Почему не оплодотворяется яйцеклетка при эко – Почему яйцеклетка не оплодотворяется при ЭКО? Незрелая яйцеклетка, причины — статьи

Почему не оплодотворяется яйцеклетка?

После оплодотворения яйцеклетки, начинается процесс формирования эмбриона. Сначала происходит деление яйцеклетки на 4, а затем на 8, после на 16 клеток и так далее. Происходит формирование органов будущего малыша. Но не всегда все происходит гладко, бывает, что яйцеклетка не оплодотворяется даже при ЭКО. У многих возникают проблемы с оплодотворением по разным причинам. О том почему это происходит и пойдет речь далее.

Как происходит оплодотворение?

Рассмотрим как оплодотворяется яйцеклетка. Оплодотворение происходит при попадании сперматозоида в яйцеклетку. В этот момент начинается выработка специальных ферментов, которые не допустят в яйцеклетку других спермиев. Оплодотворение осуществляется в период овуляции, сам процесс длится около 2-х часов. Но так как сперматозоиды живут достаточно длительный срок, зачатие может случиться и через несколько дней после полового акта.

Бывали случаи когда оплодотворение произошло на седьмой день после коитуса.

На первоначальном этапе никаких изменений в женском организме не происходит. Определить наступление беременности можно только через две недели, когда начнет меняться гормональный фон или менструация не начнется вовремя. Также при наступлении беременности иногда происходят выделения с кровяными сгустками, похожими на месячные. Это происходит из-за имплантации эмбриона в эпителий матки.

Если яйцеклетка не оплодотворяется за 24 часа после начала овуляции она погибает.

Обязательно посмотрите это интересное видео:

Возможные причины

Проблемы с зачатием случаются достаточно часто, и могут быть вызваны как проблемами с женским, так и с мужским организмом. Поэтому крайне важно понять, почему не происходит оплодотворение яйцеклетки и как этого можно избежать.

Иногда причиной может служить попадание 2-х сперматозоидов в яйцеклетку, в таком случае зачатие не произойдет. Если оплодотворение не произошло, в организме женщины начинается снижение уровня гомона беременности – прогестерона, это служит сигналом для старта менструации.

Другими причинами могут быть непроходимые маточные трубы, в них может скопиться шеечная слизь. Бывает, что в трубах слишком агрессивная среда и яйцеклетка погибает. Еще одной причиной может быть неправильное формирование ооцита. Яичники вообще могут не произвести яйцеклетку.

Некоторые возможные причины:

1. Заболевания половых органов.
2. Прерывание беременности (аборты).
3. Патология яйцеклетки.
4. Низкий уровень прогестерона серьезно влияет на оплодотворение.
5. Толщина эндометрия не соответствует норме (10-13мм).

При проведении процедуры искусственного оплодотворения (ЭКО) также возможна ситуация при которой яйцеклетка не оплодотворяется. Этому может способствовать ряд факторов:

• генетические мутации, наследственность;
• вовремя не выявленные антиспермальные тела;
• сперматозоид не может сблизится с яйцеклеткой. Рецепторы на ее внешней стороне отсутствуют или их недостаточно;
• перезрелая яйцеклетка (ее оболочка слишком плотная и сперматозоид не может сквозь нее проникнуть внутрь).

Так происходит процесс оплодотворения.

Очень многих женщин интересует вопрос: «Куда девается не оплодотворенная яйцеклетка?». Если оплодотворение не произошло яйцеклетка направляется в матке, где растворяется. Нормализуется гормональный фон, начинается менструальное кровотечение.

Второстепенные причины

Врачи репродуктологи выделяют факторы которые косвенно могут препятствовать оплодотворению, вот некоторые из них:

1. Нервное перенапряжение, стресс.
2. Прием лекарственных препаратов, например антибиотиков. У мужчин это может привести к снижению качества спермы.
3. Недостаточный или избыточный вес у женщин (меньше 42 или больше 89 кг.).
4. Курение, злоупотребление алкогольными напитками снижает качество половых клеток.
5. Чрезмерные физические нагрузки.
6. Избыток витамина С в суточной дозе.
7. Применение лубрикантов (смазки), повреждающих сперматозоиды.
8. Чрезмерное употребление кофе и других напитков содержащих большие дозы кофеина.

