Эмбрион эко: как проходит подготовка, как происходит подсадка эмбрионов – статьи о здоровье
Оценка качества ооцитов и эмбрионов в программе ЭКО в стадии бластоцисты
Все пациенты интересуются качеством полученных клеток, а в дальнейшем и качеством эмбрионов. Однако данный вопрос многофакторный и не имеет однозначного ответа. Начнем с начала. Первый вопрос, который задают пациенты, когда к ним в палату после процедуры забора ооцитов приходит эмбриолог, звучит всегда одинаково: «А клетки у меня хорошие?». Хочется сразу заметить, что на этот вопрос очень сложно ответить на данном этапе программы ВРТ. Первичная оценка ооцита основана на непосредственном визуальном анализе морфологии ооцит-кумулюсного комплекса. При получении ооцитов эмбриолог смотрит на клетки через бинокулярный микроском с незначительным уровнем увеличения. Выглядит это вот так:
В данной ситуации оценить детально качество ооцитов не представляется возможным. Эмбриолог может только делать предположения. Поэтому оценка ооцитов на этапе проведения трансвагинальной пункции яичников не проводится.
После забора ооцитов эмбриолог определяется с тем, каким методом проводить оплодотворение полученных клеток.
Метод оплодотворения выбирается на основании показателей мужского материала. Если показатели спермограммы снижены – выбирается метод ICSI. Суть его заключается в том, что эмбриолог очищает ооциты от клеток кумулюса и с помощью специальных инструментов, работая на специальном микроскопе, вводит морофологически хороший, активно-подвижный сперматозоид внутрь клетки. Перед тем как ввести сперматозоид в клетку, его обездвиживают. Данный метод оплодотворения предлагается также парам с бесплодием неясного генеза и пациентам, планирующим проведение преимлантационной генетической диагностики. Помимого этого, ИКСИ может быть проведено по желанию пациента.
При хороших показателях спермограммы проводится оплодотворение методом ЭКО. В чашке со специальной средой соединяют сперматозоиды и ооциты, а оплодотворение происходит естественным способом.
Итак, поговорим более подробно о зрелости и качестве ооцита.
a
Созревание ооцита до состояния, когда он способен к оплодотворению, происходит в процессе стимуляции суперовуляции, проводимой врачом гинекологом-репродуктологом. Не все ооциты в процессе стимуляции достигают зрелости.
- Способны оплодотворятся только ооциты, находящиеся в стадии метафазы 2 процесса мейоза. Их обозначают как М2.
Зрелый ооцит выглядит так
- Ооциты не достигшие зрелости имеют отличия от ооцита М2, которые эмбриолог способен увидеть только при выполнении оплодотворения методом ICSI. Незрелые ооциты имеют 2 вида: это клетка находящаяся в метафазе 1 мейоза (М1) и так называемый герминальный везикул (GV) ооциты в профазе I деления мейоза, определяемые по наличию зародышевого пузырька или ядерной оболочки в цитоплазме.
М1
GV
При оплодотворении методом ЭКО такую оценку не проводят.
Возможность оценить клетки в данной ситуации возникает только утром следующего дня, а в это время не всегда возможно понять, какими клетки были в момент пункции, т.к. они имеют возможность пройти процесс дозревания в условиях инкубатора.
Что такое качество ооцита
Качество ооцита характеризует внешний вид цитоплазмы, вителлинового слоя, полярного тельца. Гомогенная цитоплазма с однородным цветом и отсутствием гранулярности характеризует хорошее качество ооцита. Вакуоли, темная окраска, всевозможные включения, деформация или гранулярность расцениваются при морфологической оценке качества ооцита как негативные признаки.
Ооцит плохого качества, с гранулированной цитоплазмой и вакуолью большого размера в центре.
Оценка оплодотворения в стадии бластоцисты
Оценка оплодотворения проводится утром следующего за пункцией дня. Этот день считается 1-м днем эмбрионального развития.
