Подсчет тромбоцитов вручную – Подсчет количества тромбоцитов в крови: обзор методик от врача

Содержание

Подсчет тромбоцитов

Подсчет
тромбоцитов вручную сейчас осуществляется
гораздо реже в связи с появлением в
лабораториях автоматических счетчиков.
Кроме того, эти приборы позволяют
анализировать ряд новых параметров
тромбоцитов, которые приобретают
существенное значение в диагностике.

Автоматический
подсчет тромбоцитов проводится в одном
канале с эритроцитами. В связи с этим
важным является дифференцирование
прибором макротромбоцитов от
микроэритроцитов и фрагментов эритроцитов.
Для этого в приборах, где используется
кондуктометрический метод, существует
система Дискриминаторов, определяющих
высоту электрического сигнала,
пропорциональную размеру частицы и
ширину (длительность) импульсов. Все
импульсы, соответствующие размерам
частиц от 1,8 до
30,0 фл
подсчитываются как тромбоциты. Если
амплитуда импульса превышает
30 фл, то выводится
сообщение
«Micro
RBC», либо
«Macro PLT».
При этом прибор автоматически проводит
коррекцию количества тромбоцитов и
выдает их истинное значение.

Использование величин rdw и mcv в дифференциальной диагностике анемий.

RDW
НОРМАЛЬНЫЙ

RDW
ВЫСОКИЙ

MCV
НИЗКИЙ

талассемия

дефицит
железа

гемонрансфумия

бета-талассемия

химиотерапия

гемоглобин
Н

злокачественные
новообразования

фрагментация
эритроцитов

геморрагия

посттравматическая
спленэктомия

старческий
сфероцитоз

MCV
НОРМАЛЬНЫЙ

норма

гемотрансфузия

хронические
заболевания

начальный
этап железо-, В12-,
или фолиеводефицитной анемии

гомозиготная
гемоглобинопатия

миелофиброз

сидеробластная
анемия

MCV
ВЫСОКИЙ

апластическая
анемия

фолиеводефицитная
анемия

заболевание
печени

В12
дефицитная анемия

холодовая
агглютинация

гемолитическая
анемия

химиотерапия

Морфофизиологическая
классификация тромбоцитарных нарушений.

Средний
объем

Количество
тромбоцитов (PLT)

тромбоцитов
(MPV)

низкое

нормальное

высокое

низкий

апластическая
анемия

мегалобластные
анемии

цитотоксическая
химиотерапия

септическая
тромбоцитемия

некоторые
заболевания

нормальный

Норма

атеросклероз
коронарных сосудов

шизофрения

диабет

реактивные
тромбоцитозы при:

воспалительных,

инфекционных
,

неопластических
заболеваниях

высокий

Иммунная

Тромбоцитопения

острый
инфаркт

системная
красная волчанка

гетерозиготные
талассемии

железодефицитная
анемия

хронические
миелогенные лейкемии

спленэктомия

серповидноклеточная
анемия

гигантский

болезнь
Бернара-Сулье (тромбоцитодистро-фия)

болезнь
Верльгофа

Общий анализ крови:
причины возможных результатов.

Параметр

Ложное
повышение

Ложное
понижение

Лейкоциты

криоглобулинемия

миелома

ядросодержащие
красные кровяные клетки

аггрегаты
тромбоцитов

нелизированные
эритроциты

Тромбы

Эритроциты

Криоглобинемия

гигантские
тромбоциты

высокий
(>50000)
лейкоцитоз

агглютинация
эритроцитов

тромбы

гемолиз
(in
vitro)

микроцитоз

Гемоглобин

Более
10% карбоксигемоглобина

криоглобулинемия

гемолиз
(in
vitro)

гипербилирубинемия

миелома

липидемия

тромбообразование

Гематокрит
(автоматический метод)

криоглобулинемия

гигантские
тромбоциты

высокий
(>
50000) лейкоцитоз

гипергликемия
(>
600
mg/dl)

агглютинация
эритроцитов

тромбообразование

гемолиз
(in
vitro)