Отторжение яйцеклетки

В ряде случаев бывает, что эмбрион воспринимается женским организмом как инородное тело. Это достаточно часто случается при искусственном оплодотворении, поэтому пациентке назначают прием гормональных препаратов для стимуляции беременности. Более подробно о том, почему матка отвергает оплодотворенную яйцеклетку рассказано здесь.

Также отторжение эмбриона может быть при:

• патологии яйцеклетки;
• проблемах с эндометрием матки.

На процесс зачатия влияет множество факторов. Поэтому при планировании беременности необходимо тщательно следить за своим здоровьем, правильно питаться и избегать нервных перегрузок, и конечно следовать рекомендациям лечащего врача.

Краткий итог

Нужно четко понимать какую цель вы преследуете. Если беременность не входит в ваши планы, во время овуляции от осуществления половых актов стоит отказаться. И наоборот, если вы хотите иметь детей, то половая жизнь должна быть активной и регулярной. Так как при длительном воздержании активность сперматозоидов падает.

Близость должна быть не чаще 2 раз в неделю, не реже. При таком графике сперматозоиды будут наиболее активны и жизнеспособны.

Это очень интересно:

Задавайте вопросы в комментариях, расскажите о причинах не оплодотворения яйцеклетки о которых мы не рассказали в статье. Делитесь этой статьей со своими друзьями в социальных сетях, для этого внизу есть специальные кнопки. Поставьте оценку звездами. Спасибо за посещение.

Вам может быть интересно

ekobesplodie.ru

Почему яйцеклетка не оплодотворяется

Когда происходит оплодотворение, яйцеклетка начинает деление. Сначала формируются четыре клетки, затем восемь и так продолжается до развития эмбриона, который после формирования органов станет ребёнком. Однако у многих женщин возникают проблемы. Причины, почему яйцеклетка не оплодотворяется, могут быть разными.

Процесс оплодотворения

Формируется эмбрион в течение двух часов. В этот момент сперматозоид проникает в яйцеклетку. Для оплодотворения необходимы специальные ферменты. Они являются вспомогательными элементами для защиты барьера, через который другие сперматозоиды не попадут.

Один раз в месяц во время овуляции происходит оплодотворение. Это сложный процесс, в момент которого яйцеклетка делится несколько часов. Так как сперматозоиды живут дольше, отмечен случай, когда оплодотворение произошло на седьмой день после полового акта. Процесс незаметный практически никак не проявляется. Изменения выявляют на гормональном фоне. Иногда открывается кровотечение. То есть женщина узнает о беременности через две недели.

Большой проблемой зачать ребёнка является для многих семей. Поэтому важно разобраться, почему не происходит оплодотворение яйцеклетки. С таким явлением сталкиваются и мужчины, и женщины. Случается, что спермий и яйцеклетка встретились, а зачатие не произошло. Это бывает в том случае, когда встречаются два сперматозоида. Беременность в этой ситуации не наступит.

Куда девается яйцеклетка, если не произошло оплодотворение? Как только она вышла из яичника, фолликул превращается в желтое тело. Когда оплодотворение не наступает, оно уменьшается и снижается уровень прогестерона. Это сигнал для начала менструации.

Проблемы у женщин

Позднее оплодотворение яйцеклетки – это зачатие, как правило, у девушек с нерегулярным циклом, которое происходит в последние дни месячных. В этом случае оплодотворённая яйцеклетка ещё не достигла полости матки, так как ей нужно не менее 10 дней. Однако отторгается эндометрия и начинается менструация.

С момента зачатия выявить наступление беременности сложно. Есть симптомы, которые отмечают женщины в этом случае:

1. критические дни не обильные;
2. продолжительность до трёх суток;
3. тошнота и слабость начинается до задержки.

Тест подтвердит беременность в следующем месяце.

Причина не оплодотворения яйцеклетки при ЭКО:

• не хватает рецепторов с внешней стороны ооцита, или их нет, поэтому сперматозоид не может прикрепиться;
• из-за мутаций и наследственных факторов;
• если яйцеклетка перезрела, внешняя оболочка ооцита становится толстой;
• наличие антиспермальных антител у мужчины, которые не выявлены до проведения процедуры.

