Лабораторная диагностика зппп основывается на – Диагностика ЗППП: когда проводится, что входит.

Диагностика ЗППП, как проходит.

Существует большое количество таких заболеваний, которые довольно сложно выявить. Современные методы диагностики ЗППП позволяют идентифицировать возбудителя даже у пациентов, не имеющих видимых признаков инфекции.

Лабораторная диагностика ЗППП

Это лучший способ идентифицировать возбудителя. Современная медицина располагает множеством методик, позволяющих обнаружить причину заболевания даже при хроническом и латентном течении. Какие анализы лучше сдать в каждом конкретном случае, скажет врач.

Диагностика ЗППП у женщин и мужчин включает следующие методы:

Разберемся, в чем особенности, преимущества и недостатки каждого из методов.

Микроскопия мазка

Это самый простой и доступный метод. Материалом для исследования служит мазок из половых путей. Капля выделений наносится на предметное стекло и изучается под микроскопом.

В мазке можно обнаружить лейкоциты, эритроциты, скопления бактерий, грибков. Метод доступный и дешевый, но он не позволяет точно определять вид возбудителя, подсчитать его количество. Для диагностики вирусных инфекций микроскопия не подходит вовсе. Этот метод обычно используют как предварительный и дополняют другими анализами.

Посев

Образец биоматериала наносят на питательную среду и помещают в условия, оптимальные для размножения бактерий. Если в образце есть возбудитель, то спустя 5-7 дней на питательной среде можно обнаружить его колонии.

Каждый микроорганизм формирует колонии разного цвета, формы и размера. Поэтому по их внешнему виду можно определить причину заболевания.

Диагностика ЗППП у мужчин и женщин методом посева позволяет определить чувствительность возбудителя к антибиотикам, что позволяет назначить эффективное лечение. Для диагностики вирусных инфекций посев также не используется. Результата придется ждать около недели, что является существенным недостатком.

Определение антител

ИФА — это ценный метод для диагностики урогенитальных инфекций как бактериальной, так и вирусной природы. С помощью этого исследования удается обнаружить специфические антитела, которые организм вырабатывает в ответ на проникновение возбудителя.

prosifilis.ru

Глава 17. Организация лабораторной диагностики ЗППП. Инфекции, передаваемые половым путем

Глава 17. Организация лабораторной диагностики ЗППП

Окончательное установление диагноза заболевания возможно при обнаружении возбудителя или наличия антител в отделяемом из очагов поражения или в крови пациента методами микроскопичес­кого, бактериологического, а также иммунологического (серологи­ческого) исследований.

В целях совершенствования контроля за ЗППП рекомендовано создать в качестве структурных подразделений республиканских, краевых, областных и городских кожно-венерологических диспан­серов центральные лаборатории, сосредоточив в них все виды ис­следований для микроскопической, вирусологической, бактерио­логической, серологической иммунологической диагностики этих инфекций.

Лабораторные исследования в централизованной лаборатории про­водятся всеми имеющимися методами:

1. Для диагностики сифили­са исследование в темном поле микроскопа нативного препарата отделяемого или пунктата лимфатических узлов; серологического исследования крови и ликвора в РСК, реакции Кана, микрореак­ции прицепитации с кардиолипиновым антигеном, реакции иммо­билизации бледных трепонем, реакции иммунофлуоресценции в модификациях, реакции иммунного прилипания, иммуноферментным методом в модификациях, реакции пассивной гемагглютинации («Инструкция по постановке серологических реакций на сифи­лис», утверждена Приказом № 1161 от 02.09.1985 г.; «Инструкция по постановке иммуноферментного анализа на поверхности твердофазного носителя (ИФА) для ликвородиагностики сифилиса», ут­верждена 03.11.1987 г., № 10-11/129).

2. Для диагностики гонореи исследования препаратов, окрашенных метиленовым синим (брил­лиантовым зеленым) и по способу Грама, культуральные исследо­вания, определение беталактамазной активности чистых культур гонококка, определение чувствительности гонококков к антибио­тикам или другим лекарственным препаратам, постановка реакции Борде-Жангу (Методические указания по лабораторной диагности­ке гонореи и трихомониаза, утвержденнные приказами № 1570 от 04.12.1986 и № 936 от 12.07.1985).

3. Для диагностики трихомониаза исследование нативных препаратов и окрашенных метиленовым си­ним и по способу Грама, а также методом выращивания на пита­тельных средах (Методические указания по лабораторной диагностике, утвержденные приказами № 1570 от 04.12.1986, № 936 от 14.07.1985 г.).

4. Для диагностики хламидиоза исследование препара­тов, окрашенных по Гимзе-Романовскому, ПИФ, с помощью моноклональных антител, ИФА, культуральные исследования (мето­дические рекомендации «Урогенитальный хламидиоз, уреаплазмоз, гарднереллез (диагностика, лечение, профилактика)», утверждены 12.03.1969 г. № 10-11/38).

5. Для диагностики уреаплазмоза исследо­ванием методом культивирования на жидких и твердых питатель­ных средах (методические рекомендации «Урогенитальные хламидиозы, уреаплазмоз, гарднереллез (диагностика, лечение, профи­лактика), утверждены 17.03.1988 г. № 10-11/38).