микроцитоз

Средний
объем эритроцитов

агглютинация
эритроцитов

высокий
(>
50000) лейкоцитоз

гипергликемия
(>
600
mg/dl)

криоглобулинемия

гигантские
тромбоциты

гемолиз
(in
vitro)

микроцитоз

набухание
эритроцитов

Среднее
содержание гемоглобина

высокий
(>
50000) лейкоцитоз

ложно
завышенный результат гемоглобина

ложно
завышенный результат эритроцитов

ложно
заниженный результат гемоглобина

ложно
завышенный результат эритроцитов

Средняя
концентрация гемоглобина

агглютинация
эритроцитов

тромбообразование

гемолиз
(in vivo
и
in vitro)

ложно
завышенный гемоглобин

ложно
заниженный гематокрит

высокий
(>
50000) лейкоцитоз

ложно
заниженный гемоглобин

ложно
завышенный гематокрит

Тромбоциты

криоглобулинемия

гемолиз
(in vivo
и in
vitro)

микроцитоз

включение
эритроцитов

фрагменты
лейкоцитов

тромбообразование

гигантские
тромбоциты

аггрегаты
тромбоцитов

Ложное
снижение числа тромбоцитов может давать
их агрегация при наличии тромбоцитарных
агглютининов. Агрегация тромбоцитов
выражена при взятии крови с гепарином
в качестве антикоагулянта. Большинство
исследователей рекомендует использовать
стандартный антикоагулянт
— К2ЭДТА
в концентрации 1,5—2,2
мг на 1
мл крови. Однако при наличии аутоантител
к тромбоцитам ЭДТА индуцирует агрегацию
тромбоцитов, что проявляется
псевдотромбоцитопенией.

Средний
объем тромбоцитов
(MPV-mean platelet volume; выражается
в фемтолитрах (фл) или кубических микронах
(мкм3)
В норме этот показатель варьирует от
7,4 до
10,4 фл и имеет
тенденцию к увеличению с возрастом: с
8,6 — 8,9 фл у
детей
1— 5 лет до
9,5—10,6 фл у
людей старше
70 лет. «Молодые»
кровяные пластинки имеют больший объем,
поэтому при ускорении тромбоцитопоэза
средний объем тромбоцитов возрастает.

Увеличение
среднего объема тромбоцитов наблюдается
при идиопатической тромбоцитопенической
пурпуре, гипертиреозе, атеросклерозе,
сахарном диабете, у курильщиков и лиц,
страдающих алкоголизмом, при
миелопролиферативных заболеваниях
Уменьшение этого показателя отмечается
после спленэктомии и при синдроме
Вискотта-Олдрича.

Ширина
распределения тромбоцитов по объему
(PDW-platelet distribution width)
измеряется в процентах (коэффициент
вариации тромбоцитометрической кривой)
и количественно отражает гетерогенность
популяции этих клеток по размерам
(степень анизоцитоза тромбоцитов). В
норме этот показатель составляет
10—20%.

Тромбокрит
(PCT-platelet crit)
является параметром, который отражает
долю объема цельной крови, занимаемую
тромбоцитами. Он аналогичен гематокриту
и выражается в процентах В норме
тромбокрит составляет
0,15—0,40%.

studfiles.net

что это такое, подсчет вручную, норма женщин, повышены у младенца в мазке крови, методика, детей, на 1000 эритроцитов, как считать, анализ

Тромбоциты по Фонио определяют под микроскопом. Этот способ сейчас считается самым точным.

Что за анализ

Анализ дает возможность получить информацию о количестве частиц. Они участвуют в процессе свертывания крови, создают тромбы, образуют вещество, нужное для восстановления ткани, способствуют делению клеток, нормализуют проницаемость клеточных стенок и восстанавливают эластичность сосудов.

Анализ используется при диагностике сердечно-сосудистых болезней. Повышенное содержание тромбоцитов именуется тромбоцитоз, а низкое — тромбоцитопения. Цвет частиц изменяется в соответствии с возрастом.