В зависимости от состояния яичников оплодотворения может не быть.

Если яйцеклетка не оплодотворяется, она перемещается в матку, растворяясь.

Поэтому отсутствует зачатие. Гормоны приходят в норму, и выходит утолщённый эндометрий вместе с месячными кровотечениями.

Факторы

В первую очередь рекомендуется воздержание от секса в дни овуляции. Это делать не рекомендуется парам, которые стремятся иметь детей. Из-за долгого воздержания сперматозоиды становятся вялыми.

Почему не происходит оплодотворение яйцеклетки при ЭКО, причин несколько:

1. у женщины выявили эндометриоз или миому;
2. слой эндометрия тонкий или толстый, при идеальной толщине 10–13 мм;
3. ранее было множество абортов;
4. у зародыша генетическое заболевание, поэтому не происходит прикрепление;
5. нет условий для развития эмбриона из-за низкого количества прогестерона.

Что может помешать оплодотворению яйцеклетки:

• стресс, когда жизненный ритм не предоставляет возможности расслабиться;
• проблемы с весом, особенно у женщин. Это касается как повышенного, так и пониженного порога;
• приём лекарств сокращают до минимума, чтобы не снизилось количество спермы у мужчины;
• недостаток жидкости влияет на то, что во влагалище мало цервикальной жидкости, которой не хватает для зачатия;
• вредные привычки, из-за которых сперматозоиды становятся менее подвижными;
• занятия спортом: фитнес, аэробика, резкое скручивание пресса, скоростной бег;
• использование лубрикантов, которые повреждают сперматозоиды;
• витамин С в суточной дозе более 1 тыс. мг;
• кофе, который врачи рекомендуют заменить крепким чаем.

Способность яйцеклетки к оплодотворению сохраняется в течение 48 часов. Неделю живут сперматозоиды в половых путях. Это позволяет повысить шанс забеременеть даже при редкой близости.

Случается отторжение по 2 причинам:

• если в оплодотворённой яйцеклетке есть генетическая аномалия;
• эндометрий матки находится в неблагоприятном состоянии.

Почему матка отвергает оплодотворённую яйцеклетку? Когда в организме женщины формируется эмбрион, он воспринимается как инородное тело.

Чтобы забеременеть, важно учитывать все факторы. Сюда относится правильное питание, здоровый образ жизни и умеренные физические нагрузки. Иногда необходимо принимать лекарства. Главное, придерживаться рекомендаций врача.

ekoclinic.ru

Почему эмбрионы прекращают развиваться в лаборатории? — Репродуктивные технологии

Если вы участвовали в протоколе ЭКО, то наверняка слышали от своего врача, что некоторые эмбрионы прекратили делиться. Некоторая часть пациенток так и не дожидается подсадки, так как все оплодотворенные яйцеклетки в конечном итоге прекращают развитие. Из-за чего это происходит? Можно ли предотвратить такой исход?

10-15% эмбрионов останавливаются в развитии на стадии деления 2-4 клетки. Некоторые даже не начинают процесс деления. Более половины всех замерших человеческих эмбрионов содержали хромосомные аномалии (генетические дефекты). Остановка деления – это естественный отбор, предотвращающий рождение потомства с генетическими аномалиями.

Почему не развивается эмбрион:

• неоптимальная среда развития;
• хромосомные аномалии;
• неспособность генома эмбриона активироваться;
• митохондриальные дефекты.

Когда эмбрионы оказываются в неоптимальной среде культивирования в лаборатории (например, из-за сбоя в работе инкубатора или инфицирования питательной среды), они могут перестать делиться. Если вам сообщили, что значительная часть эмбрионов перестала развиваться, поинтересуйтесь у эмбриолога, не вина ли это лаборатории. Пусть он покажет, как ведут себя эмбрионы других пациентов, помещенные в такие же условия.

