В сперме нити: Основные параметры базовой спермограммы

Основные параметры базовой спермограммы

Сперма – среда, в которой живут сперматозоиды. Они занимают 5% её объёма. Всё остальное – это питательные вещества и защитные соединения, которые обеспечивают им комфортные условия для жизни, помогают достичь яйцеклетки. Изменение состава эякулята отражается на качестве половых клеток, их оплодотворяющей способности.

Базовая спермограмма оценивает биохимические и микроскопические показатели спермы:

Время разжижения. Норма – от 10 до 30 минут. Если на разжижение уходит более 60 минут, сперма считается слишком густой и вязкой. Вязкость спермы определяют через 60 минут после получения образца для исследования. В биоматериал погружают стеклянную палочку, которую затем поднимают и замеряют длину свисающей с кончика нити. Нормой считается 1-2 см. В случае повышенной вязкости имеет место синдром вязкой спермы или вискозипатия спермы.

Вязкость спермы и время ее разжижения являются взаимосвязанными параметрами.

В момент семяизвержения в сперму выбрасывается сок предстательной железы, что приводит к разжижению эякулята. Попадая в половые пути женщины, он густеет, а затем опять разжижается, тем самым обеспечивая попадание сперматозоидов в маточные трубы. Повышенная вязкость спермы препятствует движению спермиев. Причиной вискозипатии может стать длительное воздержание от половых контактов. Если же эякуляция происходит слишком часто, то вязкость спермы снижается. При этом сокращается число сперматозоидов, среди них начинают преобладать незрелые формы. Поэтому, в период попыток зачать ребёнка лучше придерживаться установленной нормы — 3-4 эякуляции в неделю.

Объем спермы в норме колеблется в пределах 2-6 мл. Отклонение в меньшую сторону от нормы (микроспермия) происходит по причине недостаточной функции придаточных половых желёз. Объём свыше нормы указывает на возможный воспалительный процесс в придаточных половых железах.

Запах спермы. Выраженный резкий неприятный запах может указывать на патологию. Гнилостный говорит о воспалительном процессе в области половых органов.

Цвет спермы считается нормальным, если он белый с сероватым или желтоватым оттенком. Чем прозрачнее сперма, тем меньше в ней сперматозоидов и наоборот. Поэтому, фертильная сперма мутная. Если цвет спермы красноватый или коричневый, это свидетельствует о повышенной содержании эритроцитов. В этом случае говорят о гемоспермии. Причиной попадания крови в эякулят могут быть травмы, воспаления, опухоли, в т.ч. злокачественные новообразования. Зеленоватый оттенок сперме придают лейкоциты – их появление говорит о наличии воспаления.

Уровень кислотности (pH) эякулята в норме колеблется в пределах 7,2-8,0. Такая слабощелочная среда позволяет нейтрализовать кислотность влагалища и способствует продвижению сперматозоидов в половых путях женщины. Если pН выше нормы (щелочная среда), то можно предполагать воспалительный процесс или инфекцию.

Отклонение pH в меньшую сторону (кислотная среда), приводит к снижению подвижности и жизнеспособности спермиев. Заниженный pH спермы может быть на фоне нарушения проходимости семямыводящих путей, патологии развития семенных пузырьков, попадания мочи в эякулят и др.

Лейкоциты в сперме в количестве 1 млн на 1 мл – норма для здорового мужчины. Если их больше, то имеет место «пиоспермия» (лейкоспермия). Данное заключение спермограммы не только указывает на воспалительный процесс. При лейкоспермии страдает качество сперматозоидов.

Лейкоциты продуцируют свободные радикалы (активные формы кислорода). Атакуя вредоносные клетки, они параллельно разрушают мембраны сперматозоидов. Последние при этом начинают испытывать оксидативный стресс. В результате снижается их активность, происходит фрагментация ДНК в головке, повреждаются рецепторы, отвечающие за контакт с яйцеклеткой, нарушается акросомная реакция — сперматозоиды не могут растворить оболочку яйцеклетки и оплодотворить её.

Оксидативный стресс в 30-80% случаев является причиной бесплодного брака

Эритроциты в сперме (гемоспермия) – отклонение от нормы, хотя негативного влияния на сперматозоиды они не оказывают. Гемоспермия указывает на различные патологии – это могут быть микротравмы, урогенитальные инфекции, хронический простатит, наличие камней в предстательной железе, опухоли. У пациентов с гемоспермией в 14% случаев обнаруживается онкология.

Клетки сперматогенеза. Сперматогенез – это процесс формирования сперматозоидов. Ежедневно их образуется около двухсот миллионов из клеток-предшественников, которых в норме должно быть не более 2-5 млн на 1 мл. (0,5-2% к общему числу сперматозоидов). Превышение нормы наблюдается при секреторной форме мужского бесплодия, при которой яички не вырабатывают достаточного количества зрелых мужских половых клеток.

Клетки сперматогенеза имеют значение для преодоления мужского бесплодия методами вспомогательных репродуктивных технологий (ВРТ). При отсутствии в эякуляте нормальных сперматозоидов из ткани яичка извлекают клетки-предшественники последних стадий сперматогенеза. Их применение в процедуре ИКСИ даёт шанс на получение беременности.

Сегодня учёные работают над искусственным развитием сперматозоидов из полученных клеток сперматогенеза у бесплодных мужчин. Проводятся и такие смелые эксперименты как получение клеток раннего сперматогенеза из клеток кожи.

Агглютинация означает склеивание сперматозоидов между собой, в результате чего снижается их подвижность. В норме агглютинация отсутствует. В противном случае есть повод предполагать нарушение со стороны иммунной системы или воспалительный процесс. Агглютинация отрицательно сказывается на качестве сперматозоидов, что может привести к генетическим патологиям плода.

Агрегация — скопление сперматозоидов в результате их склеиваются с другими составляющими эякулята. Это могут быть клетки эпителия, макрофаги, комки слизи, мёртвые клетки. Возникает на фоне повышенной вязкости эякулята, что является следствием хронического воспаления внутренних половых органов мужчины.

Липоидные тельца или лецитиновые зёрна – неклеточные соединения. Как продукт секреции предстательной железы, они присутствуют в её соке. Сокращение их количества наблюдается при простатите. Отсутствие липоидных телец может говорить о длительном воспалительном процессе или о закупорке протоков предстательной железы, что случается при абсцессе или появления камней в простате.

Роль лецитиновых зёрен в сперме до конца не изучена. Есть мнение, что без них шансы на оплодотворение яйцеклетки снижаются. Число липоидных телец возрастает при застое секрета предстательной железы в результате длительного воздержания. При разрушении лецитиновых зёрен освобождается холин. Это вещество, накапливаясь в тканях предстательной железы, может спровоцировать образование раковой опухоли. Холин также отрицательно действует на сперматозоиды.

Слизь в здоровом эякуляте отсутствует. Её появление приводит к снижению активности мужских половых клеток (сперматозоидов), в результате чего значительно снижается их способность к оплодотворению и возможность зачатия ребенка естественным путем. Слизь в сперме может быть результатом длительного воздержания, следствием нарушения функции простаты, воспалительного процесса, инфекции, травмы, доброкачественной и злокачественной опухоли.

Концентрация сперматозоидов в норме составляет 15 и более млн на 1 мл.

Доля прогрессивно-подвижных форм сперматозоидов в норме — более 38%. Определяет их тест на жизнеспособность

Антиспермальные антитела в сперме — отклонение от нормы. Они казывают на возможное аутоиммунное бесплодие. Выявить их позволяет особый анализ — Мар-тест

Соотношение внешне-нормальных сперматозоидов и аномальных  — 14%, согласно строгим критериям Крюгера. Морфология по Крюгеру  является дополнительным анализом к базовой спермограмме.

Сперма. Нити — Вопрос урологу

Если вы не нашли нужной информации среди ответов на этот вопрос, или же ваша проблема немного отличается от представленной, попробуйте задать дополнительный вопрос врачу на этой же странице, если он будет по теме основного вопроса. Вы также можете задать новый вопрос, и через некоторое время наши врачи на него ответят. Это бесплатно. Также можете поискать нужную информацию в похожих вопросах на этой странице или через страницу поиска по сайту. Мы будем очень благодарны, если Вы порекомендуете нас своим друзьям в социальных сетях.

Медпортал 03online.com осуществляет медконсультации в режиме переписки с врачами на сайте. Здесь вы получаете ответы от реальных практикующих специалистов в своей области. В настоящий момент на сайте можно получить консультацию по 73 направлениям: специалиста COVID-19, аллерголога, анестезиолога-реаниматолога, венеролога, гастроэнтеролога, гематолога, генетика, гепатолога, гериатра, гинеколога, гинеколога-эндокринолога, гомеопата, дерматолога, детского гастроэнтеролога, детского гинеколога, детского дерматолога, детского инфекциониста, детского кардиолога, детского лора, детского невролога, детского нефролога, детского офтальмолога, детского психолога, детского пульмонолога, детского ревматолога, детского уролога, детского хирурга, детского эндокринолога, дефектолога, диетолога, иммунолога, инфекциониста, кардиолога, клинического психолога, косметолога, липидолога, логопеда, лора, маммолога, медицинского юриста, нарколога, невропатолога, нейрохирурга, неонатолога, нефролога, нутрициолога, онколога, онкоуролога, ортопеда-травматолога, офтальмолога, паразитолога, педиатра, пластического хирурга, подолога, проктолога, психиатра, психолога, пульмонолога, ревматолога, рентгенолога, репродуктолога, сексолога-андролога, стоматолога, трихолога, уролога, фармацевта, физиотерапевта, фитотерапевта, флеболога, фтизиатра, хирурга, эндокринолога.

Мы отвечаем на 97.47% вопросов.

Оставайтесь с нами и будьте здоровы!

Спермограмма

Спермограмма (от др.-греч. σπέρμα — семя и γράμμα — запись) — анализ эякулята (спермы), используемый в медицине для установления фертильности мужчины и выявления возможных заболеваний половой системы. Спермограмму назначают при жалобах супружеской пары на бесплодие, также спермограмма показана донорамспермы и людям, планирующим криоконсервацию спермы.

Исследуемые характеристики при анализе эякулята

Основной составляющей частью спермограммы является микроскопический анализ эякулята, при котором определяют характеристики клеточных элементов спермы, а именно: количество сперматозоидов, подвижность сперматозоидов, морфологические характеристики сперматозоидов, количество и типы лейкоцитов, количество и типы незрелых клеток сперматогенеза и пр. Кроме того, обязательно фиксируются макроскопические параметры эякулята: объем спермы, цвет, время разжижения и вязкость эякулята, pH.

Иногда дополнительно проводят биохимический анализ эякулята, при котором наиболее часто исследуют содержание в сперме фруктозы, цинка, альфа-глюкозидазы, L-карнитина.

Параметры нормального эякулята

Представления о том, какими характеристиками обладает эякулят фертильного мужчины, менялись с течением времени. С повышением качества и количества исследований в разделе мужского бесплодия, пересматриваются и уточняются данные по сперматогенезу. Принято считать, что общая тенденция состоит в «ослаблении» норм фертильного эякулята. Предложения разных авторов по нормам объема эякулята, концентрации и подвижности сперматозоидов представлены в таблице

Предложены следующие нормативные показатели фертильного эякулята:

ВОЗ не дает специальных рекомендаций относительно нормы количества сперматозоидов с нормальной морфологией, указывая на то обстоятельство, что исследования нормативных значений сперматозоидов находятся пока в стадии проведения.

Нормы ВОЗ 2010 года

В 2010 году Всемирная Организация Здравоохранения (ВОЗ) внесла новые изменения в референсные значения показателей эякулята, изменив методику его обработки и исследования. В последнем, 5 издании «WHO laboratory manual for the examination and processing of human semen», изменены нормы количества и подвижности сперматозоидов, количества нормальных форм сперматозоидов. Так, например, упразднена классификация подвижных спермиев: по группам а, b, c, d. Вместо этого предлагается классификация сперматозоидов с прогрессивным движением, непрогрессивным движением и неподвижные.

Ниже приводятся нормы показателей эякулята, согласно новейшим рекомендациям ВОЗ 2010 года:

Патологические состояния спермы

Эякулят, соответствующий принятым нормативным значениям, называют нормальным и состояние этого эякулята обозначают термином «нормоспермия», или «нормозооспермия».

ВОЗ предлагает следующие термины для описания патологических состояний эякулята:

• Олигозооспермия — концентрация сперматозоидов ниже нормативного значения
• Астенозооспермия — подвижность сперматозоидов ниже нормативного значения
• Тератозооспермия — морфология сперматозоидов ниже нормативного значения
• Азооспермия — отсутствие сперматозоидов в эякуляте
• Аспермия — отсутствие эякулята (в таком значении соответствует термину «анэякуляция», но некоторые специалисты используют термин «аспермия» для описания эякулята, в котором отсутствуют не только сперматозоиды, но и незрелые клетки сперматогенеза)

Термины «олигозооспермия», «астенозооспермия» и «тератозооспермия» при наличии соответствующих отклонений в эякуляте могут быть объединены в одно слово, например: «олигоастенотератозооспермия», «астенотератозооспермия» и т.  п.

Кроме того, распространены следующие термины:

• олигоспермия — объем эякулята ниже нормативного значения
• лейкоцитоспермия, так же лейкоспермия, так же пиоспермия — концентрация лейкоцитов выше нормативного значения

Иногда можно встретить следующие термины:

• акиноспермия (акинозооспермия) — полная неподвижность сперматозоидов,
• некроспермия (некрозооспермия) — отсутствие живых сперматозоидов в эякуляте,
• криптоспермия (криптозооспермия) — предельно малое количество сперматозоидов, которые могут быть обнаружены в эякуляте с большим трудом, после центрифугирования спермы.
• гемоспермия — присутствие крови (эритроцитов) в эякуляте.

Правила проведения анализа эякулята

Условия получения эякулята

Мужчинам перед сдачей спермы для анализа рекомендовано воздержание от половой жизни и мастурбации в течение 2-7 дней. Этот период рекомендован для стандартизации условий проведения анализа, для того чтобы можно было сравнивать результаты, полученные в разных лабораториях. Также обычно рекомендуют за 2-5 дней избегать чрезмерного употребления крепких спиртных напитков (хотя влияние алкоголя на качество спермы в этот период не показано). Также в течение нескольких дней до анализа следует избегать посещения саун, парных, термальных ванн и прочих помещений с очень высокой температурой, так как высокая температура снижает подвижность сперматозоидов.

Наиболее распространенным способом получения спермы для анализа является мастурбация. Этот метод рекомендован ВОЗ. Иные методы имеют недостатки. К ним относятся: прерванный половой акт и использование специального медицинского презерватива без смазки. Эякулят получают в посуду, предложенную соответствующим медицинским учреждением. Как правило, используют специальные стерильные стаканчики для сбора жидких биологических выделений (моча, кал). Возможно получение эякулята вне медицинского учреждения с последующей транспортировкой.

Время разжижения эякулята и вязкость

Нормальная сперма сразу после эякуляции представляет собой коагулят, или попросту вязкую жидкость. С течением некоторого времени сперма становится жидкой. Этот период времени называют «время разжижения». Обычно эякулят разжижается в течение 15-60 минут. Если эякулят не разжижается в течение 1 часа, то как правило, он уже не разжижается вовсе.

Разжижение эякулята определяют по так называемой «длине нити». Стеклянной или пластиковой палочкой (пипеткой) касаются эякулята и поднимают палочку над поверхностью эякулята, если за палочкой тянется «нить» более 2 см, то эякулят не разжижен. Для определения «длины нити» в современной медицине чаще пользуются выпусканием эякулята из 5 мл серологической пипетки. «Длина нити» характеризует параметр «вязкость». Вязкость и время разжижения — связанные параметры.

Вязкость сперме придает гликопротеин семеногелин, который образуется в семенных пузырьках. Функции семеногелина до конца не известны, предполагается, что он связывается с лигандами на поверхности сперматозоидов и поддерживает их в неактивном состоянии. Во время эякуляции к сперматозоидам и соку семенных пузырьков подмешивается сок предстательной железы, который содержит так называемый «простатический специфический антиген». Этот протеолитический фермент разрушает семеногелин, что приводит к разжижению спермы и предположительно переводит сперматозоиды в активное состояние (наряду с прочими факторами). Неразжижение эякулята указывает на дисфункцию предстательной железы.

Поскольку повышенная вязкость эякулята может повлиять на достоверность микроскопического анализа, то не разжижившийся в течение 1 часа эякулят следует искусственно разжижить с помощью протеолитических ферментов (например, фармакопейного трипсина).

Объем эякулята

Объем эякулята обычно измеряют с помощью градуированной серологической пипетки (одновременно определяют вязкость). В большинстве лабораторий объем эякулята менее 2 мл считают не соответствующим норме, состояние такого эякулята характеризуют как «олигоспермия». Основной объем эякуляту придают сок семенных пузырьков (около двух третей объема) и сок предстательной железы (около одной трети объема). Недостаточность объема эякулята может быть вызвана ретроградной эякуляцией, дисфункцией, гипоплазией семенных пузырьков, дисфункцией предстательной железы, гипогонадизмом, непроходимостью (полной или частичной) семявыбрасывающих протоков, коротким периодом воздержания от половой жизни перед сдачей спермы для анализа.

Кислотность (pH) эякулята

Кислотность эякулята определяют после разжижения с помощью индикаторной бумаги или pH-метра. В качестве нормального показателя ВОЗ рекомендует значение pH не менее 7,2. Эякулят большинства мужчин имеет pH 7,8-8,0.

Цвет и запах эякулята

Цвет эякулята в современной медицине не имеет серьёзного диагностического значения, его фиксация на бланке спермограммы — дань традиции. По традиционным представлениям нормальный эякулят имеет «беловато-сероватый» цвет, иногда его характеризуют как «опалесцирующий», «мутно-белый». Прозрачный эякулят может указывать (но не обязательно) на содержание малого количества сперматозоидов в эякуляте. Желтоватый или розоватый оттенок эякулята иногда связывают с гемоспермией. Следует отметить, что микроскопический анализ с точностью определяет количество сперматозоидов и эритроцитов в сперме, поэтому нет необходимости в фиксации цвета эякулята.

Некоторые лаборатории фиксируют запах эякулята. Его характеризуют как «специфический» (в некоторых устаревших медицинских книгах (например, в Руководстве ВОЗ… 1991 г.) сравнивают с запахом цветов каштана). Запах эякуляту придает вещество спермин, секретируемое предстательной железой. Функции спермина неизвестны. Некоторые андрологи по запаху эякулята судят о секреторной активности предстательной железы, однако диагностическая ценность такого подхода неизвестна.

Количество сперматозоидов

Количество сперматозоидов выражают в относительном значении (концентрация или количество в 1 мл эякулята) и в абсолютном значении (общее количество в эякуляте). Как правило, для определения количества сперматозоидов используют счетные камеры — устройства, позволяющие наблюдать в микроскопсперматозоиды в определенном объеме жидкости (это позволяет путем арифметических действий определить количество сперматозоидов в 1 мл, то есть концентрацию). Для подсчета сперматозоидов используют либо счетные камеры для форменных элементов крови — гемацитомеры («Камера Горяева», камера «Неубауэра»), либо специальные счетные камеры для спермы («Камера Маклера» и пр.) Также существуют быстрые методы определения концентрации, например, подсчет сперматозоидов на предметном стекле. Если накрыть каплю спермы 10 мкл покровным стеклом 22х22, то количество сперматозоидов в поле зрения микроскопа на увеличении х400 будет приблизительно равно количеству миллионов сперматозоидов в 1 мл эякулята. Существуют компьютеризированные системы определения концентрации сперматозоидов — так называемые сперманализаторы. Такой прибор представляет собой микроскоп с установленной видеокамерой и системой оценки изображения.

При всех методах определения количества сперматозоидов сначала получают данные по концентрации. Затем путем умножения концентрации на объем получают данные об общем количестве сперматозоидов в эякуляте. По предложению ВОЗ нормальный эякулят имеет не менее 20 млн сперматозоидов в 1 мл объема или не менее 40 млн во всем объеме. Состояние эякулята с меньшим количеством сперматозоидов характеризуется как «олигозооспермия».

Иногда количество сперматозоидов настолько мало, что не может быть выражено в определенной концентрации (допустим врач увидел только несколько сперматозоидов, изучив не одну пробу эякулята). В этом случае говорят о «единичных сперматозоидах в поле зрения», «единичных сперматозоидах на препарате» или «единичных сперматозоидах в эякуляте». Иногда сперматозоиды можно обнаружить, только проведя осаждение спермы в центрифуге и исследовав с помощью микроскопа осадок.

Подвижность сперматозоидов

По подвижности сперматозоиды разделяют на 4 категории: A,B,C и D.

 

Предполагается, что достичь яйцеклетку способны сперматозоиды категорий A и B (сперматозоиды категории B иногда могут увеличить свою скорость после капацитации, наступающей во влагалище и шейке матки). Долю сперматозоидов разных категорий подвижности определяют либо на предметном стекле «на глазок», либо в счетной камере, либо с помощью компьютеризированного спермоанализатора. По предложению ВОЗ эякулят считается нормальным при выполнении хотя бы одного из двух условий: 1) если доля сперматозоидов категории подвижности A не меньше 25 %, 2) либо если доля сперматозоидов категорий подвижности A и B в сумме не меньше 50 %. Состояние эякулята, не удовлетворяющее данным условиям, характеризуется как «астенозооспермия».

В нашей клиники помимо обычной спермограммы Вы так же сможете провести МАР-тестирование и оценку морфологии сперматозоидов.
 

 

Наши контактные телефоны: 8-707-881-881-6, 8-707-988-35-01, 8(71-32) 555-001
Наш адрес:РК, г.Актобе, пр-т Санкибай батыра 175 «П»
Наши социальные сети: @aktobe_embriolog, @semvrach555,  @eko_centr_aktobe

Анализ спермограммы: исследование спермы

В Клинике МАМА спермограмму сдают в процессе наблюдения у андролога или в программе подготовки супругов к ЭКО. Спермограмму сдают после 3-5 дней полового воздержания и отказа от алкоголя в течение одной недели. Анализ готов на следующий день после сдачи. Затем наш андролог прокомментирует полученные результаты и при необходимости назначит лечение или дополнительное обследование. Записаться на анализ спермограммы и на прием к андрологу Вы можете примерно за неделю до предполагаемого посещения.

Спермограмма, или анализ спермы, — сегодня обычная процедура. Стандартная спермограмма учитывает физические параметры: объем спермы, ее цвет, вязкость, pH; и микроскопические параметры: количество и подвижность сперматозоидов, содержание других клеток и т.д. На основании полученных данных можно сделать предположение о мужском бесплодии, простатите, возможных инфекциях.

Как получают сперму для анализа?

Идеальным методом получения спермы для анализа признана мастурбация. Именно этот метод рекомендован Всемирной Организацией Здравоохранения. Лучше всего получение спермы осуществить в клинике, это позволит специалистам начать анализ сразу после разжижения эякулята. Допускается сбор материала и в домашних условиях, если пациент может обеспечить доставку семени в лабораторию в течение 1 часа. В клинике МАМА выделена особая комната для получения спермы, ее интерьер далек от «больничного», это обеспечивает психологический комфорт пациента. Желающим привезти эякулят из дома выдают специальный транспортный контейнер для спермы.

Перед сдачей спермы для анализа пациенту рекомендуется половое воздержание в течение 3-5 дней. Признано, что меньший срок воздержания может привести к заниженному объему спермы и количеству сперматозоидов, больший — к снижению подвижности и увеличению аномальных сперматозоидов. Впрочем, указанная зависимость не всегда четко прослеживается.

Исследуемые показатели спермы

Время разжижения эякулята — первый изучаемый параметр. Извергаемая сперма, как правило, представляет собой коагулят, то есть не является совершенно жидкой. По прошествии некоторого времени эякулят становится жидким под действием ферментов предстательной железы, содержащихся в семенной жидкости. Разжижение определяют по изменению вязкости спермы. Для этого эякулят, набранный в шприц, выпускают через специальную иглу. Вязкость измеряют по длине «нити», тянущейся за выпущенной каплей. Сперма считается разжиженной, если «нить» не превышает 2 см. Нормальная сперма разжижается через 10-40 минут (в некоторых лабораториях разжижение в течение одного часа считают нормальным). Если разжижение затягивается или не наступает вовсе — это может свидетельствовать о нарушениях в работе предстательной железы.

Объем эякулята — одна из важнейших характеристик спермы. Вместе с концентрацией сперматозоидов, этот показатель дает представление об общем количестве живчиков, извергаемом при половом акте. Объем меньше 2 мл может рассматриваться как причина мужского бесплодия (олигоспермия). Дело не только в том, что в маленьком эякуляте содержится мало сперматозоидов. Даже если концентрация спермиев велика, и общее количество их намного превышает необходимые 40 миллионов, все равно угроза для нормального зачатия существует.

При извержении во влагалище сперматозоиды оказываются в агрессивных условиях. Кислая среда влагалища губительна для сперматозоидов и большая их часть погибает в течение 2-3 часов. За это время наиболее подвижные и «здоровые» сперматозоиды должны успеть проникнуть в матку, где условия для их жизни благоприятные (сперматозоиды могут оставаться подвижными в матке и фаллопиевых трубах три дня и больше). Семенная жидкость (или семенная плазма) на некоторое время защелачивает среду влагалища, делая ее менее кислой, и дает возможность активным спермиям уйти в матку. Полагают, что малый объем семенной жидкости «не справляется» с этой задачей: чем меньше семенной жидкости, тем меньшее время она сможет сдерживать кислотность влагалища.

Кроме того, семенная плазма локально подавляет иммунитет супруги (ведь для иммунной системы женщины сперматозоиды — что чужеродные микроорганизмы). И с этой точки зрения объем также играет существенную роль.

Впрочем, слишком большой объем спермы не дает мужчине преимуществ. Как правило, во влагалище помещается не более 5 мл эякулята, лишние же миллилитры вытекают и в зачатии не участвуют.

Ввиду важности определения объема спермы, пациент должен собрать в контейнер по возможности весь эякулят. В случае утери более одной четвертой части эякулята, предназначенного для анализа, необходимо обязательно сообщить об этом специалисту клиники. Следует иметь в виду, что первая часть эякулята наиболее богата сперматозоидами.

К сожалению, в некоторых случаях эякуляция отсутствует вовсе, несмотря на ощущения оргазма. Это может свидетельствовать о так называемой «ретроградной эякуляции» (семяизвержение в мочевой пузырь). В таких случаях имеет смысл изучить мочу после оргазма, нет ли в ней сперматозоидов.

