Ранняя бластоциста: Развитие эмбрионов — Гинекологическая клиника Embio

Культивирование эмбрионов

После получения ооцитов (яйцеклеток) в результате пункции яичников и аспирации содержимого фолликулов, чашку с ооцитами помещают в инкубаторы для культивирования. Цель культивирования in vitro — культивирование гамет и эмбрионов в условиях, максимально приближенных к условиям in vivo.

Для обеспечения соответствующей питательной среды используются специальные коммерческие культуральные среды. Среды содержат определенные концентрации компонентов, которые оказались основными для развития человеческого эмбриона, а именно, глюкозу, забуференные солевые растворы, синтетический заменитель сыворотки, пенициллин и другие.

Однако физиологическое pH (7,2 — 7,3) и температура (37 °С) поддерживаются в основном инкубаторами, в которых проводят культивирование. Культуральная среда содержит бикарбонатную буферную систему, использующую газообразный диоксид углерода для поддержания рН. Инкубаторы устанавливают и калибруют соответствующим образом, чтобы обеспечить точную концентрацию CO2 и температурные условия.

Установлено, что пониженная концентрация О2 в камере инкубатора оказывает положительное влияние на развитие эмбрионов, особенно на поздних этапах культивирования (4-6 день). Снижение концентрации кислорода внутри камеры достигается подачей газообразного N2. Поэтому для культивирования эмбрионов в медицинском центре Интерсоно Медикавер Групп используют инкубаторы, имеющие опцию подачи азота и контроля уровня О2 внутри камеры.

Ежедневно эмбриологи мониторят температуру и концентрацию газов внутри инкубатора, а также наблюдают за развитием эмбрионов и вносят данные в Протокол культивирования.

Нормальным темпам развития эмбриона отвечает:

2 день культивирования – стадия 2-4 бластомеров;

3 день культивирования – стадия 6-8 бластомеров;

4 день культивирования – стадия 10-12 бластомеров, компактизации или морулы;

5 день культивирования – стадия морулы или бластоцисты;

6 день культивирования – бластоциста.

Оценку ранних эмбрионов (2-3 день культивирования) проводят по двум показателям — количеству клеток (эластомеров) и их качеству.

Категории качества ранних эмбрионов:

А — эмбрионы не содержат фрагментации (фрагментация — небольшие участки цитоплазмы, которые не содержат генетического материала), симметричные бластомеры;

В — эмбрионы содержат незначительное фрагментацию (до 25%), большинство эластомеров симметричные;

С — у эмбрионов выраженная фрагментация > 25%, бластомеры асимметричные;

D — фрагментация эмбрионов составляет более 50%, бластомеры асимметричны.

На 5-6 день культивирования эмбрион достигает стадии бластоцисты. Оценку бластоцисты проводят по трем показателям — степень зрелости бластоцисты, качество внутриклеточной массы (ВКМ), из которой будет формироваться сам эмбрион и качество трофектодермы (ТЕ), из которой будут формироваться плодные оболочки.

Степени зрелости бластоцист:

І — ранняя бластоциста. Бластоцель менее половины объема эмбриона;

II — полная бластоциста. Бластоцель полностью занимает объем эмбриона;

III – разросшаяся бластоциста (експандированная). Бластоцель становится больше и начинает истончаться зона пеллюцида;

IV — трофектодерма начинает проникать через зону пеллюцида (хетчинг)

V – вылупившаяся бластоциста покинула зону пеллюцида.

Качество ВКМ оценивается как:

А — плотная, с большим количеством клеток;

В – свободное группирование среднего количества клеток;

С — незначительное количество клеток.

Качество ТЕ оценивается как:

А — много клеток, которые формируют трофектодермальный слой;

В — немного клеток;

С — незначительное количество крупных клеток.

Качество перенесенных эмбрионов коррелирует с наступлением беременности. В частности, чем быстрее темпы дробления, тем выше шансы имплантации таких эмбрионов. Но речь идет только о вероятности имплантации. То есть имплантироваться может как эмбрион хорошего качества, так и эмбрион «плохого» качества. Однако шансы имплантироваться у эмбрионов хорошего качества значительно выше. Также стоит помнить, что, оценивая качество эмбриона, мы говорим только о его темпах развития и морфологию (внешний вид), а не о генетическом статусе эмбриона.

Ответы на вопросы от эмбриолога Синенко Виталия Владимировича

Расскажите пожалуйста о качестве эмбрионов после разморозки.