Возможность понять, произошло ли оплодотворение клетки, появляется через 18 часов после оплодотвоерния и характеризуется формированием пронуклеусов.
Эмбрион первых суток развития называется зиготой.
На этот день эмбриолог оценивает «правильность» оплодотворения. Нормально оплодотворившийся ооцит содержит 2 пронуклеуса. Все остальные варианты считаются отклонением.
Триплоидный эмбрион (3pn)
Аномально оплодотворившиеся эмбрионы исключаются из культивирования.
Оценка качества эмбрионов 2-3 дня развития
Дробление — это синхронное быстрое деление эмбриона на равные крупные клетки. Эти клетки называются бластомерами. Оценка качества эмбриона производится по равномерности бластомеров. Чем более равномерные бластомеры содержит эмбрион, тем лучшим считается его качество. Оценку эмбрионов данных суток развития осуществляют по количеству бластомеров (обозначается цифрой) и по дополнительным критериям, таким как равномерность бластомеров и наличие фрагментации (оценивается латинскими буквами a,b,c,d и их комбинацией).
Эмбрион хорошего качества выглядит так.
4-е сутки эмбрионального развития
На 4-е сутки развития эмбрион человека состоит уже, как правило, из 16-18 клеток, межклеточные контакты постепенно уплотняются, и поверхность эмбриона сглаживается. Этот процесс называется компактизацией. Важно понимать, что до 3-х суток дробление эмбриона происходит механически, каждая клетка делится пополам, черпая энергию из запасов ооцита. Начиная с 4 суток эмбрионального развития начинается дифференциация клеток эмбриона, часть из них сформируют зародыш, остальные будут обеспечивать возможность имплантации и формирования плаценты.
На данном этапе эмбрионы наиболее чувствительны к отрицательным воздействиям.
Качество бластоцисты, которая сформируется из морулы, оценить практически невозможно.
Оценка качества морулы проводится по характеристикам компактизации:
- А — эмбрион полностью компактизован.
Клеточные мембраны видны нечетко. - В — компактизовано более 75% бластомеров. Эмбрион сохраняет сферичную форму и гладкую поверхность.
- С — частичная компактизация (около 50% бластомеров).
- D — компактизация менее 50% бластомеров. Различимы фрагменты и некомпактизовавшиеся бластомеры.
Клеточные мембраны видны нечетко.Морулы отличного качества
Морула плохого качества
Далее внутри морулы начинает формироваться полость. Когда эта полость достигает достигает 20% от ее объема, эмбрион называется бластоцистой. В норме формирование бластоцисты допускается с конца 4-х по середину 6-х суток развития, но чаще это происходит на 5-е сутки. В редких случаях возможно формирование бластоцисты к 7-м суткам эмбрионального развития.
Бластоциста состоит из двух популяций клеток, таких как: трофэктодерма (однослойный эпителий, окружающий полость) и внутренняя клеточная масса (плотное образование из клеток внутри бластоцисты).
Из трофэктодермы сформируется в дальнейшем плацента и все зародошевые оболочки. Из внутренней клеточной массы будут формироваться все ткани и органы будущего ребенка. На данном этапе развития эмбрион оценивают по 3 критериям:по размеру полости, качеству трофэктодермы и качеству внутриклеточной массы.
Размер полости оценивают цифрой от 1-ого до 4-х. Внутриклеточную массу и трофэктодерму оценивают буквами от А до С. Первая буква в оценке качества будет относится к внутриклеточной массе, вторая – к качеству трофэктодермы. Если бластоциста успела совершить «хетчинг» (разрыв оболочки, окружающий эмбрион), такой бастоцисте присваивается цифра 5. Если же бластоциста успела полностью выбраться из оболочки после хетчинга, такую бластоцисту обозначат цифрой 6. Размер полости имеет меньшее значение в определении качества эмбриона, чем буквенная классификация. Ввиду того, что эмбрионы имеют индивидуальные особенности, они могут развиваться неравномерно. Любой размер полости определяется как вариант нормы.