Цвет эякулята. У большинства мужчин сперма «бело-сероватого» цвета. Многочисленные оттенки: молочно-белый, желтоватый, прозрачный не могут четко свидетельствовать о каких-либо нарушениях. Исключение составляет лишь эякулят «розоватого» цвета, свидетельствующий о гемоспермии — повышенном содержании эритроцитов в сперме.

Водородный показатель (pH), или, проще говоря, кислотность эякулята — зачастую может явиться важной подсказкой в определении нарушений репродуктивной и половой функции. Нормальный эякулят имеет слабощелочную реакцию среды (pH 7,2-8,0). Изменение этого показателя в ту или иную сторону от нормы, если нет других отклонений, не может свидетельствовать о каких-либо нарушениях. Но в сочетании с другими признаками оказывает влияние на постановку диагноза. Например, увеличенный pH при повышенном содержании округлых клеток и неразжижении спермы упрочит мнение специалиста о возможном нарушении предстательной железы инфекционной природы; пониженный pH при азооспермии даст надежду на ее обструктивный характер (сперматозоиды есть, но семявыбрасывающие протоки закупорены), и т.д.

И все-таки основные свойства спермы можно узнать, рассмотрев ее в микроскоп.

Количество сперматозоидов — первое, на что обращают внимание специалисты. Обычно количество выражают в виде концентрации (столько-то миллионов на один миллилитр). В нормальном эякуляте сперматозоидов не менее 20 миллионов в миллилитре (не менее 40 миллионов в общем объеме спермы).

Подвижность сперматозоидов важна не менее их количества, ведь что проку во множестве сперматозоидов, если они не движутся. Принято разделять сперматозоиды на 4 категории подвижности.

• К категории A относят спермии с быстрым и прямолинейным движением, скорость их движения должна быть не менее 0,025мм/с (то есть не менее половины собственной длины в секунду).
• К категории B относят спермии с медленным прямолинейным движением, скорость менее 0,025 мм/с, но траектория движения все-таки прямая.
• В категорию C включают сперматозоиды, которые движутся непрямолинейно (и те, что еле барахтаются на месте, и те, что носятся кругами).
• Наконец, категория D — полностью неподвижные сперматозоиды.

В эякуляте всегда присутствуют все категории подвижности. Обычно больше всего неподвижных сперматозоидов категории D (от 40% до 60%), как правило, это умершие или умирающие «от старости» сперматозоиды. Поэтому чем меньше воздержание перед семяизвержением, тем меньше неподвижных сперматозоидов в эякуляте. Также обычно много быстрых прямолинейных спермиев категории А (40-60%), это здоровые, «молодые» сперматозоиды, недавно сформировавшиеся в яичках. Непрогрессивно-подвижных сперматозоидов категории В обычно 10-15%, это, как правило, сперматозоиды с нарушениями строения шейки и жгутика, либо «стареющие». Также обычно мало сперматозоидов медленных с прямым движением категории С (5-15%).

В нормальной фертильной сперме прогрессивно-подвижных сперматозоидов (A+B) должно быть не менее половины, либо быстрых прогрессивно-подвижных (A) не менее четверти. На подвижность сперматозоидов влияет много факторов. Важным фактором является температура: при температуре тела (около 37С) скорость движения максимальна, при комнатной температуре она снижается, а при температуре менее 10С сперматозоиды почти не движутся. Нередко бывает, что сперматозоиды, отнесенные к категории B при комнатной температуре, могут быть отнесены к категории A, если взглянуть на них при температуре 37С. Поэтому в ряде лабораторий, в том числе и в клинике МАМА, микроскоп для спермограммы оснащен специальным подогреваемым «термостолом», отрегулированным на 37С.

Существуют методы, позволяющие узнать, какое количество сперматозоидов среди неподвижных является живым. Для этого сперму подкрашивают эозином. Это вещество красного цвета не может проникнуть сквозь оболочку сперматозоида, но оболочка погибшего спермия быстро разрушается, и он окрашивается красным. Данный метод имеет смысл применять при акинозооспермии — полной неподвижности сперматозоидов, чтобы выяснить, связана ли эта неподвижность с гибелью, или нарушениями жгутикового аппарата. В соответствии с этим можно выработать план лечения бесплодия.

Доля аномальных сперматозоидов определяется двумя методами. Первый — изучение морфологии сперматозоидов в нативном эякуляте, то есть сперму, как она есть (нативная), рассматривают под микроскопом. При этом пытаются сосчитать, сколько сперматозоидов из 100 являются аномальными. Метод этот очень неточен, поскольку, во-первых, не все патологии можно увидеть без специальной обработки спермы, а во-вторых, сперматозоиды движутся и с трудом поддаются детальному разглядыванию. Поэтому в клинике МАМА при превышении аномальными сперматозоидами барьера 50%, проводят изучение морфологии сперматозоидов на окрашенном мазке. Для этого каплю спермы размазывают по предметному стеклышку, высушивают в потоке воздуха, обрабатывают спиртом, снова высушивают, погружают в несколько различных красителей, отмывают от лишней краски и заключают в специальный бальзам для микроскопирования. После такой обработки сперматозоиды обездвиживаются, окрашиваются и приклеиваются к стеклу. Их легко можно рассмотреть и посчитать, при этом могут быть обнаружены нарушения, невидимые при первом методе (например, отсутствие акросомы).

Для оценки качества спермы считают не только долю аномальных сперматозоидов (она должна быть менее 85% в окрашенном мазке), но также среднее количество патологий на один сперматозоид (так называемый индекс спермальных нарушений, SDI) и среднее количество патологий на один аномальный сперматозоид (так называемый индекс тератозооспермии, TZI). При превышении TZI значения 1,6 сперма считается аномальной, а при превышении SDI значения 1,6 могут возникнуть проблемы даже при искусственном оплодотворении.

Спермагглютинация, или склеивание сперматозоидов — сигнал грозных иммунных нарушений, которому, к сожалению, не всегда уделяют должное внимание. Часто неправильно думают, что агглютинация не позволяет сперматозоидам свободно двигаться и достичь яйцеклетки. Это неверно. Само по себе склеивание затрагивает обычно небольшую часть сперматозоидов, и не препятствует движению большинства, но наличие агглютинации может свидетельствовать о присутствии в эякуляте антиспермальных антител, которые и могут быть причиной бесплодия. Истинную спермагглютинацию не всегда легко распознать, иногда требуются специальные методы для отличия ее от спермагрегации. Агрегация сперматозоидов — это склеивание, вызванное не иммунными причинами, а слизью, содержащейся в семенной жидкости. Спермагрегация на фертильность спермы не влияет.

Антиспермальные антитела (АСА, или АСАТ) — это антитела организма против сперматозоидов. Соединяясь со жгутиком, АСА подавляют движение сперматозоида. Прилипая к головке, препятствуют оплодотворению. АСА могут образовываться как в организме мужчины, так и в организме женщины, вызывая бесплодие. Для диагностики АСА в сперме используют различные методы, наиболее распространенным среди которых является MAR-тест (Mixed Immunoglobuline Reaction — «реакция иммуноглобулинов при смешивании»).

Кроме сперматозоидов в эякуляте присутствуют так называемые округлые клетки. Под этим собирательным названием подразумевают лейкоциты и незрелые клетки сперматогенеза, то есть клетки, из которых в яичках образуются зрелые сперматозоиды. В норме концентрация лейкоцитов не должна превышать 1 млн/мл. Принято считать, что большая концентрация этих иммунных клеток может свидетельствовать о воспалительных процессах в придаточных половых железах (простате или семенных везикулах). Без специального окрашивания отличить лейкоциты от незрелых клеток сперматогенеза трудно, поэтому ВОЗ рекомендует прибегать к окрашиванию, если общая концентрация всех округлых клеток превышает 5 млн/мл.

Нормы для спермограммы:

ПОКАЗАТЕЛЬ	НОРМА
Объем	Не менее 2 мл
Цвет	Бело-сероватый
Время разжижения	10-40 минут
рН	7,2-7,8
Количество спермиев в 1 мл	20-120 млн.
Количество спермиев в эякуляте	40-500 млн.
Активно подвижные (категория А)	Не менее 25 %
Слабоподвижные (категория В)	А + В не менее 50 %
Непрогрессивно подвижные (кат.С)	С + D не более 50 %
Неподвижные (категория D)
Патологические сперматозоиды	Не более 50 %
Количество округлых клеток	Не более 5 млн.
Спермагглютинация	Нет
Лейкоциты	До 3-5 в поле зрения

Какие термины используются для описания нарушений спермы?

Для описания нарушений спермы существуют различные термины. В клинике МАМА пользуются следующей номенклатурой:

Нормоспермия — все характеристики эякулята в норме, нормальная сперма.
Нормозооспермия — все характеристики, связанные с фертильностью спермы, в норме, но при этом допустимы отклонения, не влияющие на бесплодие (повышенное содержание округлых клеток, аномальный pH, аномальная вязкость или неразжижение эякулята).
Олигоспермия — недостаточный объем эякулята (менее 2 мл).
Олигозооспермия — недостаточное количество сперматозоидов (концентрация менее 20 млн/мл).
Астенозооспермия — недостаточная подвижность сперматозоидов (А Акинозооспермия — полная неподвижность сперматозоидов.
Тератозооспермия — повышено содержание аномальных сперматозоидов (более 50% при исследовании нативного эякулята или более 85% при исследовании окрашенного мазка спермы).
Некрозооспермия — отсутствие живых сперматозоидов.
Лейкоцитоспермия — повышено содержание лейкоцитов (более 1 млн/мл).
Гемоспермия — присутствие эритроцитов в эякуляте.
Азооспермия — отсутствие сперматозоидов в эякуляте.

Когда пациент знакомится с результатами спермограммы, он должен знать следующее. Все до единой характеристики спермы сильно меняются с течением времени. Если объем спермы при анализе составил 3 мл, то при следующей эякуляции он может иметь совсем другие значения, также иные значения он будет иметь спустя месяц, тем более спустя полгода. Тот же принцип касается остальных параметров. Именно поэтому в репродуктологии общепризнано, что для анализа необходимо исследовать сперму дважды с интервалом не менее двух недель, а в случае существенных различий в параметрах — трижды.

Сделайте первый шаг — запишитесь на прием!

Ознакомьтесь с текстом по ссылке

Y N

Эякулят — Физические свойства | ClinLabs.com

Количество.

Среднее количество спермы, выделенное во время коитуса, составляет 3-3,5 мл. Иногда оно колеблется от 2 до 6 мл. При двусторонней непроходимости семявыносящих путей количество эякулята может заметно не уменьшаться, так как при этом андрогенная функция яичек не нарушается. При аспермии, обусловленной атрофией яичек (недостаточная продукция тестостерона), количество эякулята очень небольшое — 0,5-1,0 мл. Малый объем эякулята, особенно в сочетании с отсутствием фруктозы, и низким pH (6,5-6,8) часто свидетельствует о врожденном отсутствии семенных пузырьков. Увеличенный объем эякулята наблюдается при гиперфункции бульбоуретральных желез.

Цвет.

Свежая сперма в норме имеет серовато-беловатый цвет с молочно-белой опалесценцией. Желтоватый оттенок эякулята наблюдается при длительном половом воздержании и при наличии в нем флавина. Патологические примеси изменяют цвет спермы. При гемоспермии она окрашена кровью (розовый или коричневый цвет). Желтый цвет характерен для пиоспермии (гнойный процесс в предстательной железе или семенных пузырьках).

Прозрачность.

Стекловидно-прозрачная сперма бедна сперматозоидами (азооспермия). Эякулят, содержащий большое количество сперматозоидов, мутный, молочно- белого цвета.

Запах.

Спермин, выделяющийся предстательной железой, обусловливает специфический запах спермы, напоминающий запах цветов каштана. Отсутствие его наблюдается при закупорке выводных предстательных проточков. При гнойно-воспалительных процессах запах зависит от микрофлоры, вызвавшей воспалительный процесс.

Консистенция.

В норме сперма выделяется из мочеиспускательного канала в жидком состоянии но на воздухе под действием ферментов желатинизирует, а затем при комнатной температуре снова разжигается. Время разжижения учитывается от момента эякуляции до полного разжижения (в норме 20-30 мин). Замедление или отсутствие разжижения спермы указывает на дефицит фибринолизина и фибриногеназы в секрете предстательной железы.

Вязкость.

Определяют после полного разжижения спермы, для чего ее тщательно перемешивают стеклянной палочкой, которую затем медленно извлекают. Если за палочкой тянется нить длиной до разрыва 0,1-0,5 см, то вязкость спермы нормальная, если короче 0,1 см — снижена, если длиннее 0,5 см — повышена. Вязкость спермы определяют с помощью гемовискозиметра, при этом относительная вязкость нормальной спермы составляет 6,0-6,6.

При повышенной вязкости эякулята, мешающей исследованию, его обрабатывают трипсином в концентрации 1 мг на 1 мл или пропускают несколько раз через иглу типа «Рекорд» № 840, избегая пенообразования.

Повышенная вязкость спермы сочетается с увеличением времени ее разжижения и наличием большого количества слизи, что наблюдается при воспалительных процессах в предстательной железе или в семенных пузырьках. Уменьшение вязкости спермы характерно для поражения семенных пузырьков.

При непопадании секрета семенных пузырьков в эякулят он имеет пониженную вязкость, при этом феномен коагуляции — разжижение спермы отсутствует.

Реакция (pH).

Свежая сперма имеет pH 7,2-7,6, но спустя некоторое время после эякуляции при наличии большого количества сперматозоидов pH снижается в результате интенсивного фруктолиза, сопровождающегося накоплением молочной кислоты. Определяют pH сразу же после разжижения спермы при помощи индикаторной бумаги  с диапазоном pH 6,6-8,1; более точно pH спермы можно определить с помощью pH-метра, желательно с микроэлектродом.

Значительная щелочность спермы свидетельствует о гипоспермии или азооспермии и большом количестве сперменной плазмы. Кислая реакция спермы (при одновременном отсутствии фруктозы) свидетельствует о непопадании щелочного секрета семенных пузырьков в эякулят, что наблюдается при закупорке выделительных протоков обоих семенных пузырьков, но не об атрофии эпителия выносящих канальцев яичек. В таких случаях плазма спермы состоит в основном из секрета предстательной железы, pH которого составляет 6,6-6,8. Оплодотворяющая способность такой спермы резко снижена ввиду недостаточности щелочного резерва для нейтрализации кислого содержимого влагалища (в кислой среде сперматозоиды теряют способность двигаться и погибают).

---

Руководство к практическим занятиям по клинической лабораторной диагностике / Под ред. проф. М.А. Базарновой, проф. В.Т. Морозовой.— К.: Выща школа, 1988.— 318 с., 212 ил.

борьба за качество. Анализы и обследования перед зачатием

Раньше вина за бездетность возлагалась на женщину. Сегодня понятно, что обследоваться нужно обоим. Причин мужского бесплодия множество. Но самая распространенная — ухудшение качества спермы.

Крупным планом

Качество спермы нельзя оценить «на глаз». Достоверную информацию дает только специализированный анализ — спермограмма. Предмет исследования — эякулят, совокупность сперматозоидов, или спермиев, клеток сперматогенеза, лейкоцитов и секрета дополнительных половых желез — спермоплазмы. Стандартная спермограмма учитывает как физические параметры: объем спермы, ее цвет, вязкость, уровень кислотности pH, так и микроскопические: количество и подвижность сперматозоидов, содержание других клеток. На основании полученных данных можно диагностировать простатит, инфекции, выявить причины бесплодия.

Количество и качество

Первое, что определяется в лаборатории, — время разжижения эякулята. Вначале сперма абсолютно жидкая, потом быстро загустевает, а спустя некоторое время под действием ферментов предстательной железы вновь становится жидкой. О правильности превращений можно судить по изменению вязкости. Для этого эякулят набирают в шприц и выпускают через специальную иглу. Вязкость измеряют по длине «нити», которая тянется за выпущенной каплей. Сперма считается разжиженной, если «нить» не превышает 2 см. В норме это происходит за 10–40 минут. Если процесс затягивается, значит? есть проблемы с предстательной железой. После разжижения с помощью индикаторной бумаги сперму тестируют на кислотность. ВОЗ рекомендует значение pH не менее 7,2.

Второй важный показатель — объем. При значении меньше 2 мл состояние характеризуют как олигоспермию — уменьшенное по сравнению с нормой количество сперматозоидов в сперме. Ее причины — либо дисфункция семенных пузырьков или предстательной железы, либо непроходимость семявыбрасывающих протоков.

Конечно, для зачатия достаточно всего одного сперматозоида, но… Кислая среда влагалища губительна для мужских половых клеток, потому семенная жидкость содержит щелочь для ее смягчения — это дает возможность активным спермиям уйти в матку. Меньше объем эякулята — меньше шансов побороть агрессивную среду.

На вкус и цвет…

Цвет эякулята в современной медицине не имеет диагностического значения, его фиксация на бланке спермограммы — дань традиции. Считается, что эталон беловато-сероватого цвета. Слишком прозрачный эякулят может указывать на низкое содержание сперматозоидов. Желтоватый или розоватый оттенок иногда связывают с гемоспермией — появлением крови в сперме. Но современный микроскопический анализ с точностью определяет количество сперматозоидов и эритроцитов в сперме, поэтому особого смысла в описании цвета нет.

Некоторые лаборатории фиксируют запах. Его характеризуют как «специфический». Запах придает особое вещество, спермин, которое вырабатывает предстательная железа. Некоторые андрологи по запаху эякулята судят о секреторной активности этой железы. Правильность такого подхода не доказана.

Лучше больше, но лучше

Численность сперматозоидов в эякуляте выражают в относительном значении (концентрация в 1 мл) и в абсолютном (общее количество). Обычно для этого используют счетные камеры — устройства, позволяющие наблюдать в микроскоп сперматозоиды в заданном объеме жидкости. С помощью арифметических действий определяется количество сперматозоидов в 1 мл, то есть их концентрация. Существуют также быстрые методы, например подсчет сперматозоидов на предметном стекле. Разработаны и компьютеризированные системы — сперманализаторы. Это микроскоп с установленной видеокамерой и системой оценки изображения.

При всех методах вначале получают данные по концентрации, затем, умножив их на объем, — общее количество сперматозоидов в эякуляте. В норме — не менее 20 млн сперматозоидов в 1 мл объема, или не менее 40 млн во всем объеме. Состояние эякулята с меньшим количеством сперматозоидов характеризуется как олигозооспермия.

Карьерная гонка

По подвижности спермии разделяют на четыре категории: A, B, C и D. Категория А — «лидеры», так называемее прогрессивно-активно-подвижные. Они быстро перемещаются, двигаясь прямолинейно: в течение двух секунд преодолевают расстояние, равное своей длине.

Группа В — «середняки», «прогрессивно-слабоподвижные». Их скорость заметно ниже. Литерой С обозначается «болото», «непрогрессивно-подвижные». Совершают бессмысленные движения, в результате оставаясь на месте. Категория D — настоящие лентяи, «неподвижные» сперматозоиды. Достичь яйцеклетки способны лишь сперматозоиды категорий A и B, от остальных — никакой пользы.

Распределение по категориям происходит либо на предметном стекле — «на глазок», либо с помощью компьютеризированного спермоанализатора.

Сперма считается нормальной, если в ней не меньше четверти А-сперматозиодов или совокупная доля А и В составляет не менее половины. В остальных случаях можно говорить об астенозооспермии.

Фейс-контроль

После количественных измерений приступают к морфологическому анализу — изучению формы и строения клеток. Сперматозоиды разделяют на нормальные и патологические, то есть те, которые не соответствуют критериям нормы: головка, шейка или хвост отличаются от эталона. Тест на качество проводится с помощью микроскопа. Лаборант отмечает нестандартную форму или размер головки, искривление шейки или средней части. Неправильный жгутик бывает кривым или раздвоенным. Иногда он и вовсе отсутствует. Доля любых аномальных спермиев не должна превышать 50–70%. Чрезмерное размножение «монстров» — это тератозооспермия.

Сперматозоид должен не только идеально выглядеть, но и быть живым. Неподвижный сперматозоид может оказаться либо жизнеспособным, но с нарушенными функциями движения, либо мертвым. Норма — не менее 50% живых. Этот параметр особенно важен при астенозооспермии.

Иногда в эякуляте обнаруживаются «враги» сперматозиодов, антиспермальные антитела (АСАТ). Соединяясь со жгутиком, АСАТ подавляют движение, а прилипнув к головке, препятствуют оплодотворению. Такие антитела может вырабатывать как организм мужчины против собственных сперматозоидов, так и организм женщины. Для диагностики используют различные методы, наиболее популярен MAR-тест.

Кроме сперматозоидов в эякуляте присутствуют лейкоциты: в норме их должно быть не более 1 млн/мл. Превышение количества этих иммунных клеток называется лейкоцитоспермией. Ее появление говорит о воспалительных процессах в придаточных половых железах — простате или семенных везикулах.

Сам себе лаборант

Сделать спермограмму сейчас не проблема. Не только в Москве и Санкт-Петербурге, но и в других городах России существуют клиники, профессионально проводящие диагностику. Перед сдачей анализа необходимо половое воздержание не менее трех дней, но не более недели. Оптимально — от 3 до 5 суток. Сперма должна быть получена с помощью мастурбации — метод рекомендован ВОЗ. Прерванный коитус не подойдет — в образец спермы могут попасть клетки вагинального происхождения или микрофлора партнерши. Сперма собирается в чистый стеклянный или пластмассовый стакан. Использовать с этой целью презерватив не стоит, так как он часто снижает жизнеспособность сперматозоидов.

Анализ сдают в клинике, где есть специальное помещение. В исключительных случаях сбор эякулята допустим в домашних условиях. Но материал требуется доставить в лабораторию в течение часа.

Получили неважные результаты? Обязательно повторите исследование: показатели спермограммы зависят от множества факторов, и только двойное подтверждение будет сигналом к действиям.

Русско-медицинский разговорник

Акиноспермия (акинозооспермия) — полная неподвижность сперматозоидов.

Аспермия — полное отсутствие эякулята.

Астенозооспермия — снижение подвижности сперматозоидов, препятствующее оплодотворению.

Азооспермия — полное отсутствие сперматозоидов в семенной жидкости. Сперматозоиды образуются в яичках, но из-за повреждений придатка или семявыносящих протоков не попадают в семенную жидкость. Это может быть врожденной патологией или следствием инфекционного заболевания.

Гемоспермия — присутствие крови (эритроцитов) в эякуляте.

Крипроспермия (криптозооспермия) — предельно малое количество сперматозоидов. В этом случае их очень сложно обнаружить в эякуляте.

Лейкоцитоспермия — концентрация лейкоцитов выше нормативного значения.

Некроспермия (некрозооспермия) — отсутствие живых сперматозоидов в эякуляте. Олигозооспермия — значительное снижение количества сперматозоидов в семенной жидкости.

Олигоспермия — объем эякулята ниже нормативного значения.

Тератозооспермия — изменение формы сперматозоидов, препятствующее оплодотворению.

Мужской идеал

В настоящее время в России нет специальных документов Минздравсоцразвития, устанавливающих нормы фертильного эякулята. Медицинские учреждения вправе оценивать его по собственным разработкам. Но большинство клиник пользуется нормативами, предложенными Всемирной организацией здравоохранения.

Состояние эякулята, соответствующее мировым параметрам, называют нормоспермией. В этом случае беспокоиться не о чем, фертильные возможности мужчины — на высоте.

Спермограмма, анализ спермограммы, расшифровка спермограммы, сдача спермограммы

 В нашей клинике оценка эякулята производится согласно последним критериям ВОЗ 2010 года. Исследуемые показатели эякулята:

• Вязкость или время разжижения. После эякуляции сперма имеет вязкую консистенцию. Через некоторое врямя, под воздействием ферментов предстательной железы, она разжижается. В норме это 15-60 мин. Отсутствие разжижения может указывать на нарушение в работе предстательной железы и повлиять на оплодотворяющую способность сперматозоидов.
• Объем эякулята должен составлять не менее 1,5 мл. Состояние, при котором объем эякулята снижен, называют олигоспермией.
• Кислотность (pH). Согласно рекомендациям ВОЗ, эякулят должен иметь pH не менее 7,2. Отклонения от этого значения в ту или иную сторону может рассматриваться как нарушение только в сочетании с отклонениями в других параметрах.

После определения физических показателей, мы приступаем к исследованию образца спермы под микроскопом.

 Первый параметр, на который мы обращаем внимание – это концентрация сперматозоидов (количество в 1мл спермы). Этот показатель должен быть не менее 15 млн/мл. Также определяется концентрация сперматозоидов во всем объеме эякулята (не менее 39 млн). Если количество сперматозоидов меньше данных значений, то ставится диагноз олигозооспермия. Бывают случаи, когда сперматозоиды в эякуляте отсутствуют. Такое состояние называют азооспермией.

 Не менее важный параметр – это подвижность сперматозоидов. Согласно критериям ВОЗ 2010 года сперматозоиды делятся на 3 категории:

• прогрессивно-подвижные (PR), именно эти сперматозоиды способны «добежать» до яйцеклетки. В норме их содержание 32% и более; — непрогрессивно-подвижные (NP)
• сперматозоиды, которые движутся непрямолинейно или шевелятся на месте;
• полностью неподвижные (IM).

Состояние, при котором количество подвижных сперматозоидов снижено, называется астенозооспермией.

 Помимо сперматозоидов, в эякуляте могут присутствовать круглые клетки. Этот термин подразумевает клетки сперматогенеза, из которых образуются сперматозоиды и лейкоциты. В норме концентрация лейкоцитов не должна превышать 1 млн/мл. Увеличение этого значения может свидетельствовать о наличии воспалительного процесса.

Агглютинация – склеивание подвижных сперматозоидов между собой. Наличие агглютинации может указывать на иммунологический фактор бесплодия, но не является доказательством последнего.

Агрегация — это склеивание неподвижных сперматозоидов между собой или подвижных с нитями слизи или другими клетками. Спермагрегация на фертильность спермы не влияет.

MAR-тест используется для диагностики иммунологического бесплодия. С помощью этого метода определяется наличие или отсутствие антиспермальных антител на поверхности сперматозоидов. Если более 50% сперматозоидов содержат антиспермальные антитела, то шансы на самостоятельную беременность снижены.

Морфология сперматозоидов – оценка их строения, формы и способности к оплодотворению яйцеклетки. Наиболее точным методом считается исследование окрашенного мазка согласно критериям Крюгера, которые предполагают наличие 4% и более нормальных сперматозоидов. Именно этот метод мы используем при определении морфологии сперматозоидов. Если количество аномальных сперматозоидов больше 96% — ставится диагноз тератозооспермия. Многие пациенты переживают по поводу того, что патологические сперматозоиды повышают вероятность врожденных дефектов у плода, но это не так. Однако большое количество сперматозоидов с нарушениями в морфологии снижает вероятность оплодотворения.