Криоконсервация проводится по специальному протоколу и не имеет пагубного влияния на качество эмбрионов. Замороженные эмбрионы могут храниться более 10 лет, без каких-либо изменений. На сегодня мы можем видеть реальные факты рождения абсолютно здоровых детей, чьи эмбрионы находились в крио банке несколько лет. На сегодня это один из лучших методов хранения как эмбрионов, так и яйцеклеток, и сперматозоидов.

По сколько эмбрионов ваша клиника морозит в одной палочке?

«Палочка» или специальная соломина (крио носитель) служит специально для хранения эмбрионов в жидком азоте. Мы морозим 1 эмбрион на одну соломину. В случае, если есть необходимость, лечащий врач-репродуктолог оговаривает вариант заморозки двух эмбрионов на один крио носитель.

Как хранятся эмбрионы, чтобы потом не все размораживать?

Как было сказано выше эмбрионы хранятся на крио носителях по одному или по два, поэтому для каждого протокола размораживается только необходимое количество, чаще всего 1 эмбрион. Остальные эмбрионы остаются в крио хранилище нетронутыми.

Замороженные эмбрионы можно проверить?

Качество эмбриона проверяется до и после заморозки. В крио состоянии это сделать невозможно.

Какой классности должен быть эмбрион для имплантации?

Каждый эмбрион оценивается по нескольким факторам. И уже из их совокупности определяется, насколько хороший эмбрион мы имеем. Учитывают такие факторы как:

— Динамика развития эмбриона каждые сутки.

— Степень зрелости бластоцисты.

— Внутриклеточная масса (ВКМ)

— Трофэктодермальный слой.

Для имплантации выбирают эмбрионы максимально хорошего качества, так как от этого во многом зависит шанс наступления беременности.

Однако, для успешной имплантации и дальнейшей беременности, существует множество факторов: начиная от правильности стимуляции, здоровья родителей и заканчивая специальной поддержкой после переноса эмбриона.  Поэтому, даже при среднем качестве эмбриона, вполне возможно получить желаемую беременность и родить здорового малыша.

Скольки дневные эмбрионы вы переносите и более высокие шансы по какими эмбрионами?

В основном мы переносим 5-суточные эмбрионы. Однако, бывают случаи, когда к переносу рекомендованы эмбрионы на стадии дробления (2-3 суточные).

Как показывают исследования, максимальный процент наступления беременности, а также рождения детей дает перенос на стадии бластоцисты (5 сутки)

Эмбрионы по классности как различаются?

На пятые сутки после оплодотворения образуется бластоциста. Она характеризуется наличием ВКМ (внутриклеточная масса) и окружающей ее клетки — трофэктодермы.

Бластоциста оценивается нескольким параметрам:

Степени зрелости:

— Первая  степень — ранняя бластоциста, полость бластоцисты составляет  менее чем половину объема эмбриона

— Вторая степень – когда полость бластоцисты составляет больше половины объема эмбриона.

— Третья степень  или полная бластоциста. Полость занимает весь объем эмбриона.

— Четвертая  степень  — расширенная бластоциста. Полость бластоцисты становится больше и начинает истончаться ZP (Zona Pellucida или блестящая оболочка).

— Пятая степень – стадия, когда трофэктодерма начинает проникать через ZP.

— Шестая степень — вылупившаяся бластоциста, покинувшая ZP.

Качеству внутриклеточной массы:

— класс А — плотно упакованная с большим количеством клеток.

— класс В — более свободная группировка среднего количества клеток.

— класс С — незначительное количество клеток

Качеству трофэктодермы:

— класс А много клеток, формирующих трофэктодерму.

— класс В немного клеток.

— класс С незначительное количество больших клеток.

Исходя из совокупности оценок формируется общая оценка качества эмбриона

В эмбриолисте вы описываете развитие посуточно?

Развитие эмбрионов описываем в листе стимуляции, где даем полную характеристику каждого дня развития от начала оплодотворения до криоконсервации.

Несет ли какие-то последствия биопсия эмбриона на генетику?

Биопсия эмбриона проводится таким образом, что не несет пагубного влияния на эмбрион. Для анализа необходимо получить всего несколько клеток, при этом, это клетки трофэктодермы – поверхностного слоя, не задевая ВКМ (внутриклеточная масса) процедура проводится опытными эмбриологами, на высококлассном оборудовании, с фиксацией всех манипуляций.

Опасно ли делать генетический анализ? Несет ли какие-то последствия биопсия эмбриона на генетику?

Генетический анализ делать абсолютно безопасно. После биопсии никаких изменений или генетических сбоев не происходит.

Возможно ли при ЭКО, получить двойню разных полов?