6. Для диагностики кандидоза исследование нативного препарата, мазков, окрашенных метиленовым синим, по способу Грама, а также культивированием на питательной среде в условиях повышенного содержания СО^ и в анаэробных условиях (методические рекомендации «Применение кли-нико-диагностических и бактериологических исследований в диаг­ностике гарднереллеза и некоторых видов анаэробной инфекции мочеполовых органов, утверждены 15.11.1989 г., № 10-11/150).

7. Для диагностики вирусной инфекций цитологическими исследо­ваниями препаратов, окрашенных гематоксилин-эритрозином, по Романовскому, Папаниколау, а также методом флюоресцирующих антител.

Поделитесь на страничке

Следующая глава >

med.wikireading.ru

методы лабораторной диагностики разных заболеваний

Инфекционные болезни — это заболевания, вызванные проникновением в организм бактерий, грибков или вирусов. Самая важная часть диагностики инфекций — это определение возбудителя и его концентрации. Для этих целей используются разнообразные лабораторные методы, которые позволяют выяснить, чем именно и как давно атакован организм, а в некоторых случаях — спрогнозировать эффективность лечения тем или иным препаратом.

Особенности диагностики инфекционных заболеваний

В клинической практике данный тип заболеваний встречается очень часто. Именно они, по данным Всемирной организации здравоохранения, становятся причиной 26% всех смертей. В список самых распространенных инфекционных заболеваний входят инфекционная пневмония и другие воспалительные заболевания дыхательных путей, гепатит, ВИЧ, туберкулез, малярия, воспаления органов половой системы и мочевыводящих путей, гистоплазмоз, ротавирусные инфекционные заболевания, ветряная оспа, герпес, вирус папилломы человека и еще несколько десятков болезней. Хотя бы раз в жизни каждый из нас сталкивается с инфекционными заболеваниями и необходимостью быстрой постановки диагноза.

Все инфекционные болезни делятся на пять типов — прионные, вирусные, бактериальные, протозойные и грибковые поражения. Далее будут рассмотрены последние четыре типа как наиболее распространенные. Разные возбудители иногда могут вызывать одно и то же заболевание. В частности, пневмония может быть результатом как вирусной, так и бактериальной инфекции. Лечение зависит не от проявлений, а от возбудителя болезни. Противовирусные препараты бесполезны в борьбе с бактериями и грибками, антибиотики не действуют на вирусы. Поэтому основная задача лабораторной диагностики инфекционных заболеваний — выявление типа возбудителя.

На заметку
Слово «Прион» предложено в 1982 году американским врачом, профессором неврологии и биохимии Университета Калифорнии в Сан-Франциско Стенли Прузинером. Это особый класс возбудителей, состоящих их белка. Вызывают такие болезни, как болезнь Крейтцфельда — Якоба, куру, фатальная семейная бессонница.

Способы лабораторной диагностики инфекционных болезней можно разделить на два типа: неспецифические и специфические методы.

К неспецифическим относятся общий анализ крови и исследование соотношения ее белковых фракций, печеночные пробы, общий анализ мочи и кала. Эти методы не дают информации о виде возбудителя, но позволяют узнать, в какой мере болезнь затронула органы и системы организма, что именно в их работе нарушено и насколько далеко зашел процесс.

Специфические — вирусологический и бактериологический методы, микроскопическое исследование возбудителей, анализы на антигены и антитела — направлены непосредственно на обнаружение возбудителя.

Методы лабораторной диагностики бактериальных инфекций

Современная медицина располагает множеством методов выделения возбудителей бактериальной инфекции:

Бактериоскопический . Исследуется окрашенный специальным образом мазок.

Бактериологический . Биоматериал высеивается в питательную среду, и через некоторое время специалист исследует колонию бактерий, выросшую в ней.

Биологический . Направлен на определение патогенности микроорганизмов.

Серологический . Выявляет антитела и антигены в сыворотке крови — особые вещества, которые вырабатываются организмом при контакте с возбудителем определенной болезни.

Чаще всего для исследований используют кровь или сыворотку крови, реже — слюну, мочу, кал, клетки эпителия (мазок и соскоб) и другой биоматериал.

Диагностика вирусных инфекций

В лабораторной диагностике вирусных заболеваний используются:

Вирусологическое исследование . Световая и электронная микроскопия дает возможность выявить наличие вирусных включений и сами вирусы и идентифицировать их.

Серологическое исследование для обнаружения антител и антигенов. Этот метод дает возможность быстро выявить агрессора, как и в случае с бактериальными инфекциями. Для диагностики используются разнообразные способы исследования материала — реакции гемадсорбции, гемагглютинации или метод непрямой иммунофлюоресценции. Имунноблоттинг, в частности, позволяет выявлять антитела сразу к нескольким инфекциям и считается современным и точным диагностическим методом.

Молекулярно-генетические методы . Последнее слово в лабораторной диагностике. Позволяют обнаружить вирус даже тогда, когда его концентрация ничтожно мала — то есть на самых ранних стадиях. Самым известным из этих методов является ПЦР, при которой фрагмент вируса многократно копируется до тех пор, пока специалист не получит достаточно материала для определения типа вируса и его изначальной концентрации.

Для выявления вирусов обычно требуется сделать анализ крови.

