяться ректально или вагинально ежедневно, через день или 2 раза в неделю.

Полиоксидоний^®, суппозитории 12 мг применяется у взрослых ректально или вагинально.

Ректально: 1 раз в сутки по 1 супп. (после очищения кишечника).

Вагинально: при гинекологических заболеваниях по 1 супп. 1 раз в сутки (на ночь) вводится во влагалище в положении лежа.

Полиоксидоний^®, суппозитории 6 мг применяется: у детей старше 6 лет ректально — по 1 супп. 1 раз в сутки (после очищения кишечника), у взрослых — ректально (после очищения кишечника) или вагинально (во влагалище в положении лежа) как поддерживающая доза — по 1 супп. 1 раз в сутки (на ночь).

Стандартная схема применения Полиоксидония^® — по 1 супп. (6 или 12 мг) 1 раз в сутки, ежедневно в течение 3 дней, затем — через день курсом 10–20 супп. При необходимости курс лечения повторяют через 3–4 мес.

Для больных, длительно получающих иммуносупрессивную терапию, онкологических, имеющих приобретенный дефект иммунной системы — ВИЧ, подвергшихся облучению, показана длительная от 2–3 мес до 1 года поддерживающая терапия Полиоксидонием^® (взрослым — по 12 мг, детям старше 6 лет — по 6 мг 1–2 раза в неделю).

Рекомендуемые схемы применения в составе комплексной терапии:

— при хронических инфекционно-воспалительных заболеваниях: в стадии обострения — по стандартной схеме, в стадии ремиссии — по 1 супп. через 1–2 дня, общим курсом — 10–15 супп.;

— при острых инфекционных процессах и для активации регенераторных процессов (переломы, ожоги, трофические язвы): ежедневно по 1 супп., курс лечения — 10–15 супп.;

— при туберкулезе: по стандартной схеме, курс лечения — не менее 15 супп., далее возможно использование поддерживающей терапии — по 2 супп. в неделю курсом 2–3 мес;

— на фоне химио- и лучевой терапии опухолей: по 1 супп. ежедневно за 2–3 дня до начала курса терапии, далее частота введения суппозиториев определяется врачом в зависимости от переносимости и длительности химио- и лучевой терапии;

— для реабилитации часто (более 4–5 раз в год) и длительно болеющих лиц и при ревматоидном артрите: по 1 супп. через день, курс лечения — 10–15 супп.

— для коррекции вторичных иммунодефицитов, в т.ч. возникающих вследствие старения: по 1 супп. (12 мг) 2 раза в неделю, курс — не менее 10 супп. 2–3 раза в год.

В виде монотерапии:

— для сезонной профилактики обострений хронических очагов инфекции, профилактики рецидивирующей герпетической инфекции: через день взрослым — 6–12 мг, детям — 6 мг. Курс — 10 супп.

— для коррекции вторичных иммунодефицитов, профилактики гриппа и ОРЗ: по стандартной схеме.

— при гинекологических заболеваниях (ректально или вагинально): по стандартной схеме.

Эффективность и безопасность полиоксидония® у госпитализированных пациентов с коронавирусным заболеванием COVID-19 — Просмотр полного текста

Таблица размещения информации о местоположении

Областное государственное бюджетное учреждение здравоохранения «Городская больница № 5 г. Барнаула»
Барнаул, Российская Федерация, 656045
ЦНИИ эпидемиологии Роспотребнадзора
Москва, Российская Федерация, 111123
Государственное учреждение здравоохранения города Москвы «Городская клиническая больница № 15 им. Филатова О.М.» в «Управлении здравоохранения города Москвы»
Москва, Российская Федерация, 111539
г. Москва ГБУЗ «Инфекционная клиническая больница № 1 ДЗМ г. Москвы»
Москва, Российская Федерация, 125367
г. Москва ГБУЗ «Городская клиническая больница № 24 ДЗМ»
Москва, Российская Федерация, 127015
ГБУ «НИИ скорой помощи им. Н.В. Склифосовского Департамента здравоохранения города Москвы»
Москва, Российская Федерация, 129090
г. Москва ГБУЗ «Городская клиническая больница № 40 ДЗМ»
Москва, Российская Федерация, 129301
Государственное бюджетное учреждение здравоохранения Нижегородской области «Инфекционная клиническая больница № 2 г. Нижнего Новгорода»
Нижний Новгород, Российская Федерация, 603022
ФГБОУ ВО «Оренбургский государственный медицинский университет» Минздрава России
Оренбург, Российская Федерация, 460000
Федеральное государственное бюджетное образовательное учреждение высшего образования «Первый Санкт-Петербургский государственный медицинский университет имени академика И. П. Павлова»
Санкт-Петербург, Российская Федерация, 197022
Государственное бюджетное учреждение здравоохранения Владимирской области «Областная клиническая больница»
Владимир, Российская Федерация, 600023
Ярославский государственный медицинский университет Минздрава России
Ярославль, Российская Федерация, 150000
Клиника инфекционных заболеваний, университетская больница в Нитре
Нитра, Словакия, 949 01
Инфекционная клиника, Университетская больница в Трнава
Трнава, Словакия, 917 74

Таблица раскладок для информации следователя

Главный исследователь:	Жан-Франсуа Росси, профессор	Университет Монпелье (Медицинский факультет) и Институт Святой Екатерины

Полиоксидоний® активирует цитотоксический ответ лимфоцитов посредством созревания дендритных клеток: клинические эффекты при раке молочной железы

Введение

Иммунотерапия в настоящее время рассматривается как новый рубеж в лечении рака с рядом впечатляющих успехов (1). В некоторых случаях иммунотерапия рака требует, чтобы иммунный ответ был направлен на определенные антигены, и обычно отсутствует эффективная стимуляция иммунной системы. В этом смысле адъюванты, агенты, которые модифицируют действие других агентов, усиливают иммунный ответ и широко используются в вакцинации (2), тем самым сводя к минимуму необходимую дозу антигена. Несмотря на их длительное использование, сегодня лицензировано лишь несколько адъювантов, способных генерировать адаптивный иммунный ответ на вакцины, и их применение при лечении рака встречается редко (3).

Полиоксидоний (ПО) представляет собой физиологически активное соединение из нового класса гетероцепных алифатических полиаминов, вызывающих клинический интерес (4). Химически ПО представляет собой сополимер N-окисленного 1,4-этиленпиперазина и бромида (N-карбоксиэтил)-1,4-этиленпиперазиния, который растворим в воде и биоразлагаем и имеет молекулярную массу 60–100 кДа (5). . ПО разрешен в России в качестве вакцинного адъюванта, стимулирующего выработку антител (http://petrovax. com/medication/catalog/polyoxydonium/). Цепи сополимера расщепляются и легко выводятся из организма (5), что объясняет его низкую почечную токсичность и хороший профиль безопасности, как показано в обширном постмаркетинговом исследовании в Словакии (6). Соответственно, ПО в комплексе с антигенами в коммерческой противогриппозной вакцине также продемонстрировал высокую безопасность согласно анализу около 50 миллионов реципиентов (5).