Нормозооспермия – термин, свидетельствующий о том, что показатели спермограммы находятся в пределах нормы.

 В случае, если показатели спермограммы существенно отличаются от нормативных, необходимо пройти повторное исследование с интервалом не менее 1-2 недель. Диагноз может быть поставлен только при повторном подтверждении показателей предыдущей спермограммы.

 

В нашей клинике Вы всегда можете получить консультацию квалифицированного уролога-андролога.

Что такое вязкость спермы и как она влияет на мою фертильность

Результаты анализа спермы отражают состояние вашей спермы и определяют шансы на зачатие. Разжижение и вязкость — это два параметра, которые относятся к толщине спермы. В нормальных условиях свежая сперма разжижается под действием ферментов. Эти ферменты разрушают студенистую структуру спермы, делая ее водянистой и способствуя подвижности сперматозоидов. Специалисты-биологи наблюдают за временем, необходимое для разжижения образца спермы, чтобы оценить степень ее вязкости.

Как сперму проверяют на вязкость?

Как вязкость влияет на мужскую фертильность?

Вязкость затрудняет плавание сперматозоидов. Снижение подвижности сперматозоидов снижает шансы на оплодотворение яйцеклетки. Ученые исследовали менее известные корреляции вязкости спермы с бесплодием и другими заболеваниями. Флинт и его команда изучили образцы сверхвязкой спермы и обнаружили, что количество лейкоцитов в них (количество лейкоцитов) также было повышено. В этом случае исследователи выявили потенциальную корреляцию лейкоцитоспермии с вязкостью сперматозоидов и ее связь с мужским бесплодием.У пациентов с диагнозом лейкоцитоспермия также уменьшился объем спермы.

Другое исследование подтвердило, что очень вязкая сперма ухудшает качество спермы и отрицательно влияет на ее параметры. Вязкая сперма также может быть результатом воспалительного состояния, инфекции половых путей, генетической предрасположенности и факторов окружающей среды. Воспалительное состояние затронуло несколько аспектов спермы, включая содержание в ней цинка, кальция, фруктозы и аскорбиновой кислоты. Изменение биохимического состава спермы отрицательно сказалось на жизнеспособности, подвижности и способности сперматозоидов к оплодотворению.

Как лечится вязкость сперматозоидов?

Вязкость сперматозоидов по-разному влияет на процесс слияния сперматозоидов с ооцитом. Он вызывает уменьшение количества сперматозоидов, предотвращает попадание сперматозоидов на слизистую оболочку шейки матки и даже влияет на стабильность хроматина в сперматозоидах. Нежелательные эффекты повышенной вязкости сперматозоидов проявляются в снижении скорости оплодотворения, зачатия и развития плода.

В клинической практике существует несколько подходов к лечению вязкости сперматозоидов.К ним относятся использование муколитических ферментов, антибиотиков, иглы для подкожных инъекций и противовоспалительных средств. Тем не менее, необходимы дальнейшие исследования, чтобы разработать соответствующие диагностические и терапевтические подходы для выяснения причин вязкости сперматозоидов и мужского бесплодия.

распространенность, патогенез и терапевтические аспекты

Asian J Androl. 2009 сен; 11 (5): 609–615.

Джлениа Элиа

¹ Кафедра медицинской физиопатологии, Римский университет, Сапиенца, Рим 00189, Италия

Микеле Дельфино

¹ Кафедра медицинской физиопатологии, Римский университет, Сапиенца, Рим 00189, Италия

Норина Имброгно

¹ Кафедра медицинской физиопатологии, Римский университет, Сапиенца, Рим 00189, Италия

Франческа Капогреко

¹ Кафедра медицинской физиопатологии, Римский университет, Сапиенца, Рим 00189, Италия

Марко Лукарелли

² Кафедра клеточной биотехнологии и гематологии, Римский университет, Сапиенца, Рим 00189, Италия

Тициана Росси

¹ Кафедра медицинской физиопатологии, Римский университет, Сапиенца, Рим 00189, Италия

Фернандо Маццилли

¹ Кафедра медицинской физиопатологии, Римский университет, Сапи enza, Rome 00189, Италия

¹ Кафедра медицинской физиопатологии, Римский университет, Сапиенца, Рим 00189, Италия

² Кафедра клеточной биотехнологии и гематологии, Римский университет, Сапиенца, Рим 00189, Италия

^* Медицинский факультет, больница Сант-Андреа, Римский университет, Via di Grottarossa 1035-00189, Sapienza, Rome 00189, Италия. Факс: + 39-6337-75001 Эл. Почта: [email protected]

Поступила в редакцию 22 января 2009 г .; Пересмотрено 16 июня 2009 г .; Принято 2 июля 2009 г.

Эта статья цитировалась в других статьях в PMC.

Abstract

Целями этого исследования были (а) определение распространенности субъектов с повышенной вязкостью спермы (SHV) в большой популяции мужчин-партнеров субфертильных пар; (b) для выявления любой корреляции между SHV и инфекциями или воспалением половых путей; (c) оценить эффекты терапевтических подходов к лечению SHV; и (d) для оценки кинетических параметров сперматозоидов после успешного лечения SHV.Было проведено ретроспективное исследование 1833 мужчин-партнеров субфертильных пар. Затем были проведены клинические, семенные, бактериологические и ультразвуковые исследования с участием 52 субъектов, страдающих SHV, и SHV был классифицирован как легкий (длина нити> 2 см и ≤ 4 см), средний (> 4 см и ≤ 6 см). или тяжелые (> 6 см). Распространенность SHV наблюдалась у 26,2% (480) субъектов, из которых 13,2% страдали легкой формой, 6,6% — средней и 6,4% — тяжелой формой SHV. Лечение было полностью успешным только у 27 человек (52.0%), в первую очередь у тех, у кого была легкая базальная SHV с положительным посевом спермы. У этих субъектов процент прогрессивной подвижности, скорость прямой линии и линейность были значительно выше, чем уровни до лечения. SHV часто обнаруживается у субъектов с пониженной фертильностью. Патогенез был строго связан с инфекционными / воспалительными факторами только в 48,0% случаев; следовательно, возможно, что биохимические, ферментативные или генетические факторы играют роль в этом состоянии.

Ключевые слова: Инфекция половых путей, воспаление половых путей, УЗИ половых путей, посев спермы, повышенная вязкость спермы (SHV), подвижность сперматозоидов

Введение

Повышенная вязкость спермы (SHV) — это состояние, которое может серьезно ухудшить физико-химические свойства характеристика семенной жидкости.Таким образом, он заслуживает более пристального внимания исследователей, так как может серьезно повлиять на функцию сперматозоидов. Прежде всего, SHV, по-видимому, связан со снижением подвижности сперматозоидов, возможно, из-за «эффекта захвата», который предотвращает нормальное продвижение сперматозоидов через женские половые пути ^{1, 2} .

Повышенная вязкость спермы также приводит к определенным техническим трудностям при работе с образцами, например, при использовании градиентов Перколла для подготовки спермы для программ in vitro оплодотворения (ЭКО) ³ .

Предложены физико-химические методы лечения SHV. Физический метод включает проталкивание образца через иглу для подкожных инъекций ⁴ , тогда как при химической обработке используются муколитические агенты, такие как α-химотрипсин ^{5, 6} и спутолизин ⁷ . Однако нельзя игнорировать тот факт, что такие процедуры могут повредить структуру сперматозоидов. Поэтому патогенный подход к лечению повышенной вязкости может быть более целесообразным.

Патогенетические аспекты SHV еще предстоит полностью выяснить. Гонсалес и др. . ^{8, 9} и Andrade-Rocha ¹⁰ показали снижение уровня фруктозы в SHV и выдвинули гипотезу о неадекватном функционировании семенных пузырьков в качестве объяснения. Carpino and Siciliano ¹¹ изучали возможную корреляцию между SHV и секрецией белка придатка яичка, пузырьков и простаты. Они обнаружили, что гипервязкость не играет никакой роли в процессе свертывания спермы.

Mendeluk и др. . ¹² показали, что нет никакой разницы ни в концентрации общих белков или ДНК, ни в процентном содержании воды в сверхвязкой семенной плазме.Кроме того, Mendeluk et al . ^{13, 14} наблюдали, что лизоцим не играет прямой роли в SHV, хотя дефицит в случаях хронических инфекций может быть усугубляющим фактором с клинической точки зрения. Айдемир и др. . ¹⁵ указывают на то, что повышенное окислительное повреждение может быть фактором SHV. В предыдущем исследовании мы показали, что генетические факторы могут влиять на текучесть спермы ¹⁶ .

Особый интерес представляет возможная корреляция между SHV и инфекциями и / или воспалением половых путей.Однако следует отметить, что в этой области существует много разногласий. Согласно Munuce и др. . ¹⁷ , нет никакой связи между SHV и положительностью посева спермы, лейкоспермией или наличием антител к сперматозоиду. Кроме того, нет корреляции между SHV и инфекцией вируса иммунодефицита человека ¹⁸ . Однако Wang и др. . ¹⁹ обнаружили, что Ureaplasma urealyticum инфекций были связаны с SHV.

Цели этого исследования: (а) оценить распространенность субъектов с SHV в большой популяции мужчин-партнеров субфертильных пар; (б) оценить возможную корреляцию между SHV и инфекциями / воспалениями половых путей; (c) оценить эффекты терапевтических подходов в лечении SHV; и (d) оценить кинетические параметры сперматозоидов после успешного лечения SHV.

Материалы и методы

Ретроспективное исследование

Ретроспективное исследование было проведено для изучения данных с января 2004 года по декабрь 2007 года для оценки распространенности ВГЧ у мужчин-партнеров субфертильных пар, направленных в отделение андрологии больницы Сант-Андреа (Рим) для анализа спермы. Всего было обследовано 1 833 человека и 2 587 эякулятов. В анализ были включены субъекты с полностью нормальными параметрами спермы и лица с одним или несколькими измененными параметрами спермы.

Клиническое исследование

Клиническое исследование проводилось в соответствии с рекомендациями комитета по этике больницы.

Для изучения возможного вовлечения инфекций или воспалений половых путей в качестве патогенного фактора в SHV группу исследования составили 52 пациента с SHV в возрасте от 25 до 43 лет.Был собран полный анамнез, и пациенты прошли диагностическую и терапевтическую программу, включающую клиническое и семенное обследование, посев спермы и ультразвуковое исследование яичек, семенных пузырьков и простаты. Все пациенты с гормональными изменениями, лечившимися крипторхизмом и варикоцеле с выраженным венозным рефлюксом (время рефлюкса более 2 с, определяется с помощью цветного допплера) ²⁰ были исключены из исследования.

Минимальный период бесплодия пары составил 1 год. Концентрация спермы составляла ≥ 20 миллионов мл ^–1 , а атипичные формы — <70%. SHV было подтверждено вторым семенным обследованием через 2 месяца после первого.

Все 52 субъекта лечились противовоспалительными и муколитическими средствами, 50 мг тетрациклина и 5 мг гидрокортизона (Фармацевтика Форменти спа, Милан, Италия) каждый день в течение 30 дней, а затем 200 мг N -ацетилцистеина (Zambon Svizzera SA , Cadempino, Swisse) каждый день в течение следующих 2 месяцев.Пациенты с SHV, не ответившие на терапию, получали второй курс противовоспалительных препаратов. Субъекты с положительной культурой спермы должны были сначала пройти специальную антибактериальную терапию, согласно антибиотикограмме, при самой низкой минимальной ингибирующей концентрации для идентифицированных бактерий. Терапия длилась 5 дней.

Стандартный анализ спермы, посев спермы и ультразвуковое исследование яичек, семенных пузырьков и простаты проводились до и после терапии.

Определение инфекции и воспаления мужских половых путей

В нашей когорте инфекции были обнаружены с помощью посева спермы. Был предложен ряд методов диагностики воспаления половых путей, включая исследование эякулята на наличие пероксидаза-положительных клеток или уровней семенной полиморфно-ядерной эластазы ²¹ . Увеличение количества лейкоцитов в семенной жидкости (WBC) при отсутствии инфекции или признаков воспаления, влияющих на придаток яичка, семенные пузырьки и простату, было принято как маркер воспаления. Подтверждение воспаления производилось с помощью УЗИ. Субъекты были разделены в зависимости от наличия или отсутствия инфекции и / или признаков воспаления.

Анализ спермы и посев спермы

Образцы спермы были собраны путем мастурбации через 3-5 дней полового воздержания. Образцы хранили в контролируемом инкубаторе (37 ° C) на осторожно перемещающемся планшете.

После разжижения образцы спермы были проанализированы в соответствии с рекомендациями Всемирной организации здравоохранения (ВОЗ) ^{22, 23} . Система анализа наложенных изображений использовалась для оценки параметров подвижности сперматозоидов ^{24, 25} . Прогрессивная подвижность определялась следующим образом: класс 1 — скорость по прямой (VSL) ≥ 23 мкм с ^–1 и линейность (LIN) ≥ 0.58; и класс 2 — VSL> 10 и ≤ 23 мкм с ^-1 и LIN ≥ 0,58 (частота кадров: 21 кадр с ^-1 ) ²⁵ . Морфологию сперматозоидов изучали методом окрашивания по Брайану – Лейшману (BL) ²² . Предметные стекла исследовали при увеличении × 1000 с помощью светового микроскопа Olympus CX31 с использованием микрометрической шкалы. Метод окрашивания BL является особенно эффективным методом различения половых клеток и лейкоцитов ²² . Дефекты морфологии сперматозоидов были классифицированы в соответствии с рекомендациями ВОЗ ^{22, 23} .Для каждого образца оценивали не менее 200 сперматозоидов.

Вязкость определяли через 1 час после эякуляции осторожным отсасыванием спермы в пипетку на 5 мл и затем получением капель спермы. В случае аномальной вязкости капля образовывала нить длиной более 2 см, что оценивали по сантиметровой шкале. Гипервязкость при нормальной гравитации оценивалась как легкая (длина нити> 2 см и ≤ 4 см), умеренная (> 4 см и ≤ 6 см) или сильная (> 6 см).

Наконец, образцы семенной культуры с колониями> 100 000 UFC мл ^-1 были признаны положительными.

Контроль качества анализа спермы

Внутренний контроль качества (КК) (внутриоператорский и межоператорский) проводился каждые 2 месяца. Внешний контроль качества проводился Национальным институтом здравоохранения.

Ультразвук

Ультразвук яичек выполняли с помощью HDI 4000 (ATL Ultrasound, Bothell, WA, USA) с использованием датчика с диапазоном частот от 5,5 до 12 МГц. Увеличение объема предстательной железы, семенных пузырьков или придатка яичка или изменения эхогенных структур считались признаками воспаления ²⁶ .

Статистика

Мы использовали тест Шапиро – Уилка для изучения прогрессивной моторики, распределения VSL и LIN. Мы использовали как тест Уилкоксона, так и двусторонний тест Стьюдента t для парных данных, чтобы оценить прогрессивную моторику, для которой гипотеза нормальности не может быть отклонена. Для VSL и LIN, для которых гипотеза нормальности должна быть отклонена, мы использовали только тест Вилкоксона для парных данных, поскольку этот тест не требует каких-либо конкретных предположений о распределении данных.Все тесты проводились с использованием статистического пакета SPSS.

Результаты

Ретроспективное исследование

Из 2 587 образцов 602 (23,2%) показали некоторую степень SHV (11,2% легкая, 6,2% умеренная и 5,8% тяжелая) (). Распространенность SHV составила 26,2% (480 из 1833 субъектов): 13,2% легкая, 6,6% умеренная и 6,4% тяжелая (). Для тех субъектов, для которых было выполнено более одного анализа спермы, в таблице показана вязкость, обнаруженная во время первого исследования.

Таблица 1

Распространенность образцов спермы и субъектов с повышенной вязкостью спермы (SHV) у партнеров-мужчин из субфертильных пар.

9025 26,2%) 902 тяжелая9

	Всего образцов спермы ( n = 2 587)	Всего субъектов ( n = 1833)
Всего SHV	602 (23,2%)
SHV легкая	291 (11,2%)	242 (13,2%)
SHV умеренная	160 (6,2%)	121 (6,6%)
151 (5,8%)	117 (6. 4%)

Клиническое исследование

52 субъекта, участвовавшие в клиническом исследовании, были разделены на три группы в соответствии с их исходными диагностическими результатами ().

Таблица 2

Последующее обследование 52 пациентов (разделенных на 3 группы), прошедших полную диагностическую и терапевтическую программу.

тяжелая )

Группа	SHV	Предварительная обработка	Последующая обработка
			Нормальная вязкость	SHV
				Легкая	Легкая
A	мягкий	14	14	—	—	—
	умеренный	1	1							— тяжелый	2	2	—	—	—
		17	17 (100%)	—	—	—
	2	—	—	—
умеренный	4	2	1	1	—
тяжелый	6	—	3	2	1
	12	4 (33. 3%)	4 (33,3%)	3 (25%)	1 (8,4%)
C	мягкий	6	3	3	—	—	умеренный	7	2	1	4	—
	тяжелый	10	1	3	1	5						7 (30,5%)	5 (21. 7%)	5 (21,7%)
	Всего		52 (100%)	27 (52,0%)	11 (21,1%)	8 (15,4%)	6 (11,5 %)

Группа A ( n = 17) включала субъектов с положительной культурой спермы на Escherichia coli ( n = 5), Klebsiella pneumoniae ( n = 3), Proteus mirabilis ( n = 3), Pseudomonas aeruginosa ( n = 1), Enterobacter faecalis ( n = 2) или Ureaplasma urealyticum ( n = 3).

Группа B ( n = 12) состояла из субъектов с> 1 × 10 ⁶ семенных лейкоцитов и / или воспалительными признаками, наблюдаемыми при ультразвуковом исследовании.

Группа C ( n = 23) включала субъектов с отрицательной культурой спермы и без воспалительных признаков, наблюдаемых при УЗИ, и 1 × 10 ⁶ лейкоцитов в семенной жидкости.

Каждая группа была разделена на три подгруппы в зависимости от степени тяжести SHV (легкая, умеренная или тяжелая).

Терапевтическое лечение полностью разрешило SHV в 27 случаях (52.0%): 17 из 17 субъектов (100%) в группе A, 4 из 12 субъектов (33,0%) в группе B и 6 из 23 субъектов (26,1%) в группе C. У всех этих субъектов посев спермы стал или остался отрицательный, семенные лейкоциты стали или остались 1 × 10 ⁶ , а ультразвуковое исследование больше не показало признаков воспаления.

Напротив, у других 25 субъектов лечение было неэффективным или только частично, поскольку тяжелая гипервязкость стала средней или легкой. Таким образом, 25 из 52 пролеченных пациентов (48.0%) все еще имели некоторую степень SHV. Из них 11 (21,1%) страдали легкой SHV, 8 (15,4%) — средней и 6 (11,5%) — тяжелой повышенной вязкостью.

Наконец, из 27 пациентов, у которых после терапии была достигнута нормальная вязкость, прогрессивная подвижность (тест Уилкоксона P <0,01 и двусторонний тест Стьюдента t -тест P <0,005), VSL (тест Уилкоксона P < 0,001) и LIN (тест Уилкоксона P <0,05) были выше, чем уровни до лечения (,).Прогрессивная моторика, VSL и LIN улучшились, соответственно, у 21, 25 и 18 человек из 27 (). Только один субъект перешел от астенозооспермии к нормальной подвижности сперматозоидов (50% оценок a + b по данным ВОЗ). Средняя разница подвижности сперматозоидов после лечения и . предварительная обработка составляла 6,2 + 10,4 (стандартное отклонение) ().

Профиль подвижности сперматозоидов у субъектов ( n = 27) с предварительной обработкой SHV и последующей обработкой с нормальной вязкостью. Сплошные и пунктирные линии показывают приращение и уменьшение кинетических параметров соответственно.(A): Процент прогрессирующей подвижности (тест Шапиро-Уилка до лечения P = 0,077, после лечения P = 0,246; гипотеза нормальности не может быть отклонена). Тест Вилкоксона для парных данных P <0,01. Двусторонний критерий Стьюдента t для парных данных P <0,005. (B): Скорость прямой линии (VSL) (мкм сек ^-1 ) (тест Шапиро-Уилка до лечения P = 0,033, после лечения P <0,001; гипотеза о нормальности должна быть отклонена).Тест Вилкоксона для парных данных P <0,001. (C): Линейность (LIN) (тест Шапиро-Уилка до лечения P = 0,043, после лечения P = 0,017; гипотеза о нормальности должна быть отклонена). Тест Вилкоксона для парных данных P <0,05.

Таблица 3

Профиль подвижности у субъектов ( n = 27) с SHV до лечения и нормальной вязкостью после лечения.

	Предварительная обработка ( n = 27)	Последующая обработка ( n = 27)	Различия
Прогрессивная подвижность (%)	20.2 ± 12,6	26,4 ± 13,3 a, d	6,2 ± 10,4
VSL (мкм с −1 ) (скорость по прямой)	18,4 ± 6,2	25,3 ± 6,8 b	6,8 ± 6,2
LIN (линейность)	0,76 ± 0,09	0,81 ± 0,07 c	0,05 ± 0,11

Обсуждение

Целью данного исследования было оценить распространенность в большой популяции партнеров-мужчин из субфертильных пар, а также для оценки возможной корреляции между инфекциями / воспалением половых путей и SHV. Кроме того, мы оценили эффекты терапевтических подходов к лечению SHV и оценили кинетические параметры сперматозоидов после успешного лечения.

Что касается первого пункта, исследование большой популяции мужчин-партнеров субфертильных пар показало, что распространенность SHV составила 26,2%, что подтверждает относительно высокую частоту этого состояния. Эта распространенность была значительно ниже, чем обнаруженная Gonzales et al . ^{8, 9} , но значительно выше по сравнению с найденным Гопалкришнаном и др. . ²⁷ и Эсфандиари и др. . ²⁸ . Это может быть из-за различий в популяциях пациентов, а также из-за различий в стандартизации измерения SHV.

Что касается причин и патогенных аспектов SHV, то они еще не выяснены полностью. В этом исследовании изучалась корреляция между повышенной вязкостью и классическими патогенными факторами, предлагаемыми в литературе, такими как инфекция или воспаление мужских половых путей. Это исследование показало распространенность легкой SHV в группе A (положительный посев спермы), тогда как оно показало преобладание тяжелой SHV в группе B и, что удивительно, в группе C, которая была группой без каких-либо признаков воспаления.

Что касается лечения SHV, то в эпоху до появления техник ЭКО Амелар и Дубин ⁴ заявили, что SHV следует лечить только в том случае, если результаты посткоитальных тестов были плохими. Лечение для снижения SHV с помощью непрямых мер, таких как избыточная гидратация пациентов, массаж простаты или введение парентеральной гиалуронидазы, не было эффективным ⁴ .Они также предложили использовать первую часть эякулята (если вязкость была ниже, чем у всего эякулята) или весь эякулят, после нескольких прогонов через иглу для подкожных инъекций, для внутриматочной инсеминации (ВМИ) ⁴ .

Внедрение ЭКО и использование все более сложных методов подготовки спермы подчеркнули важность принятия дополнительных мер в случаях SHV. Фактически, муколитические агенты были предложены для лечения in vitro .Среди наиболее важных исследований в этой области Honea et al . В заявлении ⁶ указано, что ограниченный протеолиз с использованием α-химотрипсина в случаях, когда он улучшает результаты анализа проникновения сперматозоидов, может представлять собой полезную предварительную обработку сверхвязкой спермы для программ IUI или IVF. Кроме того, согласно Zavos et al . ⁵ , ограниченный протеолиз сверхвязких образцов спермы с использованием α-химотрипсина помог восстановить большее количество сперматозоидов более высокого качества, которые можно было бы использовать в различных вспомогательных репродуктивных технологиях.

Однако не исключено, что подобные процедуры могут повредить структуру сперматозоидов. В результате более перспективным может оказаться патогенный подход к лечению повышенной вязкости.

Munuce и др. . ¹⁷ использовали лечение антибиотиками у субъектов с инфекциями половых путей, с SHV и без. Терапия основывалась на соответствующем микроорганизме и антибиотикограмме. Они пришли к выводу, что не было никакой связи между SHV и положительностью в культурах спермы, количеством видов, выделенных в культурах спермы, лейкоспермией или наличием антител к сперматозоидам.

В этом исследовании мы оценили эффекты не только лечения антибиотиками, но также противовоспалительных и муколитических агентов in vivo . Анализ результатов показал, что лечение было успешным примерно в половине случаев, в первую очередь у пациентов с легкой формой SHV и положительным посевом спермы. У остальных пациентов лечение либо не имело эффекта, либо просто снижало гипервязкость с тяжелой до умеренной или легкой. На основании этих наблюдений можно предположить, что случаи легкой SHV могут быть результатом легко поддающейся лечению инфекции и воспаления.С другой стороны, тяжелая SHV может представлять собой совсем другое. В предыдущем исследовании мы предположили, что определенные случаи идиопатической SHV можно рассматривать как минимальные клинические проявления муковисцидоза, поскольку вариации последовательности гена CFTR могут составлять генетическую основу этого заболевания ¹⁶ . Несмотря на негативное влияние тяжелой SHV на способность к воспроизводству и хотя было бы очень важно понять лежащие в основе молекулярные механизмы, никаких других исследований генетической основы идиопатической SHV в литературе не найдено.

Следовательно, в случаях, когда противовоспалительное лечение оказывается безуспешным, можно заподозрить генетическое происхождение SHV. В этих случаях может быть полезно провести генетический анализ, в первую очередь на наличие мутаций в гене CFTR.

Наконец, пагубное влияние SHV на подвижность сперматозоидов, по-видимому, дополнительно подтверждается улучшенной кинетикой, наблюдаемой у успешно пролеченных пациентов. Это согласуется с Эльзанати и др. . ² и Кури и др. . ²⁹ , и подтверждает важный «эффект улавливания», который, естественно, более очевиден при тяжелой SHV.

В заключение, результаты исследования позволяют сделать следующие наблюдения: SHV часто обнаруживается у субфертильных мужчин и отрицательно влияет на кинетические параметры семенной жидкости; специфическая антибиотикотерапия и противовоспалительная терапия могут успешно лечить легкую SHV, при которой состояние кажется результатом инфекции или воспаления; и повышенная вязкость, по-видимому, возникает не из-за одного патогенного фактора, а из-за нескольких (биохимических, ферментативных и генетических) факторов, которые действуют совместно. Эти факторы требуют дальнейшего изучения, чтобы лучше понять их роль в патогенезе SHV.

Благодарности

Эта работа была поддержана грантом Telethon (GGP06199).