Исследование тромбоцитов по методу Фонио позволяет вычислить точное число клеток и выявить многие патологии. При исследовании считают пропорцию микрочастиц в кровяном мазке на 1000 эритроцитов. Этот показатель пересчитывают на 1 мл или л. Этот способ является эффективным для диагностики болезней.

При анализе кровь окрашивают. Для тестирования берут кровь из пальца. Число клеток в крови — это коагулограмма. Такой тест проводят многим людям. Он дает возможность диагностировать различные патологии.

Преимущества и недостатки

Метод Фонио включает множество достоинств, его применяют много лет.

Преимущества:

  • Под микроскопом хорошо видно изучаемый материал, величину, цвет и количество частиц.
  • Исследование проводят в любое время дня.
  • Методика проста в применении, имеет несложную формулу, анализ отличается высокой информативностью.
  • Сейчас появились другие методы исследования, но способ Фолио отличается более высокой информативностью.

Недостатки:

  • В то время как другие способы позволяют при помощи приборов сразу получить готовый результат, лаборант должен визуально под микроскопом подсчитывать показатели, что занимает время и требует специальной квалификации.
  • Забор материала — клеток эритроцитов осуществляется вручную.

Подготовка к процедуре

Последний прием пищи должен быть за 8 часов до исследования, поскольку некоторые продукты влияют на цвет исследуемых частиц.

За день до анализа нельзя заниматься спортом, следует избегать физической нагрузки. В лабораторию нужно придти утром. Сдача повторного теста дает возможность следить за числом клеток в динамике. Пациент должен заранее проинформировать доктора о лекарствах, которые он принимает.

Как считать тромбоциты

Работниками лаборатории подсчет тромбоцитов по Фонио делается с применением нескольких реактивов. Для анализа используют сульфат магния или препарат этилендиаминтетраацетат. Эти вещества специалист набирает из емкости пипеткой.

Прежде всего в емкость капают кровь и 1 реактив. Количество вещества доводят до 75, плазму доводят до отметки К. Получившийся раствор размешивают, он нужен для создания мазка. При использовании магния сульфата мазок изменяет цвет за 120 минут. Когда используют этилендиаминтетраацетат, то мазок окрашивается в течение 40 минут. Частицы приобретают фиолетовый оттенок.

Тельца считают в мазке при помощи микроскопа. При подсчете, чтобы определить уровень тромбоцитов, их умножают на содержание эритроцитов в 1 мл, после этого делят значение на 1000. Чтобы результат был более точным, используется методика окрашивания частиц.

Нормальные значения

Норма тромбоцитов равна от 120-400 тыс. частиц в 1 мм³ мазка. Уровень микрочастиц соответствует возрасту.

Нормальное значение:

  • Дети до 1 года — 100-420 тыс. на мм³.
  • Дети старше года — 180-320 тыс. на мм³.
  • Мужчины — 180-400 тыс. на мм³.
  • Норма у женщин равна 180-340 тыс. на мм³.
  • У подростков число клеток может уменьшиться до 70 тыс. на мм³.

У мужчин старше 40 лет бывает наибольшее число частиц. Эти отклонения врач учитывает при диагностике.

Отклонения

Отклонение от нормы не всегда является патологией. Количество клеток может меняться после физической нагрузки, при изменении режима питания. При кровотечении число тромбоцитов повышается, т. к. организм компенсирует утрату крови увеличенным образованием клеток. На уровень частиц влияют стрессы, повышенные нагрузки, курение.

Индекс повышается при длительном употреблении алкоголя или препаратов.

Снижение нормы тромбоцитов наблюдается при:

  • воздействии вредных веществ;
  • свинца;
  • радиации;
  • болезнях крови;
  • патологии соединительной ткани;
  • нефрите.

У таких больных бывает часто кровь из носа, десен, подкожные кровоизлияния.

Показатель повышается при лечении некоторыми препаратами, после операций, после потери крови, при воспалении оболочки головного мозга, после хирургического удаления селезенки. У детей повышенные значения показателя также считают нормой. У младенца эти значения бывают выше, чем у ребенка более старшего возраста.