Ооциты женщин старшего возраста имеют более высокий процент вероятности несения генетических дефектов, таких как анеуплоидия (неверное количество хромосом). Такие яйцеклетки после оплодотворения могут начать деление, но в зависимости от хромосомной аномалии рано или поздно их развитие остановится. Кто-то не преодолеет стадии зиготы, некоторые замрут в чашке Петри, кто-то – после подсадки в матку. Будут и такие, чье деление остановится лишь после имплантации (около 60% спонтанных абортов вызваны генетическими пороками). Генетические дефекты – самый распространенный фактор остановки развития эмбрионов.

При проникновении сперматозоида в яйцеклетку происходит оплодотворение и возникает эмбрион, который несет генетическую информацию как матери, так и отца. На первые сутки после слияния эмбрион представляет собой одну клетку. Тем не менее, вся информация, необходимая для превращения в полноценного ребенка, у него есть. Начальные несколько делений происходят благодаря информации, находящейся в цитоплазме яйцеклетки. С помощью только материнской стороны эмбрион дорастет до стадии 4-8 клеток и только затем активируется его собственный геном. Если по каким-либо причинам активация не произойдет, деление так и замрет на восьми клетках.

Эмбриону нужна энергия для деления. Ее вырабатывают специальные органеллы называемые митохондриями. Они несут свой собственный генетический материал и синтезируют аденозинтрифосфат (АТФ). АТФ – универсальный источник энергии для клеток, которую они тратят, в том числе, на деление. Так как митохондрии находятся в цитоплазме, эмбрион получает их только от матери. Митохондрии спермиев сразу после оплодотворения уничтожаются. Чем старше женщина, тем больше вероятность накопления дефектов в митохондриях. Это влияет на их функции, в том числе на выработку АТФ. Оказавшись на «голодном пайке», клетки не смогут продолжать деление. Эта гипотеза подтвердилась на опытах — когда в яйцеклетку женщины старшего возраста вводилась цитоплазма молодой девушки, эмбрион начинал делиться. Сейчас такой метод используется при проведении ЭКО. Уже родились дети, эмбрионы которых подвергались цитоплазматическому переносу.

Если эмбрион перестал развиваться in vitro, есть ли способ запустить деление вновь? К сожалению, нет. Важно правильно задокументировать, когда и (возможно) почему он перестал делиться. Это необходимо для выбора дальнейшей тактики лечения и ведения пациентки.

Далеко не все ооциты, полученные после стимуляции, оплодотворятся; не все эмбрионы будут достаточного качества, чтобы быть перенесенными в матку; и не все подсаженные станут детьми.

Развитие эмбриона после ЭКО от 0 до 7 дня (0-7). После оплодотворения клетка претерпевает серию митотических делений. Стрелками в нулевом и первом днях помечены гаплоидные ядра зиготы. На четвертый день эмбрион становится более компактным и называется морулой, состоящей из клеток (бластомеров), окруженных так называемой «блестящей оболочкой» (гликопротеиновой оболочкой). Бластоциста, формируемая на пятый день, — полая структура, состоящая из внутренней клеточной массы (указана белой стрелкой) и  трофобласта (серая стрелка). На шестой день бластоциста выходит из блестящей оболочки. Имплантация эмбриона при ЭКО в стенку матки происходит на седьмой день.

www.babyplan.ru

Клиника ЭКО | Правила оплодотворения

Интересно как проходит оплодотворение и что такое правильное оплодотворение яйцеклетки? Ведущий эмбриолог Клиники МАМА, кандидат биологических наук Елена Евгеньевна ЗАХАРОВА проведет небольшую виртуальную экскурсию.

Каждое утро эмбриологи клиники МАМА начинают с оценки оплодотворения яйцеклеток, полученных накануне — c момента оплодотворения in vitro прошло 15-20 часов. Оплодотворенная яйцеклетка носит название «зигота». Поскольку после оплодотворения в яйцеклетке содержится генетический материал обоих родителей, то зигота — это эмбрион, хоть и состоит он всего из одной клетки.