ПО связывается с моноцитами и нейтрофилами периферической крови человека и, в меньшей степени, с лимфоцитами (7). Он используется в качестве иммунного адъюванта, особенно в вакцинах, и в качестве иммуномодулятора для лечения острых и хронических бактериальных, вирусных или грибковых инфекционных заболеваний (4). ПО обладает рядом иммуногенных свойств. Во-первых, он стимулирует выработку ИЛ-6 (7). Во-вторых, повышает бактерицидную активность лейкоцитов (8). В-третьих, ПО индуцирует продукцию H ₂ O ₂ и улучшает способность нейтрофилов и макрофагов захватывать и обрабатывать различные инфекционные агенты, включая бактерии, например, стафилококки, примерно на 40–60% (7, 8). Это может объяснить способность ПО повышать устойчивость к инфекциям.

Влияние ПО на лимфоцитарный компартмент менее известно, хотя его иммуномодулирующие функции могут частично включать улучшенную презентацию антигена, приводящую к эффективной выработке антител (4). Сначала ПО ковалентно конъюгировали с антигенными компонентами противогриппозной вакцины: гемагглютинином и нейраминидазой (5). Данные примерно 50 миллионов реципиентов показали, что вакцина безопасна и эффективна (5). Во-вторых, PO оценивали с помощью трехвалентной живой аттенуированной вакцины против кори, эпидемического паротита и краснухи (9).). Здоровым детям пероральный прием не требовался для выработки высокого уровня специфических антител. Напротив, детям с аномальным количеством Т-лимфоцитов может быть полезен пероральный прием (9).

Благодаря отличному профилю клинической безопасности перорального приема мы решили испытать его у пациентов с раком молочной железы до операции. Мы наблюдали положительный клинический результат у 30% пациентов, что коррелировало с повышенной инфильтрацией опухоли CD4 ⁺ Т-клетками. Результаты побудили нас исследовать эффекты PO in vitro для идентификации клеток-мишеней трех различных иммунных линий, играющих важную роль в иммунном надзоре за опухолью, а именно дендритных клеток (ДК), Т-клеток и NK-клеток (10). Однако мы обнаружили, что некоторые иммуномодулирующие свойства ПО различаются у разных доноров. Следовательно, существует реальная потребность в лучшем понимании иммунных эффектов ПО для поддержки новых клинических разработок.

Пациенты, материалы и методы

Соединения

ПО предоставлено НПО «Петровакс» (Москва, Россия). Рекомбинантный человеческий (rh) IL-15, полученный от Miltenyi, и rhIL-2 от PeproTech. Рекомбинантный человеческий GM-CSF и rhIL-4 были получены от R&D systems и LPS от Sigma. Все остальные продукты описаны ниже.

Больные раком молочной железы

ПО разрешено в России и других странах в качестве иммуноадъюванта. Больные проходили лечение в хирургическом отделении РБУЗ им. Н.Н. Блохина в Москве в соответствии с международно-признанными рекомендациями и правилами, используемыми локальным комитетом по этике. Патологоанатомы морфологически подтвердили наличие рака путем окрашивания гематоксилин-эозином перед пероральным лечением. Двадцать пациентов с гистологически подтвержденной аденокарциномой молочной железы без метастазов получали неоадъювантную пероральную терапию в дозе 12 мг внутримышечно в дни 1, 2, 3, 5 и 7. Стадию определяли с использованием классификации TNM (11). Таблица 1 описывает стадии пациентов; согласно этой классификации, T описывает размер исходной (первичной) опухоли и то, проникла ли она в близлежащие ткани, N описывает пораженные близлежащие (региональные) лимфатические узлы, а M описывает отдаленные метастазы. Мы также проанализировали Her2/neu, рецепторы эстрогена и прогестерона и Ki-67 в качестве пролиферативного индекса. Пациентам была проведена последующая операция на 8-й день. Образцы патологии до и после операции сравнивали в соответствии с системой оценки патоморфоза, которая определяет патологические изменения, наблюдаемые между образцами, полученными до и после специфической терапии, как описано ранее (12, 13). Вкратце, степень патоморфоза 1 соответствует легкой модификации, степени 2 и 3 соответствуют уменьшению инфильтрата опухолевых клеток от низкого до умеренного, а степень 4 указывает на полное исчезновение инфильтрата опухолевых клеток. Мы также изучили подмножества лейкоцитов, инфильтрирующих опухоль, и, кроме того, мы проанализировали изменения лимфоцитов в крови и аспиратах костного мозга на 0-й и 8-й день у девяти пациентов. Суспензии клеток анализировали на CD4/CD3/CD25/CD45 и CD8/CD3/CD56/CD45 с использованием проточной цитометрии и программы FCS3 (Becton Dickinson, Bioline BD Biosciences, Санкт-Петербург, Россия).

Таблица 1 . Клинические характеристики 20 пациентов с раком молочной железы, получавших пероральный прием.

Образцы здоровых доноров

Данные были получены от трех индивидуальных доноров «Etablissement Français du Sang» ( EFS ). Мы подготовили три биологических образца из каждого лейкоцитарного слоя для каждого из следующих экспериментов: концентрация ПО и тип клеток. В этой работе использовались единицы пуповинной крови (UCB) и опыт профессора Джона Де Воса, отвечающего за коллекцию Центра биологических ресурсов университетской больницы Монпелье – http://www.chu-montpellier.fr/en/ платформы (идентификатор BIOBANQUES – BB-0033-00031).

In vitro Расширение/дифференцировка/созревание дендритных клеток (ДК)

После очистки фиколла РВМС высевали в среду RPMI 1640 с добавлением 10% фетальной телячьей сыворотки, 100 ЕД/мл пенициллина, 0,1 мг/мл стрептомицина и 1% глутамина (RP10) и через 2 часа удаляли неприкрепленные клетки. Адгезивные клетки использовали в качестве исходной популяции и культивировали в среде RP10 с добавлением rhGM-CSF (100 нг/мл) и rhIL-4 (25 нг/мл) в течение 7 дней.

ПО растворяли в воде и добавляли к клеткам, растущим в среде RP10, в нескольких конечных концентрациях (1, 10 или 100 мкг/мл). ПО добавляли с 0-го по 7-й день (незрелые ДК, иДК D0). Мы добавили 1 мл свежей среды RP10 с добавлением GM-CSF и IL-4 на 2-й день. На 5-й день некоторые iDC (iDC D5) обрабатывали различными концентрациями ПО (1, 10 и 100 мкг/мл) для изучить его влияние на созревание iDC. В качестве положительного контроля мы использовали ЛПС (50 нг/мл) для индуцирования созревания ДК (мДК), а также исследовали влияние ПО на созревание, индуцированное ЛПС. Эксперименты были выполнены в трех экземплярах, и результаты выражены как среднее значение ± стандартная ошибка среднего. Экспрессию молекул клеточной поверхности анализировали через 7 дней культивирования. Окрашивание клеток проводили с использованием флуоресцентно-конъюгированных моноклональных антител. Антитела против CD1a, конъюгированные с PE-Cy™5 (клон HI149), BV421-конъюгированный анти-CD83 (клон HB15e), BV605-конъюгированный анти-CD80 (клон L307.4), BV650-конъюгированный анти-CD14 (клон M5E2), BV711-конъюгированный анти-CD40 (клон 5C3), PE-Cy™7- конъюгированное анти-CD86 (клон 2331), Alexa Fluor ^® 647-конъюгированное анти-CCR1 (клон 53504) и Fc-Block были получены от BD Biosciences. Антитело против HLA-DR, конъюгированное с APC-Alexa Fluor ^® 750 (клон Immu-357), было приобретено у Beckman Coulter. Человеческое антитело CCR7, конъюгированное с флуоресцеином (клон 150503), было приобретено у R&D Systems, а конъюгированное с фикоэритрином (PE) антитело против CD1c (клон AD5-8E7) было приобретено у Miltenyi Biotech. Образцы были получены на BD-LSR Fortessa (Becton Dickinson), и все данные были проанализированы с использованием программного обеспечения FlowJo (Tree Star, Ashland, OR, USA). iDC идентифицировали по экспрессии CD1a и CD1c и потере экспрессии CD14, а созревание DC контролировали по экспрессии CD40, CD80, CD83 и CD86 в клетках HLA-DR+.