Возможно два варианта развития ситуации. Чаще всего, при переносе двух бластоцист, могут развиться два плода. Что дает возможность выносить и родить двойню разных полов.

Второй случай – при переносе одной бластоцисты, во время беременности происходит процесс деления и у вас рождаются однояйцевые близнецы. Но такая вероятность достаточно мала. Так что, если был выполнен селективный перенос одного эмбриона, у вас родиться один малыш.

Тест контакт спермы и с цервикальной слизью информативен? На какой день делать это анализ?

Как известно, чтобы произошло оплодотворение сперматозоиды должны преодолеть огромный путь через влагалище, цервикальный канал, полость матки и маточные трубы.

Тест-контакт на совместимость позволяет определить способность сперматозоидов проходить через цервикальную слизь женщины. В дни овуляции слизь в цервикальном канале меняет свою консистенцию для лучшего прохождения сперматозоидов.

Когда тест положительный, наблюдается проникновение сперматозоидов в слизь и дальнейшее сохранение подвижности через 20-30 минут. Если проникновение не происходит, либо происходит единичное проникновение и дальнейшее обездвиживание сперматозоидов, то тест оценивают, как отрицательный.

Наиболее удачным и благоприятным считается период с 9 дня менструального цикла (при 28-дневном цикле).

Отличие ИКСИ от ПИКСИ?

Во время проведения процедуры ИКСИ эмбриолог имеет возможность селективно отбирать сперматозоиды опираясь на морфологические характеристики (по внешнему виду). А при процедуре ПИКСИ отбор сперматозоидов происходит при помощи проведения специального анализа, что дает возможность определить степень зрелости сперматозоида. Проведение процедуры ПИКСИ дает больший процент выхода бластоцист.

Кто следит за заморозкой яйцеклеток? Если на 5 лет.  Если есть срок годности яйцеклеток при заморозке?

Замораживают яйцеклетки эмбриолог, четко следуя протоколу, что дает гарантию сохранности ооцитов на долгое время. Обычно сроком годности выбирают до 5 лет, в редких случаях до 7 лет.

Где хранятся при заморозке яйцеклетки?

Яйцеклетки хранятся на крионосителях которые помещены в жидкий азот. Сосуд Дьюара с биоматериалом находится непосредственно у нас в Клинике, под контролем эмбриологов.

 

Бластоциста: определение, стадия и имплантация

Обзор

Что такое бластоциста?

Бластоциста представляет собой скопление делящихся клеток, образованных оплодотворенной яйцеклеткой. Это ранняя стадия эмбриона. Бластоциста является одним из многих шагов, ведущих к беременности.

Бластоциста образуется примерно через пять-шесть дней после оплодотворения яйцеклетки сперматозоидом. Слои клеток в бластоцисте делятся и расходятся. Со временем они становятся структурами, которые защищают и питают развивающийся плод.

Стадия бластоцисты оплодотворенной яйцеклетки особенно важна для экстракорпорального оплодотворения (ЭКО). ЭКО — это процесс создания эмбриона вне тела рожающего родителя, чтобы помочь с беременностью.

Какие этапы оплодотворения и эмбрионального развития?

Чтобы понять роль бластоцисты, полезно знать, как происходят овуляция, зачатие и беременность.

Примерно через 14 дней после начала менструального цикла яичники выделяют одну яйцеклетку (яйцеклетку). Яйцеклетка попадает в одну из фаллопиевых труб, где ждет оплодотворения сперматозоидом.

Если оплодотворения не происходит, яйцеклетка перемещается в их матку, где она покидает их тело во время следующего менструального цикла. Но если оплодотворение все же происходит, их оплодотворенная яйцеклетка становится зиготой, единственной клеткой с генами обоих родителей.

Зигота проходит через фаллопиевы трубы в матку примерно через три-пять дней после оплодотворения. Клетка зиготы непрерывно делится, в конечном итоге образуя полый шар клеток, называемый бластоцистой.

Бластоциста остается в матке в течение нескольких дней, прежде чем имплантируется во внутреннюю оболочку стенки матки (эндометрий). Он продолжает создавать новые клетки, которые разделяются на слои. Примерно через 10–12 дней после оплодотворения бластоциста превращается в эмбрион. Он остается эмбрионом примерно до девяти недель после имплантации, после чего становится плодом.

Функция

Каково назначение бластоцисты?

Стадия бластоцисты является чрезвычайно важной частью эмбрионального и внутриутробного развития. Если бластоциста не имплантируется в эндометрий человека, беременность не наступит.

Чтобы произошла имплантация, гормоны запускают процесс, называемый вылуплением. Бластоциста сбрасывает свою прозрачную внешнюю оболочку. Вылупление происходит через один-три дня после попадания бластоцисты в матку.