Справка
Вирусные включения представляют собой выявляемые с помощью микроскопа образования в клетках, которые возникли при внедрении в организм вируса.

Методы диагностики протозойных инфекций

Так называют инфекции, вызванные простейшими паразитами, например, амебами. Малярия, амёбиаз, токсоплазмоз, лямблиоз, трихомониаз, сонная болезнь — вот неполный список самых распространенных протозойных инфекций. Лабораторная диагностика таких заболеваний включает в себя следующие методы:

Микроскопический . Простейшие паразиты выявляются путем исследования под микроскопом окрашенных образцов биоматериала. Самый простой и надежный метод для многих возбудителей.

Культуральный . Посев биоматериала в питательную следу для дальнейшего исследования размножившихся простейших. У этого метода есть существенный недостаток: результатов нужно ждать долго, сам процесс может занять не менее 5-6-ти дней.

Серологический . Используют редко ввиду малой информативности.

Аллергический . Также не является распространенным. Кожные аллергопробы делают для того, чтобы подтвердить лейшманиоз и токсоплазмоз. Это вспомогательный диагностический метод.

В качестве биоматериала для исследований в основном используется кровь, иногда — – кал или моча.

Диагностика грибковых инфекций

Грибковые инфекции распространены не так широко, как вирусные или бактериальные потому, что они поражают в основном людей с ослабленным иммунитетом. Обычно при словах «грибковая инфекция» люди думают о заболеваниях кожи и ногтей, но сфера деятельности микозов шире: они могут поражать практически любые ткани. Самые распространенные грибковые поражения – это кандидоз, или молочница, микозы стоп, аспергиллез. При диагностике грибковых инфекций чаще всего используются следующие лабораторные методы:

Микроскопическое исследование

. Препарат окрашивается и рассматривается под мощным микроскопом. Посредством иммунофлюоресцентной микроскопии исследуется проба, помеченная флюоресцеинами — специальным красителем. Наиболее быстрый способ выявления грибка по сравнению с другими методами.

Культуральный . Происходит посев пробы на питательную среду и дальнейшее исследование полученной в результате колонии грибков.

Серологический . Используется для выявления грибковых поражений, однако для микозов он считается не особенно точным.

Гибридизация нуклеиновых кислот . Самый современный способ выявления грибковых инфекций, его применяют для идентификации основных возбудителей системных микозов. Из культуры извлекается РНК и вносится особым способом помеченная молекула ДНК. Если в пробе наличествует один из основных патогенных грибков, ДНК объединится с его РНК, создав легко различимую структуру. Несомненным преимуществом метода является возможность определить инфекцию на самых ранних стадиях.

Биоматериалом для исследований являются клетки кожи, волос и ногтей, клетки слизистых оболочек (мазок или соскоб), мокрота, моча, секрет простаты, сперма, грудное молоко.

Современные методики диагностики инфекций позволяет выявить их на начальном этапе, Чем раньше болезнь будет обнаружена, тем проще ее вылечить. Поэтому сдавать анализы на инфекции желательно регулярно, даже если вы ни на что не жалуетесь и не замечаете никаких перемен в самочувствии.

www.kp.ru

Лабораторная диагностика инфекций, передаваемых половым путём

Для проведения молекулярно-биологических методов из клинического образца необходимо выделить ДНК в соответствии с инструкцией изготовителя. Методы предназначаются для обнаружения N. gonorrhoeaeв урогенитальных пробах. В большинстве случаев молекулярно-биологические методы имеют высокую чувствительность и специфичность. Однако наличие субстанций ингибиторов в некоторых образцах, а также тот факт, что у некоторых штаммов N. gonorrhoeaeможет не быть последовательности, являющейся мишенью для молекулярно-биологического метода, может приводить к снижению чувствительности метода. Известна недостаточная специфичность некоторых ДНК/РНК-методов, и получено большое количество ложноположительных результатов из-за перекрестных реакций с комменсальными видами нейссерий. таких как N. lactamlса, N. cinerea. N subjtava. Высокую специфичность показали новые методы ПЦР-анализа. использующие праймеры, направленные на РогА псевдоген N. gonorrhoeae.Этот ген (PorAJ/псевдо-ген подходит для дифференциальной диагностики N. gonorrhoeaeи N. meningitides. Для всех экстрагенитальных образцов или для определения антибиотикочувствительности должно проводиться культивирование с последующей идентификацией нейссерий до вида.

A. Проведение анализа

Выделение ДНК и проведшие амплификации проводится строго в соответствии с инструкцией производителя диагностических наборов. Необходимо строгое соблюдение инструкций по уборке помещений и обработке поверхностей. После окончания работы рабочие поверхности должны обрабатываться ДНК/РНК деградирующими растворами для удаления ранее амплифицированных нуклеиновых кислот.

B. Интерпретация результатов

Разработка и внедрение диагностических методов, основанных на амплификации нуклеиновых кислот, позволяют улучшить диагностику гонореи, так же как и многих других инфекционных болезней. Однако особое внимание следует уделять правильной интерпретации результатов молекулярно-биологических тестов, даже если они имеют хорошие диагностические характеристики. Это особенно важно в случае применения этих методов для скрининга гонореи в популяциях с низкой распространенностью инфекции.