In vitro Размножение/активация Т-клеток

Клетки обрабатывали PO на протяжении всего протокола размножения/активации. Использовали несколько концентраций: ПО 1, 10, 100 и 500 мкг/мл. После Фиколла мы использовали набор для положительной селекции EasySep™ CD3 (StemCell Technologies) в соответствии с протоколом производителя. Очищенные клетки CD3 ⁺ ресуспендировали в RPMI-Glutamax, 10% FBS. Клетки активировали человеческим Т-активатором CD3/CD28 Dynabeads (Life Technologies) в соответствии с протоколом производителя. На 5-й день мы проанализировали пролиферацию Т-клеток и различные маркеры Т-клеток. Некоторые образцы обрабатывали ФМА (50 нг/мл)/иономицином (1 мкг/мл). Внутриклеточное окрашивание выполняли путем добавления BD GolgiPlug, ингибитора транспорта белка, содержащего брефельдин A (BD Biosciences).

Экспрессию молекул клеточной поверхности анализировали через 7 дней культивирования. Окрашивание клеток проводили с использованием флуоресцентных конъюгированных мышиных моноклональных антител. V500-конъюгированные анти-CD4 (клон L200), PerCP-Cy5.5-конъюгированные анти-CD25 (клон MA251), V450-конъюгированные анти-Foxp3 (клон 259D/C7), PE-конъюгированные анти-CD127 (клон HIL7RM21), PE-Cy7- конъюгированные антитела против IFN-g (клон B27) и PerCP-Cy5.5-конъюгированные антитела против IL-17a были получены от BD Biosciences. PB-конъюгированные анти-CD4 (клон 13B8.2) и APC-конъюгированные анти-CD8 (клон B9.11) были приобретены у Beckman Coulter. Окрашенные образцы анализировали на проточном цитометре Gallios (Beckman Coulter) с использованием программного обеспечения Kaluza. Эксперимент был проведен в трех повторностях, и результаты выражены как среднее значение ± стандартная ошибка среднего.

Экспансия и активация NK-клеток человека

Это выполняли, как описано ранее (14). Вкратце, единицы крови были лишены Т-клеток с использованием набора EasySep ^TM CD3 Positive Selection Kit (STEMCELL Technologies). Клетки культивировали в течение 20 дней с γ-облученными клетками PLH при соотношении 1:1 NK-клетки:акцессорные клетки в присутствии IL-2 (100 ед/мл) и IL-15 (5 нг/мл). Клетки PLH добавляли каждые 4 дня и свежие цитокины каждый второй день. Мы не добавляли PLH в течение последних 4 дней, и в конце процесса чистота NK-клеток (CD56 ⁺ /CD3 ^— ) всегда было выше 90%, при этом не осталось живых клеток PLH.

Для анализа фенотипа клетки окрашивали 7AAD (Beckman Coulter) для выявления жизнеспособных клеток и антител к поверхностным маркерам. FITC-конъюгированные анти-CD25 (клон B1.49.9), анти-CD45RO (клон UCHL1), PE-конъюгированные анти-CD69 (клон TP1.55.3), анти-CD62L (клон DREG56), анти-CD19 (клон J3-119), анти-CD3 ( клон UCHT1), ECD-конъюгированные анти-CD19 (клон J3-119), PacificBlue-конъюгированные анти-CD16 (клон 3G8), анти-CD57 (клон NC1), APC-AlexaFluor750-конъюгированные анти-CD45 (клон J33), анти-CD45RA (клон 2h5LDh21LDB9)), анти-CD45, конъюгированные с KromeOrange (клон J33), и анти-CD16 (клон 3G8) были получены от Beckman Coulter. Анти-CD158b, конъюгированное с FITC (клон CH-L), анти-CD158a, конъюгированное с PE (клон HP-3E4), и анти-CD107a, конъюгированное с V450 (клон h5A3), были предоставлены BD Biosciences. APC-конъюгированные анти-CD56 (клон REA196), анти-CD3 (клон AC146) и анти-CD158e, конъюгированные с Vioblue (клон DX9), были приобретены у Miltenyi. Анти-CD56, конъюгированное с PECy7 (клон HCD56), было получено от BioLegend. 1 × 10 ⁵ -3 × 10 9Клетки 0184 5 инкубировали в течение 20–30 мин при 4°С с различными антителами в PBS, содержащем 2,5% FBS. Затем клетки промывали и суспендировали в 200–250 мкл той же среды. Окрашенные образцы анализировали на проточном цитометре Gallios (Beckman Coulter) с использованием программного обеспечения Kaluza. Жизнеспособные лимфоциты отбирали с использованием окрашивания FSC/SSC и 7AAD. В-клетки (CD19 ⁺), Т-клетки (CD3 ⁺ CD56 ^—) и NK-клетки (CD56 ⁺ CD3 ^—) различали с использованием CD19., CD3 и CD56 антитела соответственно.

Цитотоксичность, опосредованная NK-клетками

Это было выполнено, как описано ранее (14, 15). NK-клетки метили 3 мкМ красителя CellTracker™ Violet BMQC (Life Technologies) и инкубировали в течение ночи с клетками-мишенями при различных соотношениях E:T. Впоследствии транслокацию фосфатидилсерина (PS) и повреждение мембран анализировали в популяции клеток-мишеней с отрицательной фиолетовой флуоресценцией с помощью проточной цитометрии с использованием аннексина V-FITC (Immunostep) и 7AAD (BD Biosciences) или йодида пропидия (PI), как описано ранее (16, 17). Мы считаем все клетки, положительные на аннексин-V и/или PI (или 7-ADD), мертвыми (или умирающими).

Анализ дегрануляции NK

Это было сделано, как описано ранее (15). Вкратце, 50 × 10 ³ клеток-мишеней на лунку помещали в RPMI, 10% FBS, IL-2 100 ЕД/мл с монензином (BD Biosciences) в 96-луночный планшет с V-образным дном. NK и клетки-мишени инкубировали в течение ночи при 37°C в 5% CO ₂ и подсчитывали живые клетки с использованием цитометра Muse (Millipore) с набором для подсчета и определения жизнеспособности (Millipore). В качестве контроля NK-клетки инкубировали без клеток-мишеней. CD107a ⁺ NK-клеток анализировали на проточном цитометре Gallios (Beckman Coulter) с использованием 7AAD, CD45RO-FITC, CD19-PE, CD56-PECy7, CD3-APC, CD45RA-APCAlexaFluor750, CD16-KromeOrange и CD107a-HV500 (BD Biosciences). ). Результаты были проанализированы с использованием программного обеспечения Kaluza.