При оценке оплодотворения эмбриологу необходимо определить, какие яйцеклетки оплодотворены, а так же удалить те из них, которые оплодотворены аномально. Оплодотворение считается нормальным, если гаплоидную (содержащую одинарный набор хромосом) яйцеклетку оплодотворил один гаплоидный сперматозоид. В ходе оплодотворения одинарные наборы материнских и отцовских хромосом объединятся, и получится двойной набор хромосом нового организма. Нормально оплодотворенная яйцеклетка выглядит так: Видны мужской и женский пронуклеусы (от лат. nucleus — ядро). Каждый пронуклеус содержит генетический материал одного из родителей. У человека определить, какой пронуклеус материнский, а какой — отцовский по внешнему виду нельзя. Бывает, что яйцеклетка или сперматозоид содержат не одинарный, а двойной, тройной или четверной набор хромосом. При слиянии таких половых клеток с нормальными гаметами или друг с другом образуется зигота с тремя, четырьмя и более пронуклеусами. Триплоидные (содержащие тройной набор хромосом), тетраплоидные (четверной набор хромосом) и полиплоидные эмбрионы генетически аномальны и не способны дать нормальную беременность. В среднем оплодотворение наблюдается в 60-80% яйцеклеток при проведении стандартного ЭКО, и в 80-90% яйцеклеток при проведении ЭКО-ИКСИ. Доля зигот с тремя и более пронуклеусами обычно пропорциональна соотношению нормальных и аномальных гамет у родителей. В среднем, аномальное оплодотворение наблюдается в 10% яйцеклеток. Еще одна причина формирования аномальных зигот — полиспермное оплодотворение, когда в яйцеклетку проникают два и более сперматозоида. Природой предусмотрен механизм, ограждающий яйцеклетку от полиспермного оплодотворения — так называемый «блок полиспермии». Это сложный физиологический и биохимический процесс, важную роль в котором играет блестящая оболочка яйцеклетки. Если по каким-либо причинам блестящая оболочка аномальна, блок полиспермии не срабатывает. При проведении цикла ЭКО избежать полиспермного оплодотворения можно с помощью процедуры ИКСИ, когда сперматозоид инъецируют в яйцеклетку. ведущий эмбриолог Клиники МАМА, кандидат биологических наук Елена Евгеньевна ЗАХАРОВА Сделайте первый шаг — запишитесь на прием!

www.ma-ma.ru

Незрелая яйцеклетка — в чем причина? Может ли оплодотвориться?

Незрелые ооциты, это что знают почти все женщины которые столкнулись с проблемами в зачатии. Незрелые яйцеклетки представляют собой фолликулы яичника, которые не прошли необходимого деления клеток, чтобы уменьшить количество хромосом в ядре с 46 хромосом до 23 хромосом. Может ли оплодотвориться незрелая яйцеклетка? Незрелые ооциты не способны к оплодотворению спермой и образованию жизнеспособного эмбриона. Если у женщины есть проблема с созреванием яйцеклеток, то она наверняка столкнется с трудностями в зачатии и нужно будет нужна донация яйцеклеток.

Чтобы производить и зрелые и жизнеспособные яйцеклетки во время овуляции, фолликулы яичников должны проходить процесс деления клеток, называемый мейозом, который представляет собой процесс деления клеток, специфичный для яйцеклеток и сперматозоидов. Мейоз уменьшает количество хромосом в ядре клетки с 46 хромосом до 23 хромосом, что позволяет оплодотворить ее спермой, которая в своем составе будет иметь те отцовские 23 хромосомы. Поэтому, незрелая яйцеклетка не способна оплодотворяться спермой, поскольку ее ядро содержит слишком много хромосом и не нуждается во «второй половинке».

Яйцеклетки созревают каждые 28-30 дней у взрослой женщины и выходят из яичника в фаллопиеву трубу для оплодотворения спермой. Существуют определенные условия, при которых ооциты не созревают в яичниках.

Итак, незрелая яйцеклетка: в чем причина?

Гормональный дисбаланс: в этом состоянии фолликулы в яичниках не образуются, поэтому яйцеклетки остаются незрелыми. Таким образом, отсутствие овуляции приводит к бесплодию.

Это обычно происходит при синдроме поликистозных яичников; он характеризуется отсутствием менструации, аномальным ростом волос на лице, подбородке, над верхней губой и ановуляцией. При этом синдроме снижается выработка ФСГ (фолликулостимулирующий гормон) и увеличена активность ЛГ (лютеинезирующего гормона), эстрогена и тестостерона.