2.3.4 Лабораторные критерии диагноза гонореи;

• выделение Neisseriagonorrhoeaeиз клинического образца;

• выявление антигена или нуклеиновой кисло ты N. gonorrhoeae:

• обнаружение грамотрицательных внутриклеточных диплококков в мазках из уретры мужчин.

Морфология, устойчивость и культуральные свойства хламидий

Хламидии (Chlamydia trachomatis) являются мелкими грамотрицательными микроорганизмами. Хламидии составляют группу облигатных внутриклеточных паразитов, не могут размножаться вне клетки хозяина. Наибольший тропизм хламидии проявляют к клеткам цилиндрического эпителия. Цикл развития хламидии включает две формы существования микроорганизма: элементарные тельца (ЭТ) — мелкие (0,15 – 0,2 мкм) неподвижные сферические организмы и ретикулярные (инициальные) тельца (РТ) — более крупные (около 1 мкм). ЭТ представляет собой высоко инфекционную форму возбудителя, адаптированную к внеклеточному существованию. ЭТ адсорбируется на поверхность эпителиальной клетки при помощи специфического поверхностного термолабильного эффектора, структурно связанного с типоспецифическим хламидийным антигеном и комплементарного клеточному рецептору, содержащему сиаловую кислоту. Последняя разрушается нейраминидазой и ЭТ проникает в клетку. Хламидии не имеют активного механизма проникновения в чувствительную клетку. Проникновение ЭТ осуществляется посредством фагоцитарной активности клеток, при этом происходит ингибирование процесса слияния фагосомы, в которой они находятся, с лизосомами и тем самым “выключают” важнейший защитный клеточный механизм.

В клетке начинается процесс деления ЭТ: увеличивается количество рибосом и полирибосом, визуализируется бактериальный нуклеоид, они увеличиваются в размере, появляются формы бинарного деления, формируется РТ, которое далее распадается на ЭТ. Из одного ЭТ образуется от 200 до 1000 новых “инфекционных единиц”, новых ЭТ. Обычно этот процесс длится 18 — 24 часа. Все это время возбудитель персистирует в фагосоме пораженной клетки. Вновь образовавшиеся ЭТ покидают клетку хозяина при ее разрушении, либо путем экзоцитоза, окруженные тонким ободком цитоплазмы. В последнем случае жизнеспособность клетки сохраняется. Предполагается, что данный механизм высвобождения ЭТ является одним из факторов бессимптомного и латентного течения хламидийной инфекции.

Вновь образовавшиеся ЭТ после выхода из пораженной клетки могут инфицировать новые здоровые клетки, что приводит к прогрессированию инфекционного процесса. Длительность инкубационного периода зависит от состояния организма, инфицирующей дозы, локуса поражения и может составлять в среднем от 14 до 35 дней.

В настоящее время различают по антигенной структуре 15 серотипов патогенных штаммов С. trachomatis. Так называемые “глазные” штаммы по эпидемическим особенностям и клиническим проявлениям хламидийной инфекции отличаются от “генитальных” штаммов. Первые (4 серовара С. trachomatis: А, В, Ва, С) вызывают классическую эндемическую трахому, передаются из глаз больного в глаза здорового контактным путем. Вторые (серовары от D до К) поражают отделы урогенитального тракта и передаются половым путем. Возможно инфицирование глаз “генитальными” штаммами хламидий у взрослых и детей при заносе инфицированного материала руками, полотенцами и другими бытовыми предметами, при купании, особенно в бассейнах, а также у новорожденных во время родов при прохождении через родовые пути инфицированной матери.

С.trachomatis различных серотипов имеют общий групповой, родоспецифический антиген — липополисахаридный комплекс, в состав которого входит 2-кето-3-дезоксиоктановая кислота. Данная антигенная особенность позволяет определять хламидийный антиген группоспецифической сывороткой.

Диагноз урогенитального хламидиоза основывается на данных анамнеза, клинической картине и подтверждается результатами лабораторных исследований. Результаты лабораторных исследований в процессе лечения позволяют оценить адекватность проводимой терапии, а по окончанию ее оценить полноту излечения.

Диагностическая значимость результатов лабораторных исследований зависит от следующих факторов:

1. Выбор соответствующего метода лабораторного исследования;

2. Правильная подготовка пациента к исследованию;

3. Правильное взятие врачом-клиницистом биоматериала для исследования из соответствующих очагов поражения;

4. Правильная предварительная подготовка биоматериала и своевременное проведение исследования;

5. Материально-техническое обеспечение лабораторного исследования;

6. Уровень квалификации медицинского персонала, проводящего исследование.

Для диагностики хламидийной инфекции используют 4-е группы методов:

1. Культуральный метод;

2. Цитологический метод;

3. Методы, в основе которых лежат иммунологические реакции;

4. Методы, использующие принципы молекулярной биологии.

3.2.1 Культуральный метод

Культивирование С. trahomatis на перевиваемых линиях клеток млекопитающих, либо в клетках желточных мешочков куриных эмбрионов с последующей их идентификацией, является самым специфичным и наиболее чувствительным методом лабораторной диагностики хламидиоза. Культуральный метод считается “золотым стандартом”, с которым сравнивают специфичность и чувствительность всех других методов лабораторной диагностики. Для диагностики хламидиоза культуральным методом нужна специальная лаборатория, оборудованная всем необходимым для работы с культурами тканей и перевиваемыми линиями клеток, специально подготовленный высококвалифицированный медперсонал. Метод трудоемкий, требует значительного времени для получения окончательного ответа (от 3 до 14 дней и более при проведении нескольких пассажей). Поэтому до настоящего времени культуральный метод диагностики урогенитального хламидиоза не получил широкого распространения в практической лабораторной диагностике и используется в основном для научных целей, а также для сравнительной оценки специфичности и чувствительности других методов диагностики хламидиоза.