Как привести уровень в норму

При отклонении от нормы показателя врач должен определить заболевание, которое вызвало это изменение. Если отклонение индекса произошло по физиологическим причинам, то поможет диета, отказ от спиртного.

Пациентам надо употреблять:

  • зеленый чай;
  • помидоры;
  • виноград;
  • гречку;
  • рыбу;
  • печенку.

Врач может назначить витамины A, B и C. Уменьшить показатель тромбоцитов поможет избегание стрессов, физических перегрузок. Чтобы снизить показатель, назначают Аспирин, препараты магния, большое количество жидкости.

medicalok.ru

Количество тромбоцитов (Plt)


Plt – мелкие клетки-пластинки, быстро реагирующие на воспалительный процесс, активацию свертывания или возникающее кровотечение. Тромбоциты формируют первичный тромб в области повреждения сосуда.


В ручном режиме для подсчета тромбоцитов предполагается взятие отдельной капли крови для изготовления и окраски мазка и последующего подсчета тромбоцитов.

p>В автоматическом режиме при анализе в «RBC—кювете» частицы размером 2–20 фл относятся к тромбоцитам. Полученные необработанные данные проверяются с помощью математических критериев и экстраполируются в виде логарифмически нормального распределения от 0 до 70 фл.


В некоторых анализаторах для более точного подсчета тромбоцитов выполняется обработка пробы специальными антителами, активными в отношении поверхностных рецепторов тромбоцитов.




Референтный интервал

150–350*109


Пониженные значения – тромбоцитопения – состояние, при котором число тромбоцитов не превышает 150*109/л (150 тыс/мкл). Клинические признаки кровоточивости развиваются при снижении количества тромбоцитов до 50*109/л (50 тыс/мкл). Уменьшение числа тромбоцитов может быть обусловлено:

  • повышением разрушения тромбоцитов;
  • повышением потребления тромбоцитов;
  • недостаточным образованием кровяных пластинок.


Повышенные значения – тромбоцитоз – увеличение количества тромбоцитов в периферической крови более 400*109/л (400 тыс/мкл), могут быть первичными и вторичными.


Первичные тромбоцитозы характерны для всех хронических миелопролиферативных заболеваний (хронический миелолейкоз, идиопатический миелофиброз, эссенциальная тромбоцитемия, эритремия).


Вторичные тромбоцитозы встречаются:

  • при острых и хронических воспалительных процессах (ревматоидный артрит, узелковый периартериит, неспецифический язвенный колит, остеомиелит и др.), а также при сепсисе;
  • амилоидозе;
  • железодефицитных состояниях на фоне хронической кровопотери;
  • злокачественных новообразованиях как проявление паранеопластической реакции;
  • гемолитической анемии;
  • после острой кровопотери, спленэктомии;
  • при лечении некоторыми препаратам (витамин В12, андрогены, адреналин, эритропоэтин и др.).

www.cmd-online.ru

Подсчет тромбоцитов в мазках крови по Фонио

Исследование крови

Унифицированная методика подсчета тромбоцитов в мазках крови по Фонио (A. Fonio)

Принцип. Подсчет количества тромбоцитов на 1000 эритроцитов в окрашенных мазках крови и перерасчет их числа на 1 мкл или 1 л, в соответствии с количеством эритроцитов в этом объеме крови.

Реактивы: 1) 14% раствор сульфата магния; 2) 2,6% раствор этилендиаминтетраацетата натрия (ЭДТА).

Ход определения. В пробирку вносят реактив 1 или 2, взятый капилляром Панченкова до отметки «75», затем добавляют кровь, взятую тем же капилляром до отметки «К (0)». Содержимое пробирки перемешивают и готовят тонкие мазки. Фиксируют и окрашивают по Романовскому—Гимзе (см. «Окраска мазков крови») в течение 2–3 ч (при использовании реактива 1) или 35–45 мин (при использовании реактива 2).