Важно понимать, что критерии оценки эмбрионов носят субъективный характер. Даже эмбрионы, оцененные по классификации как эбмрионы среднего и ниже среднего качества, могут дать полноценную беременность.
Бластоцисты хорошего качества
3АА
4АА
5АА
5АА
6АА
Бластоцисты среднего качества
1АВ
2ВВ
Бластоцисты плохого качества
2ВС
3ВС
2СС
Почему происходит остановка развития эмбрионов?
Если вы прибегали к процедуре ЭКО, возможно, вам приходилось узнавать от репродуктолога или эмбриолога, что часть эмбрионов прекратила развитие, и их пришлось удалить из инкубатора.
К сожалению, некоторым пациенткам так и не удаётся перенести эмбрион, так как на определенном этапе инкубации прекращается развитие всех оплодотворённых яйцеклеток. В чем причина подобного замирания в развитии? Существует ли способ предотвратить это?
Около 15% ЭКО эмбрионов перестают развиваться во время митотического деления ещё на стадии 2-4 клеток. Некоторые замирают в развитии сразу после оплодотворения и не преодолевают стадию одной клетки. Более чем у половины замерших эмбрионов обнаруживаются хромосомные аномалии (генетические дефекты). Это означает, что проблема остановки развития эмбрионов – генетическая. Но есть и другие причины её возникновения.
Эмбрион может прекратить развитие по следующим причинам:
- Неблагоприятные условия инкубации
- Хромосомные аномалии
- Нарушение активации генома эмбриона
- Дефекты митохондрий
Ооциты женщин позднего фертильного возраста чаще несут в себе такие генетические дефекты, как анеуплоидия (ненормальное число хромосом).
Подобные ооциты могут быть оплодотворены, но их развитие останавливается на определенной стадии в зависимости от тяжести дефекта. Некоторые не начинают делиться (не проходят стадию одной клетки – зиготы), другие замирают до помещения в матку (в лабораторной чашке Петри), после помещения в матку или даже после имплантации (помните, что 60% неудачных случаев происходят из-за наличия в эмбрионе генетических аномалий). Генетические нарушения – одна из самых частых причин остановки развития эмбрионов, поэтому эмбрионы более молодых женщин реже замирают в развитии.
Когда яйцеклетка и сперматозоид сливаются, происходит оплодотворение и формирование эмбриона. Он несёт генетическую информацию от обоих родителей. В самый первый день после формирования эмбрион представляет собой одну единственную клетку, которая несёт в себе всю необходимую информацию для превращения в полноценного ребёнка. Первые несколько делений этой клетки происходят благодаря генам ооцита, но не сперматозоида. Цитоплазма яйцеклетки содержит ключевую информацию, которая позволяет пройти стадию 4-8 клеток.
Только после этой стадии геном эмбриона активируется и начинается его развитие. Однако активация может быть нарушена, что приведёт к остановке развития.
Для развития эмбриону требуется энергия, потребность в которой удовлетворяется специальными органеллами – митохондриями, которые называют “энергетическими станциями клетки”. У митохондрий есть собственный генетический материал, их функция – синтез молекул АТФ (аденозинтрифосфата). АТФ – это “энергетическая валюта” клетки, они используют её энергию для выполнения многих функций, в том числе на деления. Поскольку митохондрии располагаются в цитоплазме, все митохондрии эмбрион получает от матери. Митохондрии сперматозоида разрушаются сразу же после оплодотворения. Яйцеклетки женщины позднего фертильного возраста чаще содержат митохондрии с генетическими дефектами. Подобные нарушения не позволяют синтезировать достаточное для деления количество АТФ, что является одной из возможных причин остановки развития эмбриона. Было доказано, что при замене цитоплазмы ооцита женщины старшего возраста на цитоплазму ооцита молодой женщины функция деления восстанавливалась.