Гипоталамическая дисфункция: гипоталамус в мозге посылает сообщение в гипофиз, чтобы высвободить гормоны ФСГ и ЛГ, чтобы стимулировать яичники производить яйцеклетки, когда эта связь прерывается, как в случае опухоли или другого повреждения гипоталамуса, то ооциты перестают созревать в яичниках.

Нарушение функции гипофиза: это может быть связано с опухолью гипофиза, что приводит к недостаточной продукции гормонов ФСГ и ЛГ, без которых яичники не смогут овулировать.

Другой причиной незрелых ооцитов является нарушение в яичниках. В случае СПКЯ, например, оболочка яичников настолько плотная, что созревший фолликул не может разорваться и высвободить яйцеклетку.

Менопауза в молодом возрасте: яйца не созревают у этих женщин, это происходит чаще в легкой атлетике, а женщины делают строгие упражнения. Наследственная может быть причиной.

Получение незрелых яйцеклеток вовремя экстракорпорального оплодотворения – обычное дело. Около 10-15% полученных яйцеклеток после стимуляции являются незрелыми. Чтобы протокол экстракорпорального оплодотворения был максимально эффективен, полученные незрелые ооциты дозревают в лабораторных условиях. Дозревание яйцеклеток в лаборатории может использоваться для женщин, которые подвергаются повышенному риску гиперстимуляции яичников с использованием обычных вариантов лекарственной терапии в рамках экстракорпорального оплодотворения. Синдром гиперстимуляции яичников может быть серьезным заболеванием, требующим медицинской помощи. Из-за риска гиперстимуляции для некоторых женщин, например, с синдромом поликистозных яичников, экстракорпорального оплодотворения с дозреванием ооцитов in vitro.

В рамках программы экстракорпорального оплодотворения, предполагающей дозревание яйцеклеток in vitro, фармакологическая стимуляция созревания клеток не используется до извлечения. Вместо этого собираются незрелые яйцеклетки. В таком случае собирается меньше клеточного материала. Поскольку невозможно оплодотворить незрелые ооциты, полученные незрелые клетки дозревают в чашке Петри, которая помещена в инкубатор.

Этот процесс может занять 1-2 дня, и не все полученные ооциты могут достигнуть полной зрелости.В случае низкого качества яйцеклеток,донорская яйцеклетка позволит зачать, выносить и родить долгожданного ребенка. После яйцеклетки могут быть оплодотворены спермой и в конечном итоге имплантированы в матку.

Видео : Вся правда о яйцеклетке

agency-ivf.ru

Всего одна яйцеклетка оплодотворилась!( — запись пользователя Ленточка (marlenochka) в сообществе ЭКО — мама в категории Протоколы ЭКО (Все о них, все об этом периоде.+Гиперстимуляция)

Девочки...я только успокоилась от неприятной новости... Голова от слез гудит. Вчера была пункция. ( это мой первый протокол, платный).Весь протокол было сначала 7 фолликулов, потом стало 6. К дню пункции врач уже стала говорить о 5. ( не понимаю, куда они отсеялись.((. Стимуляция была не сильной( пурегон 100). Врач говорила , что лучше немного, но качественные будут. И мол исключить гиперу.  Вчера взяли 5 як. Пункция прошла почти безболезненно. От наркоза отошла быстро. Мечтала весь день как будем выбирать 1 или 2 подсаживать. Что еще останется на крио. Но тут позвонили и сказали, что всего ОДНА як оплодотворилась. Я была в шоке от неожиданности. Очень расстроилась.Потом пригласили эмбриолога к телефону, т.к. от меня посыпались вопросы. С ним уже "с комом в горле" разговаривала. Она сказала, что  из пяти-2 были пустые( где же ожидаемое хорошее качество..). 1 як-незрелая.Две оплодотворили методом ИКСИ. И оплодотворилась только одна.( не знаю верить ли им, но другого не остается.. Они нам могут сейчас рассказывать хоть что... Ни проверить, "ни предъявить").Врач хотела подсаживать на 5 день.Эмбриолог хочет подсаживать на 3. Завтра они между собой решать будут. Я уже и не знаю когда лучше. Кто прав эмбриолог или врач. Много почитала сейчас про 3-х и 5-ти дневок. Понимаю, что у всех по разному. Думаю в моем случае, рисковать нельзя... Лучше 3-х...? Но врач наверно будет ссылаться на наш МФ и не захочет рисковать.Но больше всего в голове мыслей-лишь бы не остановился малыш...лишь бы бы дожил до переноса и остался с нами навсегда. Я так надеялась на то, что будет еще шанс с криошками. Но никого нет для подстраховки.... Сорри за сумбур. Я понимаю, что надежда есть еще...но она такая маленькая((((((((((. Пишу, чтобы видимо, поделиться, послушать ваши мысли и мнения. 