Высохшие мазки микроскопируют с иммерсионным объективом, подсчитывая тромбоциты в тонких местах препарата (эритроциты должны располагаться изолированно друг от друга). Тромбоциты окрашиваются в розовато-фиолетовый цвет, имеют округлую форму, размер 2–4 мкм, в центре клетки отчетливо определяется зернистость — грануломер, периферическая часть имеет более светлую окраску, незернистая — гиаломер.

Подсчет производят следующим образом. В каждом поле зрения микроскопа считают число эритроцитов и тромбоцитов, передвигая мазок до тех пор, пока не будут просчитаны 1000 эритроцитов. Для удобства и большей точности счета рекомендуется пользоваться окуляром с уменьшенным полем зрения. При его отсутствии можно уменьшить поле зрения приемом, описанным в «Подсчет ретикулоцитов». Параллельно берут кровь для подсчета числа эритроцитов в камере Горяева.

Расчет. Зная количество эритроцитов в 1 мкл (или 1 л) крови и количество тромбоцитов на 1000 эритроцитов, легко рассчитать и содержание тромбоцитов в крови:

где X — количество тромбоцитов в 1 мкл (1 л) крови; а — количество тромбоцитов, подсчитанных в мазке крови на 1000 эритроцитов; b — количество эритроцитов в 1 мкл (1 л) крови; 1000 — количество эритроцитов, подсчитанных в мазке крови.

См. также:

onlab.info

Методы определения тромбоцитов



Обратная связь

ПОЗНАВАТЕЛЬНОЕ

Сила воли ведет к действию, а позитивные действия формируют позитивное отношение


Как определить диапазон голоса — ваш вокал


Как цель узнает о ваших желаниях прежде, чем вы начнете действовать. Как компании прогнозируют привычки и манипулируют ими


Целительная привычка


Как самому избавиться от обидчивости


Противоречивые взгляды на качества, присущие мужчинам


Тренинг уверенности в себе


Вкуснейший «Салат из свеклы с чесноком»


Натюрморт и его изобразительные возможности


Применение, как принимать мумие? Мумие для волос, лица, при переломах, при кровотечении и т.д.


Как научиться брать на себя ответственность


Зачем нужны границы в отношениях с детьми?


Световозвращающие элементы на детской одежде


Как победить свой возраст? Восемь уникальных способов, которые помогут достичь долголетия


Как слышать голос Бога


Классификация ожирения по ИМТ (ВОЗ)


Глава 3. Завет мужчины с женщиной


Оси и плоскости тела человека — Тело человека состоит из определенных топографических частей и участков, в которых расположены органы, мышцы, сосуды, нервы и т.д.


Отёска стен и прирубка косяков — Когда на доме не достаёт окон и дверей, красивое высокое крыльцо ещё только в воображении, приходится подниматься с улицы в дом по трапу.


Дифференциальные уравнения второго порядка (модель рынка с прогнозируемыми ценами) — В простых моделях рынка спрос и предложение обычно полагают зависящими только от текущей цены на товар.

Существует три метода определения количества тромбоцитов:

1) Подсчет тромбоцитов в счетной камере Горяева микроскопией при фазовом контрасте, т.е. с фазовоконтрастной приставкой. Коэффициент вариации 25-30%

2) Подсчет тромбоцитов в мазке крови (по Фонио), Коэффициент вариации 10-15%. Достоинство – возможность оценить морфологические особенности тромбоцитов.

3) Определение количества тромбоцитов на гематологическом анализаторе,

коэффициент вариации 4-10%.

Метод подсчета тромбоцитов в счетной камере Горяева микроскопией при фазовом контрасте, т.е. с фазовоконтрастной приставкой.

Принцип. Производится подсчет тромбоцитов в камере Горяева с применением в качестве разводящей и гемолизирующей жидкости раствора оксалата аммония. При подсчете используют фазовоконтрастную микроскопию.

Реактивы: 1 % раствор оксалата аммония.