Затем клетки внешнего слоя бластоцисты прикрепляются к внешнему слою своего эндометрия. Они выделяют липкий белок, называемый L-селектин, который связывается с веществами в их эндометрии. Эти внешние клетки в конечном итоге становятся плодом.

Клетки внутреннего слоя бластоцисты имплантируются глубже в эндометрий. Эти клетки становятся плацентой, которая переносит кислород и питательные вещества к развивающемуся плоду. Некоторые плацентарные клетки также образуют амниотический мешок. Амниотический мешок содержит прозрачную защитную жидкость, которая окружает плод по мере его развития.

Где происходит имплантация бластоцисты?

Имплантация обычно происходит в верхней части матки человека. В редких случаях бластоциста никогда не попадает в матку. Вместо этого он имплантируется вне матки (обычно в маточной трубе), создавая внематочную беременность.

Каковы признаки имплантации бластоцисты?

Около трети людей во время имплантации испытывают легкое кровотечение или кровянистые выделения. Пятна могут быть первым признаком беременности. Кровь имеет тенденцию быть светло-розовой или темно-коричневой и держится от нескольких часов до нескольких дней, поэтому она не будет похожа на вашу менструацию.

Другие признаки могут включать:

• Болезненность молочных желез.
• Головные боли.
• Боль в пояснице.
• Легкие спазмы, которые обычно не так болезненны, как менструальные спазмы (дисменорея).
• Перепады настроения.
• Тошнота.

Почему бластоциста так важна для ЭКО?

Во время ЭКО медицинские работники оценивают и классифицируют бластоцисты в лаборатории, чтобы определить, какие эмбрионы с наибольшей вероятностью приведут к беременности. Через пять или шесть дней после оплодотворения бластоцисты идеально подходят для переноса в матку во время ЭКО. Медицинские работники могут классифицировать бластоцисты на основе их зрелости, формы, количества клеток и плотности.

Анатомия

Как устроена бластоциста?

Бластоциста представляет собой полый клубок клеток. Клетки образуют два слоя. Толщина внутреннего слоя составляет от трех до четырех клеток, а толщина внешнего слоя — около одной клетки.

Клетки бластоцисты быстро делятся. Зрелая бластоциста может содержать от 200 до 300 клеток.

Условия и расстройства

Могут ли бластоцисты привести к выкидышу?

Бластоцисты содержат хромосомы. Если есть хромосомные аномалии, такие как дополнительная хромосома или хромосома, которая дуплицирована или удалена, бластоциста обычно не имплантируется в ваш эндометрий. Неудачная имплантация может привести к раннему выкидышу примерно через пять недель, что часто называют «химической беременностью». Если у вас не было задержки менструации и вы не делали тест на беременность, вы можете даже не знать, что у вас была биохимическая беременность.

Если бластоциста имплантируется и приводит к успешной беременности, всегда существует риск того, что у ребенка могут быть хромосомные нарушения, такие как:

• Синдром Дауна .
• Синдром Клайнфельтера .
• Синдром Тернера .

Как часто бластоцисты не имплантируются?

Неспособность имплантации бластоцисты является одной из наиболее частых причин неудачного лечения ЭКО. Это также является причиной около 75% ранних выкидышей.

Около половины всех ранних выкидышей являются результатом хромосомных аномалий у эмбрионов.

Каковы симптомы неудачной имплантации?

Вы можете не знать, не имплантируется ли бластоциста. У многих людей нет никаких симптомов. У некоторых возникают легкие кровянистые выделения или кровотечения. Поскольку эти симптомы аналогичны симптомам успешной имплантации, важно поговорить со своим лечащим врачом, чтобы он мог провести тест на беременность.

Можно ли диагностировать хромосомные аномалии на стадии бластоцисты?

Во время ЭКО медицинские работники могут проводить преимплантационное генетическое тестирование (PGT). Они берут клетки эмбриона на стадии бластоцисты, чтобы проверить наличие хромосомных аномалий. Они проводят тесты в лаборатории, чтобы определить, какие эмбрионы здоровы и имеют наибольшие шансы на имплантацию после переноса в матку.

Если вы забеременели естественным путем, пренатальное тестирование на хромосомные аномалии проводится после стадии бластоцисты. Самые ранние тесты обычно проводятся на 9-10 неделе беременности.

уход

Могу ли я снизить риск рождения эмбриона с хромосомными аномалиями?