Статистический анализ

Экспериментальные значения были обработаны и статистический анализ выполнен с использованием программного обеспечения GraphPad Prism (v6. 0). Все статистические данные представлены в виде * p < 0,05; ** стр < 0,01; *** р < 0,001 и **** р < 0,0001. Средние значения выражены как среднее плюс или минус стандартная ошибка среднего (SEM).

Результаты были получены от трех индивидуальных доноров «Etablissement français du sang» ( EFS ). Мы подготовили три биологических образца из каждого лейкоцитарного слоя для каждого из следующих экспериментов: концентрация ПО и тип клеток.

Результаты

Эффекты ПО у пациентов с раком молочной железы

Мы выбрали когорту из 20 пациентов женского пола со средним возрастом 53,5 года (диапазон 32–78 лет). Первая биопсия в день O показала, что у них были разные оценки TNM и что у большинства была инфильтративная карцинома протоков (таблица 1). Мы лечили пациентов внутримышечно PO в течение 1 недели и получили вторую биопсию на 8-й день. Среди пациентов у шести были обнаружены патологические изменения после операции по сравнению с результатами до операции (таблица 2). Ответившие пациенты имели различные показатели TNM, рецепторы эстрогена и прогестерона, окрашивание Her2/neu и пролиферативные индексы (таблица 2). Один пациент имел особенно агрессивный тройной негативный фенотип, то есть отрицательный по рецепторам эстрогена, прогестерона и человеческого эпидермального фактора роста 2 (HER2), и имел высокий пролиферативный индекс, измеренный высоким коэффициентом пролиферации на основе Ki-67. окрашивание (рис. 1). Она получила 1 неделю лечения PO и радикальную мастэктомию левой молочной железы с сохранением грудных мышц. В послеоперационном материале наблюдали патоморфоз 4 степени (рис. 2А,Б). Это соответствует полному исчезновению инфильтрата опухолевых клеток, что означает полную патологическую реакцию. Мы также наблюдали воспалительный инфильтрат в ложе опухоли (рис. 2С), который состоял из клеток как клеточного, так и гуморального иммунитета с почти эквивалентным соотношением Т- и В-клеток (рис. 2С). Макрофаги состояли из отдельных гистиоцитов, сгруппированных в виде гранулем, и демонстрировали появление гигантоклеточной реакции (рис. 2С). Наконец, около 15–20% инфильтрирующих клеток составляли гранулоциты, в основном нейтрофилы (данные не показаны). Таким образом, изменения, выявленные после лечения ПО у данного пациента, соответствовали активному хроническому воспалению с образованием гранулемы.

Таблица 2 . Клиническая характеристика больных с патоморфозом после лечения ПО (вверху) и рецепторный статус и пролиферативный индекс их опухолей (внизу).

Рисунок 1 . Гистологическая картина при постановке диагноза у пациента 32 лет с тройным негативизмом, достигшим полного патологического ответа после лечения ПО. (A) Морфологические особенности при окрашивании гематоксилин-эозином (H-e) (x50) показали инфильтрат опухоли протоков. (Б) Иммуногистохимическое окрашивание показало тройную негативность для рецептора прогестерона (PR), рецептора эстрогена (ER) и рецептора роста эстрогена человека 2 (HER2) с высоким индексом Ki-67.

Рисунок 2 . Гистологическая картина после введения полиоксидония (ПО) пациенту 32 лет с тройным негативизмом, достигшим полного патологического ответа после лечения. (A) Морфологические аспекты с наличием гранулемы, воспалительного инфильтрата и фиброза тканей, без инфильтрата опухолевых клеток (H-e; x20). (B) Иммуногистохимическое исследование с антителами к панцитокератину (AE1/AE3) с последующим окрашиванием гематоксилином Майера. Положительный результат был ограничен только молочными протоками без инфильтрата опухолевых клеток, что соответствовало полной патологической реакции. (C) Иммунный инфильтрат наблюдался в срезах биопсии, с иммуногистохимической окраской на послеоперационном материале. Наблюдались Т-лимфоциты (CD3, CD4, CD8-положительные клетки), В-лимфоциты (CD20-положительные клетки) и макрофаги (CD68-положительные клетки).

Кроме того, у 3 больных отмечены незначительные изменения (1 степень), у 2 – уменьшение опухолевого инфильтрата (2 степень). Мы также получали клеточные суспензии и изучали субпопуляции лейкоцитов, инфильтрирующих опухоль. Мы обнаружили значительную разницу в популяции CD4 ⁺ в инфильтрате опухолевых клеток между шестью пациентами с патологическими изменениями и без патологических изменений, соответственно 50,91 ± 2,05% против 40,89 ± 2,26% ( P = 0,006). Кроме того, соотношение CD8/CD4 составляло 0,79 ± 0,09 против 1,17 ± 0,13 ( P = 0,03). Мы также проанализировали субпопуляции CD4 и CD8 в крови и аспирате костного мозга девяти наших пациентов в день 0 и в день 8 после перорального лечения и не обнаружили каких-либо существенных различий (данные не показаны).

Влияние ПО на Т-клетки

Предыдущие результаты, касающиеся рекрутирования Т-клеток, побудили нас исследовать прямое влияние ПО на Т-клетки. Мы стимулировали очищенные Т-клетки от трех здоровых доноров (HD) антителами против CD3/CD28. Этот протокол вызывал эффективную активацию, что измерялось снижением уровня CD127 и повышением уровня CD25 (дополнительная фигура 1A) и снижением уровня CD45RA (данные не показаны). Чтобы частично имитировать относительно длительное пероральное лечение пациентов с раком молочной железы, мы стимулировали Т-клетки и обрабатывали их различными концентрациями перорального спирта. Количество Т-клеток статистически увеличилось к 5-му дню при 100 и 500 мкг/мл (рис. 3). Напротив, пероральный прием не изменял процентное содержание CD4 ⁺ клеток, экспрессирующих CD127, CD25 и CD45, а также уровень их экспрессии (дополнительная фигура 2). Точно так же пероральный прием не влиял на активацию CD8 ⁺, за исключением того, что более высокие дозы перорального приема вызывали снижение уровня CD25 (дополнительная фигура 3). Повторная стимуляция Т-клеток на 5-й день с помощью ФМА/иономицина индуцировала продукцию IFNγ в обоих компартментах Т-клеток. На этот ответ не повлиял ПО (дополнительная фигура 3). Таким образом, in vitro хроническое пероральное лечение не оказывало токсического действия и фактически увеличивало пролиферацию Т-клеток без отрицательного воздействия на любой из протестированных маркеров активации.

Рисунок 3 . ПО увеличивает пролиферацию Т-клеток. Очищенные Т-клетки от трех отдельных здоровых доноров активировали костимуляцией анти-CD3/CD28 в трех повторностях. Указанные концентрации ПО добавляли в день 0. Количество клеток определяли количественно. Контрольное среднее количество необработанных клеток стандартизировали до 1, чтобы уменьшить вариабельность между донорами. Графики представляют собой средние ± SEM; ** р < 0,01, *** р < 0,001; Тест ANOVA использовали для сравнения с необработанными клетками.