Ход определения. Исследование можно проводить как в крови, полученной из пальца, так и в стабилизированной цитратом венозной крови. В последнем случае полученный при подсчете результат умножают на коэффициент 1,1 (учитывают разведение венозной крови раствором цитрата натрия – 9:1). Самым удобным и достаточно точным является способ разведения крови в пробирках (не в меланжере). Для этого, в предварительно высушенную чистую силиконированную или пластиковую (полистирол) пробирку пипеткой отмеривают 1,98 мл 1% оксалата аммония и осторожно вносят в нее 0,02 мл крови. В течение 1-2 мин содержимое пробирки тщательно перемешивают без вспенивания. Заполняют две камеры Горяева и на 10-15 мин помещают их для оседания тромбоцитов во влажную камеру (чашку Петри со смоченной фильтровальной бумагой или марлей). В каждой камере подсчитывают тромбоциты в 25 больших квадратах.

Фазовоконтрастная микроскопия проводится при помощи обычного микроскопа, осветителя типа ОИ-19 (или аналогичного) и устройства для наблюдения методом фазового контраста КФ-1 или КФ-4 [2].

Метод подсчета тромбоцитов в мазках крови (по Фонио)

Принцип. Метод основан на подсчете числа тромбоцитов в окрашенных мазках крови на 1000 эритроцитов с расчетом на 1 мкл (или 1 л) крови, исходя из содержания в этом объеме количества эритроцитов.

Реактивы: Применяют 6% раствор этилендиаминтриацетата натрия (ЭДТА).

Ход определения. Смешивают кровь с раствором ЭДТА, для этого взятый капилляром Панченкова реактив до метки «75» вносят в пробирку, затем добавляют кровь, взятую до метки «0». Содержимое пробирки перемешивают и готовят тонкие мазки. Фиксируют и окрашивают по Романовскому-Гимзе в течение 30-45 минут (обычно окраска тромбоцитов занимает в 1,5 – 2 раза больше времени, чем окраска мазка для подсчета формулы крови). Высохшие мазки микроскопируют с иммерсионным объективом, подсчитывая тромбоциты в тонких местах препарата (эритроциты должны быть расположены изолировано). Подсчет производят следующим образом: в каждом поле зрения считают количество эритроцитов и тромбоцитов, передвигая мазок до тех пор, пока не будут просчитаны 1000 эритроцитов.

Расчет: Количество тромбоцитов на 1000 эритроцитов составляет А0/00. Зная число эритроцитов в 1 мкл (в 1 л) крови, легко подсчитать количество тромбоцитов в 1 мкл крови (в 1 л).

Например. А=600/00 ; число эритроцитов 5 000000 в 1 мкл (5*106/мкл или 5*1012/л)

Составляют пропорцию:

60 – 1000;

Х – 5000000,откуда

Х= 60*5*1000000/1000=300*1000 мкл (300*103/мкл или 300*109/л).

Определение количества тромбоцитов с помощью гематологического анализатора

В настоящее время все шире используются определение количества тромбоцитов и их распределение по величине (гистограмма) с помощью автоматических счетчиков крови, или гематологических анализаторов. Эти аппараты точны, и позволяют проводить экспресс-диагностику (определения выполняются за 1 мин).

Подсчет тромбоцитов проводят согласно инструкции к аппарату. Бюджетные модели гематологических анализаторов определяют только количество тромбоцитов, а более совершенные приборы содержат полный анализ тромбоцитарного звена, и позволяют говорить о морфологии тромбоцитов. Развернутый анализ тромбоцитов на анализаторе позволяет определить такие показатели:

РLТ – количество тромбоцитов.

Норма от 180-320109/л; При выходе за эти пределы необходима микроскопия мазка.

MPV – средний объем тромбоцитов. «Молодые» тромбоциты имеют больший объем. MPV увеличивается с возрастом. Норма: 8,6-8,9 фл у детей 1 – 5 лет; 9,5-10,6 фл у людей старше 70 лет.

PDV ширина распределения тромбоцитов по объему отражает степень анизоцитоза тромбоцитов. Норма = 14-18%.