Этот метод уже применяется для преодоления бесплодия, однако его эффективность и безопасность ещё требуют подтверждения.
Если произошла остановка развития эмбрионов, возможно ли возобновить процесс? К сожалению, ответ – нет. Замирание развития необратимо. Важно задокументировать произошедшее, чтобы в дальнейшем изменить тактику лечения и повысить шансы на успех.
Если вы – женщина старшего возраста и уже сталкивались с проблемой остановки развития эмбрионов – донорские яйцеклетки могут стать возможным решением проблемы бесплодия. Если вы молоды, а в клинике сообщают, эмбрионы раз за разом прекращают развиваться – возможный метод решения проблемы – прибегнуть к методу замены цитоплазмы. Однако помните, что данная методика является экспериментальной, исследования находятся на начальной стадии, и метод ещё не применятся широко. Если вы готовитесь к процедуре ЭКО, стоит принять во внимание, что очень небольшой процент эмбрионов останавливается в развитии в ЭКО-лаборатории, и это явление считается вполне нормальным.
Горькая правда в том, что далеко не все яйцеклетки могут быть оплодотворены, не все эмбрионы могут быть перенесены в матку, не каждый из них может превратиться в ребёнка. До сих пор нет способа определить наверняка тот единственный эмбрион, который станет долгожданным малышом. Поэтому важно помнить: “Каждый младенец был эмбрионом, но не каждый эмбрион может стать младенцем!”
Автор материала:
Броварская Юлия Михайловна
Гинеколог-эндокринолог, Репродуктолог | клиника ДАХНО
Записатися на консультацію
Безопасность и положительный результат — главные правила нашей работы!
Катетер для переноса эмбрионов Guardia™ AccessET
Катетер для переноса эмбрионов Guardia™ AccessET ИзогнутыйУзнайте, как сделать заказ» Создайте учетную запись клиента и закажите этот или другие продукты Cook
Задать вопрос в службу поддержки» Спросите службу поддержки клиентов о наших продуктах или услугах
Технические характеристики
Свернутый Расширенный
| Номер заказа | Справочный номер детали | Инструкции по применению (IFU) | MR Статус | Проводник Катетер Пр | Проводник Катетер Длина см | Трансфер Катетер Пр | Подробнее |
|---|---|---|---|---|---|---|---|
| G53247 | Н/Д | 6. 6 | 16,7 | 2,8 | Расширять » | ||
Дополнительные характеристики Описание — Длина катетера для переноса см 23 Тип втулки маленький | |||||||
| G53007 | К-ДЖЕТС-7019-ЕТ | Н/Д | 6.6 | 17,3 | 2,8 | Расширять » | |
Дополнительные характеристики Описание — Длина катетера для переноса см 24 Тип втулки большой | |||||||
Документы
Брошюра
Библиотека изображений
Ищете дополнительную информацию об этом продукте?
Позвоните нам по бесплатному номеру 800.457.4500 или заполните форму ниже.
Пожалуйста, ознакомьтесь с нашей Политикой конфиденциальности, чтобы ознакомиться с уведомлениями о защите данных, касающимися сбора и использования нами ваших данных.
Заголовок: * — Г-жа Миссис Доктор.