Ссылки

• Tjioe DY, Oentoeng S. Вязкость спермы человека и процент подвижных сперматозоидов. Fertil Steril. 1968; 19: 562–5. [PubMed] [Google Scholar]
• Эльзанати С., Мальм Дж., Гиверкман А. Вязко-эластичность семенной жидкости по отношению к функции придатков и придатков половых желез и ее влияние на подвижность сперматозоидов.Инт Дж. Андрол. 2004. 27: 94–100. [PubMed] [Google Scholar]
• Эсфандиари Н., Бурджак Х, Готлиб Л., Каспер РФ. Гипервязкость семенной жидкости связана с плохим исходом экстракорпорального оплодотворения и переноса эмбриона: проспективное исследование. Fertil Steril. 2008; 90: 1739–43. [PubMed] [Google Scholar]
• Амелар Р.Д., Дубин Л. Особые проблемы в управлении // Амелар Р.Д., Дубин Л., Уолш П.С., редакторы. Мужское бесплодие. Филадельфия: WB Saunders Company; 1977p191–214.
• Zavos PM, Zarmakoupis-Zavos PN, Correa JR.Влияние лечения нарушений вязкости семенной жидкости с помощью α-химотрипсина на восстановление сперматозоидов для вспомогательных репродуктивных технологий: сравнение методов фильтрации SpermPrep и центрифугирования в градиенте Percoll. Ближний Восток Fertil Soc J. 1997; 2: 223–9. [Google Scholar]
• Honea KL, Houserman VL, Merryman DC, Free DA, Stringfellow SE. Влияние ограниченного протеолиза с α-химотрипсином на сперму с аномальным анализом проникновения сперматозоидов и возможным применением для оплодотворения in vitro или внутриматочной инсеминации.J Assist Reprod Genet. 1993; 10: 255–60. [PubMed] [Google Scholar]
• Упадхьяя М., Хиббард Б.М., Уокер С.М. Использование спутолизина для разжижения вязкой человеческой спермы. Fertil Steril. 1981; 35: 657–61. [PubMed] [Google Scholar]
• Gonzales GF, Kortebani G, Mazzolli AB. Повышенная вязкость и гипофункция семенных пузырьков. Арка Андрол. 1993; 30: 63–8. [PubMed] [Google Scholar]
• Гонсалес Г.Ф. Функция семенных пузырьков и их роль в мужской фертильности. Азиат Дж. Андрол. 2001; 3: 251–8.[PubMed] [Google Scholar]
• Андраде-Роша FT. Физический анализ эякулята для оценки секреторной активности семенных пузырьков и простаты. Clin Chem Lab Med. 2005; 43: 1203–10. [PubMed] [Google Scholar]
• Carpino A, Siciliano L. Неизмененный белковый состав / уровни маркеров секреции половых путей в семенной плазме высоковязких эякулятов человека. Арка Андрол. 1998; 41: 31–5. [PubMed] [Google Scholar]
• Mendeluk GR, Gonzales Flecha FL, Castello PR, Bregni C. Факторы, участвующие в биохимической этиологии повышенной вязкости семенной плазмы человека.Дж. Андрол. 2000; 21: 262–7. [PubMed] [Google Scholar]
• Mendeluk GR, Blanco AM, Bregni C. Реология семенной жидкости человека: роль лизоцима. Acta Farm Bonaerense. 1996; 15: 163–8. [Google Scholar]
• Mendeluk GR, Blanco AM, Bregni C. Вязкость семенной жидкости человека: роль лизоцима. Арка Андрол. 1997; 38: 7–11. [PubMed] [Google Scholar]
• Айдемир Б., Онаран И., Кизилер А.Р., Алиджи Б., Акьолджу М.С. Влияние окислительного повреждения на вязкость семенной жидкости у бесплодных мужчин.Дж. Андрол. 2008; 29: 41–6. [PubMed] [Google Scholar]
• Росси Т., Грандони Ф., Маццилли Ф., Куатруччи С., Антонелли М. и др. Высокая частота (TG) _m T _n вариантных трактов в гене регулятора трансмембранной проводимости муковисцидоза у мужчин с высокой вязкостью спермы. Fertil Steril. 2004; 82: 1316–22. [PubMed] [Google Scholar]
• Munuce MJ, Bregni C, Carizza C, Mendeluk G. Посев спермы, лейкоцитоспермия и наличие антител к сперматозоидам при повышенной вязкости семенной жидкости.Арка Андрол. 1999; 42: 21–8. [PubMed] [Google Scholar]
• Дондеро Ф., Росси Т., Д’Оффици Дж., Маззилли Ф., Россо Р. и др. Анализ спермы серопозитивных мужчин и лиц с высоким риском заражения ВИЧ. Hum Reprod. 1996; 11: 765–8. [PubMed] [Google Scholar]
• Ван И, Лян С. Л., Ву Дж.К., Сюй Ц., Цинь С.Х. и др. Do Ureaplasma urealyticum Инфекции половых путей влияют на качество спермы. Азиат Дж. Андрол. 2006; 8: 562–8. [PubMed] [Google Scholar]
• Винкельбауэр Ф.В., Амманн М.Э., Карнел Ф., Ламмер Дж.Допплерография варикоцеле: отдаленное наблюдение после венографии и транкатетерной склеротерапии. J Ultrasound Med. 1994; 23: 953–8. [PubMed] [Google Scholar]
• Хенкель Р., Маасс Дж., Юнг А., Хайдл Дж., Шилл В. Б. и др. Возрастные изменения семенной полиморфно-ядерной эластазы у мужчин с бессимптомным воспалением половых путей. Азиат Дж. Андрол. 2007; 9: 299–304. [PubMed] [Google Scholar]
• Всемирная организация здравоохранения. Лабораторное руководство по исследованию взаимодействия спермы человека и цервикальной слизи 3-е изд.Нью-Йорк: Издательство Кембриджского университета; 1992 [Google Scholar]
• Всемирная организация здравоохранения. Лабораторное руководство по исследованию взаимодействия спермы человека и цервикальной слизи 4-е изд. Нью-Йорк: Издательство Кембриджского университета; 1999 [Google Scholar]
• Маццилли Ф., Росси Т., Сабатини Л., Дондеро Ф. Программное обеспечение системы анализа наложенных изображений (SIAS): новый подход к оценке подвижности сперматозоидов. Fertil Steril. 1995; 64: 653–6. [PubMed] [Google Scholar]
• Маццилли Ф., Росси Т., Дельфино М., Нофрони И.Применение обновленной системы наложения изображений (SIAS) для оценки кинематики сперматозоидов. Андрология. 1999; 31: 187–194. [PubMed] [Google Scholar]
• Кимура А., Куроока Ю., Хирасава К., Китамура Т., Кавабе К. Точность расчета объема простаты при трансректальном УЗИ. Int J Urol. 1995; 2: 252–6. [PubMed] [Google Scholar]
• Gopalkrishnan K, Padwal V, Balaiah D. Влияет ли вязкость семенной жидкости на целостность хроматина сперматозоидов? Арка Андрол. 2000; 45: 99–103. [PubMed] [Google Scholar]
• Эсфандиари Н., Готлиб Л., Каспер РФ.Гипервязкость семенной жидкости связана с плохим результатом контролируемой стимуляции яичников и внутриматочной инсеминации: проспективное исследование. Int J Fertil Wom Med. 2006; 51: 21–7. [PubMed] [Google Scholar]
• Кури С.М., Арианьо Д.И., Ченло П.Х., Менделук Г.Р., Пульезе М.Н. и др. Астенозооспермия: анализ большой популяции. Арка Андрол. 2003; 49: 343–9. [PubMed] [Google Scholar]

распространенность, патогенез и терапевтические аспекты

Азиатский Дж. Андрол. 2009 сен; 11 (5): 609–615.

Джлениа Элиа

¹ Кафедра медицинской физиопатологии, Римский университет, Сапиенца, Рим 00189, Италия

Микеле Дельфино

¹ Кафедра медицинской физиопатологии, Римский университет, Сапиенца, Рим 00189, Италия

Норина Имброгно

¹ Кафедра медицинской физиопатологии, Римский университет, Сапиенца, Рим 00189, Италия

Франческа Капогреко

¹ Кафедра медицинской физиопатологии, Римский университет, Сапиенца, Рим 00189, Италия

Марко Лукарелли

² Кафедра клеточной биотехнологии и гематологии, Римский университет, Сапиенца, Рим 00189, Италия

Тициана Росси

¹ Кафедра медицинской физиопатологии, Римский университет, Сапиенца, Рим 00189, Италия

Фернандо Маццилли

¹ Кафедра медицинской физиопатологии, Римский университет, Сапи enza, Rome 00189, Италия

¹ Кафедра медицинской физиопатологии, Римский университет, Сапиенца, Рим 00189, Италия

² Кафедра клеточной биотехнологии и гематологии, Римский университет, Сапиенца, Рим 00189, Италия

^* Медицинский факультет, больница Сант-Андреа, Римский университет, Via di Grottarossa 1035-00189, Sapienza, Rome 00189, Италия. Факс: + 39-6337-75001 Эл. Почта: [email protected]

Поступила в редакцию 22 января 2009 г .; Пересмотрено 16 июня 2009 г .; Принято 2 июля 2009 г.

Эта статья цитировалась в других статьях в PMC.

Abstract

Целями этого исследования были (а) определение распространенности субъектов с повышенной вязкостью спермы (SHV) в большой популяции мужчин-партнеров субфертильных пар; (b) для выявления любой корреляции между SHV и инфекциями или воспалением половых путей; (c) оценить эффекты терапевтических подходов к лечению SHV; и (d) для оценки кинетических параметров сперматозоидов после успешного лечения SHV.Было проведено ретроспективное исследование 1833 мужчин-партнеров субфертильных пар. Затем были проведены клинические, семенные, бактериологические и ультразвуковые исследования с участием 52 субъектов, страдающих SHV, и SHV был классифицирован как легкий (длина нити> 2 см и ≤ 4 см), средний (> 4 см и ≤ 6 см). или тяжелые (> 6 см). Распространенность SHV наблюдалась у 26,2% (480) субъектов, из которых 13,2% страдали легкой формой, 6,6% — средней и 6,4% — тяжелой формой SHV. Лечение было полностью успешным только у 27 человек (52.0%), в первую очередь у тех, у кого была легкая базальная SHV с положительным посевом спермы. У этих субъектов процент прогрессивной подвижности, скорость прямой линии и линейность были значительно выше, чем уровни до лечения. SHV часто обнаруживается у субъектов с пониженной фертильностью. Патогенез был строго связан с инфекционными / воспалительными факторами только в 48,0% случаев; следовательно, возможно, что биохимические, ферментативные или генетические факторы играют роль в этом состоянии.

Ключевые слова: Инфекция половых путей, воспаление половых путей, УЗИ половых путей, посев спермы, повышенная вязкость спермы (SHV), подвижность сперматозоидов

Введение

Повышенная вязкость спермы (SHV) — это состояние, которое может серьезно ухудшить физико-химические свойства характеристика семенной жидкости.Таким образом, он заслуживает более пристального внимания исследователей, так как может серьезно повлиять на функцию сперматозоидов. Прежде всего, SHV, по-видимому, связан со снижением подвижности сперматозоидов, возможно, из-за «эффекта захвата», который предотвращает нормальное продвижение сперматозоидов через женские половые пути ^{1, 2} .

Повышенная вязкость спермы также приводит к определенным техническим трудностям при работе с образцами, например, при использовании градиентов Перколла для подготовки спермы для программ in vitro оплодотворения (ЭКО) ³ .

Предложены физико-химические методы лечения SHV. Физический метод включает проталкивание образца через иглу для подкожных инъекций ⁴ , тогда как при химической обработке используются муколитические агенты, такие как α-химотрипсин ^{5, 6} и спутолизин ⁷ . Однако нельзя игнорировать тот факт, что такие процедуры могут повредить структуру сперматозоидов. Поэтому патогенный подход к лечению повышенной вязкости может быть более целесообразным.

Патогенетические аспекты SHV еще предстоит полностью выяснить. Гонсалес и др. . ^{8, 9} и Andrade-Rocha ¹⁰ показали снижение уровня фруктозы в SHV и выдвинули гипотезу о неадекватном функционировании семенных пузырьков в качестве объяснения. Carpino and Siciliano ¹¹ изучали возможную корреляцию между SHV и секрецией белка придатка яичка, пузырьков и простаты. Они обнаружили, что гипервязкость не играет никакой роли в процессе свертывания спермы.

Mendeluk и др. . ¹² показали, что нет никакой разницы ни в концентрации общих белков или ДНК, ни в процентном содержании воды в сверхвязкой семенной плазме.Кроме того, Mendeluk et al . ^{13, 14} наблюдали, что лизоцим не играет прямой роли в SHV, хотя дефицит в случаях хронических инфекций может быть усугубляющим фактором с клинической точки зрения. Айдемир и др. . ¹⁵ указывают на то, что повышенное окислительное повреждение может быть фактором SHV. В предыдущем исследовании мы показали, что генетические факторы могут влиять на текучесть спермы ¹⁶ .

Особый интерес представляет возможная корреляция между SHV и инфекциями и / или воспалением половых путей.Однако следует отметить, что в этой области существует много разногласий. Согласно Munuce и др. . ¹⁷ , нет никакой связи между SHV и положительностью посева спермы, лейкоспермией или наличием антител к сперматозоиду. Кроме того, нет корреляции между SHV и инфекцией вируса иммунодефицита человека ¹⁸ . Однако Wang и др. . ¹⁹ обнаружили, что Ureaplasma urealyticum инфекций были связаны с SHV.

Цели этого исследования: (а) оценить распространенность субъектов с SHV в большой популяции мужчин-партнеров субфертильных пар; (б) оценить возможную корреляцию между SHV и инфекциями / воспалениями половых путей; (c) оценить эффекты терапевтических подходов в лечении SHV; и (d) оценить кинетические параметры сперматозоидов после успешного лечения SHV.

Материалы и методы

Ретроспективное исследование

Ретроспективное исследование было проведено для изучения данных с января 2004 года по декабрь 2007 года для оценки распространенности ВГЧ у мужчин-партнеров субфертильных пар, направленных в отделение андрологии больницы Сант-Андреа (Рим) для анализа спермы. Всего было обследовано 1 833 человека и 2 587 эякулятов. В анализ были включены субъекты с полностью нормальными параметрами спермы и лица с одним или несколькими измененными параметрами спермы.

Клиническое исследование

Клиническое исследование проводилось в соответствии с рекомендациями комитета по этике больницы.

Для изучения возможного вовлечения инфекций или воспалений половых путей в качестве патогенного фактора в SHV группу исследования составили 52 пациента с SHV в возрасте от 25 до 43 лет.Был собран полный анамнез, и пациенты прошли диагностическую и терапевтическую программу, включающую клиническое и семенное обследование, посев спермы и ультразвуковое исследование яичек, семенных пузырьков и простаты. Все пациенты с гормональными изменениями, лечившимися крипторхизмом и варикоцеле с выраженным венозным рефлюксом (время рефлюкса более 2 с, определяется с помощью цветного допплера) ²⁰ были исключены из исследования.

Минимальный период бесплодия пары составил 1 год. Концентрация спермы составляла ≥ 20 миллионов мл ^–1 , а атипичные формы — <70%. SHV было подтверждено вторым семенным обследованием через 2 месяца после первого.

Все 52 субъекта лечились противовоспалительными и муколитическими средствами, 50 мг тетрациклина и 5 мг гидрокортизона (Фармацевтика Форменти спа, Милан, Италия) каждый день в течение 30 дней, а затем 200 мг N -ацетилцистеина (Zambon Svizzera SA , Cadempino, Swisse) каждый день в течение следующих 2 месяцев.Пациенты с SHV, не ответившие на терапию, получали второй курс противовоспалительных препаратов. Субъекты с положительной культурой спермы должны были сначала пройти специальную антибактериальную терапию, согласно антибиотикограмме, при самой низкой минимальной ингибирующей концентрации для идентифицированных бактерий. Терапия длилась 5 дней.

Стандартный анализ спермы, посев спермы и ультразвуковое исследование яичек, семенных пузырьков и простаты проводились до и после терапии.

Определение инфекции и воспаления мужских половых путей

В нашей когорте инфекции были обнаружены с помощью посева спермы. Был предложен ряд методов диагностики воспаления половых путей, включая исследование эякулята на наличие пероксидаза-положительных клеток или уровней семенной полиморфно-ядерной эластазы ²¹ . Увеличение количества лейкоцитов в семенной жидкости (WBC) при отсутствии инфекции или признаков воспаления, влияющих на придаток яичка, семенные пузырьки и простату, было принято как маркер воспаления. Подтверждение воспаления производилось с помощью УЗИ. Субъекты были разделены в зависимости от наличия или отсутствия инфекции и / или признаков воспаления.

Анализ спермы и посев спермы

Образцы спермы были собраны путем мастурбации через 3-5 дней полового воздержания. Образцы хранили в контролируемом инкубаторе (37 ° C) на осторожно перемещающемся планшете.

После разжижения образцы спермы были проанализированы в соответствии с рекомендациями Всемирной организации здравоохранения (ВОЗ) ^{22, 23} . Система анализа наложенных изображений использовалась для оценки параметров подвижности сперматозоидов ^{24, 25} . Прогрессивная подвижность определялась следующим образом: класс 1 — скорость по прямой (VSL) ≥ 23 мкм с ^–1 и линейность (LIN) ≥ 0.58; и класс 2 — VSL> 10 и ≤ 23 мкм с ^-1 и LIN ≥ 0,58 (частота кадров: 21 кадр с ^-1 ) ²⁵ . Морфологию сперматозоидов изучали методом окрашивания по Брайану – Лейшману (BL) ²² . Предметные стекла исследовали при увеличении × 1000 с помощью светового микроскопа Olympus CX31 с использованием микрометрической шкалы. Метод окрашивания BL является особенно эффективным методом различения половых клеток и лейкоцитов ²² . Дефекты морфологии сперматозоидов были классифицированы в соответствии с рекомендациями ВОЗ ^{22, 23} .Для каждого образца оценивали не менее 200 сперматозоидов.

Вязкость определяли через 1 час после эякуляции осторожным отсасыванием спермы в пипетку на 5 мл и затем получением капель спермы. В случае аномальной вязкости капля образовывала нить длиной более 2 см, что оценивали по сантиметровой шкале. Гипервязкость при нормальной гравитации оценивалась как легкая (длина нити> 2 см и ≤ 4 см), умеренная (> 4 см и ≤ 6 см) или сильная (> 6 см).

Наконец, образцы семенной культуры с колониями> 100 000 UFC мл ^-1 были признаны положительными.

Контроль качества анализа спермы

Внутренний контроль качества (КК) (внутриоператорский и межоператорский) проводился каждые 2 месяца. Внешний контроль качества проводился Национальным институтом здравоохранения.

Ультразвук

Ультразвук яичек выполняли с помощью HDI 4000 (ATL Ultrasound, Bothell, WA, USA) с использованием датчика с диапазоном частот от 5,5 до 12 МГц. Увеличение объема предстательной железы, семенных пузырьков или придатка яичка или изменения эхогенных структур считались признаками воспаления ²⁶ .

Статистика

Мы использовали тест Шапиро – Уилка для изучения прогрессивной моторики, распределения VSL и LIN. Мы использовали как тест Уилкоксона, так и двусторонний тест Стьюдента t для парных данных, чтобы оценить прогрессивную моторику, для которой гипотеза нормальности не может быть отклонена. Для VSL и LIN, для которых гипотеза нормальности должна быть отклонена, мы использовали только тест Вилкоксона для парных данных, поскольку этот тест не требует каких-либо конкретных предположений о распределении данных.Все тесты проводились с использованием статистического пакета SPSS.

Результаты

Ретроспективное исследование

Из 2 587 образцов 602 (23,2%) показали некоторую степень SHV (11,2% легкая, 6,2% умеренная и 5,8% тяжелая) (). Распространенность SHV составила 26,2% (480 из 1833 субъектов): 13,2% легкая, 6,6% умеренная и 6,4% тяжелая (). Для тех субъектов, для которых было выполнено более одного анализа спермы, в таблице показана вязкость, обнаруженная во время первого исследования.

Таблица 1

Распространенность образцов спермы и субъектов с повышенной вязкостью спермы (SHV) у партнеров-мужчин из субфертильных пар.

9025 26,2%) 902 тяжелая9

	Всего образцов спермы ( n = 2 587)	Всего субъектов ( n = 1833)
Всего SHV	602 (23,2%)
SHV легкая	291 (11,2%)	242 (13,2%)
SHV умеренная	160 (6,2%)	121 (6,6%)
151 (5,8%)	117 (6. 4%)

Клиническое исследование

52 субъекта, участвовавшие в клиническом исследовании, были разделены на три группы в соответствии с их исходными диагностическими результатами ().

Таблица 2

Последующее обследование 52 пациентов (разделенных на 3 группы), прошедших полную диагностическую и терапевтическую программу.

тяжелая )

Группа	SHV	Предварительная обработка	Последующая обработка
			Нормальная вязкость	SHV
				Легкая	Легкая
A	мягкий	14	14	—	—	—
	умеренный	1	1							— тяжелый	2	2	—	—	—
		17	17 (100%)	—	—	—
	2	—	—	—
умеренный	4	2	1	1	—
тяжелый	6	—	3	2	1
	12	4 (33. 3%)	4 (33,3%)	3 (25%)	1 (8,4%)
C	мягкий	6	3	3	—	—	умеренный	7	2	1	4	—
	тяжелый	10	1	3	1	5						7 (30,5%)	5 (21. 7%)	5 (21,7%)
	Всего		52 (100%)	27 (52,0%)	11 (21,1%)	8 (15,4%)	6 (11,5 %)

Группа A ( n = 17) включала субъектов с положительной культурой спермы на Escherichia coli ( n = 5), Klebsiella pneumoniae ( n = 3), Proteus mirabilis ( n = 3), Pseudomonas aeruginosa ( n = 1), Enterobacter faecalis ( n = 2) или Ureaplasma urealyticum ( n = 3).

Группа B ( n = 12) состояла из субъектов с> 1 × 10 ⁶ семенных лейкоцитов и / или воспалительными признаками, наблюдаемыми при ультразвуковом исследовании.

Группа C ( n = 23) включала субъектов с отрицательной культурой спермы и без воспалительных признаков, наблюдаемых при УЗИ, и 1 × 10 ⁶ лейкоцитов в семенной жидкости.

Каждая группа была разделена на три подгруппы в зависимости от степени тяжести SHV (легкая, умеренная или тяжелая).

Терапевтическое лечение полностью разрешило SHV в 27 случаях (52.0%): 17 из 17 субъектов (100%) в группе A, 4 из 12 субъектов (33,0%) в группе B и 6 из 23 субъектов (26,1%) в группе C. У всех этих субъектов посев спермы стал или остался отрицательный, семенные лейкоциты стали или остались 1 × 10 ⁶ , а ультразвуковое исследование больше не показало признаков воспаления.

Напротив, у других 25 субъектов лечение было неэффективным или только частично, поскольку тяжелая гипервязкость стала средней или легкой. Таким образом, 25 из 52 пролеченных пациентов (48.0%) все еще имели некоторую степень SHV. Из них 11 (21,1%) страдали легкой SHV, 8 (15,4%) — средней и 6 (11,5%) — тяжелой повышенной вязкостью.

Наконец, из 27 пациентов, у которых после терапии была достигнута нормальная вязкость, прогрессивная подвижность (тест Уилкоксона P <0,01 и двусторонний тест Стьюдента t -тест P <0,005), VSL (тест Уилкоксона P < 0,001) и LIN (тест Уилкоксона P <0,05) были выше, чем уровни до лечения (,).Прогрессивная моторика, VSL и LIN улучшились, соответственно, у 21, 25 и 18 человек из 27 (). Только один субъект перешел от астенозооспермии к нормальной подвижности сперматозоидов (50% оценок a + b по данным ВОЗ). Средняя разница подвижности сперматозоидов после лечения и . предварительная обработка составляла 6,2 + 10,4 (стандартное отклонение) ().

Профиль подвижности сперматозоидов у субъектов ( n = 27) с предварительной обработкой SHV и последующей обработкой с нормальной вязкостью. Сплошные и пунктирные линии показывают приращение и уменьшение кинетических параметров соответственно.(A): Процент прогрессирующей подвижности (тест Шапиро-Уилка до лечения P = 0,077, после лечения P = 0,246; гипотеза нормальности не может быть отклонена). Тест Вилкоксона для парных данных P <0,01. Двусторонний критерий Стьюдента t для парных данных P <0,005. (B): Скорость прямой линии (VSL) (мкм сек ^-1 ) (тест Шапиро-Уилка до лечения P = 0,033, после лечения P <0,001; гипотеза о нормальности должна быть отклонена).Тест Вилкоксона для парных данных P <0,001. (C): Линейность (LIN) (тест Шапиро-Уилка до лечения P = 0,043, после лечения P = 0,017; гипотеза о нормальности должна быть отклонена). Тест Вилкоксона для парных данных P <0,05.

Таблица 3

Профиль подвижности у субъектов ( n = 27) с SHV до лечения и нормальной вязкостью после лечения.

	Предварительная обработка ( n = 27)	Последующая обработка ( n = 27)	Различия
Прогрессивная подвижность (%)	20.2 ± 12,6	26,4 ± 13,3 a, d	6,2 ± 10,4
VSL (мкм с −1 ) (скорость по прямой)	18,4 ± 6,2	25,3 ± 6,8 b	6,8 ± 6,2
LIN (линейность)	0,76 ± 0,09	0,81 ± 0,07 c	0,05 ± 0,11

Обсуждение

Целью данного исследования было оценить распространенность в большой популяции партнеров-мужчин из субфертильных пар, а также для оценки возможной корреляции между инфекциями / воспалением половых путей и SHV. Кроме того, мы оценили эффекты терапевтических подходов к лечению SHV и оценили кинетические параметры сперматозоидов после успешного лечения.

Что касается первого пункта, исследование большой популяции мужчин-партнеров субфертильных пар показало, что распространенность SHV составила 26,2%, что подтверждает относительно высокую частоту этого состояния. Эта распространенность была значительно ниже, чем обнаруженная Gonzales et al . ^{8, 9} , но значительно выше по сравнению с найденным Гопалкришнаном и др. . ²⁷ и Эсфандиари и др. . ²⁸ . Это может быть из-за различий в популяциях пациентов, а также из-за различий в стандартизации измерения SHV.

Что касается причин и патогенных аспектов SHV, то они еще не выяснены полностью. В этом исследовании изучалась корреляция между повышенной вязкостью и классическими патогенными факторами, предлагаемыми в литературе, такими как инфекция или воспаление мужских половых путей. Это исследование показало распространенность легкой SHV в группе A (положительный посев спермы), тогда как оно показало преобладание тяжелой SHV в группе B и, что удивительно, в группе C, которая была группой без каких-либо признаков воспаления.