www.babyblog.ru

оценка качества ооцитов, обработка спермы перед ЭКО, оплодотворение яйцеклетки

Один из самых важных этапов программы ЭКО – эмбриологический. Именно от того, как будет выполнена оценка качества и оплодотворение яйцеклетки, а также последующее культивирование до созревания эмбрионов  зависит успешный результат экстракорпорального оплодотворения.

Успех определяется опытом конкретного эмбриолога, и контролю этот этап не поддаётся. Но при этом многим женщинам будет очень полезно узнать, как осуществляется оплодотворение яйцеклетки и культивирование до стадии эмбрионов.

Клиники по лечению бесплодия применяют для этой цели различные среды, и зависит это, помимо прочего,  от бюджета и технологической оснащённости.

 

Культуральная среда

Требования, предъявляемые к культурной среде, используемой при ЭКО,  весьма серьёзные: её показатели должны максимально совпадать с параметрами, которыми обладает естественная жидкость, служащая средой для эмбрионов и яйцеклеток в женском организме.

Основные характеристики, которыми должна обладать среда:

— уровень РН – 7,4. Точно таким же уровнем РН обладает кровь человека. Определить РН можно с помощью цветного индикатора, который должен окраситься в красно-оранжевый цвет;

— осмолярность, равная 285 мОсм/кг воды. Она также соответствует осмолярности, которой обладает кровь;

— вода, используемая для приготовления питательной среды, должна пройти двойную дистилляцию. Идеальный вариант, который практикуют многие центры по лечению бесплодия – приобретение воды у известных производителей, которые гарантируют высокое качество своей продукции, например, у компаний Ampuwa, Sigma;

— ионный состав.

Обычно в качестве источника  белка  при ЭКО используют человеческий или бычий сывороточный альбумин, либо инактивированную сыворотку человека. В среду иногда добавляют аминокислоты, поскольку они имеются в яйцеводах представителей некоторых семейств млекопитающих. Но стабильность при  условиях культивирования проявляют далеко не все аминокислоты. Как только температура среды достигнет 37 градусов, они распадаются, выделяя при этом токсические элементы.
Кроме того, питательные среды, используемые при экстракорпоральном оплодотворении,  могут включать нуклеотиды, витамины и микроэлементы.

СО2 культиватор

Для культивирования яйцеклеток и эмбрионов при ЭКО необходимо наличие в воздухе 5% СО2, влажность не менее 80% и не более 90%,  а также температура 37 градусов. Наиболее оптимального соотношения этих показателей можно достичь, применяя СО2 инкубаторов, в которых автоматически поддерживаются требуемые показатели. Углекислый газ подаётся из специального баллона и из окружающего воздуха, требуемая влажность достигается с помощью испарения воды.

 

Оценка качества ооцитов

На тот момент, когда в процессе ЭКО осуществляется пункция фолликулов, вместе с ними нередко захватываются и ооцит-cumulus, иногда и с частицами фолликулярного эпителия. Поскольку в фолликулярной жидкости содержится фибриноген, это может способствовать формированию сгустков, осложняющих  выявление яйцеклетки. Чтобы упростить процесс, ооциты, полученные в результате пункции, промывают, либо помещают фолликулярную жидкость в контейнер с антикоагулянтом (гепарином).