Цитологический метод

Цитологический метод лабораторной диагностики наиболее простой и доступный. Данный метод дает общее представление о цитологической картине, морфологии клеток из очага поражения, наличии микробного обсеменения, мицели

mirznanii.com

Исследование на ИППП / Лабораторные методы исследования / Диагностика / Сайт врача уролога-андролога Савзиханова Руслана

За последние несколько лет лабораторная диагностика достигла серьезных высот в своем развитии. Если пациент, обращается с острой формой заболевания, вопросов нет – возбудителей так много, что обнаружить гораздо проще. Гораздо чаще приходится обследовать мужчину, которого ничего или почти ничего не беспокоит. Следует отметить, что идеального (100%-ного) метода диагностики не существует. Даже при правильной подготовке пациента и врача к исследованию остается низкий процент, когда мы можем получить как ложноположительную (здоров, а анализы выявляют инфекцию), так и ложноотрицательную реакцию (болен, но анализы не выявляют инфекций).

 

Сегодня несколько основных способов выявления ИППП:

·        анализ крови (ИФА)

·        культуральный метод

·        ПЦР

 

Анализ крови на ИППП

Суть иммуно-ферментного (ИФА) метода выявления инфекции в крови заключается в специфичности реакции антигена с антителом. Они обнаруживаются по присутствию в сыворотке крови характерных иммуноглобулинов (антител —  белков, которые вырабатываются клетками иммунной системы организма в ответ на попадание в него инфекции). Если иммуноглобулин (Ig) попадает на мембрану болезнетворных микроорганизмов, он нейтрализует ее. Таким способом организм самостоятельно борется с инфекцией. Иммуноферментный анализ (ИФА) обнаруживает в крови антитела IgG, IgA, IgM. Появление данных антител в организме является свидетельством того, что имеется инфицирование.

 

Преимущества:

·        быстрота и точность (по разным данным от 60 до 80% случаев)

·        позволяет выявить и саму болезнь, и этап ее распространения в организме

Недостатки:

·        недешевый метод;

·        для обнаружения в крови антитела или антигены необходим длительный период заражения – хотя бы месяц.

·        небольшое количество бактерий, недостаточное для воспаления, может не вызвать появление антител (в итоге анализ приходит отрицательный, тогда как бактерии в организме есть).

·        в связи с индивидуальными особенностями иммунной системы положительный результат ИФА-диагностики, вызванный повышенным содержанием антител, может сохраняться несколько месяцев и даже лет после полного выздоровления.

·        «следы» инфекций не всегда специфичны (антитела к хламидиям не обязательно связаны с патогенной chlamidia trachomatis, они могли образоваться при попадании в организм легочной формы хламидии),

 

Культуральный метод

Этот вид диагностики ИППП называют еще посев. Берется соскоб из уретры и наносится на питательную среду для данных микроорганизмов. Через сутки на ней вырастает колония микроорганизмов. По виду, цвету, форме и консистенции этой колонии можно точно идентифицировать возбудителя, а также провести определение его чувствительности к различным антибиотикам.

Преимущества:

·        высокой точностью результата (более 90%)

·        важен в случаях многократных лечений, для уточнения возбудителей и подбора оптимальных препаратов.

Недостатки:

·        дорогостоящий метод

·        трудоемкий и длительный.  

·        для того чтобы бактерии выросли на питательной среде, требуется достаточно большое их количество, в случае, когда бактерии единичные таким методом можно ее не выявить.

 

ПЦР — полимеразная цепная реакция (ДНК диагностика)

ПЦР  — это высокоточный метод диагностики различных инфекций, который способен идентифицировать возбудителей инфекционных болезней на основе выявления их генетического материала (ДНК или РНК) в пробах, полученных от обследуемого человека.

Принцип работы: в специальный реактор помещается небольшое количество исследуемого материала, затем к этому материалу добавляют специальные ферменты, которые связываются с ДНК микроба и синтезируют ее копию. Реакция копирования ДНК идет в несколько этапов, по принципу цепной реакции: на первом этапе реакции из 1 молекулы ДНК образуются 2 новые молекулы, на втором этапе из имеющихся 2 молекул – образуются 4 новые и т.д. После нескольких циклов вместо 1 копии ДНК появляется несколько сотен или тысяч копий. Такое количество копий микробной ДНК может быть легко проанализировано и сравнено с базой данных, которая содержит информацию о строении ДНК различных микробов.

 

Преимущества:

·        высокой точностью результата (95-97%)

·        достаточно находиться единичным возбудителям в пробирке, чтобы тест дал положительный результат

·        может проводиться исследование любого материала — крови, мочи, соскобов и выделений.

·        дает количественную оценку инфекции: то есть как много микробов есть в организме человека, являясь очень важным в диагностике и в оценке эффективности лечения многих хронических инфекций (уреоплазмы, микоплазмы и т.д.)