Что касается лечения SHV, то в эпоху до появления техник ЭКО Амелар и Дубин ⁴ заявили, что SHV следует лечить только в том случае, если результаты посткоитальных тестов были плохими. Лечение для снижения SHV с помощью непрямых мер, таких как избыточная гидратация пациентов, массаж простаты или введение парентеральной гиалуронидазы, не было эффективным ⁴ .Они также предложили использовать первую часть эякулята (если вязкость была ниже, чем у всего эякулята) или весь эякулят, после нескольких прогонов через иглу для подкожных инъекций, для внутриматочной инсеминации (ВМИ) ⁴ .

Внедрение ЭКО и использование все более сложных методов подготовки спермы подчеркнули важность принятия дополнительных мер в случаях SHV. Фактически, муколитические агенты были предложены для лечения in vitro .Среди наиболее важных исследований в этой области Honea et al . В заявлении ⁶ указано, что ограниченный протеолиз с использованием α-химотрипсина в случаях, когда он улучшает результаты анализа проникновения сперматозоидов, может представлять собой полезную предварительную обработку сверхвязкой спермы для программ IUI или IVF. Кроме того, согласно Zavos et al . ⁵ , ограниченный протеолиз сверхвязких образцов спермы с использованием α-химотрипсина помог восстановить большее количество сперматозоидов более высокого качества, которые можно было бы использовать в различных вспомогательных репродуктивных технологиях.

Однако не исключено, что подобные процедуры могут повредить структуру сперматозоидов. В результате более перспективным может оказаться патогенный подход к лечению повышенной вязкости.

Munuce и др. . ¹⁷ использовали лечение антибиотиками у субъектов с инфекциями половых путей, с SHV и без. Терапия основывалась на соответствующем микроорганизме и антибиотикограмме. Они пришли к выводу, что не было никакой связи между SHV и положительностью в культурах спермы, количеством видов, выделенных в культурах спермы, лейкоспермией или наличием антител к сперматозоидам.

В этом исследовании мы оценили эффекты не только лечения антибиотиками, но также противовоспалительных и муколитических агентов in vivo . Анализ результатов показал, что лечение было успешным примерно в половине случаев, в первую очередь у пациентов с легкой формой SHV и положительным посевом спермы. У остальных пациентов лечение либо не имело эффекта, либо просто снижало гипервязкость с тяжелой до умеренной или легкой. На основании этих наблюдений можно предположить, что случаи легкой SHV могут быть результатом легко поддающейся лечению инфекции и воспаления.С другой стороны, тяжелая SHV может представлять собой совсем другое. В предыдущем исследовании мы предположили, что определенные случаи идиопатической SHV можно рассматривать как минимальные клинические проявления муковисцидоза, поскольку вариации последовательности гена CFTR могут составлять генетическую основу этого заболевания ¹⁶ . Несмотря на негативное влияние тяжелой SHV на способность к воспроизводству и хотя было бы очень важно понять лежащие в основе молекулярные механизмы, никаких других исследований генетической основы идиопатической SHV в литературе не найдено.

Следовательно, в случаях, когда противовоспалительное лечение оказывается безуспешным, можно заподозрить генетическое происхождение SHV. В этих случаях может быть полезно провести генетический анализ, в первую очередь на наличие мутаций в гене CFTR.

Наконец, пагубное влияние SHV на подвижность сперматозоидов, по-видимому, дополнительно подтверждается улучшенной кинетикой, наблюдаемой у успешно пролеченных пациентов. Это согласуется с Эльзанати и др. . ² и Кури и др. . ²⁹ , и подтверждает важный «эффект улавливания», который, естественно, более очевиден при тяжелой SHV.

В заключение, результаты исследования позволяют сделать следующие наблюдения: SHV часто обнаруживается у субфертильных мужчин и отрицательно влияет на кинетические параметры семенной жидкости; специфическая антибиотикотерапия и противовоспалительная терапия могут успешно лечить легкую SHV, при которой состояние кажется результатом инфекции или воспаления; и повышенная вязкость, по-видимому, возникает не из-за одного патогенного фактора, а из-за нескольких (биохимических, ферментативных и генетических) факторов, которые действуют совместно. Эти факторы требуют дальнейшего изучения, чтобы лучше понять их роль в патогенезе SHV.

Благодарности

Эта работа была поддержана грантом Telethon (GGP06199).

Ссылки

• Tjioe DY, Oentoeng S. Вязкость спермы человека и процент подвижных сперматозоидов. Fertil Steril. 1968; 19: 562–5. [PubMed] [Google Scholar]
• Эльзанати С., Мальм Дж., Гиверкман А. Вязко-эластичность семенной жидкости по отношению к функции придатков и придатков половых желез и ее влияние на подвижность сперматозоидов.Инт Дж. Андрол. 2004. 27: 94–100. [PubMed] [Google Scholar]
• Эсфандиари Н., Бурджак Х, Готлиб Л., Каспер РФ. Гипервязкость семенной жидкости связана с плохим исходом экстракорпорального оплодотворения и переноса эмбриона: проспективное исследование. Fertil Steril. 2008; 90: 1739–43. [PubMed] [Google Scholar]
• Амелар Р.Д., Дубин Л. Особые проблемы в управлении // Амелар Р.Д., Дубин Л., Уолш П.С., редакторы. Мужское бесплодие. Филадельфия: WB Saunders Company; 1977p191–214.
• Zavos PM, Zarmakoupis-Zavos PN, Correa JR.Влияние лечения нарушений вязкости семенной жидкости с помощью α-химотрипсина на восстановление сперматозоидов для вспомогательных репродуктивных технологий: сравнение методов фильтрации SpermPrep и центрифугирования в градиенте Percoll. Ближний Восток Fertil Soc J. 1997; 2: 223–9. [Google Scholar]
• Honea KL, Houserman VL, Merryman DC, Free DA, Stringfellow SE. Влияние ограниченного протеолиза с α-химотрипсином на сперму с аномальным анализом проникновения сперматозоидов и возможным применением для оплодотворения in vitro или внутриматочной инсеминации.J Assist Reprod Genet. 1993; 10: 255–60. [PubMed] [Google Scholar]
• Упадхьяя М., Хиббард Б.М., Уокер С.М. Использование спутолизина для разжижения вязкой человеческой спермы. Fertil Steril. 1981; 35: 657–61. [PubMed] [Google Scholar]
• Gonzales GF, Kortebani G, Mazzolli AB. Повышенная вязкость и гипофункция семенных пузырьков. Арка Андрол. 1993; 30: 63–8. [PubMed] [Google Scholar]
• Гонсалес Г.Ф. Функция семенных пузырьков и их роль в мужской фертильности. Азиат Дж. Андрол. 2001; 3: 251–8.[PubMed] [Google Scholar]
• Андраде-Роша FT. Физический анализ эякулята для оценки секреторной активности семенных пузырьков и простаты. Clin Chem Lab Med. 2005; 43: 1203–10. [PubMed] [Google Scholar]
• Carpino A, Siciliano L. Неизмененный белковый состав / уровни маркеров секреции половых путей в семенной плазме высоковязких эякулятов человека. Арка Андрол. 1998; 41: 31–5. [PubMed] [Google Scholar]
• Mendeluk GR, Gonzales Flecha FL, Castello PR, Bregni C. Факторы, участвующие в биохимической этиологии повышенной вязкости семенной плазмы человека.Дж. Андрол. 2000; 21: 262–7. [PubMed] [Google Scholar]
• Mendeluk GR, Blanco AM, Bregni C. Реология семенной жидкости человека: роль лизоцима. Acta Farm Bonaerense. 1996; 15: 163–8. [Google Scholar]
• Mendeluk GR, Blanco AM, Bregni C. Вязкость семенной жидкости человека: роль лизоцима. Арка Андрол. 1997; 38: 7–11. [PubMed] [Google Scholar]
• Айдемир Б., Онаран И., Кизилер А.Р., Алиджи Б., Акьолджу М.С. Влияние окислительного повреждения на вязкость семенной жидкости у бесплодных мужчин.Дж. Андрол. 2008; 29: 41–6. [PubMed] [Google Scholar]
• Росси Т., Грандони Ф., Маццилли Ф., Куатруччи С., Антонелли М. и др. Высокая частота (TG) _m T _n вариантных трактов в гене регулятора трансмембранной проводимости муковисцидоза у мужчин с высокой вязкостью спермы. Fertil Steril. 2004; 82: 1316–22. [PubMed] [Google Scholar]
• Munuce MJ, Bregni C, Carizza C, Mendeluk G. Посев спермы, лейкоцитоспермия и наличие антител к сперматозоидам при повышенной вязкости семенной жидкости.Арка Андрол. 1999; 42: 21–8. [PubMed] [Google Scholar]
• Дондеро Ф., Росси Т., Д’Оффици Дж., Маззилли Ф., Россо Р. и др. Анализ спермы серопозитивных мужчин и лиц с высоким риском заражения ВИЧ. Hum Reprod. 1996; 11: 765–8. [PubMed] [Google Scholar]
• Ван И, Лян С. Л., Ву Дж.К., Сюй Ц., Цинь С.Х. и др. Do Ureaplasma urealyticum Инфекции половых путей влияют на качество спермы. Азиат Дж. Андрол. 2006; 8: 562–8. [PubMed] [Google Scholar]
• Винкельбауэр Ф.В., Амманн М.Э., Карнел Ф., Ламмер Дж.Допплерография варикоцеле: отдаленное наблюдение после венографии и транкатетерной склеротерапии. J Ultrasound Med. 1994; 23: 953–8. [PubMed] [Google Scholar]
• Хенкель Р., Маасс Дж., Юнг А., Хайдл Дж., Шилл В. Б. и др. Возрастные изменения семенной полиморфно-ядерной эластазы у мужчин с бессимптомным воспалением половых путей. Азиат Дж. Андрол. 2007; 9: 299–304. [PubMed] [Google Scholar]
• Всемирная организация здравоохранения. Лабораторное руководство по исследованию взаимодействия спермы человека и цервикальной слизи 3-е изд.Нью-Йорк: Издательство Кембриджского университета; 1992 [Google Scholar]
• Всемирная организация здравоохранения. Лабораторное руководство по исследованию взаимодействия спермы человека и цервикальной слизи 4-е изд. Нью-Йорк: Издательство Кембриджского университета; 1999 [Google Scholar]
• Маццилли Ф., Росси Т., Сабатини Л., Дондеро Ф. Программное обеспечение системы анализа наложенных изображений (SIAS): новый подход к оценке подвижности сперматозоидов. Fertil Steril. 1995; 64: 653–6. [PubMed] [Google Scholar]
• Маццилли Ф., Росси Т., Дельфино М., Нофрони И.Применение обновленной системы наложения изображений (SIAS) для оценки кинематики сперматозоидов. Андрология. 1999; 31: 187–194. [PubMed] [Google Scholar]
• Кимура А., Куроока Ю., Хирасава К., Китамура Т., Кавабе К. Точность расчета объема простаты при трансректальном УЗИ. Int J Urol. 1995; 2: 252–6. [PubMed] [Google Scholar]
• Gopalkrishnan K, Padwal V, Balaiah D. Влияет ли вязкость семенной жидкости на целостность хроматина сперматозоидов? Арка Андрол. 2000; 45: 99–103. [PubMed] [Google Scholar]
• Эсфандиари Н., Готлиб Л., Каспер РФ.Гипервязкость семенной жидкости связана с плохим результатом контролируемой стимуляции яичников и внутриматочной инсеминации: проспективное исследование. Int J Fertil Wom Med. 2006; 51: 21–7. [PubMed] [Google Scholar]
• Кури С.М., Арианьо Д.И., Ченло П.Х., Менделук Г.Р., Пульезе М.Н. и др. Астенозооспермия: анализ большой популяции. Арка Андрол. 2003; 49: 343–9. [PubMed] [Google Scholar]

распространенность, патогенез и терапевтические аспекты

Азиатский Дж. Андрол. 2009 сен; 11 (5): 609–615.

Джлениа Элиа

¹ Кафедра медицинской физиопатологии, Римский университет, Сапиенца, Рим 00189, Италия

Микеле Дельфино

¹ Кафедра медицинской физиопатологии, Римский университет, Сапиенца, Рим 00189, Италия

Норина Имброгно

¹ Кафедра медицинской физиопатологии, Римский университет, Сапиенца, Рим 00189, Италия

Франческа Капогреко

¹ Кафедра медицинской физиопатологии, Римский университет, Сапиенца, Рим 00189, Италия

Марко Лукарелли

² Кафедра клеточной биотехнологии и гематологии, Римский университет, Сапиенца, Рим 00189, Италия

Тициана Росси

¹ Кафедра медицинской физиопатологии, Римский университет, Сапиенца, Рим 00189, Италия

Фернандо Маццилли

¹ Кафедра медицинской физиопатологии, Римский университет, Сапи enza, Rome 00189, Италия

¹ Кафедра медицинской физиопатологии, Римский университет, Сапиенца, Рим 00189, Италия

² Кафедра клеточной биотехнологии и гематологии, Римский университет, Сапиенца, Рим 00189, Италия

^* Медицинский факультет, больница Сант-Андреа, Римский университет, Via di Grottarossa 1035-00189, Sapienza, Rome 00189, Италия. Факс: + 39-6337-75001 Эл. Почта: [email protected]

Поступила в редакцию 22 января 2009 г .; Пересмотрено 16 июня 2009 г .; Принято 2 июля 2009 г.

Эта статья цитировалась в других статьях в PMC.

Abstract

Целями этого исследования были (а) определение распространенности субъектов с повышенной вязкостью спермы (SHV) в большой популяции мужчин-партнеров субфертильных пар; (b) для выявления любой корреляции между SHV и инфекциями или воспалением половых путей; (c) оценить эффекты терапевтических подходов к лечению SHV; и (d) для оценки кинетических параметров сперматозоидов после успешного лечения SHV.Было проведено ретроспективное исследование 1833 мужчин-партнеров субфертильных пар. Затем были проведены клинические, семенные, бактериологические и ультразвуковые исследования с участием 52 субъектов, страдающих SHV, и SHV был классифицирован как легкий (длина нити> 2 см и ≤ 4 см), средний (> 4 см и ≤ 6 см). или тяжелые (> 6 см). Распространенность SHV наблюдалась у 26,2% (480) субъектов, из которых 13,2% страдали легкой формой, 6,6% — средней и 6,4% — тяжелой формой SHV. Лечение было полностью успешным только у 27 человек (52.0%), в первую очередь у тех, у кого была легкая базальная SHV с положительным посевом спермы. У этих субъектов процент прогрессивной подвижности, скорость прямой линии и линейность были значительно выше, чем уровни до лечения. SHV часто обнаруживается у субъектов с пониженной фертильностью. Патогенез был строго связан с инфекционными / воспалительными факторами только в 48,0% случаев; следовательно, возможно, что биохимические, ферментативные или генетические факторы играют роль в этом состоянии.

Ключевые слова: Инфекция половых путей, воспаление половых путей, УЗИ половых путей, посев спермы, повышенная вязкость спермы (SHV), подвижность сперматозоидов

Введение

Повышенная вязкость спермы (SHV) — это состояние, которое может серьезно ухудшить физико-химические свойства характеристика семенной жидкости.Таким образом, он заслуживает более пристального внимания исследователей, так как может серьезно повлиять на функцию сперматозоидов. Прежде всего, SHV, по-видимому, связан со снижением подвижности сперматозоидов, возможно, из-за «эффекта захвата», который предотвращает нормальное продвижение сперматозоидов через женские половые пути ^{1, 2} .

Повышенная вязкость спермы также приводит к определенным техническим трудностям при работе с образцами, например, при использовании градиентов Перколла для подготовки спермы для программ in vitro оплодотворения (ЭКО) ³ .

Предложены физико-химические методы лечения SHV. Физический метод включает проталкивание образца через иглу для подкожных инъекций ⁴ , тогда как при химической обработке используются муколитические агенты, такие как α-химотрипсин ^{5, 6} и спутолизин ⁷ . Однако нельзя игнорировать тот факт, что такие процедуры могут повредить структуру сперматозоидов. Поэтому патогенный подход к лечению повышенной вязкости может быть более целесообразным.

Патогенетические аспекты SHV еще предстоит полностью выяснить. Гонсалес и др. . ^{8, 9} и Andrade-Rocha ¹⁰ показали снижение уровня фруктозы в SHV и выдвинули гипотезу о неадекватном функционировании семенных пузырьков в качестве объяснения. Carpino and Siciliano ¹¹ изучали возможную корреляцию между SHV и секрецией белка придатка яичка, пузырьков и простаты. Они обнаружили, что гипервязкость не играет никакой роли в процессе свертывания спермы.

Mendeluk и др. . ¹² показали, что нет никакой разницы ни в концентрации общих белков или ДНК, ни в процентном содержании воды в сверхвязкой семенной плазме.Кроме того, Mendeluk et al . ^{13, 14} наблюдали, что лизоцим не играет прямой роли в SHV, хотя дефицит в случаях хронических инфекций может быть усугубляющим фактором с клинической точки зрения. Айдемир и др. . ¹⁵ указывают на то, что повышенное окислительное повреждение может быть фактором SHV. В предыдущем исследовании мы показали, что генетические факторы могут влиять на текучесть спермы ¹⁶ .

Особый интерес представляет возможная корреляция между SHV и инфекциями и / или воспалением половых путей.Однако следует отметить, что в этой области существует много разногласий. Согласно Munuce и др. . ¹⁷ , нет никакой связи между SHV и положительностью посева спермы, лейкоспермией или наличием антител к сперматозоиду. Кроме того, нет корреляции между SHV и инфекцией вируса иммунодефицита человека ¹⁸ . Однако Wang и др. . ¹⁹ обнаружили, что Ureaplasma urealyticum инфекций были связаны с SHV.

Цели этого исследования: (а) оценить распространенность субъектов с SHV в большой популяции мужчин-партнеров субфертильных пар; (б) оценить возможную корреляцию между SHV и инфекциями / воспалениями половых путей; (c) оценить эффекты терапевтических подходов в лечении SHV; и (d) оценить кинетические параметры сперматозоидов после успешного лечения SHV.

Материалы и методы

Ретроспективное исследование

Ретроспективное исследование было проведено для изучения данных с января 2004 года по декабрь 2007 года для оценки распространенности ВГЧ у мужчин-партнеров субфертильных пар, направленных в отделение андрологии больницы Сант-Андреа (Рим) для анализа спермы. Всего было обследовано 1 833 человека и 2 587 эякулятов. В анализ были включены субъекты с полностью нормальными параметрами спермы и лица с одним или несколькими измененными параметрами спермы.

Клиническое исследование

Клиническое исследование проводилось в соответствии с рекомендациями комитета по этике больницы.

Для изучения возможного вовлечения инфекций или воспалений половых путей в качестве патогенного фактора в SHV группу исследования составили 52 пациента с SHV в возрасте от 25 до 43 лет.Был собран полный анамнез, и пациенты прошли диагностическую и терапевтическую программу, включающую клиническое и семенное обследование, посев спермы и ультразвуковое исследование яичек, семенных пузырьков и простаты. Все пациенты с гормональными изменениями, лечившимися крипторхизмом и варикоцеле с выраженным венозным рефлюксом (время рефлюкса более 2 с, определяется с помощью цветного допплера) ²⁰ были исключены из исследования.

Минимальный период бесплодия пары составил 1 год. Концентрация спермы составляла ≥ 20 миллионов мл ^–1 , а атипичные формы — <70%. SHV было подтверждено вторым семенным обследованием через 2 месяца после первого.

Все 52 субъекта лечились противовоспалительными и муколитическими средствами, 50 мг тетрациклина и 5 мг гидрокортизона (Фармацевтика Форменти спа, Милан, Италия) каждый день в течение 30 дней, а затем 200 мг N -ацетилцистеина (Zambon Svizzera SA , Cadempino, Swisse) каждый день в течение следующих 2 месяцев.Пациенты с SHV, не ответившие на терапию, получали второй курс противовоспалительных препаратов. Субъекты с положительной культурой спермы должны были сначала пройти специальную антибактериальную терапию, согласно антибиотикограмме, при самой низкой минимальной ингибирующей концентрации для идентифицированных бактерий. Терапия длилась 5 дней.

Стандартный анализ спермы, посев спермы и ультразвуковое исследование яичек, семенных пузырьков и простаты проводились до и после терапии.

Определение инфекции и воспаления мужских половых путей

В нашей когорте инфекции были обнаружены с помощью посева спермы. Был предложен ряд методов диагностики воспаления половых путей, включая исследование эякулята на наличие пероксидаза-положительных клеток или уровней семенной полиморфно-ядерной эластазы ²¹ . Увеличение количества лейкоцитов в семенной жидкости (WBC) при отсутствии инфекции или признаков воспаления, влияющих на придаток яичка, семенные пузырьки и простату, было принято как маркер воспаления. Подтверждение воспаления производилось с помощью УЗИ. Субъекты были разделены в зависимости от наличия или отсутствия инфекции и / или признаков воспаления.

Анализ спермы и посев спермы

Образцы спермы были собраны путем мастурбации через 3-5 дней полового воздержания. Образцы хранили в контролируемом инкубаторе (37 ° C) на осторожно перемещающемся планшете.

После разжижения образцы спермы были проанализированы в соответствии с рекомендациями Всемирной организации здравоохранения (ВОЗ) ^{22, 23} . Система анализа наложенных изображений использовалась для оценки параметров подвижности сперматозоидов ^{24, 25} . Прогрессивная подвижность определялась следующим образом: класс 1 — скорость по прямой (VSL) ≥ 23 мкм с ^–1 и линейность (LIN) ≥ 0.58; и класс 2 — VSL> 10 и ≤ 23 мкм с ^-1 и LIN ≥ 0,58 (частота кадров: 21 кадр с ^-1 ) ²⁵ . Морфологию сперматозоидов изучали методом окрашивания по Брайану – Лейшману (BL) ²² . Предметные стекла исследовали при увеличении × 1000 с помощью светового микроскопа Olympus CX31 с использованием микрометрической шкалы. Метод окрашивания BL является особенно эффективным методом различения половых клеток и лейкоцитов ²² . Дефекты морфологии сперматозоидов были классифицированы в соответствии с рекомендациями ВОЗ ^{22, 23} .Для каждого образца оценивали не менее 200 сперматозоидов.

Вязкость определяли через 1 час после эякуляции осторожным отсасыванием спермы в пипетку на 5 мл и затем получением капель спермы. В случае аномальной вязкости капля образовывала нить длиной более 2 см, что оценивали по сантиметровой шкале. Гипервязкость при нормальной гравитации оценивалась как легкая (длина нити> 2 см и ≤ 4 см), умеренная (> 4 см и ≤ 6 см) или сильная (> 6 см).

Наконец, образцы семенной культуры с колониями> 100 000 UFC мл ^-1 были признаны положительными.

Контроль качества анализа спермы

Внутренний контроль качества (КК) (внутриоператорский и межоператорский) проводился каждые 2 месяца. Внешний контроль качества проводился Национальным институтом здравоохранения.

Ультразвук

Ультразвук яичек выполняли с помощью HDI 4000 (ATL Ultrasound, Bothell, WA, USA) с использованием датчика с диапазоном частот от 5,5 до 12 МГц. Увеличение объема предстательной железы, семенных пузырьков или придатка яичка или изменения эхогенных структур считались признаками воспаления ²⁶ .

Статистика

Мы использовали тест Шапиро – Уилка для изучения прогрессивной моторики, распределения VSL и LIN. Мы использовали как тест Уилкоксона, так и двусторонний тест Стьюдента t для парных данных, чтобы оценить прогрессивную моторику, для которой гипотеза нормальности не может быть отклонена. Для VSL и LIN, для которых гипотеза нормальности должна быть отклонена, мы использовали только тест Вилкоксона для парных данных, поскольку этот тест не требует каких-либо конкретных предположений о распределении данных.Все тесты проводились с использованием статистического пакета SPSS.

Результаты

Ретроспективное исследование

Из 2 587 образцов 602 (23,2%) показали некоторую степень SHV (11,2% легкая, 6,2% умеренная и 5,8% тяжелая) (). Распространенность SHV составила 26,2% (480 из 1833 субъектов): 13,2% легкая, 6,6% умеренная и 6,4% тяжелая (). Для тех субъектов, для которых было выполнено более одного анализа спермы, в таблице показана вязкость, обнаруженная во время первого исследования.

Таблица 1

Распространенность образцов спермы и субъектов с повышенной вязкостью спермы (SHV) у партнеров-мужчин из субфертильных пар.

9025 26,2%) 902 тяжелая9

	Всего образцов спермы ( n = 2 587)	Всего субъектов ( n = 1833)
Всего SHV	602 (23,2%)
SHV легкая	291 (11,2%)	242 (13,2%)
SHV умеренная	160 (6,2%)	121 (6,6%)
151 (5,8%)	117 (6. 4%)

Клиническое исследование

52 субъекта, участвовавшие в клиническом исследовании, были разделены на три группы в соответствии с их исходными диагностическими результатами ().

Таблица 2

Последующее обследование 52 пациентов (разделенных на 3 группы), прошедших полную диагностическую и терапевтическую программу.

тяжелая )

Группа	SHV	Предварительная обработка	Последующая обработка
			Нормальная вязкость	SHV
				Легкая	Легкая
A	мягкий	14	14	—	—	—
	умеренный	1	1							— тяжелый	2	2	—	—	—
		17	17 (100%)	—	—	—
	2	—	—	—
умеренный	4	2	1	1	—
тяжелый	6	—	3	2	1
	12	4 (33. 3%)	4 (33,3%)	3 (25%)	1 (8,4%)
C	мягкий	6	3	3	—	—	умеренный	7	2	1	4	—
	тяжелый	10	1	3	1	5						7 (30,5%)	5 (21. 7%)	5 (21,7%)
	Всего		52 (100%)	27 (52,0%)	11 (21,1%)	8 (15,4%)	6 (11,5 %)

Группа A ( n = 17) включала субъектов с положительной культурой спермы на Escherichia coli ( n = 5), Klebsiella pneumoniae ( n = 3), Proteus mirabilis ( n = 3), Pseudomonas aeruginosa ( n = 1), Enterobacter faecalis ( n = 2) или Ureaplasma urealyticum ( n = 3).

Группа B ( n = 12) состояла из субъектов с> 1 × 10 ⁶ семенных лейкоцитов и / или воспалительными признаками, наблюдаемыми при ультразвуковом исследовании.

Группа C ( n = 23) включала субъектов с отрицательной культурой спермы и без воспалительных признаков, наблюдаемых при УЗИ, и 1 × 10 ⁶ лейкоцитов в семенной жидкости.