Влияние ПО на дендритные клетки (ДК)

ДК являются ключевыми регуляторами иммунного ответа, способными праймировать наивные покоящиеся Т-клетки и инициировать первичный Т-клеточный ответ. Следовательно, эффекты ПО на Т-клетки у больных раком молочной железы могут быть опосредованы модуляцией ДК. Мы обработали прилипшие клетки РВМС гранулоцитарно-макрофагальным колониестимулирующим фактором (ГМ-КСФ) и интерлейкином-4 (ИЛ-4) в течение 5 дней для образования незрелых ДК (нДК) и стимулировали их созревание (мДК) на дополнительные 2 дня. инкубация с липополисахаридом (ЛПС). Мы проанализировали влияние ПО на генерацию и созревание ДК с использованием трех протоколов. Во-первых, мы добавили несколько концентраций PO с 0 по 7 день. Это указывает на способность PO влиять на генерацию/размножение iDC. Во-вторых, мы обработали iDCs пероральным приемом на 5-й день (D5). Это позволило нам отслеживать способность ПО вызывать созревание iDC per se , что указывает на то, способствует ли PO формированию гуморального и/или клеточно-опосредованного иммунного ответа. В-третьих, мы созревали нДК с ЛПС, одновременно обрабатывая клетки несколькими концентрациями ПО. Это исследует способность PO влиять на созревание DC, индуцированное LPS. iDC идентифицировали по экспрессии CD1a и CD1c и потере экспрессии CD14. Созревание ДК контролировали по экспрессии костимулирующих молекул CD40, CD80, CD83 и CD86 в клетках HLA-DR+. Процент iDC, экспрессирующих костимулирующие молекулы CD80, CD86, CD40 и CD83, был относительно низким и значительно увеличивался в LPS-индуцированных mDC (дополнительная фигура 4).

PO не влиял на жизнеспособность iDC и mDC и увеличивал образование iDC и mDC при добавлении 100 мкг/мл в день 0 (рис. 4). Напротив, при добавлении на 5-й день в дозах 1 и 10 мкг/мл он незначительно снижал жизнеспособность ДК (для HD3) и, следовательно, окончательный подсчет (рис. 4). Мы наблюдали вариабельность между донорами, но PO всегда хорошо переносился с точки зрения жизнеспособности и распространения DC (дополнительная фигура 5). В совокупности эти результаты свидетельствуют о том, что пероральный прием может улучшить распространение mDC. Следовательно, в местах воспалений, где происходит созревание ДК, пероральный прием будет способствовать продукции мДК.

Рисунок 4 . Влияние ПО на жизнеспособность и распространение DC. Количество клеток (справа) и их жизнеспособность (слева), полученных на 7-й день от трех отдельных здоровых доноров. Различные концентрации ПО (1, 10 и 100 мкг/мл) добавляли либо в день 0 (iDCs D0), либо в день 5 (iDCs D5). Созревание ДК (мДК) индуцировали добавлением ЛПС (50 нг/мл) в отсутствие или в присутствии различных концентраций ПО. Из-за междонорской изменчивости мы нормализовали расширение, присвоив значение 1 расширению iDC и приспособив другие значения к этому числу. Графики представляют собой средние ± SEM; * р < 0,05, ** р < 0,01, *** р < 0,001; U Манна-Уитни использовали для сравнения с необработанными клетками.

Затем мы провели фенотипический анализ на D7, чтобы оценить уровень экспрессии HLA-класса II и костимулирующих молекул CD40, CD80, CD83 и CD86 (дополнительная фигура 4). Экспрессия этих поверхностных маркеров увеличивается во время созревания DC и может указывать на иммуногенные свойства PO. PO не влиял на экспрессию любого из этих маркеров во время генерации iDC с точки зрения процента положительных клеток (рис. 5A) или уровней экспрессии (рис. 5B). Добавление 10 мкг/мл перорально на 5-й день увеличивало процент iDC, экспрессирующих некоторые костимулирующие молекулы, у двух из трех доноров (рис. 5А). Более того, та же концентрация РО увеличивала уровни экспрессии некоторых костимулирующих молекул у этих пациентов (рис. 5В). Это показывает, что ПО обладает иммуногенными свойствами. PO не изменил индуцированную LPS экспрессию костимулирующих молекул (дополнительные рисунки 4, 6). На самом деле увеличение, вызванное LPS, уже было очень высоким, что позволяет предположить, что PO не способен увеличивать его дальше.

Рисунок 5 . Влияние ПО на процент ДК, экспрессирующих маркеры созревания ДК. iDCs индуцировали, как описано в подписи к рисунку 4. (A) Процент DCs, экспрессирующих различные маркеры. (B) Анализировали уровни экспрессии (MFI) маркеров созревания DC. На графиках представлены средние значения ± стандартная ошибка среднего для каждого отдельного здорового донора с биологическими экспериментами, проведенными в трех биологических повторах. * р < 0,05, ** р < 0,01; U-критерий Манна-Уитни использовали для сравнения с необработанными клетками.

Наконец, для проверки индуцированного PO созревания DC, обработанные PO DC культивировали совместно с Т-клетками, меченными CFSE, для оценки их способности индуцировать аллогенную пролиферацию CD4 и CD8 T-клеток. В качестве контроля использовали незрелые и зрелые ДК. Во-первых, важно отметить, что пролиферация как CD4, так и CD8 Т-клеток индуцировалась во всех условиях, протестированных в трех независимых биологических экспериментах для двух отдельных доноров.

После инкубации с mDC у обоих доноров наблюдалось более высокое количество пролиферирующих Т-клеток. Инкубация с ИДК, обработанными пероральным приемом, повышала пролиферацию аллогенных CD4 и CD8 Т-клеток по сравнению с контрольными ИДК (рис. 6). Хотя эти результаты различались у разных доноров, они продемонстрировали хорошую иммуногенность ДК, обработанных пероральным приемом, и их способность индуцировать пролиферацию Т-клеток CD4 и CD8.

Рисунок 6 . Пероральный прием увеличивал потенциал iDC для стимуляции смешанной лимфоцитарной реакции (MLR). ИДК, обработанные в день 5 различными концентрациями ПО (0, 1, 10, 100 мкг/мл) или мДК, как описано в подписи к рис. 4, использовали для стимуляции меченных CFSE аллогенных Т-клеток при ДК:Т- соотношение ячеек 1:40. (A) Пролиферацию Т-клеток анализировали на 5-й день. Все условия тестировали по крайней мере в трех экземплярах. На рисунке представлены репрезентативные точечные диаграммы (вверху) и гистограммы, изображающие пролиферацию аллогенных меченных CFSE CD4 9.0184 + (в центре) и CFSE-меченые клетки CD8 ⁺ (внизу). (B) Процент быстро пролиферирующих клеток CD4 (вверху) и CD8 (внизу). * р < 0,05, ** р < 0,01, *** р < 0,001, **** р < 0,0005; Mann-Whitney U использовали для сравнения с необработанными клетками.

В заключение, ПО не влияет на дифференцировку ДК, но может способствовать их созреванию и экспрессии костимулирующих молекул, что приводит к хорошей иммуногенности ДК, что отражается пролиферацией Т-клеток. Однако существует вариабельность, предполагающая, что эффекты перорального приема могут зависеть от иммунного статуса пациента/донора.