Недостатки:

·        дорогостоящий анализ

·        требует специального современного дорогостоящего оборудования  

 

Идеальным вариантом для постановки диагноза будет комбинация методов и правильная интерпретация Вашим врачом результатов анализа исходя из комплекса (жалоб, анамнеза, анализов половых партнеров).

                                 

Подготовка к анализам на ИППП

В случаях скрытых инфекций или наличия инфекций в небольшом количестве, всегда есть риск того, что ни одна бактерия не попадет в пробирку, отправляющуюся на анализ. Поэтому рекомендуется алиментарная провокация и правильная подголовка к анализам.

Самый простой и надежный способ провокации — это алиментарная провокация. Она подразумевает употребление алкоголя и острой, соленой пищи.

·        2-3 дня полового воздержания. За это время бактерии успевают скопиться в большом количестве в предстательной железе.

·        3-4 часа и более не мочиться перед анализом (струя мочи смывает большую часть бактерий из мочеиспускательного канала).

·        для исследования крови на инфекции не следует употреблять пищу не менее 6-8 часов до забора крови

·        не принимать антибиотиков не менее 2 недель

 

www.androlog05.ru

виды, методы диагностики, показания к обследованию, где сдать

Выявить ЗППП бывает непросто — многие половые инфекции долгое время протекают бессимптомно, у одного человека может быть сразу несколько таких заболеваний, притом что признаки некоторых из этих болезней очень похожи. Так что только на основании жалоб поставить диагноз практически невозможно. Лабораторные исследования определяют наличие заболеваний гораздо точнее. Как сдают анализы на половые инфекции и как к ним подготовиться?

Какие половые инфекции можно диагностировать с помощью лабораторных анализов

Половые инфекции очень разнообразны, и заразиться ими просто — в группу риска попадают все, кто имел хотя бы один незащищенный половой контакт любого типа. Разумеется, большое количество контактов с большим количеством партнеров повышает шансы заражения.

Все ЗППП можно условно разделить на несколько групп:

• бактериальные половые инфекции . К бактериальным половым инфекциям относятся сифилис, хламидиоз, гонорея, микоплазмоз, уреаплазмоз и некоторые другие;
• вирусные половые инфекции . К ним относится вирус папилломы человека, который, в зависимости от типа, может быть и практически безвредным, и смертельно опасным по причине канцерогенности. Еще одна известная вирусная половая инфекция — ВИЧ. К вирусным инфекциям относятся также гепатиты всех типов, герпес, контагиозный моллюск и некоторые другие;
• паразитарные половые инфекции. К этому типу относятся фтириаз (лобковый педикулез), вызываемый лобковыми вшами, и чесотка.

Все эти заболевания можно определить лабораторными методами. Иногда требуется несколько разных тестов, чтобы с полной уверенностью установить, есть ли у пациента болезнь, и если есть, то одна или несколько. Сейчас разрабатываются высокочувствительные неинвазивные тесты (например, методика ПЦР), которые позволяют определить заболевание с очень большой долей вероятности. Сегодня точность таких тестов приближается к 100%, однако всегда есть крошечный шанс ложноположительного или ложноотрицательного результата, и в сомнительных случаях тест иногда повторяют — либо используют другую методику.

Методы анализа и исследуемый биоматериал

Биохимический анализ крови

Биохимический анализ крови является безусловно информативным только при подозрении на вирусные гепатиты, так как в крови здоровых людей содержание АсАт и АлАт колеблется от 5 до 40 Ед./л, а при вирусных гепатитах эти показатели растут. Сегодня этот метод применяют в основном для контроля лечения, а не для первичной диагностики.

Бактериологический метод анализа

Бактериологический посев — это помещение биоматериала в среду, наиболее благоприятную для размножения бактерий. Через несколько дней бактерии начинают активно размножаться, и эксперты получают возможность идентифицировать их, а также подобрать подходящий препарат для лечения. Посев — метод точный, но требующий времени — от 2-х дней до нескольких недель. Зато он помогает выявить практически все грибковые и бактериальные инфекции.

Серологический метод

Этот метод основан на выявлении в сыворотке крови специфических белков-иммуноглобулинов, которые появляются как иммунный ответ на инфекцию. Применяется для обнаружения хламидиоза, сифилиса, гепатитов и других вирусных заболеваний.

Одним из подходов метода является ИФА (иммуноферментный анализ). Он предполагает выявление в крови антител к определенным инфекциям. Наш организм вырабатывает особые клетки для обезвреживания различных возбудителей болезней. Если число антител высоко, значит, заболевание присутствует. ИФА позволяет установить не только наличие болезни, но и ее стадию — острую или хроническую. Это недорогой, быстрый и эффективный анализ на половые инфекции.

Метод постановки аллергических проб

При диагностике половых инфекций этим методом пациенту внутрикожно вводят препараты ослабленных возбудителей болезни или антигены к ним. Если человек не болен и никогда не контактировал с этим возбудителем, проба будет отрицательной, в противном случае на месте укола возникнет воспаление.