Каждая группа была разделена на три подгруппы в зависимости от степени тяжести SHV (легкая, умеренная или тяжелая).

Терапевтическое лечение полностью разрешило SHV в 27 случаях (52.0%): 17 из 17 субъектов (100%) в группе A, 4 из 12 субъектов (33,0%) в группе B и 6 из 23 субъектов (26,1%) в группе C. У всех этих субъектов посев спермы стал или остался отрицательный, семенные лейкоциты стали или остались 1 × 10 ⁶ , а ультразвуковое исследование больше не показало признаков воспаления.

Напротив, у других 25 субъектов лечение было неэффективным или только частично, поскольку тяжелая гипервязкость стала средней или легкой. Таким образом, 25 из 52 пролеченных пациентов (48.0%) все еще имели некоторую степень SHV. Из них 11 (21,1%) страдали легкой SHV, 8 (15,4%) — средней и 6 (11,5%) — тяжелой повышенной вязкостью.

Наконец, из 27 пациентов, у которых после терапии была достигнута нормальная вязкость, прогрессивная подвижность (тест Уилкоксона P <0,01 и двусторонний тест Стьюдента t -тест P <0,005), VSL (тест Уилкоксона P < 0,001) и LIN (тест Уилкоксона P <0,05) были выше, чем уровни до лечения (,).Прогрессивная моторика, VSL и LIN улучшились, соответственно, у 21, 25 и 18 человек из 27 (). Только один субъект перешел от астенозооспермии к нормальной подвижности сперматозоидов (50% оценок a + b по данным ВОЗ). Средняя разница подвижности сперматозоидов после лечения и . предварительная обработка составляла 6,2 + 10,4 (стандартное отклонение) ().

Профиль подвижности сперматозоидов у субъектов ( n = 27) с предварительной обработкой SHV и последующей обработкой с нормальной вязкостью. Сплошные и пунктирные линии показывают приращение и уменьшение кинетических параметров соответственно.(A): Процент прогрессирующей подвижности (тест Шапиро-Уилка до лечения P = 0,077, после лечения P = 0,246; гипотеза нормальности не может быть отклонена). Тест Вилкоксона для парных данных P <0,01. Двусторонний критерий Стьюдента t для парных данных P <0,005. (B): Скорость прямой линии (VSL) (мкм сек ^-1 ) (тест Шапиро-Уилка до лечения P = 0,033, после лечения P <0,001; гипотеза о нормальности должна быть отклонена).Тест Вилкоксона для парных данных P <0,001. (C): Линейность (LIN) (тест Шапиро-Уилка до лечения P = 0,043, после лечения P = 0,017; гипотеза о нормальности должна быть отклонена). Тест Вилкоксона для парных данных P <0,05.

Таблица 3

Профиль подвижности у субъектов ( n = 27) с SHV до лечения и нормальной вязкостью после лечения.

	Предварительная обработка ( n = 27)	Последующая обработка ( n = 27)	Различия
Прогрессивная подвижность (%)	20.2 ± 12,6	26,4 ± 13,3 a, d	6,2 ± 10,4
VSL (мкм с −1 ) (скорость по прямой)	18,4 ± 6,2	25,3 ± 6,8 b	6,8 ± 6,2
LIN (линейность)	0,76 ± 0,09	0,81 ± 0,07 c	0,05 ± 0,11

Обсуждение

Целью данного исследования было оценить распространенность в большой популяции партнеров-мужчин из субфертильных пар, а также для оценки возможной корреляции между инфекциями / воспалением половых путей и SHV. Кроме того, мы оценили эффекты терапевтических подходов к лечению SHV и оценили кинетические параметры сперматозоидов после успешного лечения.

Что касается первого пункта, исследование большой популяции мужчин-партнеров субфертильных пар показало, что распространенность SHV составила 26,2%, что подтверждает относительно высокую частоту этого состояния. Эта распространенность была значительно ниже, чем обнаруженная Gonzales et al . ^{8, 9} , но значительно выше по сравнению с найденным Гопалкришнаном и др. . ²⁷ и Эсфандиари и др. . ²⁸ . Это может быть из-за различий в популяциях пациентов, а также из-за различий в стандартизации измерения SHV.

Что касается причин и патогенных аспектов SHV, то они еще не выяснены полностью. В этом исследовании изучалась корреляция между повышенной вязкостью и классическими патогенными факторами, предлагаемыми в литературе, такими как инфекция или воспаление мужских половых путей. Это исследование показало распространенность легкой SHV в группе A (положительный посев спермы), тогда как оно показало преобладание тяжелой SHV в группе B и, что удивительно, в группе C, которая была группой без каких-либо признаков воспаления.

Что касается лечения SHV, то в эпоху до появления техник ЭКО Амелар и Дубин ⁴ заявили, что SHV следует лечить только в том случае, если результаты посткоитальных тестов были плохими. Лечение для снижения SHV с помощью непрямых мер, таких как избыточная гидратация пациентов, массаж простаты или введение парентеральной гиалуронидазы, не было эффективным ⁴ .Они также предложили использовать первую часть эякулята (если вязкость была ниже, чем у всего эякулята) или весь эякулят, после нескольких прогонов через иглу для подкожных инъекций, для внутриматочной инсеминации (ВМИ) ⁴ .

Внедрение ЭКО и использование все более сложных методов подготовки спермы подчеркнули важность принятия дополнительных мер в случаях SHV. Фактически, муколитические агенты были предложены для лечения in vitro .Среди наиболее важных исследований в этой области Honea et al . В заявлении ⁶ указано, что ограниченный протеолиз с использованием α-химотрипсина в случаях, когда он улучшает результаты анализа проникновения сперматозоидов, может представлять собой полезную предварительную обработку сверхвязкой спермы для программ IUI или IVF. Кроме того, согласно Zavos et al . ⁵ , ограниченный протеолиз сверхвязких образцов спермы с использованием α-химотрипсина помог восстановить большее количество сперматозоидов более высокого качества, которые можно было бы использовать в различных вспомогательных репродуктивных технологиях.

Однако не исключено, что подобные процедуры могут повредить структуру сперматозоидов. В результате более перспективным может оказаться патогенный подход к лечению повышенной вязкости.

Munuce и др. . ¹⁷ использовали лечение антибиотиками у субъектов с инфекциями половых путей, с SHV и без. Терапия основывалась на соответствующем микроорганизме и антибиотикограмме. Они пришли к выводу, что не было никакой связи между SHV и положительностью в культурах спермы, количеством видов, выделенных в культурах спермы, лейкоспермией или наличием антител к сперматозоидам.

В этом исследовании мы оценили эффекты не только лечения антибиотиками, но также противовоспалительных и муколитических агентов in vivo . Анализ результатов показал, что лечение было успешным примерно в половине случаев, в первую очередь у пациентов с легкой формой SHV и положительным посевом спермы. У остальных пациентов лечение либо не имело эффекта, либо просто снижало гипервязкость с тяжелой до умеренной или легкой. На основании этих наблюдений можно предположить, что случаи легкой SHV могут быть результатом легко поддающейся лечению инфекции и воспаления.С другой стороны, тяжелая SHV может представлять собой совсем другое. В предыдущем исследовании мы предположили, что определенные случаи идиопатической SHV можно рассматривать как минимальные клинические проявления муковисцидоза, поскольку вариации последовательности гена CFTR могут составлять генетическую основу этого заболевания ¹⁶ . Несмотря на негативное влияние тяжелой SHV на способность к воспроизводству и хотя было бы очень важно понять лежащие в основе молекулярные механизмы, никаких других исследований генетической основы идиопатической SHV в литературе не найдено.

Следовательно, в случаях, когда противовоспалительное лечение оказывается безуспешным, можно заподозрить генетическое происхождение SHV. В этих случаях может быть полезно провести генетический анализ, в первую очередь на наличие мутаций в гене CFTR.

Наконец, пагубное влияние SHV на подвижность сперматозоидов, по-видимому, дополнительно подтверждается улучшенной кинетикой, наблюдаемой у успешно пролеченных пациентов. Это согласуется с Эльзанати и др. . ² и Кури и др. . ²⁹ , и подтверждает важный «эффект улавливания», который, естественно, более очевиден при тяжелой SHV.

В заключение, результаты исследования позволяют сделать следующие наблюдения: SHV часто обнаруживается у субфертильных мужчин и отрицательно влияет на кинетические параметры семенной жидкости; специфическая антибиотикотерапия и противовоспалительная терапия могут успешно лечить легкую SHV, при которой состояние кажется результатом инфекции или воспаления; и повышенная вязкость, по-видимому, возникает не из-за одного патогенного фактора, а из-за нескольких (биохимических, ферментативных и генетических) факторов, которые действуют совместно. Эти факторы требуют дальнейшего изучения, чтобы лучше понять их роль в патогенезе SHV.

Благодарности

Эта работа была поддержана грантом Telethon (GGP06199).

Ссылки

• Tjioe DY, Oentoeng S. Вязкость спермы человека и процент подвижных сперматозоидов. Fertil Steril. 1968; 19: 562–5. [PubMed] [Google Scholar]
• Эльзанати С., Мальм Дж., Гиверкман А. Вязко-эластичность семенной жидкости по отношению к функции придатков и придатков половых желез и ее влияние на подвижность сперматозоидов.Инт Дж. Андрол. 2004. 27: 94–100. [PubMed] [Google Scholar]
• Эсфандиари Н., Бурджак Х, Готлиб Л., Каспер РФ. Гипервязкость семенной жидкости связана с плохим исходом экстракорпорального оплодотворения и переноса эмбриона: проспективное исследование. Fertil Steril. 2008; 90: 1739–43. [PubMed] [Google Scholar]
• Амелар Р.Д., Дубин Л. Особые проблемы в управлении // Амелар Р.Д., Дубин Л., Уолш П.С., редакторы. Мужское бесплодие. Филадельфия: WB Saunders Company; 1977p191–214.
• Zavos PM, Zarmakoupis-Zavos PN, Correa JR.Влияние лечения нарушений вязкости семенной жидкости с помощью α-химотрипсина на восстановление сперматозоидов для вспомогательных репродуктивных технологий: сравнение методов фильтрации SpermPrep и центрифугирования в градиенте Percoll. Ближний Восток Fertil Soc J. 1997; 2: 223–9. [Google Scholar]
• Honea KL, Houserman VL, Merryman DC, Free DA, Stringfellow SE. Влияние ограниченного протеолиза с α-химотрипсином на сперму с аномальным анализом проникновения сперматозоидов и возможным применением для оплодотворения in vitro или внутриматочной инсеминации.J Assist Reprod Genet. 1993; 10: 255–60. [PubMed] [Google Scholar]
• Упадхьяя М., Хиббард Б.М., Уокер С.М. Использование спутолизина для разжижения вязкой человеческой спермы. Fertil Steril. 1981; 35: 657–61. [PubMed] [Google Scholar]
• Gonzales GF, Kortebani G, Mazzolli AB. Повышенная вязкость и гипофункция семенных пузырьков. Арка Андрол. 1993; 30: 63–8. [PubMed] [Google Scholar]
• Гонсалес Г.Ф. Функция семенных пузырьков и их роль в мужской фертильности. Азиат Дж. Андрол. 2001; 3: 251–8.[PubMed] [Google Scholar]
• Андраде-Роша FT. Физический анализ эякулята для оценки секреторной активности семенных пузырьков и простаты. Clin Chem Lab Med. 2005; 43: 1203–10. [PubMed] [Google Scholar]
• Carpino A, Siciliano L. Неизмененный белковый состав / уровни маркеров секреции половых путей в семенной плазме высоковязких эякулятов человека. Арка Андрол. 1998; 41: 31–5. [PubMed] [Google Scholar]
• Mendeluk GR, Gonzales Flecha FL, Castello PR, Bregni C. Факторы, участвующие в биохимической этиологии повышенной вязкости семенной плазмы человека.Дж. Андрол. 2000; 21: 262–7. [PubMed] [Google Scholar]
• Mendeluk GR, Blanco AM, Bregni C. Реология семенной жидкости человека: роль лизоцима. Acta Farm Bonaerense. 1996; 15: 163–8. [Google Scholar]
• Mendeluk GR, Blanco AM, Bregni C. Вязкость семенной жидкости человека: роль лизоцима. Арка Андрол. 1997; 38: 7–11. [PubMed] [Google Scholar]
• Айдемир Б., Онаран И., Кизилер А.Р., Алиджи Б., Акьолджу М.С. Влияние окислительного повреждения на вязкость семенной жидкости у бесплодных мужчин.Дж. Андрол. 2008; 29: 41–6. [PubMed] [Google Scholar]
• Росси Т., Грандони Ф., Маццилли Ф., Куатруччи С., Антонелли М. и др. Высокая частота (TG) _m T _n вариантных трактов в гене регулятора трансмембранной проводимости муковисцидоза у мужчин с высокой вязкостью спермы. Fertil Steril. 2004; 82: 1316–22. [PubMed] [Google Scholar]
• Munuce MJ, Bregni C, Carizza C, Mendeluk G. Посев спермы, лейкоцитоспермия и наличие антител к сперматозоидам при повышенной вязкости семенной жидкости.Арка Андрол. 1999; 42: 21–8. [PubMed] [Google Scholar]
• Дондеро Ф., Росси Т., Д’Оффици Дж., Маззилли Ф., Россо Р. и др. Анализ спермы серопозитивных мужчин и лиц с высоким риском заражения ВИЧ. Hum Reprod. 1996; 11: 765–8. [PubMed] [Google Scholar]
• Ван И, Лян С. Л., Ву Дж.К., Сюй Ц., Цинь С.Х. и др. Do Ureaplasma urealyticum Инфекции половых путей влияют на качество спермы. Азиат Дж. Андрол. 2006; 8: 562–8. [PubMed] [Google Scholar]
• Винкельбауэр Ф.В., Амманн М.Э., Карнел Ф., Ламмер Дж.Допплерография варикоцеле: отдаленное наблюдение после венографии и транкатетерной склеротерапии. J Ultrasound Med. 1994; 23: 953–8. [PubMed] [Google Scholar]
• Хенкель Р., Маасс Дж., Юнг А., Хайдл Дж., Шилл В. Б. и др. Возрастные изменения семенной полиморфно-ядерной эластазы у мужчин с бессимптомным воспалением половых путей. Азиат Дж. Андрол. 2007; 9: 299–304. [PubMed] [Google Scholar]
• Всемирная организация здравоохранения. Лабораторное руководство по исследованию взаимодействия спермы человека и цервикальной слизи 3-е изд.Нью-Йорк: Издательство Кембриджского университета; 1992 [Google Scholar]
• Всемирная организация здравоохранения. Лабораторное руководство по исследованию взаимодействия спермы человека и цервикальной слизи 4-е изд. Нью-Йорк: Издательство Кембриджского университета; 1999 [Google Scholar]
• Маццилли Ф., Росси Т., Сабатини Л., Дондеро Ф. Программное обеспечение системы анализа наложенных изображений (SIAS): новый подход к оценке подвижности сперматозоидов. Fertil Steril. 1995; 64: 653–6. [PubMed] [Google Scholar]
• Маццилли Ф., Росси Т., Дельфино М., Нофрони И.Применение обновленной системы наложения изображений (SIAS) для оценки кинематики сперматозоидов. Андрология. 1999; 31: 187–194. [PubMed] [Google Scholar]
• Кимура А., Куроока Ю., Хирасава К., Китамура Т., Кавабе К. Точность расчета объема простаты при трансректальном УЗИ. Int J Urol. 1995; 2: 252–6. [PubMed] [Google Scholar]
• Gopalkrishnan K, Padwal V, Balaiah D. Влияет ли вязкость семенной жидкости на целостность хроматина сперматозоидов? Арка Андрол. 2000; 45: 99–103. [PubMed] [Google Scholar]
• Эсфандиари Н., Готлиб Л., Каспер РФ.Гипервязкость семенной жидкости связана с плохим результатом контролируемой стимуляции яичников и внутриматочной инсеминации: проспективное исследование. Int J Fertil Wom Med. 2006; 51: 21–7. [PubMed] [Google Scholar]
• Кури С.М., Арианьо Д.И., Ченло П.Х., Менделук Г.Р., Пульезе М.Н. и др. Астенозооспермия: анализ большой популяции. Арка Андрол. 2003; 49: 343–9. [PubMed] [Google Scholar]

распространенность, патогенез и терапевтические аспекты

Азиатский Дж. Андрол. 2009 сен; 11 (5): 609–615.

Джлениа Элиа

¹ Кафедра медицинской физиопатологии, Римский университет, Сапиенца, Рим 00189, Италия

Микеле Дельфино

¹ Кафедра медицинской физиопатологии, Римский университет, Сапиенца, Рим 00189, Италия

Норина Имброгно

¹ Кафедра медицинской физиопатологии, Римский университет, Сапиенца, Рим 00189, Италия

Франческа Капогреко

¹ Кафедра медицинской физиопатологии, Римский университет, Сапиенца, Рим 00189, Италия

Марко Лукарелли

² Кафедра клеточной биотехнологии и гематологии, Римский университет, Сапиенца, Рим 00189, Италия

Тициана Росси

¹ Кафедра медицинской физиопатологии, Римский университет, Сапиенца, Рим 00189, Италия

Фернандо Маццилли

¹ Кафедра медицинской физиопатологии, Римский университет, Сапи enza, Rome 00189, Италия

¹ Кафедра медицинской физиопатологии, Римский университет, Сапиенца, Рим 00189, Италия

² Кафедра клеточной биотехнологии и гематологии, Римский университет, Сапиенца, Рим 00189, Италия

^* Медицинский факультет, больница Сант-Андреа, Римский университет, Via di Grottarossa 1035-00189, Sapienza, Rome 00189, Италия. Факс: + 39-6337-75001 Эл. Почта: [email protected]

Поступила в редакцию 22 января 2009 г .; Пересмотрено 16 июня 2009 г .; Принято 2 июля 2009 г.

Эта статья цитировалась в других статьях в PMC.

Abstract

Целями этого исследования были (а) определение распространенности субъектов с повышенной вязкостью спермы (SHV) в большой популяции мужчин-партнеров субфертильных пар; (b) для выявления любой корреляции между SHV и инфекциями или воспалением половых путей; (c) оценить эффекты терапевтических подходов к лечению SHV; и (d) для оценки кинетических параметров сперматозоидов после успешного лечения SHV.Было проведено ретроспективное исследование 1833 мужчин-партнеров субфертильных пар. Затем были проведены клинические, семенные, бактериологические и ультразвуковые исследования с участием 52 субъектов, страдающих SHV, и SHV был классифицирован как легкий (длина нити> 2 см и ≤ 4 см), средний (> 4 см и ≤ 6 см). или тяжелые (> 6 см). Распространенность SHV наблюдалась у 26,2% (480) субъектов, из которых 13,2% страдали легкой формой, 6,6% — средней и 6,4% — тяжелой формой SHV. Лечение было полностью успешным только у 27 человек (52.0%), в первую очередь у тех, у кого была легкая базальная SHV с положительным посевом спермы. У этих субъектов процент прогрессивной подвижности, скорость прямой линии и линейность были значительно выше, чем уровни до лечения. SHV часто обнаруживается у субъектов с пониженной фертильностью. Патогенез был строго связан с инфекционными / воспалительными факторами только в 48,0% случаев; следовательно, возможно, что биохимические, ферментативные или генетические факторы играют роль в этом состоянии.

Ключевые слова: Инфекция половых путей, воспаление половых путей, УЗИ половых путей, посев спермы, повышенная вязкость спермы (SHV), подвижность сперматозоидов

Введение

Повышенная вязкость спермы (SHV) — это состояние, которое может серьезно ухудшить физико-химические свойства характеристика семенной жидкости.Таким образом, он заслуживает более пристального внимания исследователей, так как может серьезно повлиять на функцию сперматозоидов. Прежде всего, SHV, по-видимому, связан со снижением подвижности сперматозоидов, возможно, из-за «эффекта захвата», который предотвращает нормальное продвижение сперматозоидов через женские половые пути ^{1, 2} .

Повышенная вязкость спермы также приводит к определенным техническим трудностям при работе с образцами, например, при использовании градиентов Перколла для подготовки спермы для программ in vitro оплодотворения (ЭКО) ³ .

Предложены физико-химические методы лечения SHV. Физический метод включает проталкивание образца через иглу для подкожных инъекций ⁴ , тогда как при химической обработке используются муколитические агенты, такие как α-химотрипсин ^{5, 6} и спутолизин ⁷ . Однако нельзя игнорировать тот факт, что такие процедуры могут повредить структуру сперматозоидов. Поэтому патогенный подход к лечению повышенной вязкости может быть более целесообразным.

Патогенетические аспекты SHV еще предстоит полностью выяснить. Гонсалес и др. . ^{8, 9} и Andrade-Rocha ¹⁰ показали снижение уровня фруктозы в SHV и выдвинули гипотезу о неадекватном функционировании семенных пузырьков в качестве объяснения. Carpino and Siciliano ¹¹ изучали возможную корреляцию между SHV и секрецией белка придатка яичка, пузырьков и простаты. Они обнаружили, что гипервязкость не играет никакой роли в процессе свертывания спермы.

Mendeluk и др. . ¹² показали, что нет никакой разницы ни в концентрации общих белков или ДНК, ни в процентном содержании воды в сверхвязкой семенной плазме.Кроме того, Mendeluk et al . ^{13, 14} наблюдали, что лизоцим не играет прямой роли в SHV, хотя дефицит в случаях хронических инфекций может быть усугубляющим фактором с клинической точки зрения. Айдемир и др. . ¹⁵ указывают на то, что повышенное окислительное повреждение может быть фактором SHV. В предыдущем исследовании мы показали, что генетические факторы могут влиять на текучесть спермы ¹⁶ .

Особый интерес представляет возможная корреляция между SHV и инфекциями и / или воспалением половых путей.Однако следует отметить, что в этой области существует много разногласий. Согласно Munuce и др. . ¹⁷ , нет никакой связи между SHV и положительностью посева спермы, лейкоспермией или наличием антител к сперматозоиду. Кроме того, нет корреляции между SHV и инфекцией вируса иммунодефицита человека ¹⁸ . Однако Wang и др. . ¹⁹ обнаружили, что Ureaplasma urealyticum инфекций были связаны с SHV.

Цели этого исследования: (а) оценить распространенность субъектов с SHV в большой популяции мужчин-партнеров субфертильных пар; (б) оценить возможную корреляцию между SHV и инфекциями / воспалениями половых путей; (c) оценить эффекты терапевтических подходов в лечении SHV; и (d) оценить кинетические параметры сперматозоидов после успешного лечения SHV.

Материалы и методы

Ретроспективное исследование

Ретроспективное исследование было проведено для изучения данных с января 2004 года по декабрь 2007 года для оценки распространенности ВГЧ у мужчин-партнеров субфертильных пар, направленных в отделение андрологии больницы Сант-Андреа (Рим) для анализа спермы. Всего было обследовано 1 833 человека и 2 587 эякулятов. В анализ были включены субъекты с полностью нормальными параметрами спермы и лица с одним или несколькими измененными параметрами спермы.

Клиническое исследование

Клиническое исследование проводилось в соответствии с рекомендациями комитета по этике больницы.

Для изучения возможного вовлечения инфекций или воспалений половых путей в качестве патогенного фактора в SHV группу исследования составили 52 пациента с SHV в возрасте от 25 до 43 лет.Был собран полный анамнез, и пациенты прошли диагностическую и терапевтическую программу, включающую клиническое и семенное обследование, посев спермы и ультразвуковое исследование яичек, семенных пузырьков и простаты. Все пациенты с гормональными изменениями, лечившимися крипторхизмом и варикоцеле с выраженным венозным рефлюксом (время рефлюкса более 2 с, определяется с помощью цветного допплера) ²⁰ были исключены из исследования.

Минимальный период бесплодия пары составил 1 год. Концентрация спермы составляла ≥ 20 миллионов мл ^–1 , а атипичные формы — <70%. SHV было подтверждено вторым семенным обследованием через 2 месяца после первого.

Все 52 субъекта лечились противовоспалительными и муколитическими средствами, 50 мг тетрациклина и 5 мг гидрокортизона (Фармацевтика Форменти спа, Милан, Италия) каждый день в течение 30 дней, а затем 200 мг N -ацетилцистеина (Zambon Svizzera SA , Cadempino, Swisse) каждый день в течение следующих 2 месяцев.Пациенты с SHV, не ответившие на терапию, получали второй курс противовоспалительных препаратов. Субъекты с положительной культурой спермы должны были сначала пройти специальную антибактериальную терапию, согласно антибиотикограмме, при самой низкой минимальной ингибирующей концентрации для идентифицированных бактерий. Терапия длилась 5 дней.

Стандартный анализ спермы, посев спермы и ультразвуковое исследование яичек, семенных пузырьков и простаты проводились до и после терапии.

Определение инфекции и воспаления мужских половых путей

В нашей когорте инфекции были обнаружены с помощью посева спермы. Был предложен ряд методов диагностики воспаления половых путей, включая исследование эякулята на наличие пероксидаза-положительных клеток или уровней семенной полиморфно-ядерной эластазы ²¹ . Увеличение количества лейкоцитов в семенной жидкости (WBC) при отсутствии инфекции или признаков воспаления, влияющих на придаток яичка, семенные пузырьки и простату, было принято как маркер воспаления. Подтверждение воспаления производилось с помощью УЗИ. Субъекты были разделены в зависимости от наличия или отсутствия инфекции и / или признаков воспаления.

Анализ спермы и посев спермы

Образцы спермы были собраны путем мастурбации через 3-5 дней полового воздержания. Образцы хранили в контролируемом инкубаторе (37 ° C) на осторожно перемещающемся планшете.

После разжижения образцы спермы были проанализированы в соответствии с рекомендациями Всемирной организации здравоохранения (ВОЗ) ^{22, 23} . Система анализа наложенных изображений использовалась для оценки параметров подвижности сперматозоидов ^{24, 25} . Прогрессивная подвижность определялась следующим образом: класс 1 — скорость по прямой (VSL) ≥ 23 мкм с ^–1 и линейность (LIN) ≥ 0.58; и класс 2 — VSL> 10 и ≤ 23 мкм с ^-1 и LIN ≥ 0,58 (частота кадров: 21 кадр с ^-1 ) ²⁵ . Морфологию сперматозоидов изучали методом окрашивания по Брайану – Лейшману (BL) ²² . Предметные стекла исследовали при увеличении × 1000 с помощью светового микроскопа Olympus CX31 с использованием микрометрической шкалы. Метод окрашивания BL является особенно эффективным методом различения половых клеток и лейкоцитов ²² . Дефекты морфологии сперматозоидов были классифицированы в соответствии с рекомендациями ВОЗ ^{22, 23} .Для каждого образца оценивали не менее 200 сперматозоидов.