Влияние ПО на NK-клетки

NK-клетки являются частью врожденной иммунной системы и обладают естественной цитотоксичностью. NK-клетки преимущественно нацелены на клетки, лишенные MHC-I, включая трансформированные или инфицированные вирусом клетки, которые подавляют экспрессию MHC-I, чтобы избежать распознавания ЦТЛ. Следовательно, гипотеза «отсутствующего я» предполагает, что NK-клетки различают клетки-мишени от других здоровых «я» клеток на основе экспрессии MHC-I. Однако теперь ясно, что активация NK-клеток зависит от сложного процесса передачи сигналов, опосредованного активирующими и ингибирующими рецепторами. Результат зависит от силы различных активирующих и тормозящих сигналов. Ингибирующие рецепторы в основном распознают молекулы MHC-I (HLA у человека), а активирующие рецепторы могут распознавать лиганды стресса в клетках-мишенях. Следовательно, NK-клетки также устраняют «стрессовые» клетки, даже если они экспрессируют нормальные уровни MHC-I.

Поскольку NK-клетки обеспечивают противораковую защиту (18, 19), мы проанализировали влияние перорального приема на активацию и размножение NK-клеток. CD3 ⁺ -истощенные клетки РВМС инкубировали при различных концентрациях ПО, и количество клеток анализировали на 7, 14 и 21 день. любая концентрация (дополнительная фигура 7). На самом деле исходные данные были очень разнородными из-за различий в начальных количествах NK-клеток в пакетах с кровью и реакции на протокол активации/экспансии. Это было ожидаемо, учитывая переменный процент NK-клеток у здоровых людей (примерно 5–20%) и реакцию NK-клеток на различные стимулы (14). Чтобы решить эту проблему, мы рассчитали среднее количество клеток для каждого донора и получили нормализованное значение. Мы использовали это для нормализации значений в клетках, обработанных ПО. Это показало, что пероральный прием в дозе 500 мкг/мл снижал пролиферацию NK-клеток (рис. 7). Напротив, более низкие концентрации не давали никакого эффекта. Следовательно, пероральный прием не влияет на жизнеспособность и пролиферацию NK-клеток при концентрациях ниже 100 мкг/мл и до 21 дня стимуляции, что позволяет предположить, что эти концентрации не должны отрицательно влиять на жизнеспособность и пролиферацию NK-клеток у пациентов. В этом контексте следует отметить, что периферические NK-клетки имеют короткую продолжительность жизни, в среднем 1 неделю (20), поэтому маловероятно, что большинство NK-клеток будут контактировать с ПО в течение более длительного времени.

Рисунок 7 . Высокая концентрация ПО снижает пролиферацию NK-клеток. NK-клетки от трех отдельных здоровых доноров активировали костимуляцией с клетками-мишенями и низкими дозами цитокинов в течение различных периодов времени. Различные концентрации ПО добавляли в день 0 и определяли количество клеток. Средние контрольные значения были стандартизированы до 1, чтобы уменьшить вариабельность между донорами. Графики представляют собой средние ± SEM; * р < 0,05, ** р < 0,01, *** р < 0,001; Тест ANOVA использовали для сравнения с необработанными клетками.

Затем мы исследовали влияние перорального приема на три хорошо известных маркера активации NK-клеток, CD69, CD25 и рецептор трансферрина CD71, на 21-й день после активации (дополнительная фигура 8A). CD71 активируется в клетках с высоким метаболизмом. CD25 представляет собой высокоаффинный рецептор IL-2. CD69 является маркером ранней активации NK. Все эти маркеры были повышены после активации NK-клеток, и их экспрессия была выше в NK с высокой противоопухолевой активностью (21, 22). Ни одна из концентраций PO не влияла на процент NK-клеток, экспрессирующих CD69.и CD71 или уровни их экспрессии, измеренные по интенсивности MFI. Мы наблюдали тенденцию к увеличению процента CD25-позитивных клеток и более высоким уровням CD25 при пероральном введении 10 мкг/мл. Однако обычно пероральный прием не изменяет экспрессию этих маркеров активации.

Во время созревания NK-клеток CD56 ^яркие клетки становятся CD56 ^{тусклыми} CD62L ⁺ CD57 ^— клетками, которые продуцируют перфорин, сохраняя при этом высокую продукцию IFN-γ в ответ на цитокины (23, 24). CD56 9Клетки 0184 dim CD62L ⁻ CD57 ⁺ демонстрируют низкий ответ на цитокины и более высокую цитотоксическую способность и считаются полностью зрелыми NK-клетками (23, 25). Стимулы in vitro в течение периодов до 20 дней не индуцируют CD57 (14). Пероральный прием в дозе 10–100 мкг/мл показал тенденцию к снижению экспрессии обоих маркеров (дополнительная фигура 8B). Наконец, полностью зрелые цитотоксические NK-клетки экспрессируют ингибиторные иммуноглобулиноподобные рецепторы клеток-киллеров (KIR) и CD16 (26). На дополнительной фигуре 8B показана тенденция к увеличению экспрессии KIR и отсутствие изменений в CD16 в клетках, обработанных PO (до 100 мкМ).

Цитотоксическая функция NK-клеток опосредуется активацией рецепторов, например, NKG2D, которые распознают лиганды стресса в клетках-мишенях. Их участие вызывает естественную цитотоксичность. Кроме того, NK-клетки распознают домены Fc в мАт-опсонизированных мишенях с помощью FcγRIIIa (CD16a). Взаимодействие индуцирует антителозависимую клеточно-опосредованную цитотоксичность (ADCC). ПО в дозах ниже 500 мкМ не влиял на экспрессию этих основных рецепторов (дополнительная фигура 8B).

CD45 представляет собой белок, тирозинфосфатазу, который специфически экспрессируется в лейкоцитах (27). Самая большая изоформа, CD45RA, экспрессируется на наивных Т-клетках. Активированные Т-лимфоциты и Т-лимфоциты памяти экспрессируют самую короткую изоформу CD45, CD45RO, в которой отсутствуют экзоны RA, RB и RC. Эта самая короткая изоформа способствует активации Т-клеток. Экспрессия изоформ CD45 придает NK-клеткам различные функциональные свойства (22). NK-клетки, коэкспрессирующие длинные (CD45RA) вместе с короткими (CD45RO) изоформами, проявляют более высокую противоопухолевую активность у гематологических больных раком (21). После in vitro стимуляция, CD45RA+ – покоящиеся клетки, CD45RO+ – активированные, CD45RARO проявляют более высокую цитотоксичность, CD45RAdim – клетки в процессе активации. PO существенно не изменил эти in vitro -генерированные популяции (дополнительная фигура 9), хотя наблюдалась тенденция к снижению экспрессии CD45RA и увеличению CD45RO, что могло представлять повышенную цитолитическую активность (22).

Затем мы проанализировали влияние ПО на цитотоксическую функцию, опосредованную NK-клетками, исследуя естественную цитотоксичность и дегрануляцию. Мы использовали два соотношения эффектор:мишень (Э:Т) 1:1 и 1:3. Поскольку более 50% NK-клеток экспрессируют KIR, мы использовали в качестве мишеней первичные клетки, экспрессирующие молекулы MHC-I, которые могут ингибировать KIR-экспрессирующие NK-клетки. Анализ необработанных данных не показал изменений ни в одном из этих параметров (дополнительный рисунок 10). На самом деле между донорами была большая неоднородность. Следовательно, мы использовали аналогичный подход, как на рисунке 7, измеряя среднюю цитотоксичность в контрольных клетках для каждого донора и получая соответствующие нормализованные значения. Мы использовали их для расчета нормализованных значений для клеток, обработанных ПО. Мы не обнаружили каких-либо существенных изменений в цитотоксичности (рис. 8). Когда мы анализировали дегрануляцию, мы наблюдали тенденцию к увеличению ответа при пероральном введении 10 мкМ при обоих соотношениях E:T. В заключение, пероральный прием не влиял на цитотоксичность, хотя мог способствовать дегрануляции NK.