ПЦР

ПЦР (полимеразная цепная реакция) считается одним из самых современных и точных способов лабораторной диагностики половых инфекций. Он заключается в копировании фрагмента ДНК возбудителя. ПЦР позволяет определить наличие заболевания, даже если инфекция никак себя не проявляет, а возбудитель присутствует в крови в очень малых количествах. К тому же метод ПЦР эффективен для обнаружения любых инфекций — как вирусных, так и бактериальных. Но у него есть и недостаток — он требует идеального соблюдения технологии, так как даже малейшее загрязнение образца может исказить результат.

Показания к назначению анализов на половые инфекции

Любой человек должен регулярно проходить анализы на половые инфекции. Некоторые возбудители могут попасть в организм даже при родах, поэтому примерно у 5% детей обнаруживаются половые инфекции. А уж если человек взрослый и живет половой жизнью, он и вовсе не застрахован от их появления. Использование презерватива значительно снижает риск, но не сводит его на нет. Так что прохождение анализов на половые инфекции должно быть обязательным ежегодным мероприятием.

Иногда этого требует не только здравый смысл, но и закон. Для работы на некоторых предприятиях необходима санитарная книжка, а для ее получения нужно пройти анализы на половые инфекции.

И совершенно необходимо обратиться к врачу, если вы заметили, что с половой сферой что-то не в порядке. Тревожный сигнал — зуд слизистых половых органов, необычные выделения любого вида и в любых объемах, неприятный запах, боль и чувство тяжести в нижней части живота, болезненное или затрудненное мочеиспускание.

Анализы на половые инфекции — обязательная часть мероприятий при подготовке к беременности, причем как для мужчины, так и для женщины. Некоторые половые инфекции, которые обычно протекают бессимптомно, очень опасны для беременных женщин и могут привести к невынашиванию или патологиям.

Важно!
Практически все методы диагностики половых инфекций не способны определить наличие заболевания через несколько часов или дней после заражения. В среднем инкубационный период таких инфекций составляет около 2-х недель. То есть если сделать анализ через два-три дня после заражения, результат, скорее всего, будет ложноотрицательным.

Подготовка к исследованиям

Подготовка к сдаче анализов необходима для того, чтобы результат был как можно более точным. Меры зависят от типа анализа и от материала.

Если на анализ сдается кровь, рекомендуется на протяжении 3–4-х дней до исследования не пить спиртное, не есть тяжелую пищу, не перегреваться, не заниматься спортом и, если это возможно, не нервничать. Анализ крови сдается утром натощак через 8–12 часов после последнего приема пищи. Если вы принимаете какие-либо медикаменты или пищевые добавки, об этом обязательно нужно сообщить врачу.

Если исследуется мазок или соскоб со слизистых оболочек, к вышеописанным правилам добавляется запрет на половые контакты — от них следует воздерживаться как минимум на 3 дня до сдачи анализа. В день исследования не следует проводить гигиенические процедуры половых органов, а за 3–4 дня нужно полностью отказаться от любых средств интимной гигиены, для женщин — также от тампонов и любых влагалищных свечей, гелей и мазей. При сдаче мазка из мочеиспускательного канала нельзя мочиться за 3 часа до исследования.

Сдача биоматериала

Мазок

При помощи ватного тампона врач берет на анализ материал со стенок влагалища, уретры и цервикального канала шейки матки у женщин и из уретрального канала у мужчин. Это безболезненная и нетравматичная процедура, которая не требует никакой реабилитации. Мазок используется, в частности, для бактериологического посева.

Кровь

Для большинства исследований врач берет кровь из вены. Количество ее незначительно и пациенту также не требуется никакого восстановления. Кровь — материал для проведения таких анализов, как ПЦР, ИФА, анализ по серологическому методу.

Моча

Она может также являться материалом для анализа по методу ПЦР. Желательно сдавать анализ непосредственно в лаборатории, где вам выдадут специальную емкость. Так исключается любой шанс того, что тара окажется нестерильной, а образец будет храниться в неподходящих условиях.

Как и любую другую болезнь, половые инфекции проще предупредить, чем вылечить. Методы профилактики просты: при половых контактах любого типа необходимо пользоваться презервативом, а при отказе от барьерных методов предохранения оба партнера должны пройти анализы на половые инфекции и вылечить все обнаруженные заболевания.

www.kp.ru

Методы диагностики инфекций передаваемых половым путём (ЗППП, ИППП). Что лучше?

К инфекциям, передаваемым половым путем, согласно международной классификации болезней (МКБ-10), относятся: сифилис, гонококковая инфекция (гонорея), хламидийная инфекция (урогенитальный хламидиоз), шанкроид, паховая гранулема (донованоз), хламидийная (венерическая) лимогранулема, урогенитальный трихомониаз, аногенитальная герпетическая вирусная инфекция, вирус папилломы человека (аногенитальные бородавки). 

Ниже приведены основные характеристики методов иммуно-, бактерио- и генодиагностики,  применяемых в лабораторной практике: 

РИФ (ПИФ)

Метод РИФ основан на определении в составе анализируемого объекта радиоактивно меченных иммунных комплексов. Чаще всего применяется для идентификации инфекционных агентов, аутоантител, оценки иммунного статуса (субпопуляции лимфоцитов и других иммунокомпетентных клеток, маркеры активации, молекулы адгезии и др.). Метод РИФ основан на определении в составе анализируемого объекта радиоактивно меченных иммунных комплексов. Чаще всего применяется для идентификации инфекционных агентов, аутоантител, оценки иммунного статуса (субпопуляции лимфоцитов и других иммунокомпетентных клеток, маркеры активации, молекулы адгезии и др.).