Фолликулярную жидкость проверяют на наличие  сгустков яйцеклеток-cumulus, затем переливают её в чашку Петри и проверяют  ещё раз, но уже под микроскопом. Как правило, яйцеклетки можно разглядеть невооружённым глазом, выглядят они как  слизистые сгустки размером 5-10 мм.

Обнаруженные ооциты отмывают в специальной среде, а затем перекладывают в специальную чашку, где будет осуществляться оплодотворение яйцеклетки. Для этого используются пастеровские пипетки с маленькой резиновой грушей на конце или же капилляры из стекла или пластика, которые подсоединяют к микроаспиратору. Выбор инструментария зависит от самого эмбриолога, осуществляющего искусственное  оплодотворение яйцеклетки.

После того, как ооциты помещены в культуральную среду, специалист предварительно оценивает их качество, количество и степень зрелости. Причём комплексы ооцитов – cumulus не всегда позволяют дать истинную оценку яйцеклетки.

В циклах экстракорпорального оплодотворения зачастую отмечаются отсутствие синхронности при созревании ядер ооплазмы, самой яйцеклетки и клеток cumulus.

Показатели абсолютно зрелой яйцеклетки таковы: диаметр – 110-120 мкм, ооцит должен быть окружен блестящей плёнкой (zona pellucida), несколькими клетками лучистого венца (corona radiata) и  множеством клеток яйценосного бугорка(cumulus oophorus).

У пунктированной яйцеклетке должно быть закончено  первое деление мейоза, после которого первое полярное тельце отделяется. Второе деление, как правило, находится в стадии метафазы. Хромосомы образуют ряд, создавая тем самым метафазную пластинку, располагающуюся прямо над полярным тельцем. При этом в яйцеклетке осуществляется блок мейоза, снять который способен лишь сперматозоид, проникший сквозь оболочку.

 

Обработка спермы перед ЭКО

У зрелого сперматозоида имеется грушевидная головка, слегка уплощённая, размеры её достигают в длину примерно 6 мкм, а в ширину, в районе экваториального сегмента – 4 мкм. Состоит головка из ядра и акросомы, которая включает в себя литические ферменты. Она напоминает шапочку и располагается над верхней частью головки. Размер хвоста сперматозоида достигает в длину примерно 50 мкм. Хвост берёт своё начало от головки, примерно в области шеи, там же находится комплекс митохондрий и центриоль.

Оплодотворение яйцеклетки

Сперматозоиду, перед тем, как  проникнуть в ооцит, следствием чего становится оплодотворение яйцеклетки, предстоит преодолеть ряд препятствий:

1) cumulus. Проникая вовнутрь него глубже, сперматозоид увеличивает свою скорость, демонстрируя фазу гиперактивности.

2) zona pellucida. Здесь сперматозоид связывается с рецептором.

После этого осуществляется акросомная реакция, при которой цитоплазматическая мембрана и мембрана акросомы объединяются. Содержимое акросомы затем выбрасывается,  связывается с zona pellucida, затем сперматозоид проникает через оболочку яйцеклетки, не теряя своей активности.

На том месте, которое располагается между оболочкой  яйцеклетки и zona pellucida, сперматозоид присоединяется своими рецепторами к рецепторам, которые располагаются на оболочке яйцеклетки. Это способствует возникновению кортикальной реакции, которая становится причиной необратимых процессов zona pellucida, что  делает её недоступной для проникновения других сперматозоидов. Спустя несколько часов, обе гаметы объединяют свой генетический материал, после чего появляется зигота. Хромосомы начинают готовиться к процессу первого деления дробления.

Спустя сутки, ооциты помещают в лунку, наполненную свежей культуральной средой, определяя, произошло ли оплодотворение яйцеклетки.

После того, как туда будут добавлены сперматозоиды, появятся пронуклеусы (это происходит через 10-16 часов). Ещё через 6-8 часов они бесследно исчезнут. Важно вовремя заметить их, поскольку именно их появление говорит о том, что оплодотворение яйцеклетки состоялось. В случае, если наблюдается один пронуклеус, или же более двух, то это говорит о развитии в процессе ЭКО аномального оплодотворения яйцеклетки.

www.probirka.org