Рисунок 8 . ПО не влияет на цитолитическую функцию NK-клеток. NK-клетки от трех отдельных здоровых доноров активировали костимуляцией клетками-мишенями и низкими дозами цитокинов в течение 21 дня. Различные концентрации ПО добавляли в день 0. Верхние графики представляют токсичность в отношении опухолевых клеток у пациента с В-клеточной лимфомой при двух различных соотношениях эффектор:мишень (Э:Т). Нижние графики представляют процент клеток CD107 ⁺. Средние значения контрольных значений были стандартизированы до 1, чтобы уменьшить вариабельность между донорами. Графики представляют собой средние ± SEM; Тест ANOVA использовали для сравнения с необработанными клетками.

Дискуссия

Стимуляция противоопухолевой активности иммунной системы становится основным клиническим подходом. Последние достижения в онкологии позволяют предположить, что использование клинических молекул, стимулирующих иммунную систему против инфекционных заболеваний различного происхождения, является альтернативой традиционной химиотерапии (1, 4). Чужеродные природные полиэлектролиты (белки, полисахариды, нуклеиновые кислоты) и их структурные аналоги (полипептиды, полинуклеотиды) обладают антигенными свойствами и могут служить иммуностимуляторами (5). Преимущество синтетических полиэлектролитов (SPE) заключается в том, что они не являются иммуногенными, а N-оксидные группы PO снижают присущую полиаминам токсичность. Это было исследовано в нескольких клинических условиях (5, 6). Следовательно, ПО является явным кандидатом на испытания в терапии рака. Это была наша первая цель, и результаты обнадеживают: 6 из 20 пациентов ответили на лечение, в основном за счет набора CD4 ⁺ клеток в очаг опухоли. Однако важно понимать механизм действия новых препаратов, а влияние ПО на лимфоциты практически неизвестно. Мы провели предварительное исследование, чтобы попытаться определить молекулярную основу его клинического эффекта.

Хотя ПО преимущественно связывается с миелоидными клетками, он также связывается с лимфоцитами, хотя и с более низким сродством (7). Поэтому мы изучили эффекты PO in vitro на три подмножества иммунных клеток, участвующих в противоопухолевых иммунных реакциях (10). Поскольку фармакология перорального приема в основном была неизвестна, мы использовали несколько концентраций. Более того, поскольку мы не знали, в какие функции может быть вовлечен PO, мы исследовали его активность в нескольких контекстах, т. е. активацию, созревание и пролиферацию, для каждого анализируемого типа клеток, т. е. NK, T и DC.

Хотя мы проанализировали только три HD, мы обнаружили, что PO был иммуногенным и наблюдал большую изменчивость: один дал относительно сильный ответ, один умеренный ответ, а третий в основном не реагировал. Это напоминало наше наблюдение у пациентов с раком молочной железы, у которых было ~ 30% ответивших. Следовательно, хотя цель этого исследования не заключалась в том, чтобы выявить процент пациентов, которые реагируют на лечение ПО, мы считаем, что наши результаты показывают, что эффект ПО зависит от пациента/донора. Этот относительно низкий процент пациентов, отвечающих на лечение, характерен для большинства иммунотерапевтических препаратов (28) и не исключает их использования, главным образом ввиду его низкой токсичности. Новые препараты обычно терпят неудачу в клиниках из-за слабого эффекта и/или высокой токсичности (29).). Процент «отвечающих» пациентов на лечение сильно варьируется. Это более заметно в иммунотерапии, поскольку клетка-мишень может модулировать или модулироваться другими или окружающей средой (28). Например, антитела, блокирующие взаимодействие PD-1/PD-L1, считаются одним из самых больших достижений в лечении рака за последние 20 лет. Однако эта терапия улучшает прогноз только у 50% пациентов с опухолями с лучшим ответом. Для опухолей с низким ответом процент снижается ниже 5%, даже если пациенты экспрессируют PD-L1 (28). Независимо от механизма действия и прямого действия ПО на лимфоциты примечательно, что этот препарат практически не токсичен для этих клеток в концентрациях до 100 мкг/мл, а для Т-клеток даже 500 мкг/мл. Это наблюдалось даже при лечении лимфоцитов в течение нескольких недель. Более того, он не влияет на активацию лимфоцитов in vitro . Таким образом, наши результаты in vitro и in vivo предполагают, что ПО является безопасным продуктом.

Наши результаты показывают, что ПО не оказывает «больших» эффектов на типы клеток и механизмы, которые мы исследовали. Обычно это наблюдается, когда адъюванты используются отдельно (30), и, хотя эффекты перорального приема невелики, они носят последовательный характер. Например, мы наблюдали эффективную активацию нескольких маркеров активации ДК при определенных концентрациях ПО (рис. 5), что коррелировало с лучшей активацией аллогенных Т-клеток (рис. 6). Следовательно, ДК явно активируются лучшими иммуногенными концентрациями ПО. Во-вторых, мы наблюдали, что пероральный прием значительно увеличивал размножение Т-клеток in vitro при двух более высоких концентрациях, в то время как размножение другой линии лимфоцитов, т. е. NK, не влияло или уменьшалось. Примечательно, что это коррелирует с рекрутированием CD4 ⁺ Т-клеток в место опухоли у пациентов с раком молочной железы.

Эффекты перорального приема не зависели от дозы. Это вынудило нас использовать несколько концентраций в различных условиях, чтобы выявить условия, демонстрирующие иммуногенность. На самом деле отсутствие дозозависимого эффекта не является чем-то необычным для иммунной системы, где чрезмерно сильная иммунная активация может привести к ингибированию клеток. В лимфоцитах двухфазные ответы зависят от фосфатазы CD45, которая дефосфорилирует ингибирующие остатки Src-киназ и приводит к экспансии и активации лимфоцитов. Однако сильная активация CD45 приводит к дефосфорилированию остатков, активирующих Src-киназы, что ингибирует активацию Т-клеток (31). Следовательно, чрезмерно сильные активирующие сигналы могут эффективно приводить к нарушению активации лимфоцитов. Кроме того, наивные и активированные лимфоциты экспрессируют разные изоформы CD45, обладающие различной активностью (22, 32). Следовательно, активированные и наивные лимфоциты по-разному реагируют на одни и те же стимулы.

Следовательно, клетки-мишени PO, которые мы представили здесь, могут объяснить переменный ответ на этот полиамин. Таким образом, хотя ПО показало свою клиническую ценность в нескольких ситуациях, будущая работа должна четко установить, какие больные раком могут получить пользу от лечения ПО, чтобы улучшить его клиническое применение.

Это первое исследование, демонстрирующее как клиническую, так и биологическую активность ПО в области иммунотерапии рака. В этом контексте очень интересно, что две пациентки, которые лучше реагировали на ПО, полный патологический ответ и частичный ответ, страдали тройным негативным раком молочной железы. Этот тип имеет плохой прогноз (33), и использование перорального приема может улучшить его.