РСТ – тромбокрит доля объема цельной крови, занимаемая тромбоцитами (аналогичен Hct). Норма = 0,15-0,40%.

Также гематологический анализатор строит график распределения тромбоцитов по размеру [5].


megapredmet.ru

Подсчет количества тромбоцитов в счетной камере Горяева

Унифицированная методика подсчета количества тромбоцитов в счетной камере Горяева

Принцип. Подсчет числа тромбоцитов в разведенной крови в счетной камере с применением фазово-контрастного устройства и расчет их количества в 1 мкл или 1 л крови.

Реактивы: 1) реактив 1: кокаина гидрохлорид — 3 г; натрия хлорид — 0,25 г; фурацилин — 0,25 г; дистиллированная вода— 100мл; 2) реактив 2: 1% раствор оксалата аммония. Раствор кипятят и фильтруют, хранят в холодильнике.

Наиболее быстрый и полный лизис эритроцитов вызывает 1% раствор оксалата аммония.

Ход определения. Для подсчета тромбоцитов предпочтительнее использовать венозную кровь. В качестве антикоагулянта рекомендуется применять ЭДТА (этилендиаминтетраацетат натрия). При взятии капиллярной крови из пальца высока вероятность агрегации тромбоцитов. Перед исследованием необходимо убедиться в отсутствии сгустков крови.

Исследуемую кровь разводят в 200 раз, для этого в сухую пробирку набирают 4 мл реактива 1 или 2 и 0,02 мл крови. Перемешивают и оставляют на 25–30 мин для гемолиза эритроцитов. Подготавливают камеру Горяева и заполняют ее предварительно перемешанной разведенной кровью (см. «Подсчет эритроцитов, лейкоцитов»). Счетную камеру помещают во влажную среду (чашка Петри с уложенной по краям смоченной водой фильтровальной бумагой) на 5 мин для оседания тромбоцитов. Используя объектив 40× с фазово-контрастным устройством, производят подсчет тромбоцитов в 25 больших квадратах счетной камеры.

Тромбоциты выглядят в счетной камере как мелкие, хорошо преломляющие свет образования.

Расчет числа тромбоцитов в 1 мкл крови проводят по формуле:

где X — число тромбоцитов в 1 мкл крови; а — число тромбоцитов, сосчитанных в 25 больших квадратах счетной камеры; 200 — разведение крови; 25 — число больших квадратов; 250–1(1/250) — объем одного большого квадрата, так как сторона квадрата равна 5–1 мм, а высота — 10–1 мм.

На практике число сосчитанных тромбоцитов умножают на 2000. При пересчете на 1 л крови умножают еще на 106.

Примечание. Вся используемая стеклянная посуда и камера Горяева должны быть тщательно вымыты, иначе грязевые и пылевые частицы, сходные по размеру с тромбоцитами, могут быть ошибочно учтены при подсчете.

См. также:

onlab.info

Подсчет тромбоцитов в крови — Исследование крови

Для проведения данных исследований необходимо следующее оснащение рабочего места:

  1. Предметные стекла простые и шлифованные.
  2. Смесители для эритроцитов.
  3. Камеры Горяева.
  4. Микроскопы.
  5. Микроскоп с фазовоконтрастным устройством.
  6. Черная бумага.
  7. Ножницы.
  8. Осветитель для микроскопа.
  9. Сернокислый магний (MgS04).
  10. Кокаин.
  11. Хлористый натрий.
  12. Лимоннокислый натрий.
  13. Дистиллированная вода.
  14. Метиловый спирт или смесь Никифорова (смесь равных частей 96° этилового спирта и эфира).
  15. Основной раствор краски Романовского.
  16. Иммерсионное масло.
  17. Набор инструментов для укола в палец.

Тромбоциты — это небольшие образования величиной 2-3 мю. В них различают периферическую часть, напоминающую цитоплазму (гиаломер), и центральную зернистую часть, похожую на ядро (грануломер). Морфологические особенности гиаломера и грануломера зависят от возраста и состояния организма.