Вязкость определяли через 1 час после эякуляции осторожным отсасыванием спермы в пипетку на 5 мл и затем получением капель спермы. В случае аномальной вязкости капля образовывала нить длиной более 2 см, что оценивали по сантиметровой шкале. Гипервязкость при нормальной гравитации оценивалась как легкая (длина нити> 2 см и ≤ 4 см), умеренная (> 4 см и ≤ 6 см) или сильная (> 6 см).

Наконец, образцы семенной культуры с колониями> 100 000 UFC мл ^-1 были признаны положительными.

Контроль качества анализа спермы

Внутренний контроль качества (КК) (внутриоператорский и межоператорский) проводился каждые 2 месяца. Внешний контроль качества проводился Национальным институтом здравоохранения.

Ультразвук

Ультразвук яичек выполняли с помощью HDI 4000 (ATL Ultrasound, Bothell, WA, USA) с использованием датчика с диапазоном частот от 5,5 до 12 МГц. Увеличение объема предстательной железы, семенных пузырьков или придатка яичка или изменения эхогенных структур считались признаками воспаления ²⁶ .

Статистика

Мы использовали тест Шапиро – Уилка для изучения прогрессивной моторики, распределения VSL и LIN. Мы использовали как тест Уилкоксона, так и двусторонний тест Стьюдента t для парных данных, чтобы оценить прогрессивную моторику, для которой гипотеза нормальности не может быть отклонена. Для VSL и LIN, для которых гипотеза нормальности должна быть отклонена, мы использовали только тест Вилкоксона для парных данных, поскольку этот тест не требует каких-либо конкретных предположений о распределении данных.Все тесты проводились с использованием статистического пакета SPSS.

Результаты

Ретроспективное исследование

Из 2 587 образцов 602 (23,2%) показали некоторую степень SHV (11,2% легкая, 6,2% умеренная и 5,8% тяжелая) (). Распространенность SHV составила 26,2% (480 из 1833 субъектов): 13,2% легкая, 6,6% умеренная и 6,4% тяжелая (). Для тех субъектов, для которых было выполнено более одного анализа спермы, в таблице показана вязкость, обнаруженная во время первого исследования.

Таблица 1

Распространенность образцов спермы и субъектов с повышенной вязкостью спермы (SHV) у партнеров-мужчин из субфертильных пар.

9025 26,2%) 902 тяжелая9

	Всего образцов спермы ( n = 2 587)	Всего субъектов ( n = 1833)
Всего SHV	602 (23,2%)
SHV легкая	291 (11,2%)	242 (13,2%)
SHV умеренная	160 (6,2%)	121 (6,6%)
151 (5,8%)	117 (6. 4%)

Клиническое исследование

52 субъекта, участвовавшие в клиническом исследовании, были разделены на три группы в соответствии с их исходными диагностическими результатами ().

Таблица 2

Последующее обследование 52 пациентов (разделенных на 3 группы), прошедших полную диагностическую и терапевтическую программу.

тяжелая )

Группа	SHV	Предварительная обработка	Последующая обработка
			Нормальная вязкость	SHV
				Легкая	Легкая
A	мягкий	14	14	—	—	—
	умеренный	1	1							— тяжелый	2	2	—	—	—
		17	17 (100%)	—	—	—
	2	—	—	—
умеренный	4	2	1	1	—
тяжелый	6	—	3	2	1
	12	4 (33. 3%)	4 (33,3%)	3 (25%)	1 (8,4%)
C	мягкий	6	3	3	—	—	умеренный	7	2	1	4	—
	тяжелый	10	1	3	1	5						7 (30,5%)	5 (21. 7%)	5 (21,7%)
	Всего		52 (100%)	27 (52,0%)	11 (21,1%)	8 (15,4%)	6 (11,5 %)

Группа A ( n = 17) включала субъектов с положительной культурой спермы на Escherichia coli ( n = 5), Klebsiella pneumoniae ( n = 3), Proteus mirabilis ( n = 3), Pseudomonas aeruginosa ( n = 1), Enterobacter faecalis ( n = 2) или Ureaplasma urealyticum ( n = 3).

Группа B ( n = 12) состояла из субъектов с> 1 × 10 ⁶ семенных лейкоцитов и / или воспалительными признаками, наблюдаемыми при ультразвуковом исследовании.

Группа C ( n = 23) включала субъектов с отрицательной культурой спермы и без воспалительных признаков, наблюдаемых при УЗИ, и 1 × 10 ⁶ лейкоцитов в семенной жидкости.

Каждая группа была разделена на три подгруппы в зависимости от степени тяжести SHV (легкая, умеренная или тяжелая).

Терапевтическое лечение полностью разрешило SHV в 27 случаях (52.0%): 17 из 17 субъектов (100%) в группе A, 4 из 12 субъектов (33,0%) в группе B и 6 из 23 субъектов (26,1%) в группе C. У всех этих субъектов посев спермы стал или остался отрицательный, семенные лейкоциты стали или остались 1 × 10 ⁶ , а ультразвуковое исследование больше не показало признаков воспаления.

Напротив, у других 25 субъектов лечение было неэффективным или только частично, поскольку тяжелая гипервязкость стала средней или легкой. Таким образом, 25 из 52 пролеченных пациентов (48.0%) все еще имели некоторую степень SHV. Из них 11 (21,1%) страдали легкой SHV, 8 (15,4%) — средней и 6 (11,5%) — тяжелой повышенной вязкостью.

Наконец, из 27 пациентов, у которых после терапии была достигнута нормальная вязкость, прогрессивная подвижность (тест Уилкоксона P <0,01 и двусторонний тест Стьюдента t -тест P <0,005), VSL (тест Уилкоксона P < 0,001) и LIN (тест Уилкоксона P <0,05) были выше, чем уровни до лечения (,).Прогрессивная моторика, VSL и LIN улучшились, соответственно, у 21, 25 и 18 человек из 27 (). Только один субъект перешел от астенозооспермии к нормальной подвижности сперматозоидов (50% оценок a + b по данным ВОЗ). Средняя разница подвижности сперматозоидов после лечения и . предварительная обработка составляла 6,2 + 10,4 (стандартное отклонение) ().

Профиль подвижности сперматозоидов у субъектов ( n = 27) с предварительной обработкой SHV и последующей обработкой с нормальной вязкостью. Сплошные и пунктирные линии показывают приращение и уменьшение кинетических параметров соответственно.(A): Процент прогрессирующей подвижности (тест Шапиро-Уилка до лечения P = 0,077, после лечения P = 0,246; гипотеза нормальности не может быть отклонена). Тест Вилкоксона для парных данных P <0,01. Двусторонний критерий Стьюдента t для парных данных P <0,005. (B): Скорость прямой линии (VSL) (мкм сек ^-1 ) (тест Шапиро-Уилка до лечения P = 0,033, после лечения P <0,001; гипотеза о нормальности должна быть отклонена).Тест Вилкоксона для парных данных P <0,001. (C): Линейность (LIN) (тест Шапиро-Уилка до лечения P = 0,043, после лечения P = 0,017; гипотеза о нормальности должна быть отклонена). Тест Вилкоксона для парных данных P <0,05.

Таблица 3

Профиль подвижности у субъектов ( n = 27) с SHV до лечения и нормальной вязкостью после лечения.

	Предварительная обработка ( n = 27)	Последующая обработка ( n = 27)	Различия
Прогрессивная подвижность (%)	20.2 ± 12,6	26,4 ± 13,3 a, d	6,2 ± 10,4
VSL (мкм с −1 ) (скорость по прямой)	18,4 ± 6,2	25,3 ± 6,8 b	6,8 ± 6,2
LIN (линейность)	0,76 ± 0,09	0,81 ± 0,07 c	0,05 ± 0,11

Обсуждение

Целью данного исследования было оценить распространенность в большой популяции партнеров-мужчин из субфертильных пар, а также для оценки возможной корреляции между инфекциями / воспалением половых путей и SHV. Кроме того, мы оценили эффекты терапевтических подходов к лечению SHV и оценили кинетические параметры сперматозоидов после успешного лечения.

Что касается первого пункта, исследование большой популяции мужчин-партнеров субфертильных пар показало, что распространенность SHV составила 26,2%, что подтверждает относительно высокую частоту этого состояния. Эта распространенность была значительно ниже, чем обнаруженная Gonzales et al . ^{8, 9} , но значительно выше по сравнению с найденным Гопалкришнаном и др. . ²⁷ и Эсфандиари и др. . ²⁸ . Это может быть из-за различий в популяциях пациентов, а также из-за различий в стандартизации измерения SHV.

Что касается причин и патогенных аспектов SHV, то они еще не выяснены полностью. В этом исследовании изучалась корреляция между повышенной вязкостью и классическими патогенными факторами, предлагаемыми в литературе, такими как инфекция или воспаление мужских половых путей. Это исследование показало распространенность легкой SHV в группе A (положительный посев спермы), тогда как оно показало преобладание тяжелой SHV в группе B и, что удивительно, в группе C, которая была группой без каких-либо признаков воспаления.

Что касается лечения SHV, то в эпоху до появления техник ЭКО Амелар и Дубин ⁴ заявили, что SHV следует лечить только в том случае, если результаты посткоитальных тестов были плохими. Лечение для снижения SHV с помощью непрямых мер, таких как избыточная гидратация пациентов, массаж простаты или введение парентеральной гиалуронидазы, не было эффективным ⁴ .Они также предложили использовать первую часть эякулята (если вязкость была ниже, чем у всего эякулята) или весь эякулят, после нескольких прогонов через иглу для подкожных инъекций, для внутриматочной инсеминации (ВМИ) ⁴ .

Внедрение ЭКО и использование все более сложных методов подготовки спермы подчеркнули важность принятия дополнительных мер в случаях SHV. Фактически, муколитические агенты были предложены для лечения in vitro .Среди наиболее важных исследований в этой области Honea et al . В заявлении ⁶ указано, что ограниченный протеолиз с использованием α-химотрипсина в случаях, когда он улучшает результаты анализа проникновения сперматозоидов, может представлять собой полезную предварительную обработку сверхвязкой спермы для программ IUI или IVF. Кроме того, согласно Zavos et al . ⁵ , ограниченный протеолиз сверхвязких образцов спермы с использованием α-химотрипсина помог восстановить большее количество сперматозоидов более высокого качества, которые можно было бы использовать в различных вспомогательных репродуктивных технологиях.

Однако не исключено, что подобные процедуры могут повредить структуру сперматозоидов. В результате более перспективным может оказаться патогенный подход к лечению повышенной вязкости.

Munuce и др. . ¹⁷ использовали лечение антибиотиками у субъектов с инфекциями половых путей, с SHV и без. Терапия основывалась на соответствующем микроорганизме и антибиотикограмме. Они пришли к выводу, что не было никакой связи между SHV и положительностью в культурах спермы, количеством видов, выделенных в культурах спермы, лейкоспермией или наличием антител к сперматозоидам.

В этом исследовании мы оценили эффекты не только лечения антибиотиками, но также противовоспалительных и муколитических агентов in vivo . Анализ результатов показал, что лечение было успешным примерно в половине случаев, в первую очередь у пациентов с легкой формой SHV и положительным посевом спермы. У остальных пациентов лечение либо не имело эффекта, либо просто снижало гипервязкость с тяжелой до умеренной или легкой. На основании этих наблюдений можно предположить, что случаи легкой SHV могут быть результатом легко поддающейся лечению инфекции и воспаления.С другой стороны, тяжелая SHV может представлять собой совсем другое. В предыдущем исследовании мы предположили, что определенные случаи идиопатической SHV можно рассматривать как минимальные клинические проявления муковисцидоза, поскольку вариации последовательности гена CFTR могут составлять генетическую основу этого заболевания ¹⁶ . Несмотря на негативное влияние тяжелой SHV на способность к воспроизводству и хотя было бы очень важно понять лежащие в основе молекулярные механизмы, никаких других исследований генетической основы идиопатической SHV в литературе не найдено.

Следовательно, в случаях, когда противовоспалительное лечение оказывается безуспешным, можно заподозрить генетическое происхождение SHV. В этих случаях может быть полезно провести генетический анализ, в первую очередь на наличие мутаций в гене CFTR.

Наконец, пагубное влияние SHV на подвижность сперматозоидов, по-видимому, дополнительно подтверждается улучшенной кинетикой, наблюдаемой у успешно пролеченных пациентов. Это согласуется с Эльзанати и др. . ² и Кури и др. . ²⁹ , и подтверждает важный «эффект улавливания», который, естественно, более очевиден при тяжелой SHV.

В заключение, результаты исследования позволяют сделать следующие наблюдения: SHV часто обнаруживается у субфертильных мужчин и отрицательно влияет на кинетические параметры семенной жидкости; специфическая антибиотикотерапия и противовоспалительная терапия могут успешно лечить легкую SHV, при которой состояние кажется результатом инфекции или воспаления; и повышенная вязкость, по-видимому, возникает не из-за одного патогенного фактора, а из-за нескольких (биохимических, ферментативных и генетических) факторов, которые действуют совместно. Эти факторы требуют дальнейшего изучения, чтобы лучше понять их роль в патогенезе SHV.

Благодарности

Эта работа была поддержана грантом Telethon (GGP06199).

Ссылки

• Tjioe DY, Oentoeng S. Вязкость спермы человека и процент подвижных сперматозоидов. Fertil Steril. 1968; 19: 562–5. [PubMed] [Google Scholar]
• Эльзанати С., Мальм Дж., Гиверкман А. Вязко-эластичность семенной жидкости по отношению к функции придатков и придатков половых желез и ее влияние на подвижность сперматозоидов.Инт Дж. Андрол. 2004. 27: 94–100. [PubMed] [Google Scholar]
• Эсфандиари Н., Бурджак Х, Готлиб Л., Каспер РФ. Гипервязкость семенной жидкости связана с плохим исходом экстракорпорального оплодотворения и переноса эмбриона: проспективное исследование. Fertil Steril. 2008; 90: 1739–43. [PubMed] [Google Scholar]
• Амелар Р.Д., Дубин Л. Особые проблемы в управлении // Амелар Р.Д., Дубин Л., Уолш П.С., редакторы. Мужское бесплодие. Филадельфия: WB Saunders Company; 1977p191–214.
• Zavos PM, Zarmakoupis-Zavos PN, Correa JR.Влияние лечения нарушений вязкости семенной жидкости с помощью α-химотрипсина на восстановление сперматозоидов для вспомогательных репродуктивных технологий: сравнение методов фильтрации SpermPrep и центрифугирования в градиенте Percoll. Ближний Восток Fertil Soc J. 1997; 2: 223–9. [Google Scholar]
• Honea KL, Houserman VL, Merryman DC, Free DA, Stringfellow SE. Влияние ограниченного протеолиза с α-химотрипсином на сперму с аномальным анализом проникновения сперматозоидов и возможным применением для оплодотворения in vitro или внутриматочной инсеминации.J Assist Reprod Genet. 1993; 10: 255–60. [PubMed] [Google Scholar]
• Упадхьяя М., Хиббард Б.М., Уокер С.М. Использование спутолизина для разжижения вязкой человеческой спермы. Fertil Steril. 1981; 35: 657–61. [PubMed] [Google Scholar]
• Gonzales GF, Kortebani G, Mazzolli AB. Повышенная вязкость и гипофункция семенных пузырьков. Арка Андрол. 1993; 30: 63–8. [PubMed] [Google Scholar]
• Гонсалес Г.Ф. Функция семенных пузырьков и их роль в мужской фертильности. Азиат Дж. Андрол. 2001; 3: 251–8.[PubMed] [Google Scholar]
• Андраде-Роша FT. Физический анализ эякулята для оценки секреторной активности семенных пузырьков и простаты. Clin Chem Lab Med. 2005; 43: 1203–10. [PubMed] [Google Scholar]
• Carpino A, Siciliano L. Неизмененный белковый состав / уровни маркеров секреции половых путей в семенной плазме высоковязких эякулятов человека. Арка Андрол. 1998; 41: 31–5. [PubMed] [Google Scholar]
• Mendeluk GR, Gonzales Flecha FL, Castello PR, Bregni C. Факторы, участвующие в биохимической этиологии повышенной вязкости семенной плазмы человека.Дж. Андрол. 2000; 21: 262–7. [PubMed] [Google Scholar]
• Mendeluk GR, Blanco AM, Bregni C. Реология семенной жидкости человека: роль лизоцима. Acta Farm Bonaerense. 1996; 15: 163–8. [Google Scholar]
• Mendeluk GR, Blanco AM, Bregni C. Вязкость семенной жидкости человека: роль лизоцима. Арка Андрол. 1997; 38: 7–11. [PubMed] [Google Scholar]
• Айдемир Б., Онаран И., Кизилер А.Р., Алиджи Б., Акьолджу М.С. Влияние окислительного повреждения на вязкость семенной жидкости у бесплодных мужчин.Дж. Андрол. 2008; 29: 41–6. [PubMed] [Google Scholar]
• Росси Т., Грандони Ф., Маццилли Ф., Куатруччи С., Антонелли М. и др. Высокая частота (TG) _m T _n вариантных трактов в гене регулятора трансмембранной проводимости муковисцидоза у мужчин с высокой вязкостью спермы. Fertil Steril. 2004; 82: 1316–22. [PubMed] [Google Scholar]
• Munuce MJ, Bregni C, Carizza C, Mendeluk G. Посев спермы, лейкоцитоспермия и наличие антител к сперматозоидам при повышенной вязкости семенной жидкости.Арка Андрол. 1999; 42: 21–8. [PubMed] [Google Scholar]
• Дондеро Ф., Росси Т., Д’Оффици Дж., Маззилли Ф., Россо Р. и др. Анализ спермы серопозитивных мужчин и лиц с высоким риском заражения ВИЧ. Hum Reprod. 1996; 11: 765–8. [PubMed] [Google Scholar]
• Ван И, Лян С. Л., Ву Дж.К., Сюй Ц., Цинь С.Х. и др. Do Ureaplasma urealyticum Инфекции половых путей влияют на качество спермы. Азиат Дж. Андрол. 2006; 8: 562–8. [PubMed] [Google Scholar]
• Винкельбауэр Ф.В., Амманн М.Э., Карнел Ф., Ламмер Дж.Допплерография варикоцеле: отдаленное наблюдение после венографии и транкатетерной склеротерапии. J Ultrasound Med. 1994; 23: 953–8. [PubMed] [Google Scholar]
• Хенкель Р., Маасс Дж., Юнг А., Хайдл Дж., Шилл В. Б. и др. Возрастные изменения семенной полиморфно-ядерной эластазы у мужчин с бессимптомным воспалением половых путей. Азиат Дж. Андрол. 2007; 9: 299–304. [PubMed] [Google Scholar]
• Всемирная организация здравоохранения. Лабораторное руководство по исследованию взаимодействия спермы человека и цервикальной слизи 3-е изд.Нью-Йорк: Издательство Кембриджского университета; 1992 [Google Scholar]
• Всемирная организация здравоохранения. Лабораторное руководство по исследованию взаимодействия спермы человека и цервикальной слизи 4-е изд. Нью-Йорк: Издательство Кембриджского университета; 1999 [Google Scholar]
• Маццилли Ф., Росси Т., Сабатини Л., Дондеро Ф. Программное обеспечение системы анализа наложенных изображений (SIAS): новый подход к оценке подвижности сперматозоидов. Fertil Steril. 1995; 64: 653–6. [PubMed] [Google Scholar]
• Маццилли Ф., Росси Т., Дельфино М., Нофрони И.Применение обновленной системы наложения изображений (SIAS) для оценки кинематики сперматозоидов. Андрология. 1999; 31: 187–194. [PubMed] [Google Scholar]
• Кимура А., Куроока Ю., Хирасава К., Китамура Т., Кавабе К. Точность расчета объема простаты при трансректальном УЗИ. Int J Urol. 1995; 2: 252–6. [PubMed] [Google Scholar]
• Gopalkrishnan K, Padwal V, Balaiah D. Влияет ли вязкость семенной жидкости на целостность хроматина сперматозоидов? Арка Андрол. 2000; 45: 99–103. [PubMed] [Google Scholar]
• Эсфандиари Н., Готлиб Л., Каспер РФ.Гипервязкость семенной жидкости связана с плохим результатом контролируемой стимуляции яичников и внутриматочной инсеминации: проспективное исследование. Int J Fertil Wom Med. 2006; 51: 21–7. [PubMed] [Google Scholar]
• Кури С.М., Арианьо Д.И., Ченло П.Х., Менделук Г.Р., Пульезе М.Н. и др. Астенозооспермия: анализ большой популяции. Арка Андрол. 2003; 49: 343–9. [PubMed] [Google Scholar]

распространенность, патогенез и терапевтические аспекты

Азиатский Дж. Андрол. 2009 сен; 11 (5): 609–615.

Джлениа Элиа

¹ Кафедра медицинской физиопатологии, Римский университет, Сапиенца, Рим 00189, Италия

Микеле Дельфино

¹ Кафедра медицинской физиопатологии, Римский университет, Сапиенца, Рим 00189, Италия

Норина Имброгно

¹ Кафедра медицинской физиопатологии, Римский университет, Сапиенца, Рим 00189, Италия

Франческа Капогреко

¹ Кафедра медицинской физиопатологии, Римский университет, Сапиенца, Рим 00189, Италия

Марко Лукарелли

² Кафедра клеточной биотехнологии и гематологии, Римский университет, Сапиенца, Рим 00189, Италия

Тициана Росси

¹ Кафедра медицинской физиопатологии, Римский университет, Сапиенца, Рим 00189, Италия

Фернандо Маццилли

¹ Кафедра медицинской физиопатологии, Римский университет, Сапи enza, Rome 00189, Италия

¹ Кафедра медицинской физиопатологии, Римский университет, Сапиенца, Рим 00189, Италия

² Кафедра клеточной биотехнологии и гематологии, Римский университет, Сапиенца, Рим 00189, Италия

^* Медицинский факультет, больница Сант-Андреа, Римский университет, Via di Grottarossa 1035-00189, Sapienza, Rome 00189, Италия.Факс: + 39-6337-75001 Эл. Почта: [email protected]

Поступила в редакцию 22 января 2009 г .; Пересмотрено 16 июня 2009 г .; Принято 2 июля 2009 г.

Эта статья цитировалась в других статьях в PMC.

Abstract

Целями этого исследования были (а) определение распространенности субъектов с повышенной вязкостью спермы (SHV) в большой популяции мужчин-партнеров субфертильных пар; (b) для выявления любой корреляции между SHV и инфекциями или воспалением половых путей; (c) оценить эффекты терапевтических подходов к лечению SHV; и (d) для оценки кинетических параметров сперматозоидов после успешного лечения SHV.Было проведено ретроспективное исследование 1833 мужчин-партнеров субфертильных пар. Затем были проведены клинические, семенные, бактериологические и ультразвуковые исследования с участием 52 субъектов, страдающих SHV, и SHV был классифицирован как легкий (длина нити> 2 см и ≤ 4 см), средний (> 4 см и ≤ 6 см). или тяжелые (> 6 см). Распространенность SHV наблюдалась у 26,2% (480) субъектов, из которых 13,2% страдали легкой формой, 6,6% — средней и 6,4% — тяжелой формой SHV. Лечение было полностью успешным только у 27 человек (52.0%), в первую очередь у тех, у кого была легкая базальная SHV с положительным посевом спермы. У этих субъектов процент прогрессивной подвижности, скорость прямой линии и линейность были значительно выше, чем уровни до лечения. SHV часто обнаруживается у субъектов с пониженной фертильностью. Патогенез был строго связан с инфекционными / воспалительными факторами только в 48,0% случаев; следовательно, возможно, что биохимические, ферментативные или генетические факторы играют роль в этом состоянии.

Ключевые слова: Инфекция половых путей, воспаление половых путей, УЗИ половых путей, посев спермы, повышенная вязкость спермы (SHV), подвижность сперматозоидов

Введение

Повышенная вязкость спермы (SHV) — это состояние, которое может серьезно ухудшить физико-химические свойства характеристика семенной жидкости.Таким образом, он заслуживает более пристального внимания исследователей, так как может серьезно повлиять на функцию сперматозоидов. Прежде всего, SHV, по-видимому, связан со снижением подвижности сперматозоидов, возможно, из-за «эффекта захвата», который предотвращает нормальное продвижение сперматозоидов через женские половые пути ^{1, 2} .

Повышенная вязкость спермы также приводит к определенным техническим трудностям при работе с образцами, например, при использовании градиентов Перколла для подготовки спермы для программ in vitro оплодотворения (ЭКО) ³ .

Предложены физико-химические методы лечения SHV. Физический метод включает проталкивание образца через иглу для подкожных инъекций ⁴ , тогда как при химической обработке используются муколитические агенты, такие как α-химотрипсин ^{5, 6} и спутолизин ⁷ . Однако нельзя игнорировать тот факт, что такие процедуры могут повредить структуру сперматозоидов. Поэтому патогенный подход к лечению повышенной вязкости может быть более целесообразным.

Патогенетические аспекты SHV еще предстоит полностью выяснить.Гонсалес и др. . ^{8, 9} и Andrade-Rocha ¹⁰ показали снижение уровня фруктозы в SHV и выдвинули гипотезу о неадекватном функционировании семенных пузырьков в качестве объяснения. Carpino and Siciliano ¹¹ изучали возможную корреляцию между SHV и секрецией белка придатка яичка, пузырьков и простаты. Они обнаружили, что гипервязкость не играет никакой роли в процессе свертывания спермы.

Mendeluk и др. . ¹² показали, что нет никакой разницы ни в концентрации общих белков или ДНК, ни в процентном содержании воды в сверхвязкой семенной плазме.Кроме того, Mendeluk et al . ^{13, 14} наблюдали, что лизоцим не играет прямой роли в SHV, хотя дефицит в случаях хронических инфекций может быть усугубляющим фактором с клинической точки зрения. Айдемир и др. . ¹⁵ указывают на то, что повышенное окислительное повреждение может быть фактором SHV. В предыдущем исследовании мы показали, что генетические факторы могут влиять на текучесть спермы ¹⁶ .

Особый интерес представляет возможная корреляция между SHV и инфекциями и / или воспалением половых путей.Однако следует отметить, что в этой области существует много разногласий. Согласно Munuce и др. . ¹⁷ , нет никакой связи между SHV и положительностью посева спермы, лейкоспермией или наличием антител к сперматозоиду. Кроме того, нет корреляции между SHV и инфекцией вируса иммунодефицита человека ¹⁸ . Однако Wang и др. . ¹⁹ обнаружили, что Ureaplasma urealyticum инфекций были связаны с SHV.