Многие факторы риска хромосомных аномалий невозможно предотвратить, например:

• Возраст старше 35 лет.
• Наличие в семье хромосомных заболеваний.
• Прошлые выкидыши или рождение ребенка с хромосомным отклонением.

Если вы находитесь в группе высокого риска из-за любого из этих факторов, поговорите со своим лечащим врачом и консультантом по генетике, если вы планируете забеременеть.

Вы можете снизить риск повреждения хромосом у эмбриона, ведя здоровый образ жизни до и во время беременности:

• Избегайте воздействия токсинов.
• Не злоупотребляйте наркотиками или алкоголем.

Записка из Кливлендской клиники

Бластоцисты являются частью раннего эмбрионального развития и играют решающую роль в успешном течении беременности. Бластоцисты, которые не развиваются нормально или не имплантируются в матку, не приведут к беременности. Если вам предстоит ЭКО, ваш поставщик медицинских услуг может проверить бластоцисты, чтобы убедиться, что они здоровы. Вы можете испытывать легкое кровотечение или легкие спазмы на очень ранних сроках беременности, когда бластоцисты формируются и прикрепляются к матке. Но немедленно позвоните своему лечащему врачу, если заметите более серьезные симптомы.

Эмбрион на стадии бластоцисты | Перенос эмбрионов и сортировка бластоцист

Во время зачатия яйцеклетка оплодотворяется сперматозоидом в маточной трубе и образуется зародыш.

Оплодотворение обычно происходит в части маточная труба, ближайшая к яичнику, и зародыш продолжает развиваться (посредством клеточного деления), когда он движется обратно по трубке к матка. Эмбрион обычно достигает полости матки около 5 или 6 дней после оплодотворения. В это время это бластоциста, или эмбрион состоит примерно из сотни клеток.

В В цикле ЭКО бластоциста формируется в системе культивирования в лаборатории. Яйца извлеченный из яичников женщины, оплодотворенный спермой, и эмбрион создано. Эмбрион делится и умножает свои клетки в течение 5-6 дней. превратиться в бластоцисту. Эмбрионы, дожившие до этой стадии развития имеют высокий имплантационный потенциал после переноса в полость матки.

Перенос эмбрионов

Разрешение эмбрионам расти с 3-го дня (стадия дробления) до 5/6-го дня (бластоциста) позволяет нам выбрать эмбрионы с наибольшим шансом на успех. основная польза для пациента от использования культуры эмбрионов на стадии бластоцисты заключается в том, что меньше эмбрионов нужно переносить пациенту, потому что каждый Эмбрион 5-го дня имеет больше шансов имплантироваться, чем эмбрион 3-го дня.

Перенос меньшего количества эмбрионов значительно снижает риск беременности двойней или тройней и связанный с этим риск. опасности для матери и ребенка. Кроме того, эмбрионы, которые продолжают растут до стадии бластоцисты, имеют меньшую скорость хромосомные ошибки и, следовательно, более высокие шансы на рождение здорового ребенка.

Классификация бластоцист

Расширение

Размеры бластоцист измеряются по шкале от 1 до 6. Ранние бластоцисты, с меньшим количеством ячеек, оцениваются как 1 или 2. Поскольку у них меньше ячеек и плохо выраженная внутренняя клеточная масса и трофэктодерма (см. ниже), они не получают буквенных оценок, как более продвинутые бластоцисты. Бластоцисты, которые находятся дальше в развитии, получают расширение степени от 3 до 6, где 6 указывает на эмбрион, который полностью вылупившиеся из zona pellucida (раковины).

Внутренняя масса ячейки

Внутренняя клеточная масса представляет собой совокупность клеток, предназначенных дифференцироваться в плод/ребенок. Этой группе клеток присвоена буква степени A, B или C. Оценки A и B наиболее желательны и отражают большое количество клеток с нормальным внешним видом. Поэтому только те клетки категории А или В выбираются криоконсервация.

Трофэктодерма

Трофэктодерма представляет собой совокупность клеток, которые станут плаценты и ответственны за начальную инвазию и имплантацию эмбриона в слизистую оболочку матки. Это также дает буквенные оценки из A, B или C. Как и в случае с внутренней клеточной массой, сорта A и B являются наиболее желательно.

Хотя эмбрионы классифицируются по степени их развития, важно помнить, что оценка не всегда отражает истинную потенциал эмбриона. В частности, есть эмбрионы, которые получают меньше чем идеальные сорта, которые часто рождают красивых детей. Оценка эмбрионов помогает нам определить, сколько эмбрионов нужно перенести. Важно помнить что оценка эмбрионов является субъективной и что программы ЭКО могут несколько отличаться при выставлении оценок эмбрионам.