Имя: *
Фамилия: *
Название компании: *
Номер клиента:
Страна/регион:
* —AfghanistanAlbaniaAlgeriaAmerican SamoaAngolaArgentinaArubaAustraliaAustriaBahamasBahrainBangladeshBarbadosBelarusBelgiumBeninBermudaBhutanBolivia, Plurinational State ofBosnia and HerzegovinaBotswanaBrazilBrunei DarussalamBulgariaBurkina FasoBurundiCameroonCanadaCayman IslandsCentral African RepublicChadChileChinaColombiaCongoCongo, The Democratic Republic of TheCosta RicaCroatiaCubaCyprusCzech RepublicCote d’IvoireDenmarkDominicaDominican RepublicEcuadorEgyptEl SalvadorEquatorial GuineaEstoniaEthiopiaFijiFinlandFranceFrench PolynesiaGabonGambiaGeorgiaGermanyGhanaGibraltarGreeceGuadeloupeGuamGuatemalaGuernseyGuineaHoly See (Vatican City State)HondurasHong KongHungaryIcelandIndiaIndonesiaIran, Islamic Republic ofIraqIrelandIsraelItalyJamaicaJapanJordanKazakhstanKenyaKorea, Democratic People’s Republic ofKorea, Republic КувейтЛаосская Народно-Демократическая РеспубликаЛатвияЛиванЛиберияЛивийская Арабская ДжамахирияЛихтенштейнЛитваЛюксембургМакаоМакедония, Бывшая Югославская РеспубликаМадаг ascarMalawiMalaysiaMaliMaltaMarshall IslandsMartiniqueMauritaniaMauritiusMexicoMontenegroMoroccoMozambiqueMyanmarNepalNetherlandsNetherlands AntillesNew CaledoniaNew ZealandNicaraguaNigerNigeriaNorwayOmanPakistanPalestinian Territory, OccupiedPanamaPapua New GuineaParaguayPeruPhilippinesPolandPortugalPuerto RicoQatarReunionRomaniaRussian FederationRwandaSaudi ArabiaSenegalSerbiaSierra LeoneSingaporeSlovakiaSloveniaSomaliaSouth AfricaSpainSri LankaSudanSurinameSwedenSwitzerlandSyrian Arab RepublicTaiwan, Province of ChinaTanzania, United Republic ofThailandTogoTrinidad and TobagoTunisiaTurkeyUgandaUkraineUnited Arab EmiratesUnited KingdomUnited StatesUnited States Minor Outlying IslandsUruguayVenezuela, Bolivarian Republic ofViet NamVirgin Islands, U.
S.YemenZambiaZimbabwe
Тема запроса: —Кто мой торговый представитель?Доступен ли этот продукт в моем регионе?Какой материал продукта?Какова единица измерения?Какова цена для клиента?
РПН:
GPS:
Электронная почта: *
Телефон:
Предпочтительный способ связи:
Комментарий: *
Наименование товара:
Пожалуйста, оставьте это поле пустым.
* обязательных полейСинтез, характеристика, его биомедицинские применения и их экологически безопасные подходы к разложению метиленового синего под воздействием солнечного света Каялвижи Тамилчелван, Чиннасами Рагавендран, Десингу Камаланатан, Рамкумар Раджендиран, Тиджо Чериан, Гильерме Малафая :: SSRN
42 страницы Опубликовано: 26 сентября 2022 г.
Просмотреть все статьи Kayalvizhi Thamilchelvan
Технологический колледж Соны
Университет Перияра
Технологический колледж Соны
Колледж искусств и наук для женщин Падмавани
Институт медицинских наук Пондичерри
Федеральный институт Гояно – Лаборатория токсикологии, применяемой в окружающей среде
066 Резюме
33 orchioides использовали эксплантаты корневищ для разработки быстрой и эффективной стратегии увеличения регенерации растений с использованием соматического эмбриогенеза.