Цели этого исследования: (а) оценить распространенность субъектов с SHV в большой популяции мужчин-партнеров субфертильных пар; (б) оценить возможную корреляцию между SHV и инфекциями / воспалениями половых путей; (c) оценить эффекты терапевтических подходов в лечении SHV; и (d) оценить кинетические параметры сперматозоидов после успешного лечения SHV.

Материалы и методы

Ретроспективное исследование

Ретроспективное исследование было проведено для изучения данных с января 2004 года по декабрь 2007 года для оценки распространенности ВГЧ у мужчин-партнеров субфертильных пар, направленных в отделение андрологии больницы Сант-Андреа (Рим) для анализа спермы.Всего было обследовано 1 833 человека и 2 587 эякулятов. В анализ были включены субъекты с полностью нормальными параметрами спермы и лица с одним или несколькими измененными параметрами спермы.

Клиническое исследование

Клиническое исследование проводилось в соответствии с рекомендациями комитета по этике больницы.

Для изучения возможного вовлечения инфекций или воспалений половых путей в качестве патогенного фактора в SHV группу исследования составили 52 пациента с SHV в возрасте от 25 до 43 лет.Был собран полный анамнез, и пациенты прошли диагностическую и терапевтическую программу, включающую клиническое и семенное обследование, посев спермы и ультразвуковое исследование яичек, семенных пузырьков и простаты. Все пациенты с гормональными изменениями, лечившимися крипторхизмом и варикоцеле с выраженным венозным рефлюксом (время рефлюкса более 2 с, определяется с помощью цветного допплера) ²⁰ были исключены из исследования.

Минимальный период бесплодия пары составил 1 год.Концентрация спермы составляла ≥ 20 миллионов мл ^–1 , а атипичные формы — <70%. SHV было подтверждено вторым семенным обследованием через 2 месяца после первого.

Все 52 субъекта лечились противовоспалительными и муколитическими средствами, 50 мг тетрациклина и 5 мг гидрокортизона (Фармацевтика Форменти спа, Милан, Италия) каждый день в течение 30 дней, а затем 200 мг N -ацетилцистеина (Zambon Svizzera SA , Cadempino, Swisse) каждый день в течение следующих 2 месяцев.Пациенты с SHV, не ответившие на терапию, получали второй курс противовоспалительных препаратов. Субъекты с положительной культурой спермы должны были сначала пройти специальную антибактериальную терапию, согласно антибиотикограмме, при самой низкой минимальной ингибирующей концентрации для идентифицированных бактерий. Терапия длилась 5 дней.

Стандартный анализ спермы, посев спермы и ультразвуковое исследование яичек, семенных пузырьков и простаты проводились до и после терапии.

Определение инфекции и воспаления мужских половых путей

В нашей когорте инфекции были обнаружены с помощью посева спермы.Был предложен ряд методов диагностики воспаления половых путей, включая исследование эякулята на наличие пероксидаза-положительных клеток или уровней семенной полиморфно-ядерной эластазы ²¹ . Увеличение количества лейкоцитов в семенной жидкости (WBC) при отсутствии инфекции или признаков воспаления, влияющих на придаток яичка, семенные пузырьки и простату, было принято как маркер воспаления. Подтверждение воспаления производилось с помощью УЗИ. Субъекты были разделены в зависимости от наличия или отсутствия инфекции и / или признаков воспаления.

Анализ спермы и посев спермы

Образцы спермы были собраны путем мастурбации через 3-5 дней полового воздержания. Образцы хранили в контролируемом инкубаторе (37 ° C) на осторожно перемещающемся планшете.

После разжижения образцы спермы были проанализированы в соответствии с рекомендациями Всемирной организации здравоохранения (ВОЗ) ^{22, 23} . Система анализа наложенных изображений использовалась для оценки параметров подвижности сперматозоидов ^{24, 25} . Прогрессивная подвижность определялась следующим образом: класс 1 — скорость по прямой (VSL) ≥ 23 мкм с ^–1 и линейность (LIN) ≥ 0.58; и класс 2 — VSL> 10 и ≤ 23 мкм с ^-1 и LIN ≥ 0,58 (частота кадров: 21 кадр с ^-1 ) ²⁵ . Морфологию сперматозоидов изучали методом окрашивания по Брайану – Лейшману (BL) ²² . Предметные стекла исследовали при увеличении × 1000 с помощью светового микроскопа Olympus CX31 с использованием микрометрической шкалы. Метод окрашивания BL является особенно эффективным методом различения половых клеток и лейкоцитов ²² . Дефекты морфологии сперматозоидов были классифицированы в соответствии с рекомендациями ВОЗ ^{22, 23} .Для каждого образца оценивали не менее 200 сперматозоидов.

Вязкость определяли через 1 час после эякуляции осторожным отсасыванием спермы в пипетку на 5 мл и затем получением капель спермы. В случае аномальной вязкости капля образовывала нить длиной более 2 см, что оценивали по сантиметровой шкале. Гипервязкость при нормальной гравитации оценивалась как легкая (длина нити> 2 см и ≤ 4 см), умеренная (> 4 см и ≤ 6 см) или сильная (> 6 см).

Наконец, образцы семенной культуры с колониями> 100 000 UFC мл ^-1 были признаны положительными.

Контроль качества анализа спермы

Внутренний контроль качества (КК) (внутриоператорский и межоператорский) проводился каждые 2 месяца. Внешний контроль качества проводился Национальным институтом здравоохранения.

Ультразвук

Ультразвук яичек выполняли с помощью HDI 4000 (ATL Ultrasound, Bothell, WA, USA) с использованием датчика с диапазоном частот от 5,5 до 12 МГц. Увеличение объема предстательной железы, семенных пузырьков или придатка яичка или изменения эхогенных структур считались признаками воспаления ²⁶ .

Статистика

Мы использовали тест Шапиро – Уилка для изучения прогрессивной моторики, распределения VSL и LIN. Мы использовали как тест Уилкоксона, так и двусторонний тест Стьюдента t для парных данных, чтобы оценить прогрессивную моторику, для которой гипотеза нормальности не может быть отклонена. Для VSL и LIN, для которых гипотеза нормальности должна быть отклонена, мы использовали только тест Вилкоксона для парных данных, поскольку этот тест не требует каких-либо конкретных предположений о распределении данных.Все тесты проводились с использованием статистического пакета SPSS.

Результаты

Ретроспективное исследование

Из 2 587 образцов 602 (23,2%) показали некоторую степень SHV (11,2% легкая, 6,2% умеренная и 5,8% тяжелая) (). Распространенность SHV составила 26,2% (480 из 1833 субъектов): 13,2% легкая, 6,6% умеренная и 6,4% тяжелая (). Для тех субъектов, для которых было выполнено более одного анализа спермы, в таблице показана вязкость, обнаруженная во время первого исследования.

Таблица 1

Распространенность образцов спермы и субъектов с повышенной вязкостью спермы (SHV) у партнеров-мужчин из субфертильных пар.

9025 26,2%) 902 тяжелая9

	Всего образцов спермы ( n = 2 587)	Всего субъектов ( n = 1833)
Всего SHV	602 (23,2%)
SHV легкая	291 (11,2%)	242 (13,2%)
SHV умеренная	160 (6,2%)	121 (6,6%)
151 (5,8%)	117 (6.4%)

Клиническое исследование

52 субъекта, участвовавшие в клиническом исследовании, были разделены на три группы в соответствии с их исходными диагностическими результатами ().

Таблица 2

Последующее обследование 52 пациентов (разделенных на 3 группы), прошедших полную диагностическую и терапевтическую программу.

тяжелая )

Группа	SHV	Предварительная обработка	Последующая обработка
			Нормальная вязкость	SHV
				Легкая	Легкая
A	мягкий	14	14	—	—	—
	умеренный	1	1							— тяжелый	2	2	—	—	—
		17	17 (100%)	—	—	—
	2	—	—	—
умеренный	4	2	1	1	—
тяжелый	6	—	3	2	1
	12	4 (33.3%)	4 (33,3%)	3 (25%)	1 (8,4%)
C	мягкий	6	3	3	—	—	умеренный	7	2	1	4	—
	тяжелый	10	1	3	1	5						7 (30,5%)	5 (21.7%)	5 (21,7%)
	Всего		52 (100%)	27 (52,0%)	11 (21,1%)	8 (15,4%)	6 (11,5 %)

Группа A ( n = 17) включала субъектов с положительной культурой спермы на Escherichia coli ( n = 5), Klebsiella pneumoniae ( n = 3), Proteus mirabilis ( n = 3), Pseudomonas aeruginosa ( n = 1), Enterobacter faecalis ( n = 2) или Ureaplasma urealyticum ( n = 3).

Группа B ( n = 12) состояла из субъектов с> 1 × 10 ⁶ семенных лейкоцитов и / или воспалительными признаками, наблюдаемыми при ультразвуковом исследовании.

Группа C ( n = 23) включала субъектов с отрицательной культурой спермы и без воспалительных признаков, наблюдаемых при УЗИ, и 1 × 10 ⁶ лейкоцитов в семенной жидкости.

Каждая группа была разделена на три подгруппы в зависимости от степени тяжести SHV (легкая, умеренная или тяжелая).

Терапевтическое лечение полностью разрешило SHV в 27 случаях (52.0%): 17 из 17 субъектов (100%) в группе A, 4 из 12 субъектов (33,0%) в группе B и 6 из 23 субъектов (26,1%) в группе C. У всех этих субъектов посев спермы стал или остался отрицательный, семенные лейкоциты стали или остались 1 × 10 ⁶ , а ультразвуковое исследование больше не показало признаков воспаления.

Напротив, у других 25 субъектов лечение было неэффективным или только частично, поскольку тяжелая гипервязкость стала средней или легкой. Таким образом, 25 из 52 пролеченных пациентов (48.0%) все еще имели некоторую степень SHV. Из них 11 (21,1%) страдали легкой SHV, 8 (15,4%) — средней и 6 (11,5%) — тяжелой повышенной вязкостью.

Наконец, из 27 пациентов, у которых после терапии была достигнута нормальная вязкость, прогрессивная подвижность (тест Уилкоксона P <0,01 и двусторонний тест Стьюдента t -тест P <0,005), VSL (тест Уилкоксона P < 0,001) и LIN (тест Уилкоксона P <0,05) были выше, чем уровни до лечения (,).Прогрессивная моторика, VSL и LIN улучшились, соответственно, у 21, 25 и 18 человек из 27 (). Только один субъект перешел от астенозооспермии к нормальной подвижности сперматозоидов (50% оценок a + b по данным ВОЗ). Средняя разница подвижности сперматозоидов после лечения и . предварительная обработка составляла 6,2 + 10,4 (стандартное отклонение) ().

Профиль подвижности сперматозоидов у субъектов ( n = 27) с предварительной обработкой SHV и последующей обработкой с нормальной вязкостью. Сплошные и пунктирные линии показывают приращение и уменьшение кинетических параметров соответственно.(A): Процент прогрессирующей подвижности (тест Шапиро-Уилка до лечения P = 0,077, после лечения P = 0,246; гипотеза нормальности не может быть отклонена). Тест Вилкоксона для парных данных P <0,01. Двусторонний критерий Стьюдента t для парных данных P <0,005. (B): Скорость прямой линии (VSL) (мкм сек ^-1 ) (тест Шапиро-Уилка до лечения P = 0,033, после лечения P <0,001; гипотеза о нормальности должна быть отклонена).Тест Вилкоксона для парных данных P <0,001. (C): Линейность (LIN) (тест Шапиро-Уилка до лечения P = 0,043, после лечения P = 0,017; гипотеза о нормальности должна быть отклонена). Тест Вилкоксона для парных данных P <0,05.

Таблица 3

Профиль подвижности у субъектов ( n = 27) с SHV до лечения и нормальной вязкостью после лечения.

	Предварительная обработка ( n = 27)	Последующая обработка ( n = 27)	Различия
Прогрессивная подвижность (%)	20.2 ± 12,6	26,4 ± 13,3 a, d	6,2 ± 10,4
VSL (мкм с −1 ) (скорость по прямой)	18,4 ± 6,2	25,3 ± 6,8 b	6,8 ± 6,2
LIN (линейность)	0,76 ± 0,09	0,81 ± 0,07 c	0,05 ± 0,11

Обсуждение

Целью данного исследования было оценить распространенность в большой популяции партнеров-мужчин из субфертильных пар, а также для оценки возможной корреляции между инфекциями / воспалением половых путей и SHV.Кроме того, мы оценили эффекты терапевтических подходов к лечению SHV и оценили кинетические параметры сперматозоидов после успешного лечения.

Что касается первого пункта, исследование большой популяции мужчин-партнеров субфертильных пар показало, что распространенность SHV составила 26,2%, что подтверждает относительно высокую частоту этого состояния. Эта распространенность была значительно ниже, чем обнаруженная Gonzales et al . ^{8, 9} , но значительно выше по сравнению с найденным Гопалкришнаном и др. . ²⁷ и Эсфандиари и др. . ²⁸ . Это может быть из-за различий в популяциях пациентов, а также из-за различий в стандартизации измерения SHV.

Что касается причин и патогенных аспектов SHV, то они еще не выяснены полностью. В этом исследовании изучалась корреляция между повышенной вязкостью и классическими патогенными факторами, предлагаемыми в литературе, такими как инфекция или воспаление мужских половых путей.Это исследование показало распространенность легкой SHV в группе A (положительный посев спермы), тогда как оно показало преобладание тяжелой SHV в группе B и, что удивительно, в группе C, которая была группой без каких-либо признаков воспаления.

Что касается лечения SHV, то в эпоху до появления техник ЭКО Амелар и Дубин ⁴ заявили, что SHV следует лечить только в том случае, если результаты посткоитальных тестов были плохими. Лечение для снижения SHV с помощью непрямых мер, таких как избыточная гидратация пациентов, массаж простаты или введение парентеральной гиалуронидазы, не было эффективным ⁴ .Они также предложили использовать первую часть эякулята (если вязкость была ниже, чем у всего эякулята) или весь эякулят, после нескольких прогонов через иглу для подкожных инъекций, для внутриматочной инсеминации (ВМИ) ⁴ .

Внедрение ЭКО и использование все более сложных методов подготовки спермы подчеркнули важность принятия дополнительных мер в случаях SHV. Фактически, муколитические агенты были предложены для лечения in vitro .Среди наиболее важных исследований в этой области Honea et al . В заявлении ⁶ указано, что ограниченный протеолиз с использованием α-химотрипсина в случаях, когда он улучшает результаты анализа проникновения сперматозоидов, может представлять собой полезную предварительную обработку сверхвязкой спермы для программ IUI или IVF. Кроме того, согласно Zavos et al . ⁵ , ограниченный протеолиз сверхвязких образцов спермы с использованием α-химотрипсина помог восстановить большее количество сперматозоидов более высокого качества, которые можно было бы использовать в различных вспомогательных репродуктивных технологиях.

Однако не исключено, что подобные процедуры могут повредить структуру сперматозоидов. В результате более перспективным может оказаться патогенный подход к лечению повышенной вязкости.

Munuce и др. . ¹⁷ использовали лечение антибиотиками у субъектов с инфекциями половых путей, с SHV и без. Терапия основывалась на соответствующем микроорганизме и антибиотикограмме. Они пришли к выводу, что не было никакой связи между SHV и положительностью в культурах спермы, количеством видов, выделенных в культурах спермы, лейкоспермией или наличием антител к сперматозоидам.

В этом исследовании мы оценили эффекты не только лечения антибиотиками, но также противовоспалительных и муколитических агентов in vivo . Анализ результатов показал, что лечение было успешным примерно в половине случаев, в первую очередь у пациентов с легкой формой SHV и положительным посевом спермы. У остальных пациентов лечение либо не имело эффекта, либо просто снижало гипервязкость с тяжелой до умеренной или легкой. На основании этих наблюдений можно предположить, что случаи легкой SHV могут быть результатом легко поддающейся лечению инфекции и воспаления.С другой стороны, тяжелая SHV может представлять собой совсем другое. В предыдущем исследовании мы предположили, что определенные случаи идиопатической SHV можно рассматривать как минимальные клинические проявления муковисцидоза, поскольку вариации последовательности гена CFTR могут составлять генетическую основу этого заболевания ¹⁶ . Несмотря на негативное влияние тяжелой SHV на способность к воспроизводству и хотя было бы очень важно понять лежащие в основе молекулярные механизмы, никаких других исследований генетической основы идиопатической SHV в литературе не найдено.

Следовательно, в случаях, когда противовоспалительное лечение оказывается безуспешным, можно заподозрить генетическое происхождение SHV. В этих случаях может быть полезно провести генетический анализ, в первую очередь на наличие мутаций в гене CFTR.

Наконец, пагубное влияние SHV на подвижность сперматозоидов, по-видимому, дополнительно подтверждается улучшенной кинетикой, наблюдаемой у успешно пролеченных пациентов. Это согласуется с Эльзанати и др. . ² и Кури и др. . ²⁹ , и подтверждает важный «эффект улавливания», который, естественно, более очевиден при тяжелой SHV.

В заключение, результаты исследования позволяют сделать следующие наблюдения: SHV часто обнаруживается у субфертильных мужчин и отрицательно влияет на кинетические параметры семенной жидкости; специфическая антибиотикотерапия и противовоспалительная терапия могут успешно лечить легкую SHV, при которой состояние кажется результатом инфекции или воспаления; и повышенная вязкость, по-видимому, возникает не из-за одного патогенного фактора, а из-за нескольких (биохимических, ферментативных и генетических) факторов, которые действуют совместно.Эти факторы требуют дальнейшего изучения, чтобы лучше понять их роль в патогенезе SHV.

Благодарности

Эта работа была поддержана грантом Telethon (GGP06199).

Ссылки

• Tjioe DY, Oentoeng S. Вязкость спермы человека и процент подвижных сперматозоидов. Fertil Steril. 1968; 19: 562–5. [PubMed] [Google Scholar]
• Эльзанати С., Мальм Дж., Гиверкман А. Вязко-эластичность семенной жидкости по отношению к функции придатков и придатков половых желез и ее влияние на подвижность сперматозоидов.Инт Дж. Андрол. 2004. 27: 94–100. [PubMed] [Google Scholar]
• Эсфандиари Н., Бурджак Х, Готлиб Л., Каспер РФ. Гипервязкость семенной жидкости связана с плохим исходом экстракорпорального оплодотворения и переноса эмбриона: проспективное исследование. Fertil Steril. 2008; 90: 1739–43. [PubMed] [Google Scholar]
• Амелар Р.Д., Дубин Л. Особые проблемы в управлении // Амелар Р.Д., Дубин Л., Уолш П.С., редакторы. Мужское бесплодие. Филадельфия: WB Saunders Company; 1977p191–214.
• Zavos PM, Zarmakoupis-Zavos PN, Correa JR.Влияние лечения нарушений вязкости семенной жидкости с помощью α-химотрипсина на восстановление сперматозоидов для вспомогательных репродуктивных технологий: сравнение методов фильтрации SpermPrep и центрифугирования в градиенте Percoll. Ближний Восток Fertil Soc J. 1997; 2: 223–9. [Google Scholar]
• Honea KL, Houserman VL, Merryman DC, Free DA, Stringfellow SE. Влияние ограниченного протеолиза с α-химотрипсином на сперму с аномальным анализом проникновения сперматозоидов и возможным применением для оплодотворения in vitro или внутриматочной инсеминации.J Assist Reprod Genet. 1993; 10: 255–60. [PubMed] [Google Scholar]
• Упадхьяя М., Хиббард Б.М., Уокер С.М. Использование спутолизина для разжижения вязкой человеческой спермы. Fertil Steril. 1981; 35: 657–61. [PubMed] [Google Scholar]
• Gonzales GF, Kortebani G, Mazzolli AB. Повышенная вязкость и гипофункция семенных пузырьков. Арка Андрол. 1993; 30: 63–8. [PubMed] [Google Scholar]
• Гонсалес Г.Ф. Функция семенных пузырьков и их роль в мужской фертильности. Азиат Дж. Андрол. 2001; 3: 251–8.[PubMed] [Google Scholar]
• Андраде-Роша FT. Физический анализ эякулята для оценки секреторной активности семенных пузырьков и простаты. Clin Chem Lab Med. 2005; 43: 1203–10. [PubMed] [Google Scholar]
• Carpino A, Siciliano L. Неизмененный белковый состав / уровни маркеров секреции половых путей в семенной плазме высоковязких эякулятов человека. Арка Андрол. 1998; 41: 31–5. [PubMed] [Google Scholar]
• Mendeluk GR, Gonzales Flecha FL, Castello PR, Bregni C. Факторы, участвующие в биохимической этиологии повышенной вязкости семенной плазмы человека.Дж. Андрол. 2000; 21: 262–7. [PubMed] [Google Scholar]
• Mendeluk GR, Blanco AM, Bregni C. Реология семенной жидкости человека: роль лизоцима. Acta Farm Bonaerense. 1996; 15: 163–8. [Google Scholar]
• Mendeluk GR, Blanco AM, Bregni C. Вязкость семенной жидкости человека: роль лизоцима. Арка Андрол. 1997; 38: 7–11. [PubMed] [Google Scholar]
• Айдемир Б., Онаран И., Кизилер А.Р., Алиджи Б., Акьолджу М.С. Влияние окислительного повреждения на вязкость семенной жидкости у бесплодных мужчин.Дж. Андрол. 2008; 29: 41–6. [PubMed] [Google Scholar]
• Росси Т., Грандони Ф., Маццилли Ф., Куатруччи С., Антонелли М. и др. Высокая частота (TG) _m T _n вариантных трактов в гене регулятора трансмембранной проводимости муковисцидоза у мужчин с высокой вязкостью спермы. Fertil Steril. 2004; 82: 1316–22. [PubMed] [Google Scholar]
• Munuce MJ, Bregni C, Carizza C, Mendeluk G. Посев спермы, лейкоцитоспермия и наличие антител к сперматозоидам при повышенной вязкости семенной жидкости.Арка Андрол. 1999; 42: 21–8. [PubMed] [Google Scholar]
• Дондеро Ф., Росси Т., Д’Оффици Дж., Маззилли Ф., Россо Р. и др. Анализ спермы серопозитивных мужчин и лиц с высоким риском заражения ВИЧ. Hum Reprod. 1996; 11: 765–8. [PubMed] [Google Scholar]
• Ван И, Лян С.Л., Ву Дж.К., Сюй Ц., Цинь С.Х. и др. Do Ureaplasma urealyticum Инфекции половых путей влияют на качество спермы. Азиат Дж. Андрол. 2006; 8: 562–8. [PubMed] [Google Scholar]
• Винкельбауэр Ф.В., Амманн М.Э., Карнел Ф., Ламмер Дж.Допплерография варикоцеле: отдаленное наблюдение после венографии и транкатетерной склеротерапии. J Ultrasound Med. 1994; 23: 953–8. [PubMed] [Google Scholar]
• Хенкель Р., Маасс Дж., Юнг А., Хайдл Дж., Шилл В. Б. и др. Возрастные изменения семенной полиморфно-ядерной эластазы у мужчин с бессимптомным воспалением половых путей. Азиат Дж. Андрол. 2007; 9: 299–304. [PubMed] [Google Scholar]
• Всемирная организация здравоохранения. Лабораторное руководство по исследованию взаимодействия спермы человека и цервикальной слизи 3-е изд.Нью-Йорк: Издательство Кембриджского университета; 1992 [Google Scholar]
• Всемирная организация здравоохранения. Лабораторное руководство по исследованию взаимодействия спермы человека и цервикальной слизи 4-е изд. Нью-Йорк: Издательство Кембриджского университета; 1999 [Google Scholar]
• Маццилли Ф., Росси Т., Сабатини Л., Дондеро Ф. Программное обеспечение системы анализа наложенных изображений (SIAS): новый подход к оценке подвижности сперматозоидов. Fertil Steril. 1995; 64: 653–6. [PubMed] [Google Scholar]
• Маццилли Ф., Росси Т., Дельфино М., Нофрони И.Применение обновленной системы наложения изображений (SIAS) для оценки кинематики сперматозоидов. Андрология. 1999; 31: 187–194. [PubMed] [Google Scholar]
• Кимура А., Куроока Ю., Хирасава К., Китамура Т., Кавабе К. Точность расчета объема простаты при трансректальном УЗИ. Int J Urol. 1995; 2: 252–6. [PubMed] [Google Scholar]
• Gopalkrishnan K, Padwal V, Balaiah D. Влияет ли вязкость семенной жидкости на целостность хроматина сперматозоидов? Арка Андрол. 2000; 45: 99–103. [PubMed] [Google Scholar]
• Эсфандиари Н., Готлиб Л., Каспер РФ.Гипервязкость семенной жидкости связана с плохим результатом контролируемой стимуляции яичников и внутриматочной инсеминации: проспективное исследование. Int J Fertil Wom Med. 2006; 51: 21–7. [PubMed] [Google Scholar]
• Кури С.М., Арианьо Д.И., Ченло П.Х., Менделук Г.Р., Пульезе М.Н. и др. Астенозооспермия: анализ большой популяции. Арка Андрол. 2003; 49: 343–9. [PubMed] [Google Scholar]

без названия

% PDF-1.6 % 1091 0 объект > эндобдж 1198 0 объект > поток 2010-05-04T17: 05: 24 + 02: 002010-05-05T09: 35: 36 + 02: 002010-05-05T09: 35: 36 + 02: 00 Acrobat Distiller 8.Приложение 0.0 (Windows) / pdf

без названия

uuid: 256cdfcc-8116-4ac0-ae74-1a848610ff26uuid: d4f3dfaf-19b1-4f82-b092-6103302c4513 конечный поток эндобдж 1133 0 объект > / Кодировка >>>>> эндобдж 1055 0 объект > эндобдж 1176 0 объект > эндобдж 1177 0 объект > эндобдж 1193 0 объект > эндобдж 1194 0 объект > эндобдж 1195 0 объект > эндобдж 1196 0 объект > эндобдж 1197 0 объект > эндобдж 1179 0 объект > эндобдж 1183 0 объект > эндобдж 1187 0 объект > эндобдж 1188 0 объект > эндобдж 1191 0 объект > эндобдж 1192 0 объект > эндобдж 1190 0 объект > эндобдж 1137 0 объект > / ColorSpace> / Font> / ProcSet [/ PDF / Text / ImageC / ImageI] / ExtGState >>> / Type / Page >> эндобдж 1057 0 объект > эндобдж 1166 0 объект > эндобдж 1141 0 объект > эндобдж 1140 0 объект > эндобдж 1139 0 объект > эндобдж 1138 0 объект > эндобдж 1147 0 объект > эндобдж 1142 0 объект > эндобдж 1145 0 объект > эндобдж 1144 0 объект > поток H \ j0 ~ Cq ڭ r

.