Заявление о доступности данных

Все наборы данных, созданные для этого исследования, включены в статью/дополнительный материал.

Заявление об этике

Исследования с участием людей были рассмотрены и одобрены Н. Н. Блохина Российского онкологического научного центра в Москве. Пациенты/участники предоставили письменное информированное согласие на участие в этом исследовании.

Авторские вклады

CA, MC, PL-P, D-NV, YE, ED-L и Z-YL выполняют in vitro экспериментов. PL-P, JH, J-FR и MVi разработали эксперименты in vitro и написали рукопись. FS, OC, MVa, IV, YV и NT выполняют клиническую часть, включая сбор образцов и анализ ex vivo образцов от пациентов с раком молочной железы.

Финансирование

Работа выполнена частично при поддержке контракта между НПО Петровакс (Москва, Россия) и общественной структурой INSERM Франция. НПО «Петровакс» не участвовало в разработке дизайна исследования, сборе, анализе, интерпретации данных, написании данной статьи или принятии решения о представлении ее для публикации. Эта работа также была поддержана программой PRT-K 2018 (MVi; 2018-021) и Canceropole GSO Emergence (MVi; 2018/2019).).

Конфликт интересов

Авторы заявляют, что исследование проводилось в отсутствие каких-либо коммерческих или финансовых отношений, которые могли бы быть истолкованы как потенциальный конфликт интересов.

Дополнительный материал

Дополнительный материал к этой статье можно найти в Интернете по адресу: https://www.frontiersin.org/articles/10.3389/fimmu.2019.02693/full#supplementary-material

Ссылки

1. Kruger S , Ильмер М., Кобольд С., Кадилья Б.Л., Эндрес С., Орманнс С. и др. Достижения в иммунотерапии рака 2019- последние тенденции. J Exp Clin Cancer Res. (2019) 38:268. doi: 10.1186/s13046-019-1266-0

PubMed Abstract | Полный текст перекрестной ссылки | Google Scholar

2. Де Грегорио Э., Капрони Э., Ульмер Дж. Б. Вакцинные адъюванты: механизм действия. Фронт Иммунол. (2013) 4:214: doi: 10.3389/fimmu.2013.00214

PubMed Abstract | Полный текст перекрестной ссылки | Google Scholar

3. Боуэн В.С., Свривастава А.К., Батра Л., Барсумян Х., Ширван Х. Текущие проблемы разработки адъювантов противораковой вакцины. Вакцины Exp Rev. (2018) 17:207–15. doi: 10.1080/14760584.2018.1434000

PubMed Abstract | Полный текст перекрестной ссылки | Google Scholar

4. Пауэлл Б.С., Андрианов А.К., Фуско П.С. Полиионные вакцинные адъюванты: еще один взгляд на соли алюминия и полиэлектролиты. Вакцина Clin Exp Res. (2015) 4:23–45. doi: 10.7774/cevr.2015.4.1.23

PubMed Abstract | Полный текст перекрестной ссылки | Google Scholar

5. Кабанов В.А. От синтетических полиэлектролитов к полимерно-субъединичным вакцинам. Pure Appl Chem. (2004) 76:1659–77. doi: 10.1351/pac200476091659

Полный текст CrossRef | Google Scholar

6. Пружинец П., Кирун Н., Свейката А. Профиль безопасности полиоксидония в повседневной практике: результаты пострегистрационного исследования безопасности в Словакии. Иммунотерапия. (2018) 10:131–7. doi: 10.2217/imt-2017-0116

PubMed Abstract | Полный текст перекрестной ссылки | Google Scholar

7. Дьяконова В.А., Дамбаева С.В., Пинегин Б.В., Хаитов Р.М. Изучение взаимодействия иммуномодулятора полиоксидония с клетками иммунной системы человека. Int Immunopharmacol. (2004) 4:1615–23. doi: 10.1016/j.intimp.2004.07.015

PubMed Abstract | Полный текст перекрестной ссылки | Google Scholar

8. Дамбаева С.В., Мазуров Д.В., Голубева Н.М., Дьяконова В.А., Пинегин Б.В., Хаитов Р.М. Влияние полиоксидония на фагоцитарную активность лейкоцитов периферической крови человека. Расс Дж. Иммунол. (2003) 8:53–60.

Реферат PubMed | Google Scholar

9. Топтыгина А., Семикина Е., Алёшкин В. Влияние иммуностимулятора полиоксидония на цитокиновый профиль и антителообразование у детей, привитых вакциной Приорикс. Arch Physiol Biochem. (2012) 118:197–203. doi: 10.3109/13813455.2012.659669

PubMed Abstract | Полный текст перекрестной ссылки | Google Scholar

10. Fessenden TB, Duong E, Spranger S. Совместная работа: естественные клетки-киллеры на первом этапе эстафеты противоопухолевого иммунитета. J Иммунный рак. (2018) 6:67. doi: 10.1186/s40425-018-0380-4

PubMed Abstract | Полный текст перекрестной ссылки | Google Scholar

11. Уэббер С., Господарович М., Собин Л.Х., Виттекинд С., Грин Ф.Л., Мейсон М.Д. и соавт. Улучшение классификации TNM: результаты 10-летнего непрерывного обзора литературы. Int J Рак. (2014) 135:371–8. doi: 10.1002/ijc.28683

PubMed Abstract | Полный текст перекрестной ссылки | Google Scholar

12. Ермилова В.Д., Копосова Т.Л., Муравьева Н.И., Кузьмина З.В. Степень выраженности лечебного патоморфоза и характер изменения рецепторов эстрогенов и прогестерона после лучевой и химиотерапии рака молочной железы. Вопр Онкол. (1985) 31:69–73.

Реферат PubMed | Google Scholar

13. Семенова Н.А., Дыдыкина И.Ю., Дедерер Л.Ю., Тихомиров А.Г., Горбунова В.А., Лактионова К.П. Применение спектроскопии 1Н-ЯМР для прогнозирования эффективности неоадъювантной химиотерапии рака молочной железы. Bull Exp Biol Med. (2000) 130:701–4. doi: 10.1007/BF02682110

PubMed Abstract | Полный текст перекрестной ссылки | Google Scholar

14. Sanchez-Martinez D, Allende-Vega N, Orecchioni S, Talarico G, Cornillon A, Vo DN, et al. Экспансия аллогенных NK-клеток с эффективной антителозависимой клеточной цитотоксичностью против множественных опухолевых клеток. Тераностик. (2018) 8:3856–69. doi: 10.7150/thno.25149

CrossRef Full Text | Google Scholar

15. Vo DN, Alexia C, Allende-Vega N, Morschhauser F, Houot R, Menard C, et al. Активация NK-клеток и восстановление субпопуляций NK-клеток у пациентов с лимфомой после лечения обинутузумабом и леналидомидом. Онкоиммунология. (2018) 7:e1409322. doi: 10.1080/2162402X.2017.1409322

PubMed Abstract | Полный текст перекрестной ссылки | Google Scholar

16. Aguilo JI, Garaude J, Pardo J, Villalba M, Anel A. Протеинкиназа C-тета необходима для активации NK-клеток и контроля прогрессирования опухоли in vivo. Дж Иммунол. (2009) 182:1972–81. doi: 10.4049/jimmunol.0801820