Плюсы метода в том, что проведение его достаточно быстрое по времени без особых затрат на реактивы. Минусы в том, что исследуемого материала должно быть много, то есть при носительстве какой-либо бактерии выявить на низких концентрациях проблематично. Бывают ложноположительные результаты, когда вместо хламидий высвечиваются стафилококки. В современной медицине данный метод практически утратил своё значение, используется в некоторых городах на периферии. 

ИФА 

ИФА – лабораторный метод качественного и количественного измерения антигенов и антител в биологических средах. Но следует помнить, что многие внутриклеточные микроорганизмы являются слабыми иммуногенами, то есть гуморальный ответ (продукция к микроорганизму аутоантител) на них развивается недостаточно. Поэтому при персистирующих, латентных инфекциях, вызванных атипичными микроорганизмами или вирусами, когда возбудитель не размножается и не выходит из клеток, антител может не быть. 

ПЦР (МАНК-диагностика)

Полимеразная цепная реакция была вновь открыта в 1983 году Кэри Маллисом. Его целью было создание метода, который бы позволил амплифицировать ДНК в ходе многократных последовательных удвоений исходной молекулы ДНК с помощью фермента ДНК-полимеразы. Через 7 лет после опубликования этой идеи, в 1993г., Маллис получил за неё Нобелевскую премию.

ПЦР позволяет найти в исследуемом клиническом материале небольшой участок генетической информации (несколько десятков пар нуклеотидов ДНК или РНК) любого организма, содержащийся в следовых количествах среди огромного количества нуклеотидных последовательностей иной природы, и быстро размножить его. 

Большие перспективы открывают методы молекулярной диагностики. Наиболее широкое клиническое применение из них нашла ПЦР-детекция нуклеотидного материала  микроорганизмов путем многократного увеличения числа копий консервативных участков их генома. Среди основных нозологических категорий, входящих в сферу применения этих методов, — заболевания инфекционной природы, наследственные и опухолевые формы патологии и др. До недавних пор данные методы  ограничивались детекцией медленнорастущих и труднокультивируемых микроорганизмов, что было в значительной степени обусловлено отсутствием адекватной лабораторной инфраструктуры и рядом технологических ограничений. 

Бактериальный посев с определением чувствительности к антибиотикам 

Бактериологический посев (бак.посев) – это микробиологическое лабораторное исследование биологического материала человека путем его посева на определенные питательные среды при определенном температурном режиме с целью выявления наличия в нем любого количества патогенных и условно-патогенных микроорганизмов и дальнейшего решения задач специфического лечения.

При выделении определенных микроорганизмов проводится второй немаловажный анализ –антибиотикограмма – определение чувствительности обнаруженных патогенов к антибактериальным препаратам и бактериофагам.

Преимуществами бактериологического посева являются:

• Высокая специфичность метода (то есть перекрестных ложных реакций не наблюдается).
• Возможность исследовать абсолютно любую биологическую жидкость человека.
• Лечебная цель – определение чувствительности выявленного микроба к тому или иному лечебному средству (антибиотикограмма), что позволяет с достаточно высокой точностью проводить лечебные назначения.

Недостатки бактериологического посева:

• длительность получения результата
• высокие требования к забору материала
• определенные требования к квалификации персонала бактериологических лабораторий

Благодаря достижениям последних лет в области биотехнологии, которые непосредственно касались используемых в специализированных лабораториях программ и форматов молекулярного тестирования (например, автоматическая экстракция нуклеиновых кислот, высокоскоростная полимеразная цепная реакция, детекция мишени), клиническая генодиагностика была преведена в разряд универсальных и многообещающих для изучения широкого круга этиопатогенов, включая вирусы и внутриклеточные микроорганизмы. В нозологическом отношении среди групп инфекционных заболеваний, подлежащих генодиагностике, следует особо выделить  вирусные гепатиты, туберкулез, урогенитальные инфекции, герпетические и цитомегаловирусные менингоэнцефалиты,. Сегодня с помощью методов клинической генодиагностики можно определять типы возбудителей инфекционных заболеваний и в последующем оценивать их конкретную патогенетическую роль при формировании статуса острой или хронической формы инфекционного заболевания. 

Современные принципы формирования программ комбинированного применения методов иммуногенодиагностики в клинической практике 

Чтобы правильно разработать алгоритм обследования больного и интерпретировать результаты лабораторных исследований, врач-клиницист должен иметь представление об основных принципах методик, их преимуществах и недостатках. 

Главные характеристики любого лабораторного метода — чувствительность и специфичность. Очевидно, что в идеале оба эти показателя должны приближаться к 100%. Но в реальной жизни они могут быть значительно ниже и существенно колебаться. Так, по данным Центра по контролю за заболеваниями (CDC, Атланта, США, 2000), показатели чувствительности и специфичности методов лабораторной диагностики инфекций, передающихся половым путем (ИППП), на основании анализов ряда лабораторий мира варьируют в следующих диапазонах: ПЦР — 80-95%, Бак.посева – 70-90%, ИФА — 45-75%, РИФ — 20-70%. 

 

urologbest.ru