Для подсчета тромбоцитов требуются следующие реактивы:

  1. 14% раствор сернокислого магния (MgS04): 14 г MgS04 помещают в колбу на 100 мл и доливают дистиллированной водой до метки 100 мл. Раствор магнезии может быть заменен 5% раствором лимоннокислого натрия [(приготовление см. статью «Реакция оседания эритроцитов (РОЭ) по Панченкову»]. Эти реактивы препятствуют склеиванию тромбоцитов.
  2. Реактив для подсчета тромбоцитов в счетной камере Горяева: 3 г кокаина и 0,4 г хлористого натрия растворяют в 100 мл дистиллированной воды.

Взятие крови для подсчета тромбоцитов в мазке

Подсчет в крови тромбоцитов производят по указанию врача. На очищенный спиртом и эфиром палец больного помещают каплю стерильного 14% раствора сернокислого магния или 5% раствора лимоннокислого натрия и через каплю реактива делают укол в палец. Выступившую каплю крови смешивают с помощью парафинированной стеклянной палочки или пастеровской пипетки с реактивом, готовят мазки крови и окрашивают их в течение 40-60 минут краской Романовского, разведенной на нейтральной дистиллированной воде так же, как для мазков крови.

Тромбоциты окрашиваются в розовато-фиолетовый цвет. Параллельно в смеситель берут кровь для подсчета эритроцитов (см. тему «Взятие крови и подсчет эритроцитов и лейкоцитов в счетной камере»).

Подсчет тромбоцитов производят с ограничителем поля зрения (по Фонио). Для этого из кусочка бумаги вырезают кружок, по размеру равный 15-копеечной монете, складывают пополам и вчетверо, вершину конуса срезают, в результате чего в центре круга образуется «окошко» (рис. 35). Ограничитель поля зрения вставляют в окуляр (на металлический мостик), предварительно сняв верхнюю линзу окуляра. Вновь навинтив верхнюю линзу, вставляют окуляр в тубус микроскопа. С ограничителем поля зрения насчитывают в среднем 50 эритроцитов в каждом поле зрения микроскопа. Пользуясь иммерсионной системой, одновременно в мазке подсчитывают эритроциты и тромбоциты. Подсчет тромбоцитов заканчивают, насчитав 1000 эритроцитов. По ходу подсчета результаты записывают на бумаге. Затем в камере Горяева подсчитывают количество эритроцитов в 1 мм3 крови. Зная количество эритроцитов в 1 мм3 и количество тромбоцитов на 1000 эритроцитов, производят расчет.

Пример расчета. На 1000 эритроцитов подсчитано 70 тромбоцитов. Количество эритроцитов в 1 мм3 крови (подсчитаны в камере Горяева) составляет 4 200 000. Количество тромбоцитов в 1 мм3 равно:
70×4200000/1000 = 294 000.

Практически количество подсчитанных тромбоцитов умножают на первые четыре цифры числа эритроцитов, подсчитанных в камере Горяева. Норма тромбоцитов при подсчете по этому методу 200 000-400 000 в 1 мм3.

Подсчет тромбоцитов в счетной камере

Подсчет тромбоцитов в счетной камере производят следующим образом. Кровь набирают в смеситель для эритроцитов до метки 0,5, а раствор кокаина — до метки 101 и оставляют на 30 минут. Меланжер встряхивают, выпускают первые две капли, а третью каплю вносят в камеру Горяева, которую помещают на 5 минут во влажную камеру. Подсчет тромбоцитов производят так же, как и подсчет эритроцитов. Поэтому к подсчитанному количеству тромбоцитов приписывают четыре нуля. Подсчет можно производить как при обычном освещении микроскопа, так и с помощью фазовоконтрастного устройства. В камере Горяева тромбоциты имеют вид блестящих округлых образований, в несколько раз меньших, чем эритроциты. Этот метод отличается точностью и быстротой.

Норма тромбоцитов при подсчете по этому методу 150000-250000 в 1 мм3 крови.

ginekolog.my1.ru

Отправить ответ

avatar
  Подписаться  
Уведомление о