Прямое соматическое развитие зародыша показано на корневищных эксплантатах, культивируемых на Мурасиге и Скуге (МС) с внесением 2, 4-Д (1,0 — 3,0 мг/л). Экспланты корневища, культивированные на среде МС с добавлением 2,0 мг/л 2,4-Д, давали наибольшую частоту эмбриогенеза (87,5 %) и максимальное количество соматических зародышей (159).6.7/эксплантат). Прорастание соматических зародышей осуществляли на среде MS с 2,0 мг/л 6-бензиламинопурина (БАП). С приживаемостью 80% всходы акклиматизировались в теплице. Настоящее исследование является первым доказательством эффективности полученных in vitro растений и культур каллуса соматических зародышей C. orchioides стабильных наночастиц золота. Спектрофотометрическое поглощение в УФ-видимой области при 510 нм выявило спектры поглощения AuNP. FT-IR выявил функциональные группы и реакционные процессы в образовании зеленых AuNP. Просвечивающая электронная микроскопия высокого разрешения (HR-TEM) использовалась для оценки морфологии поверхности и структуры AuNP после определения их элементного состава с использованием дисперсионного энергетического рентгеновского спектра (EDAX). Средний размер AuNP составлял около 35 нм в диаметре. Кристаллическая природа AuNP была исследована с помощью рентгеновской дифракции (XRD). Наибольшее ингибирование роста C. orctioides было обнаружено в отношении Klebsiella pneumoniae (17,5 мм) и Serratia marcescens (16,5 мм). AuNP проявляли антиоксидантную активность против свободных радикалов, таких как DPPH и ABTS. Кроме того, была оценена цитотоксичность AuNP, ингибирующая концентрация (IC50) составила 20 мкг/мл и 80 мкг/мл для карциномы молочной железы (MDA-MB-231) и клеточных линий Vero. Разложение метиленового синего измеряет фотокаталитическую активность изготовленных AuNP при воздействии видимого солнечного света (MB). Таким образом, результат показал максимальную эффективность деградации МБ (84%). Ключевые слова: Наночастицы золота, клинические патогены человека, DPPH, клеточная линия рака молочной железы, деградация красителя
Рекомендуемое цитирование: Рекомендуемая ссылка
Тамилчелван, Каялвижи и Рагавендран, Чиннасами и Камаланатан, Десингу и Раджендиран, Рамкумар и Чериан, Тиджо и Малафайя, Гильерме, Производство соматических эмбрионов in vitro из наночастиц золота, полученных из Curculigo Orchioides: синтез, характеристика, его биомедицинские применения и их экологически безопасные подходы к деградации метиленового синего под действием солнечного света.
Прямое соматическое развитие зародыша показано на корневищных эксплантатах, культивируемых на Мурасиге и Скуге (МС) с внесением 2, 4-Д (1,0 — 3,0 мг/л). Экспланты корневища, культивированные на среде МС с добавлением 2,0 мг/л 2,4-Д, давали наибольшую частоту эмбриогенеза (87,5 %) и максимальное количество соматических зародышей (159).6.7/эксплантат). Прорастание соматических зародышей осуществляли на среде MS с 2,0 мг/л 6-бензиламинопурина (БАП). С приживаемостью 80% всходы акклиматизировались в теплице. Настоящее исследование является первым доказательством эффективности полученных in vitro растений и культур каллуса соматических зародышей C. orchioides стабильных наночастиц золота. Спектрофотометрическое поглощение в УФ-видимой области при 510 нм выявило спектры поглощения AuNP. FT-IR выявил функциональные группы и реакционные процессы в образовании зеленых AuNP. Просвечивающая электронная микроскопия высокого разрешения (HR-TEM) использовалась для оценки морфологии поверхности и структуры AuNP после определения их элементного состава с использованием дисперсионного энергетического рентгеновского спектра (EDAX).
Средний размер AuNP составлял около 35 нм в диаметре. Кристаллическая природа AuNP была исследована с помощью рентгеновской дифракции (XRD). Наибольшее ингибирование роста C. orctioides было обнаружено в отношении Klebsiella pneumoniae (17,5 мм) и Serratia marcescens (16,5 мм). AuNP проявляли антиоксидантную активность против свободных радикалов, таких как DPPH и ABTS. Кроме того, была оценена цитотоксичность AuNP, ингибирующая концентрация (IC50) составила 20 мкг/мл и 80 мкг/мл для карциномы молочной железы (MDA-MB-231) и клеточных линий Vero. Разложение метиленового синего измеряет фотокаталитическую активность изготовленных AuNP при воздействии видимого солнечного света (MB). Таким образом, результат показал максимальную эффективность деградации МБ (84%).